朱媛媛；安靓
目的 研究基因1型慢性丙型肝炎(CHC)患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞(nTreg)的动态变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周.分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本.用流式的方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中nTreg的比率.COBAS Ampliprep/COBAS Taqman HCV试剂盒检测HCV-RNA定量.结果 24例患者治疗12周时HCV-RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答(SVR)；8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答(NVR),24周时终止治疗.应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义(P＞0.05).应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为(0.91±0.22)％、(1.31±0.29)％、(1.78±0.43)％、(1.92±0.44)％、(1.90±0.37)％、(1.14±0.35)％;在治疗2周(P＜0.001)及治疗结束后(P＜0.001)下降明显.无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为(1.21±0.15)％、(1.24±0.18)％、(1.42±0.11)％、(1.45±0.11)％、(1.14±0.10)％；Treg水平在治疗4周时缓慢上升(P=0.005),在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义(P＜0.001).结论 CHC患者外周血nTreg水平与干扰素/利巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效.提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用.
作者：邵晓琼；赵志新；蔡庆贤；张晓红；林潮双；高志良 刊期： 2012年第06期
目的 初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒(VLP)的免疫原性.方法 表达纯化各型VLP,用纯化好的VLP免疫BALB/c小鼠,将BALB/c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1+2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照.ELISA法检测小鼠血清抗VLP抗体效价以及血清IFN-γ、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4+细胞和CD8+细胞数.结果 登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2～3倍；攻毒后,灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-γ,分别为60和35 pg/ml,双价VLP组的较低;VLP2组的TNF-α一直保持较高水平,双价VLP组中攻DENV2组的TNF-α水平较DENV1组高；三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4+细胞的比例都有下降,而CD8+细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少.结论 无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性.
作者：喻治准；刘岩；付春云；方丹云；江丽芳；周俊梅 刊期： 2012年第06期
目的 构建含有人nestin第二内含子的荧光素酶报告基因并检测其活性.方法 从NCBI数据库获得nestin 的DNA全长序列(NC_000001),用vector NTI软件分析找到其第二内含子位置,通过PCR的方法从人血全基因组DNA中钓取nestin的第二内含子全长片段,克隆到报告基因pGL3-promoter载体上,将报告基因载体转染至293T细胞,采用双荧光素酶报告基因系统评估第二内含子的活性.结果 成功钓取nestin第二内含子片段,长度为1 688 bp,测定其DNA序列正确.瞬时转染293T细胞,经双荧光报告实验显示转染了pGL3-nes-promoter载体的细胞其相对荧光素酶活性相比于空载组,大约提高了3.39倍,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功构建了含有nestin第二内含子的荧光素酶报告载体,为进一步研究nestin的调控机制奠定基础.
作者：朱媛媛；安靓 刊期： 2012年第06期
目的 利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据.方法 以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白.结果 成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1 -F2重组载体,转化酵母白激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22％,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1 - F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基.结论 初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控.
作者：冯发深；何霞；王铸；徐霖；张定梅；关琳琳；曹开源 刊期： 2012年第06期
目的 探讨N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)在妊娠高血压疾病(PIH)心功能评估中的价值.方法 将102例PIH孕妇分为妊娠高血压组37例,轻度子痫前期组33例,重度子痫前期组32例,另外选取正常妊娠组32例及正常未孕育龄妇女32例作为对照组,采用电化学发光法测定患者血清NT-proBNP浓度.结果 PIH组、正常妊娠组和对照组的NT-proBNP水平分别为(300.52±134.44)、( 83.42±26.26)和(59.83±12.89)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组、轻度子痫前期组、妊娠高血压组的NT-proBNP水平分别为(488.56±155.54)、(323.39±148.90)和(185.73±43.78)pg/ml,三者间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).NT-proBNP与孕妇体重指数(BMI)呈正相关(r=0.602),与新生儿体重呈负相关(r=-0.279).结论 孕后NT-proBNP有所升高,而且是能够用于评估PIH孕妇心功能的敏感指标之一.
