袁伟;陈有芳;李家明
目的 了解中山市医疗机构实验室生物安全管理现状,为进一步加强和规范医疗机构实验室生物安全管理工作提供依据.方法 设计<实验室生物安全自查表>,对中山市各类医疗卫生机构共29家单位进行问卷调查,使用Excel软件对数据进行统计分析.结果 中山市医疗机构生物安全实验室在安全管理制度的制定、防护设备使用方面与生物安全管理要求尚有一定差距,尤其在菌毒种管理和运送方面存在安全隐患.结论 中山市生物安全实验室的管理工作需要加强,应尽快建立健全的实验室生物安全管理体制.
作者:刘延;徐庆锋;黄毓文;陈宇轩;朱利;吴声穗;赵卫 刊期: 2010年第02期
登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科黄病毒属,是具有包膜的单股正链RNA病毒.病毒可通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,引起登革热和登革休克综合征,广泛流行于热带和亚热带地区,全球流行超过100个国家.登革病毒依赖包膜蛋白E蛋白构象的改变,从而发生病毒包膜和宿主细胞膜之间的融合将病毒核酸传递入细胞质中,但其感染人胞机理尚不十分清楚.本文就登革病毒相关E蛋白入胞机制的新研究进展作一简要综述.
作者:李焱;时莹;徐志凯;丁天兵 刊期: 2010年第02期
目的 研究阳春市中学生超重、肥胖的流行现状及其影响因素.方法 采用分层整群随机抽样的方法,对该市中学生进行现场调查.结果 阳春市中学生超重发生率为6.98%,肥胖率为2.81%;男生超重、肥胖检出率显著高于女生.父母肥胖、进食快、喜吃蔬菜是肥胖的影响因素.结论 中学生肥胖的发生主要与不良饮食习惯、生活方式密切相关,还与父母因素有关.
作者:陈华政;曾永红 刊期: 2010年第02期
目的 明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子.方法 构建长度依次递减的MIF基因5'调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926.利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5'调控区不同区段的转录活性.通过突变转录活性高的MIF 5'调控区序列.初步确定可能的转录因子结合序列.设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平.结果 双荧光基因报告检测显示,Ang Ⅱ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间.序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5'调控区-350至-339问的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性.AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIF mRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05).结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达.
作者:冯治宽;单志新;林秋雄;朱杰宁;麦丽萍;谭虹虹;邓春玉;邝素娟;余细勇 刊期: 2010年第02期
目的 构建在哺乳动物细胞中表达的septin 8红色荧光蛋白融合表达载体(pmCherry-C2/septin 8),并观察其在细胞内的表达和定位情况.方法 采用PCR的方法从人脑胶质细胞瘤cDNA文库中扩增获得septin 8基因编码区序列,将其克隆至红色荧光蛋白载体pmCherry-C2上,重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后转染NIH3T3细胞,并利用Western blotting和细胞免疫化学技术分析重组蛋白在细胞内的表达和定位.结果 重组pmCherry-C2/septin 8融合蛋白在NIH3T3细胞中得到高量表达且主要分布于细胞浆.结论 成功构建了pmCherry-C2/septin 8融合表达载体,该载体能在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究septin 8细胞内生物学功能打下了良好的基础.
作者:王丹;梅柱中;刘爱华;明小燕;王达安;王旭;姜勇 刊期: 2010年第02期
目的 探讨以葛根素为主要有效成分的葛根提取物对颈神经根性痛大鼠体感诱发电位的影响.方法 首先对葛根中葛根素的提取方法进行优化,确定佳提取工艺.然后通过椎管插线法建立神经根型颈椎病根性疼痛模型.将符合入组条件的大鼠随机分成5组:颈复康组,葛根提取物高、中、低剂量组,生理盐水组,每组8只.治疗前和治疗10 d后,分别对大鼠进行疼痛行为及步态评分、正中神经体感诱发电位测量.结果 葛根提取物各剂量组及颈复康组均能显著改善模型大鼠根性疼痛的相关行为,且能显著改善体感诱发电位潜伏期、波幅和传导速度,与生理盐水组相比差异有显著性意义(P<0.05).其中葛根提取物高剂量组(葛根素含量266.1 mg·kg-1·d-1)疗效佳,中剂量组(葛根素含量133.0 mg·kg-1·d-1)与高剂量组之间差异无统计学意义.结论 以葛根素为主要有效成分的葛根提取物能明显减轻颈神经根根性疼痛,并提示存在量效关系.
作者:于林;陈宝田;谢炜;赵伟宏 刊期: 2010年第02期
胃、十二指肠血吸虫病是异位血吸虫病中的一种类型.本文综述了胃、十二指肠血吸虫病的发病机制、临床表现、内镜下特点、临床分型以及诊断标准,并对胃、十二指肠血吸虫病与胃癌之间的关系以及所存在的争议进行了分析,提出了今后有待解决的问题与研究方向.
