学术投稿

日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

李文桂;肖邦忠;罗兴建;陈雅棠;吴成果

关键词:日本血吸虫, 重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32, 大肠埃希菌, 表达
摘要:目的 构建日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,分析该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达情况.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST和Sj32抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Sj26GST和Sj32,得到Sj26GST-Sj32融合基因,克隆至原核表达载体pET32α(+),构建重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 基因拼接法扩增出约1991 bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入pET32a(+)中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量约82000 Mr的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的22%;Westem-blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.
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  • 湘潭市2001-2008年结核病控制效果分析

    目的 评价近8年来湘潭市实施结核病控制的防治效果.方法 对湘潭市2001-2008年结核病控制工作月报表、季报表、年报表及网络直报信息库资料进行分析.结果 湘潭市可疑肺结核患者就诊率、活动性肺结核病人的登记率,分别由2001年的64.1/10万和37.9/10万,上升到2008年的186.4/10万和67.6/10万.综合医院、乡镇卫生院和村医生等转诊来的病人由2001年的25.2%上升到2008年的36.5%.7年来的初治、复治涂阳肺结核病人平均治愈率分别为88.0%和80.3%.结论 通过实施结核病控制项目,发现和治愈了大批的涂阳肺结核病人,减少了结核病传染源,节省了病人医药费,收到了显著的社会效益和经济效益.

    作者:袁伟;陈有芳;李家明 刊期: 2010年第02期

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    目的 了解疲劳与亚健康的相关性,为亚健康的防治提供依据.方法 采用自制<公务员亚健康调查表>对参加体检的广东省某市税务部门676名公务员进行亚健康现况调查,对数据进行描述性分析、t检验、Logistic回归分析和Linear回归分析.结果 该市税务公务员亚健康总现患率为88.15%,疲劳在亚健康人群中的发生率为78.49%,亚健康人群的疲劳得分显著高于健康人群,疲劳对亚健康的发生和严重程度具有显著相关性,Cox&Snell决定系数R2=0.027,Nagelkerke决定系数R2=0.040.结论 疲劳是亚健康的重要表现症状之一,且对亚健康的发生发展具有重要的促进作用,应对公务员的疲劳症状进行及早干预.

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  • 血培养常见菌株的分布及金黄色葡萄球菌耐药性的分析

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