许慕明;庄业忠;王伟峰;林佳锐
目的 探讨线粒体脑肌病(MELAS综合征型)的临床、影像及病理特点.方法 回顾性分析2例MELAS综合征患者的临床资料及复习相关文献.结果 2例患者均以视力障碍为首发症状伴头痛、呕吐,发育延迟,血乳酸增高,影像以枕叶皮层受累为主,基底节钙化.肌肉病理发现破碎样红纤维,电镜可见肌膜下异常线粒体增多.结论 以视力障碍为首发症状的青少年患者应考虑到MELAS综合征的可能,以免误诊.
作者:成秋生;李蒙燕;杨勇;郭爱华;潘小平 刊期: 2012年第07期
目的 分析社区获得性肺炎(CAP)患者CURB-65评分与其临床指标、IL-1β、IL-4之间的相关性.方法 研究中共收入80例研究对象,其中21例健康志愿者作为对照组;CAP病例共59例,其中轻症CAP 25例,重症CAP 34例.所有患者人院后采用CURB-65进行评分,常规行动脉血气分析,计算氧合指数,同时采用ELISA检测降钙素原(PCT)、IL-1β、IL-4.结果 轻症肺炎组与健康对照组比较,其PaO2[(99.5±13.4)mmHg vs( 105.1 ±9.4)mmHg]及PCT水平[( 1.62±1.65)pg/ml vs (0.04±0.01)pg/ml]差异均无统计学意义(P>0.05);轻症肺炎组患者CURB-65评分(0.9±0.8 vs 0)、FiO2[(26.6±7.8)% vs 21%、IL-1β[(118.79±32.29)pg/ml vs (9.33±2.51)pg/ml]、IL-4[(41.24±6.52)pg/ml vs (18.46±4.05)pg/ml]高于健康对照组,氧合指数(406.59±126.03 vs 500.45±44.82)则低于健康对照组(P<0.05);重症肺炎组CURB-65评分(3.5±0.7 vs 0.9±0.8&0)、FiO2[(41.9±12.0)%vs(26.6±7.8)% & 21%)、PCT[( 11.96±7.59)pg/ml vs (1.62±1.65)pg/ml&(0.04±0.01)pg/ml]、IL-1β[(200.13 ±48.27)pg/ml vs( 118.79±32.29)pg/ml&(9.33 ±2.51 )pg/ml]、IL-4 [(55.41±13.71)pg/ml vs (41.24±6.52)pg/ml&(18.46±4.05)pg/ml]明显高于轻症肺炎组及健康对照组,而PaO2[(74.4±13.1)mmHg vs (99.5±13.4)mmHg&(105.1±9.4)mmHg]及氧合指数(204.14±110.10 vs 406.59±126.03&500.45±44.82)则明显低于轻症肺炎组及健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).CURB-65评分与氧合指数呈负相关(r=-0.833,P<0.05),而与PCT(r=0.900)、IL-1β (r=0.893)、IL-4(r=0.838)均呈正相关(P均<0.05).结论 CAP患者的CURB-65评分与患者氧合指数、炎症反应指标呈明显相关性,可以作为评估重症肺炎的一种简易手段.
作者:高旗 刊期: 2012年第07期
广州管圆线虫病(angiostrongyliasis cantonensis)又称嗜酸粒细胞增多性脑膜脑炎或脑脊髓膜炎,主要是食生或半生的感染广州管圆线虫Ⅲ期幼虫的福寿螺螺肉而感染,幼虫寄生在中枢神经系统,引起脑膜炎、脊髓膜炎、脑炎、脊髓炎等.幼虫可以侵犯眼部,引起视神经炎[1-2].因为视神经炎的发病率较低,因此一直没有引起足够重视.但临床上不断发现一些散在病例,严重者可致失明.而发现症状的早晚是病人治疗及预后的关键因素,因此,本文主要阐述了广州管圆线虫所引起的视神经炎的研究现状,期望为其基础研究及临床治疗提供依据.