作者：陈晓燕；周俐琼；陈冀莹 刊期： 2012年第06期
目的 对我市流感样病例标本进行病原学检测,分析其病原学特点,为流感防控提供病原学依据.方法 采用MDCK细胞(狗肾细胞)培养法分离流感病毒,用血凝抑制试验对病毒株进行分型鉴定.结果 从哨点医院采集的520份标本中共分离出流感病毒41株,分离率为7.9％,以新甲型H1N1为主.其中新甲型H1N1 26株(63.4％),H3N2型5株(12.2％),B(Yamagata)型l株(2.4％),B(Victoria)型9株(22.0％).流感流行高峰出现在春季的1-3月和秋季的8-9月.健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为新甲型H1N1抗体阳性率41.9％,低为B(Yamagata)的抗体阳性率,仅8.1％.对2010年2株新甲型H1N1进行基因测序,结果显示甲型H1N1基因未发生变异,暂时不会造成大的流行.结论 惠州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,活动相对平缓,新甲型H1N1流感病毒是春季的优势毒株,下半年逐渐转变为H3N2型流感病毒.
作者：曾健君；方巧云；刘燕；严宇斌；罗泽燕；徐励琴 刊期： 2012年第06期
目的 观察美托洛尔联合硝酸异山梨酯对慢性心力衰竭(CHF)患者的疗效及其对血浆N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响.方法 选取慢性心力衰竭患者130例,随机分为观察组和对照组,各65例.对照组予以硝酸异山梨酯等支持对症治疗,观察组在对照组基础上予以美托洛尔治疗.观察两组的疗效、心功能分级和其他指标的变化.结果 观察组的总有效率为90.77％,优于对照组的72.31％,差异有统计学意义(P＜0.01).治疗后两组的心功能分级、左室舒张末内径、N-端脑利钠肽前体和高敏C反应蛋白水平较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01),而观察组降低较对照组更为明显；而左心室射血分数方面,两组治疗后出现明显的提高(P＜0.01),观察组提高较对照更为明显.结论 美托洛尔联合硝酸异山梨酯对慢性心力衰竭的疗效显著,能改善心功能,提高临床疗效.
作者：周柬；庞珏 刊期： 2012年第06期
低密度脂蛋白受体( LDLR)对于维持血浆脂蛋白代谢平衡起到十分重要的作用.LDLR基因突变会导致血脂代谢紊乱,而血脂异常与动脉粥样硬化密切相关,是心脑血管疾病发生和发展的重要危险因素.本文就LDLR基因多态性与血脂异常、高血压及心脑血管疾病之间的关系进行综述.
作者：罗显云；姚震；王天松；张云波 刊期： 2012年第06期
目的 了解2008-2011年广州地区腹泻儿童空肠弯曲菌(CJ)的感染和耐药情况及其变迁,为CJ感染的临床治疗提供参考.方法 采用API-Campy鉴定系统及多重PCR对CJ进行鉴定,采用纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 4 423例粪便样本共检出345株CJ,总检出率为7.8％,2008-2011年各年检出率分别为8.0％、7.8％、7.9％、7.5％.CJ对复方新诺明和头孢哌酮几乎全部耐药,对氨苄西林、四环素及喹诺酮类药物的耐药率为23.0％～48.3％,但对亚胺培南、阿米卡星、氯霉素、红霉素、阿奇霉素则普遍敏感,耐药率在8.1％以下.CJ对氨苄西林的耐药率从2008年的23.0％上升到2011年的36.0％,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率从2008年的2.3％上升至2011年的12.8％,但对其余抗生素的耐药率则变化不大.结论 广州地区儿童空肠弯曲菌仍有较高的感染率,CJ对氨苄西林等部分抗生素的耐药率有逐年升高的趋势.