作者:熊萍香;王荣;胡美英;宁安;熊江琴 刊期: 2010年第02期
目的 构建日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,分析该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达情况.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST和Sj32抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Sj26GST和Sj32,得到Sj26GST-Sj32融合基因,克隆至原核表达载体pET32α(+),构建重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 基因拼接法扩增出约1991 bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入pET32a(+)中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量约82000 Mr的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的22%;Westem-blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.
作者:李文桂;肖邦忠;罗兴建;陈雅棠;吴成果 刊期: 2010年第02期
目的 分析手足口病的临床特点,为手足13病的临床诊断、治疗及预防提供依据.方法 对2008年5月1日至2009年3月31日期间收住院的368例手足口病患儿的临床资料进行回顾性分析.结果 368例手足13病患儿中,男女比例为1.3:1,3岁以下发病人数多(76.09%).患者均有皮疹,并发肺炎患儿多(43.5%).经抗炎、抗病毒及对症治疗后,359例患者治愈出院(97.5%),无后遗症,重症9例,死亡1例.结论 患者主要是3岁以下的儿童,成年患者较少,轻型为主,常见并发症为支气管肺炎;及时抗炎抗病毒及对症治疗后,大部分预后良好.
作者:张才儒;蒋骞;马蕾;蒋就喜 刊期: 2010年第02期
目的 探讨Zeta链蛋白检测在α-地中海贫血东南亚缺失型临床筛查中的应用价值.方法 从本院收集96例疑似标本,采用酶联免疫法和PCR法同时检测α-地贫血东南亚缺失型.以基阒检测为标准,计算ELISA法筛查α-地贫东南亚缺失型的灵敏度、特异性、准确性、阴性预测值(NPV)和阳性预测值(PPV).结果 96例全血标本经酶联免疫法检测阳性64例,阴性32例:64例阳性标本中经基因检测全部确诊为α-地中海贫血东南亚缺失型,32例阴性标本经基因检测无α-地贫东南亚缺失型.ELISA检测α-地贫东南亚缺失型灵敏度为100%,特异度为100%,准确性为100%,阴性试验的预示值为100%,阳性试验的预示值为100%.结论 酶联免疫法检测Zeta链蛋白是一种简便、快速的检测α-地贫东南亚缺失型的方法.
作者:赵文忠;周冰燚;苗竹林;杨宁;王一峰;秦卫兵 刊期: 2010年第02期
近年来,随着流行病学监测和实验室检测技术的进步、防蚊灭蚊措施的改进及抗疟疾药物的研究的进展,人类的疟疾防控工作也不断进步,但同时也不断面临着新的挑战.本文综述了我国及全球疟疾的流行现状、检测技术及防控措施的现状.
作者:车河龙;林栋 刊期: 2010年第02期
目的 构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA.结论 成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础.
作者:资捷;王前;郑磊;熊石龙;蔡贞 刊期: 2010年第02期
本文综述了华支睾吸虫病与其他肝胆疾病的误诊情况和华支睾吸虫感染与胆囊炎、胆管炎、胆石症、其他肝胆疾病及癌症的关系.临床医生若能提高对华支睾吸虫感染与其他肝胆疾病的鉴别水平,减少误诊;人群增强自我保健意识.改变不良的饮食习惯,将可有效控制华支睾吸虫感染.
作者:黄嘉殷;方小衡 刊期: 2010年第02期
目的 比较恩替卡韦和拉米夫定治疗乙肝病毒(HBV)所致慢加急性肝功能衰竭(subacute-onchronic liver failure,SCLF)的疗效.方法 93例HBV所致慢加急性肝功能衰竭患者随机分为恩替卡韦组(46例)和拉米夫定组(47例)两组.两组患者均在常规内科治疗基础上加用恩替卡韦或拉米夫定,疗程48周.观察用药后两组患者血清生化指标、HBV DNA转阴率、存活率及病毒反跳情况.结果 治疗4周和12周时恩替卡韦组的ALT值分别为(49.9±31.4)U/L和(33.2+20.5)U/L,明显低于拉米夫定组的(88.6±58.2)U/L和(55.4±31.7)U/L,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).其他生化指标两组比较差异无统计学意义.恩替卡韦治疗后4周及48周时HBV DNA转阴率分别为71.7%及97.8%,显著高于拉米夫定组的51.1%和72.3%,差异具有统计学意义(P<0.05).治疗48周内恩替卡韦组的存活率为80.4%,高于拉米夫定组的61.7%.恩替卡韦组46例患者无1例发生病毒反跳,而拉米夫定组47例患者中有5例发生病毒反跳.结论 恩替卡韦治疗慢加急性肝功能衰竭的抗病毒效果及患者存活率均高于拉米夫定,且不容易发生病毒反跳,因此适合慢加急性肝功能衰竭的长期治疗.