作者:冯英;吴忠道 刊期: 2012年第07期
目的 分析吸毒人群HIV感染者中HIV-1的基因序列特征,初步确定其感染的基因亚型和各亚型的流行趋势.方法 在Genbank中查找HIV gag基因的序列,设计巢式PCR引物.从全血中提取样本的基因组DNA,进行巢式PCR,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序,所获序列与国际参考株序列进行比对,确定基因型或亚型.结果 对36例HIV-1感染者样本进行扩增,PCR共检测出29例阳性样本,27例测序成功,其中16例为CRF 08-BC重组亚型、7例为CRF 07-BC重组亚型、4例为CRF 01-AE重组亚型,15例阴性对照均无目的条带.结论 在广州吸毒强戒人员HIV-1型中以CRF BC亚型为主,其次为CRF 01-AE亚型.应加强对HIV-1毒株亚型的监测,以制定更好的防治策略.
作者:石泽林;韩慧;吴炳义 刊期: 2012年第07期
目的 了解福田区人群土源性线虫感染情况及流行病学特征,为制定预防与控制策略提供科学依据.方法 随机选取两个监测点,采用改良加藤厚涂片法检查土源性线虫虫卵,同时对检测者进行知识、行为问卷调查,幼儿园儿童采用透明胶纸肛拭法查蛲虫卵.结果 本次共粪检743人,蛲虫感染率为0.13%,未检出蛔虫、钩虫和鞭虫.儿童透明胶纸肛拭法检测514人,蛲虫感染率为3.11%.人群防治知识知晓率为69.90%,健康行为形成率为77.67%.结论 福田区土源性线虫感染以蛲虫为主,应采取有效的措施进行儿童蛲虫病的防制.
作者:范苏云;石向辉;顾青;刘莹;舒彬 刊期: 2012年第07期
目的 克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶(GST) AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1.方法 设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因.将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1.重组质粒转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况.结果 成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank (accession no.JQ812812).AduGST-1编码序列长度为624 bp,编码307个氨基酸残基.成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21(DE3)中表达并纯化了重组AduGST-1.结论 首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础.
作者:邵正;何庆丰;邓莉;彭礼飞 刊期: 2012年第07期
目的 探讨硫酸镁联合低分子肝素治疗早发型子痫前期的疗效及其妊娠结局.方法 将50例早发型子痫前期患者分为硫酸镁治疗组(n=22)和硫酸镁联合低分子肝素治疗组(n=28),并进行病例对照分析,观察治疗前后的凝血功能、肾功能变化及妊娠结局.结果 两组患者治疗后收缩压及舒张压均明显下降,但下降幅度差异无统计学意义(P>0.05).排除治疗前凝血功能或肾功能基础值的影响,硫酸镁联合低分子肝素治疗使凝血酶原时间(PT)明显延长、凝血酶原时间国际标准化比值(PT-INR)明显增大、凝血酶时间(TT)明显延长,差异有统计学意义(P<0.05),但上述各指标改变后仍在正常范围以内.硫酸镁联合低分子肝素治疗对尿蛋白及血尿酸的减少影响更显著,差异有统计学意义(P<0.05).两个治疗组之间的血清尿素氮和血清肌酐的变化差异无统计学意义(P>0.05).两组之间的分娩孕周、期待治疗时间、新生儿体重及新生儿出生Apgar评分及母儿并发症发生率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 在传统治疗的基础上加用低分子肝素辅助治疗早发型子痫前期是安全的,且可以对肾功能起到保护作用,明显减少尿蛋白量.尚未观察到低分子肝素对妊娠结局的影响.
作者:肖立;李智泉;周紫琼;冷灵芝 刊期: 2012年第07期
目的 探讨miR-125b-1增强紫杉醇对乳腺癌SKBR-3细胞化疗敏感性的影响,及其对靶基因Her2蛋白表达的影响.方法 合成miR-125b-1并通过LipofectamineTM 2000转染SKBR-3细胞,将实验分为空白对照组(脂质体转染SKBR-3细胞株)、阴性对照组(siRNA转染SKBR-3细胞株)、miR-125b-1组(miR-125-1转染SKBR-3细胞株)3组.分别用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Her2 mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测miR125b-1对紫杉醇作用于SKBR-3细胞化疗敏感性的影响.结果 miR-125b-1转染后的SKBR-3细胞中Her2 mRNA和蛋白质水平显著下降;流式细胞仪检测结果显示,转染miRNA-125b-1的SKBR-3细胞G2M期细胞比例显著高于其他组(P=0.000),而空白对照组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P=0.094).三组之间比较,G0-G1期、S期比例差异无统计学意义;用miR-125b-1处理组细胞的IC50与未处理组相比下降2.69倍,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125b-1可增强乳腺癌SKBR-3细胞对紫杉醇的化疗敏感性,下调Her2可能是其作用机制之一.