作者：李彩金；谢永强；周珍文；邓秋连；黄钰君；何艳明 刊期： 2012年第06期
目的 观察右美托咪定在小儿扁桃体、腺样体切除手术术后围拔管期的镇静作用.方法 选择择期进行扁桃体、腺样体切除手术的患儿60例,随机分为常规组(A组)和右美托咪定组(B组)各30例；两组均以丙泊酚和瑞芬太尼靶控输注诱导及维持,手术结束时停药,并静注曲马多2 mg/kg.B组手术结束前10 min静脉注射右美托咪定0.5 μg/kg,输注时间10 min.两组均等待患儿自然清醒拔管,观察两组生命体征变化、术后睁眼时间、拔管时间以及苏醒期躁动、上呼吸道梗阻、术后恶心呕吐等情况.结果 B组拔管时和术后清醒时平均动脉压(MAP)和心率(HR)较A组低,差异有统计学意义(P＜0.05)；B组睁眼时间和拔管时间长于A组,差异有统计学意义(P＜0.05)；A、B组术后上呼吸道梗阻率分别为6.7％和10.0％,术后恶心呕吐发生率为16.7％和13.3％,差异均无统计学意义;B组苏醒期躁动发生率为10.0％,较A组的30.0％低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 右美托咪定在手术围拔管期的应用能较好地用于儿童扁桃体手术术后拔管期的镇静,稳定患儿循环情况,减少苏醒期躁动的发生.
作者：林树勇；程碧珍；庄少惠；程明华 刊期： 2012年第06期
目的 筛选主动脉夹层发病机制相关的遗传易感基因.方法 选取主动脉夹层患者为病例组(150例),按照性别、年龄、是否吸烟、合并高血压、糖尿病情况与病例组匹配的原则入选排除主动脉夹层、重大心血管疾病及肿瘤的志愿者为对照组(250例),均从外周血提取基因组DNA,采用DNA混合池技术为基础的Illumina Human660W-Quad芯片扫描,筛选主动脉夹层发病相关的遗传易感基因.结果 对照组女性数量明显多于病例组(P＜0.01)；在年龄、吸烟、高血压、糖尿病人数方面差异均无统计学意义(P＞0.05).根据芯片扫描结果,挑选silhouette width计算值大于0.7,小等位基因频率(MAF)大于0.05,且SNPs位于已知名称基因上的前5个SNPs位点.结果发现,遗传变异位点SNP rs2970873(位于PPARGC1A基因)、SNPrs12678080(位于SGCZ基因)、SNP rs489526(位于UNC13C基因)、SNP rs6928665(位于TRAM2基因)和SNP rs17837003(位于ACCN1基因上)可能与主动脉夹层的发病机制有关.结论 SNPs rs2970873、rs12678080、rs489526、rs6928665和rs17837003可能与主动脉夹层发病机制相关.
作者：陈逸飞；钟诗龙；罗建方；薛凌；黎明；胡孜阳 刊期： 2012年第06期
目的 观察禽流感H5N1型病毒对NIH小鼠的致病性.方法 将NIH小鼠随机分为接毒组(20只)和对照组(10只),在负压感染实验室,接毒组于乙醚麻醉后给予AIV H5N1型病毒滴鼻,对照组予正常阴性尿囊液滴鼻,观察14d,记录小鼠的体温、体重、临床症状、死亡情况、病理变化、肺指数及抗体变化.结果 NIH小鼠感染禽流感H5N1型病毒后第1天就出现精神不振,病程主要集中在第3～7天,临床症状主要表现为弓背、蜷缩、竖毛、颤抖、反应迟钝、活动减少、爱扎堆,体重(下降)出现减轻,体温降低,死亡率为40％；接毒组死亡小鼠肺指数为(2.21±0.40),较对照组的(0.44±0.23)明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);肺组织病理严重改变,第8天才能检出抗体(OD值等于0.231).结论 禽流感H5NI型病毒对NIH小鼠有一定的致病性.
作者：刘忠华；刘香梅；黄韧 刊期： 2012年第06期
目的 探讨深圳市龙岗区2007年麻疹发病的流行病学特征,为制定麻疹预防控制策略提供科学依据.方法 收集深圳市龙岗区2007年麻疹发病资料,按照发病时间、病人性别、年龄、职业分布等指标进行统计分析.结果 2007年全区共报告确诊麻疹病例1 351例,2007的麻疹发病率为30.18/10万,比2006年(16.88/10万)增加78.8％,差异有统计学意义(P＜0.01).发病时间集中在5～8月；发病人群以5岁以下的散居儿童和20～30岁年龄段的外来青工为主:职业以散居儿童发病多占52.5％,其次工人占20.1％.99.19％的病例无麻疹疫苗接种史或免疫史不详.结论 2007年麻疹发病显著升高,发病季节主要在夏季,5岁以下散居儿童和外来劳务青工是麻疹防控工作的重点易感人群,需积极开展麻疹疫苗的接种工作.