作者:文彬;袁静;胡敏冬;张娇红;邬明;姚思敏 刊期: 2010年第02期
目的 评价近8年来湘潭市实施结核病控制的防治效果.方法 对湘潭市2001-2008年结核病控制工作月报表、季报表、年报表及网络直报信息库资料进行分析.结果 湘潭市可疑肺结核患者就诊率、活动性肺结核病人的登记率,分别由2001年的64.1/10万和37.9/10万,上升到2008年的186.4/10万和67.6/10万.综合医院、乡镇卫生院和村医生等转诊来的病人由2001年的25.2%上升到2008年的36.5%.7年来的初治、复治涂阳肺结核病人平均治愈率分别为88.0%和80.3%.结论 通过实施结核病控制项目,发现和治愈了大批的涂阳肺结核病人,减少了结核病传染源,节省了病人医药费,收到了显著的社会效益和经济效益.
作者:袁伟;陈有芳;李家明 刊期: 2010年第02期
目的 全面了解和掌握广州市各区、县级市人群麻疹抗体水平,为实施有效的控制预防及消除麻疹提供科学依据.方法 2008年在广州市12个区、县级市中随机抽取9个区、县级市,采集孕妇、新生儿及0岁以上11个年龄组的健康人群静脉血各40人份,采用酶标ELISA法检测麻疹IgC抗体.结果 调查4043名健康者,其中抗体阳性2856人,阳性率为70.64%.所调查的9个区(县级市)中,不同区(县级市)之间的麻疹抗体阳性率差别有统计学意义(X2=400.313,P<0.05);12岁以上组则明显下降,各年龄组之间抗体阳性率差别有统计学意义(X2=267.832,P<0.05).结论 应加强计划免疫工作,使整个人群的免疫水平达到一个稳定的水平;在一定年龄组加强免疫接种是进一步控制麻疹爆发和流行的有效措施.
作者:张伟;狄飚;吴新伟;许建雄;傅传喜;李魁彪;鲁恩洁 刊期: 2010年第02期
目的 评估MCE-PEG富集法(混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集)对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法.方法 把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE-PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度,评估该方法的病毒回收率.同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度.结果 经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56.12%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝/μl.PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42.47%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝/μl.结论 MCE-PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高,可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法.
作者:周晓红;李晖;杨杏芬;柯昌文;陈传德;郑焕英;周惠琼;陈秋霞;邹丽容 刊期: 2010年第02期
目的 观察补中益气汤煎剂对卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠的免疫调节作用.方法 Waster雌性大鼠60只,随机分成正常对照组、模型对照组、西药治疗对照组、中药治疗组及中药预防组.除正常组外其他4组均参照国内外公认的造模方法建立肺孢子虫肺炎模型.模型对照组生理盐水灌胃:西药治疗对照组与中药治疗组于实验第5周起至第6周分别给予复方新诺明及补中益气汤煎剂灌胃:中药预防组于实验第1周起以补中益气汤煎剂灌胃.于实验第6周末处死各组大鼠并检测各组大鼠淋巴细胞转化率和T细胞亚群百分比.结果 正常组大鼠淋巴细胞转化率、CD4+T细胞数量和CD4+/CD8+的值高于模型组,其差异具有统计学意义.中药预防组大鼠淋巴细胞转化率、CD4+T细胞数量和CD4+/CD8+的值高于西药治疗组和模型组.预防组大鼠CD4+、CD4+/CD8+的值与正常组差异无统计学意义.西药治疗组CD4+、CD4+/CD8+的值与模型组无差异.结论 正常组与中药预防组大鼠T淋巴细胞转化率高于模型组,CD4+T细胞数量的减少与PCP的发生具有密切关系,正常组与中药预防组CD4+T细胞数量高于模型组,补中益气汤能够提高卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠淋巴细胞转化率和CD4+T细胞的数量,在本实验中中药预防组的效果尤为显著,证实该方剂对大鼠肺孢子虫肺炎具有防治作用.
作者:周季安;马贤德;陈文娜;孙宏伟;陈殿学 刊期: 2010年第02期
目的 建立体外培养东方田鼠鼠肝细胞的实验体系.方法 采用下腔静脉插管原位灌注结合胶原酶灌注法分离纯化出肝细胞,在改良Eagle培养基(Dulbecco's Modified Earle Media,DMEM)中培养,显微镜下观察细胞形态,AO-EB染色观察测定其活率来评价细胞质量.结果 一只东方田鼠肝脏一般可获得1.5×108~3.0×108个细胞,活率达95%,完全符合实验要求.刚分离的东方田鼠肝细胞呈圆球形,大小均匀,培养3 h后,大部分肝细胞出现贴壁,形态呈扁平状.培养24 h后,伸展良好,并成片生长.结论 下腔静脉插管原位灌注结合胶原酶灌注法可以分离出高纯度和活率高的东方田鼠肝细胞.
作者:丘继哲;邹艳;曾庆仁;刘碧源;黄旭;徐妮为 刊期: 2010年第02期
目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.
作者:梁昌盛;周红;罗海华;李美玉;梁天文 刊期: 2010年第02期