作者:胡斌;吴爱国;李学孝;纪术峰;王梦川;吴凯;邵国利 刊期: 2012年第07期
目的 探讨TRPC离子通道通过p53通路参与一氧化氮供体硝普钠(SNP)诱导的原代培养海马神经元凋亡.方法 原代培养的海马神经元,经RT-PCR检测TRPC1-6的表达;给予SNP处理后,通过Real-time RT-PCR检测p53下游靶基因Bax、Apaf-1、PUMA和Survivin的表达;给予TRPC通道阻断剂和激活剂,检测其是否影响SNP诱导的p53下游靶基因表达.结果 TRPC在原代培养海马神经元上广泛表达.SNP处理神经元4、8、24 h后,p53下游靶基因Bax、Apaf-1和Survivin表达无明显变化(P>0.05).而PUMA则在3个时间点分别增加至1.94、1.86和1.90倍,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).TRPC通道阻断剂2-APB,可降低SNP诱导的PUMA上调(1.91 vs 1.12) (P<0.01).结论 TRPC通道可以通过调节PUMA的表达参与SNP诱导的原代培养海马神经元凋亡.
作者:郭进强;覃旻 刊期: 2012年第07期
随着基因组研究的进展,生物信息学得到大力发展.为了更有效地利用生物信息学分析生物信息,现对生物信息学常用功能及其应用软件从DNA分析、蛋白质分析及主要数据库三个方面进行概述.
作者:牛钦王 刊期: 2012年第07期
目的 构建肠道病毒71型(EV71)的感染性克隆,为EV71致病机理的研究和药物的开发建立技术平台.方法 选取临床手足口重症儿童粪便样品,经荧光定量PCR检测为阳性,RT-PCR方法扩增出EV71全基因组,通过TA克隆的方法连接到TOPO-XL-PCR载体中,应用T7聚合酶系统将线性化的EV71 DNA序列体外转录成RNA,转染人横纹肌肉瘤细胞系RD-A细胞,病毒传代并观察病变,通过间接免疫荧光实验进一步鉴定,获得的感染性克隆进行全基因组测序和序列比对分析.结果 RT-PCR可以获得EV71全长约7.5 kb的DNA片段,体外转录并转染后3~5 d可观察到典型的肠道病毒致细胞病变,免疫荧光可看到特异标记,序列比对为C4a亚型的EV71病毒.结论 构建出具有感染性的EV71全长cDNA克隆,在分子生物学水平上有利于深入研究EV71的致病机制和毒力基因、患者抗体的中和特性、疫苗和药物的效力评估与开发等.
作者:罗敏;陈惠玲;杨洪;张海龙;冼慧霞;张仁利 刊期: 2012年第07期
目的 观察糖皮质激素对结核性胸膜炎胸液吸收及防止胸膜肥厚的影响.方法 将148例结核性胸膜炎合并胸腔积液患者,随机分为糖皮质激素观察组和对照组,每组74例.两组在给予规律抗结核治疗基础上,观察组每日加用糖皮质激素药物醋酸氢化可的松片,口服每次1片(含药20 mg),1~2次/d,对照组不加用任何药物.结果 观察组胸腔抽液总量为(2 759.4±492.7)ml,对照组胸腔抽液总量为(3412.4±512.7)ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);观察组胸膜厚度为( 1.04±0.18)mm,对照组胸膜厚度为(1.37±0.28)mm,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).两组患者均无明显不良反应.结论 糖皮质激素对结核性胸膜炎合并胸腔积液患者积液的渗出起到抑制作用,并能促进积液的吸收,抑制或降低胸膜粘连厚度.