作者：杨克志；刘国栋；刘渠；谢瑞琼；骆文博 刊期： 2012年第06期
目的 对新发现的华支睾吸虫亲肌素样蛋白(CsMLP)进行克隆、原核表达,初步了解其重组产物的免疫学功能.方法 应用生物信息学分析软件,分析CsMLP的序列特点和基本理化特征；将CsMLP基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,诱导表达并用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,用纯化的CsMLP蛋白免疫SD大鼠获得抗血清;用Western blot进行免疫反应性及免疫原性分析；应用免疫荧光方法观察CsMLP在华支睾吸虫成虫的定位.结果 该cDNA序列全长为900 bp,编码190个氨基酸,具有Calponin功能域；PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a (+)-CsMLP重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中获得高效表达,分子量为21 300 Mr;经亲和层析获得了高纯度蛋白；重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清、感染了华支睾吸虫的SD大鼠血清识别；CsMLP主要定位于虫体富含肌肉组织的口、腹吸盘、咽部,在表膜、肠壁也有分布.结论 CsMLP可在原核表达系统中呈现高效的可溶性表达,具有免疫原性,其主要分布在华支睾吸虫肌肉丰富的组织.
作者：李文芳；黄艳；余新炳；胡月；李然；徐劲 刊期： 2012年第06期
目的 探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义.方法 从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本.其中50例早期复发组(术后1年内肝内出现复发病灶)；32例非早期复发组(术后超过2年未出现肝内复发病灶).运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502-3p在两组肝癌组织中的表达水平.结果 相对于非早期复发组,miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[(43.893±107.890) vs (6.321±6.845),P=0.018];其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关(P＜0.05).而miR-502-3p在肝癌早期复发组中表达下调[(6.702±9.775)vs(26.467±39.613),P=0.009];其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关(P＜0.05).结论 miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关,并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点.
作者：邓治亮；简志祥；孙建 刊期： 2012年第06期
目的 探讨妊娠合并血小板减少的围产期处理及产后出血情况.方法 收集2006年1月至2011年8月茂名市人民医院及广州医学院第三附属医院收治的218例妊娠合并血小板减少患者,根据分娩前血小板计数51×109～99× 109/L、21×109～50×1 09/L、≤20× 109/L分为A、B、C三组,每例患者针对原发病治疗,产前根据病情适当给予糖皮质激素,静脉注射丙种球蛋白,输入血小板治疗,分析各组的产后出血情况.结果 A、B、C三组的产后出血发生率分别为2.67％、7.46％、28.20％；平均出血量分别为(600±80)、(600±120)、(900±200)ml,产后24h平均阴道流血量分别为(250±30)、(250±80)、(500±100)ml,C组平均出血量及24h平均阴道流血量与A、B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 妊娠合并血小板减少,在治疗原发病的基础上,给予对应治疗,适时终止妊娠可有效改善不良妊娠结局.
作者：李志英；余琳 刊期： 2012年第06期
目的 克隆表达恶性疟原虫复制蛋白PJRPA2亚基,制备多抗,为该蛋白的功能研究奠定基础.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pGEX-KG中,构建PfRPA2/pGEX-KG原核表达载体,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,谷胱甘肽柱纯化蛋白,Westem blot检测其抗原性,以纯化的GST-PfRPA2免疫小鼠,制备抗PfRPA2的多抗,间接ELISA法检测鼠血清效价,Western blot鉴定多抗特异性.结果 成功构建了重组PfRPA2/pGEX-KG原核表达质粒,并在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达,纯化表达产物,制备抗PfRPA2的鼠多抗,效价为10-7,Westem blot证实此抗体可识别恶性疟原虫内与PfRPA2蛋白位置对应的特异性条带.结论 恶性疟原虫复制蛋白PfPA2亚基在大肠杆菌中获得可溶性高效表达,纯化表达产物能诱导小鼠生产能识别天然蛋白的特异性抗体.