作者:陈永浩;陈志成;徐建辉;林庆裕 刊期: 2012年第07期
目的 探讨十溴联苯醚(PBDE-209)对宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响.方法 观察HeLa细胞经不同浓度PBDE-209暴露后发生的形态学变化,并用MTT方法检测细胞存活率改变,采用免疫荧光化学方法检测细胞增殖核抗原Ki67表达变化,流式细胞术观察HeLa细胞细胞周期的分布变化.结果 随着浓度升高,细胞增殖明显,细胞间隙变小.MTT方法检测发现PBDE-209促进HeLa细胞增殖,细胞增殖率的升高呈时间和浓度依赖效应,200 nmol/L PBDE-209作用24、48和72 h后细胞增殖率分别是阴性对照组的1.2、1.5和1.8倍(P<0.05).Ki67表达强度随着PBDE-209浓度升高而增强.流式细胞术检测发现200 nmol/L PBDE-209作用72 h后,G0/G1期细胞比例下降了8%,而S期细胞比例升高了7%,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 低浓度PBDE-209暴露使HeLa细胞G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,从而促进细胞增殖.
作者:李志华;刘晓燕;黄锦桃;陈敦金 刊期: 2012年第07期
目的 了解江门市感染性腹泻的流行病学特征,分析监测系统中可能存在的问题.方法 对江门市2009-2011年疾病监测信息报告系统中上报的感染性腹泻病例进行描述性流行病学分析.结果 2009-2011年江门市共报告感染性腹泻病例53 624例,年发病率的范围为378/10万~428/10万,发病呈逐年上升趋势.5岁以下年龄组占全部发病数的40.64%.发病高峰在秋冬季节.报告发病率居前3位的市、区有鹤山、蓬江、新会等.3年共报告暴发疫情3起,全部为诺如病毒引起.结论 感染性腹泻在江门市法定报告传染病中仍占有重要地位.今后应评估并完善感染性腹泻报告制度,加强监测与控制工作.
作者:许坚锋;陈茂余;杨玉芳;洪海波;范湛丽;王立华;刘鹰航 刊期: 2012年第07期
目的 构建SARSS抗原的B细胞表位核酸疫苗并观察其免疫效果.方法 将已经鉴定的SARS S抗原的B细胞表位S603-620的编码DNA序列插入真核表达载体PCI中,构建核酸疫苗(PCI-S603-620).使用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切,电泳及DNA测序鉴定.使用脂质体将PCI-S603-620转入293A细胞,使用ELISA检测其在真核细胞中的表达.使用PCI-S60-620免疫小鼠,ELISA检测其诱导的抗体情况.结果 对PCI-S603-620进行酶切鉴定,电泳结果表明目的基因片段分子量为100 bp左右.PCI-S603-620的DNA测序结果表明其序列与设计序列吻合.PCI-S603-620能在转染的293A细胞中表达.PCI-S603-620免疫小鼠可以诱导特异性抗体产生,效价为1∶400.该抗体可以特异性识别SARS S抗原.结论 成功构建SARS S抗原的B细胞表位核酸疫苗(PCI-S603-620).
作者:朱郇悯;谢红艳;陈殿慧;罗雪平;黄俊 刊期: 2012年第07期
目的 比较INNO-LiPA HBV DR v2和直接测序法检测HBV耐药突变的准确性和灵敏性.方法 选取41例接受阿德福韦或聚乙二醇干扰素α-2a救援治疗并在治疗过程中(治疗48周和72周时)进行INNO-LiPA HBV DR v2耐药检测的拉米夫定耐药患者,共收集到101份足量的血清,采用直接测序法进行拉米夫定和阿德福韦耐药检测.分析HBV聚合酶第80、173、180、181、204和236位点的耐药突变情况,并与INNO-LiPA耐药检测的结果进行对比.结果 INNO-LiPA HBV DR v2和直接测序法检测204位点耐药结果对比,完全符合率为73.8%(62/84),部分符合率为23.8%(20/84),总体符合率达到97.6%(82/84).其他位点总体符合率也多在95%以上.另外INNO-LiPA比直接测序法有更高的灵敏度,对混合感染的检出率(46.4%)明显高于直接测序法(23.8%),其总体耐药检出率也高于直接测序法.结论 INNO-LiPA方法在灵敏度和准确性上均优于直接测序法,而且操作简便、快捷,能够提供更多的信息量,在科研和临床上都有很好的应用前景.