作者：刘雅娟；李宏；周于婷；郝文波；李纪良；吴英松；罗树红；李明 刊期： 2012年第06期
目的 通过对江西省上饶县晚期血吸虫病人医疗救治项目实施情况进行分析,为进一步加强晚期血吸虫医疗救助项目的管理提供科学依据.方法 采用《江西省晚期血吸虫病人治疗救助信息管理系统》,对2005-2009年接受医疗救助的607例晚期血吸虫病人的相关资料进行分析.结果 607例晚期血吸虫病人中,男性占62.6％,女性占37.4％,50岁以上患者占83％.其中腹水型病人551例,占90.8％,救治1252例次,人均治疗2.3次；巨脾型病人56例,占9.2％,救治56例次,治疗次数均为1次.临床治愈及好转患者占89.0％.结论 上饶县晚期血吸虫医疗救助项目取得良好社会效益,达到了症状改善,病情好转的基本救治目的.
作者：周红；赵奀琴；黄书春；周玉玲；程立毅；陈远新；宁安 刊期： 2012年第06期
目的 克隆表达一个新的旋毛虫组织蛋白酶基因CathepsinX,初步探讨其免疫学特性,为研究新的防治方法奠定科学基础.方法 从GenBank旋毛虫核酸数据库中筛选出功能未知的CathepsinX基因部分EST序列,使用RACE-PCR方法得到其全长编码基因序列.半定量RT-PCR分析该基因的转录.构建该基因的原核表达载体pET30a-TsCPX,大肠杆菌中IPTG诱导表达,His-tag亲和层析纯化获重组蛋白TsCPX；将纯化的重组蛋白40μg/只免疫BALB/c小鼠,免疫前1周及每次免疫后2周收集免疫血清,间接ELISA检测血清总IgG、亚类IgG1、IgG2a抗体浓度.结果 RACE-PCR克隆出TsCPX全长基因序列,共1227 bp；RT-PCR揭示TsCPX在旋毛虫三个发育时期均有380 bp扩增条带,条带光密度分析显示高转录水平出现在新生幼虫期.E.coli原核表达体系中成功克隆表达出重组蛋白TsCPX;重组蛋白免疫小鼠二次后,免疫血清总Igc迅速上升,三次免疫后达到峰值(P＜0.001)；IgG亚类IgG1抗体浓度随着免疫次数的增加迅速上升,亚类IgG2a无明显上升,两者间差异有统计学意义(P＜0.001).结论 成功克隆的TsCPX基因在旋毛虫的三个生长发育时期均有转录表达,TsCPX重组蛋白具有较强免疫原性,能引起宿主(小鼠)Th2型为主的免疫应答,具有作为旋毛虫病免疫预防研究靶分子的潜在价值.
作者：周阳芳；贾飞飞；占建华；胡旭初；周兴旺 刊期： 2012年第06期
目的 分析深圳市公明街道2005-2010年其他感染性腹泻流行特征,为有效控制其他感染性腹泻提供流行病学依据.方法 对深圳市公明街道2005-2010年疾病监测信息报告管理系统中报告的其他感染性腹泻病例进行流行病学描述性分析.结果 2005-2010年深圳市公明街道共报告其他感染性腹泻病例9 258例,年均发病率为214.64/10万(9258/4313263),其中2008年发病率高为301.00/10万(2273/755161).5岁以下年龄组占全部发病数的90.38％,散居儿童占总病例数的91.00％;10-12月为发病高峰.报告发病率居前5位的村镇为将石、公明、上村、合水口、长圳.轮状病毒感染所致的其他感染性腹泻病例4966例,占报告病例总数的53.64％.结论 深圳市公明街道2005-2010年感染性腹泻报告病例主要集中在0～5岁散居儿童,秋冬季是好发季节,轮状病毒感染为主要病因.
作者：汪东篱；郑庆鸣；钟晓；列义；姚炜 刊期： 2012年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