作者:郑慧珂;周彬;何海棠;吕国涛;刘美三;孙剑;侯金林 刊期: 2012年第07期
目的 通过对68例鼻咽癌复发患者癌组织中细胞周期调节蛋白水平的检测,进行鼻咽癌复发的趋势预测和探讨可能的机制.方法 采取免疫组织化学法对所有研究对象的组织标本进行p53、MDM2、p21WAF1、p21ras、VEGF的检测.结果 68例患者平均复发间期为(31.65±24.52)月.未发现不同分期的复发间期差异有统计学意义(P =0.361).单因素分析发现高表达的MDM2水平会缩短复发间期(P=0.016).多因素分析显示年龄(≥50岁)、高表达MDM2和低表达或阴性p21WAF1是复发间期的影响因素.结论 年龄较大、高表达MDM2、低表达或阴性p21WAF1的鼻咽癌患者易较早出现复发.
作者:蒋昌斌;易炜;何芬;秦海燕;李蓉;孙建聪;万明辉 刊期: 2012年第07期
目的 探讨姜黄素对HepG2细胞Nrf2信号功能的调控作用与其改善胰岛素抵抗的效应关系,并进一步研究高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗时姜黄素干预对肝脏Nrf2系统功能及糖异生作用的影响.方法 在人肝癌细胞HepG2上分别用葡萄糖氧化酶(G0)或长期胰岛素处理,分别制成氧化应激和高胰岛素血症胰岛素抵抗模型;用蛋白印迹方法(WB)检测姜黄素对Nrf2抗氧化系统的作用.另外,对细胞进行短时胰岛素刺激,观察胰岛素信号(PKB Ser473磷酸化水平)变化.为研究姜黄素的整体动物药物作用,在高脂诱导的胰岛素抵抗小鼠模型用姜黄素进行干预(雄性C57BL/6J小鼠,给予高脂饲料加上3%的姜黄素),在第25周进行丙酮酸耐量实验,并于第27周取肝脏组织检测Nrf2系统功能变化.结果 姜黄素可明显激活HepG2细胞Nrf2系统,并对抗GO氧化应激所致的PKB磷酸化损害.在高脂饲喂小鼠胰岛素抵抗模型,姜黄素可改善丙酮酸耐量,提示其增强胰岛素作用(抑制肝脏糖异生),从而缓解肝脏糖代谢异常;姜黄素还明显激活高脂肥胖小鼠肝脏受抑制的Nrf2信号功能.结论 姜黄素通过增强内源性Nrf2系统功能对抗氧化应激,是其缓解肝细胞胰岛素抵抗的重要药理机理.
作者:何惠君;王国玉;高渊;于志文 刊期: 2012年第07期
目的 探讨标本荧光探针结合区序列突变对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响.方法 采用3种国产荧光定量PCR试剂对200例标本进行平行检测HBV DNA,分析3种试剂检测结果的差异,并对6例3种试剂检测结果无差异的标本和6例达安试剂检测结果明显降低或漏检标本进行测序.结果 3种试剂检测结果相差30倍以上的标本47例,且3种试剂均有不同程度的漏检;6例3种试剂检测结果无差异的标本荧光探针结合区序列无突变,6例达安试剂检测结果明显降低或漏检的标本荧光探针结合区序列均有突变.结论 标本荧光探针结合区序列突变是造成达安试剂检测HBV DNA结果明显降低或漏检的原因.
作者:郑有为;梁敏文;钱靖琳;方伟 刊期: 2012年第07期
目的 研究Bif-1基因的过表达对前列腺癌细胞凋亡、增殖以及迁移过程的影响.方法 构建Bif-1基因全克隆并转染LNCap细胞,上调细胞中Bif-1基因的表达水平,通过流式细胞术检测细胞转染前后的细胞凋亡情况;通过MTT法检测细胞的增殖能力变化;通过划痕试验检测细胞迁移能力的变化.结果 转染Bif-1基因后,Real-time PCR检测发现LNCap细胞中Bif-1基因mRNA水平△△CT高于对照组10倍以上;Western blotting条带光密度值提高2倍以上.实验组细胞凋亡比例升高至31.90%,细胞增殖能力减弱.实验组和对照组中LNCap细胞划痕愈合速度基本相同,差异无统计意义(P>0.05).结论 Bif-1基因在LNCap细胞中的过表达促进了细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力,而对前列腺癌细胞的迁移能力无显著影响.基因有可能作为一个潜在的前列腺癌治疗靶点.
作者:王铸;何霞;冯发深;关琳琳;汪杨;罗燕芬;黄斌;徐霖;曹开源 刊期: 2012年第07期