吴晓丽；蔡云清
目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.
作者：梁昌盛；周红；罗海华；李美玉；梁天文 刊期： 2010年第02期
目的 调查同济医院2006年1月至2008年12月血培养中常见非重复分离菌株的构成;分析金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 采用WHONET5.4软件分析连续3年血培养中的非重复分离菌株的分布;采用K-B纸片法测定金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的敏感性.结果 2006年1月至2008年12月共分离细菌1336株,其中革兰阳性球菌占58.5%(781/1336)、革兰阴性杆菌占37.2%(497/1336)、真菌占4.27%(57/1336).分离的前10位菌株依次为凝周酶阴性葡萄球菌(CNS,40.42%)、大肠埃希菌(13.47%)、肠球菌属(5.54%)、克雷伯菌属(4.94%)、金黄色葡萄球菌(4.34%)、草绿链球菌(4.34%)、真菌(4.27%)、沙门菌属(3.59%)、铜绿假单胞菌(3.29%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3.14%).金黄色葡萄球菌共58株,其中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)占44.8%(26/58).MRSA对头孢菌素类、氨苄西林/舒巴坦、红霉素、克林霉索、复方新诺明、庆大霉素和左氧氟沙星、磷霉素、利福平耐药率明显高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA),且差异具有统计学意义(P<0.001).未发现对万古霉素和替考拉宁不敏感的菌株.结论 本院血培养分离株中,凝同酶阴性葡萄球菌仍占据第一位.金黄色葡萄球菌占分离菌株第五位,其中MRSA检出率较高,且耐药性严重.MRSA病区的分布及耐药谱分析提示可能存在MRSA的克隆传播.
作者：石祖亮；简翠 刊期： 2010年第02期
目的 构建日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,分析该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达情况.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST和Sj32抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Sj26GST和Sj32,得到Sj26GST-Sj32融合基因,克隆至原核表达载体pET32α(+),构建重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 基因拼接法扩增出约1991 bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入pET32a(+)中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量约82000 Mr的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的22%;Westem-blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.
作者：李文桂；肖邦忠；罗兴建；陈雅棠；吴成果 刊期： 2010年第02期
登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科黄病毒属,是具有包膜的单股正链RNA病毒.病毒可通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,引起登革热和登革休克综合征,广泛流行于热带和亚热带地区,全球流行超过100个国家.登革病毒依赖包膜蛋白E蛋白构象的改变,从而发生病毒包膜和宿主细胞膜之间的融合将病毒核酸传递入细胞质中,但其感染人胞机理尚不十分清楚.本文就登革病毒相关E蛋白入胞机制的新研究进展作一简要综述.
作者：李焱；时莹；徐志凯；丁天兵 刊期： 2010年第02期
目的 评估MCE-PEG富集法(混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集)对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法.方法 把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE-PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度,评估该方法的病毒回收率.同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度.结果 经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56.12%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝/μl.PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42.47%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝/μl.结论 MCE-PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高,可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法.
作者：周晓红；李晖；杨杏芬；柯昌文；陈传德；郑焕英；周惠琼；陈秋霞；邹丽容 刊期： 2010年第02期
目的 分析手足口病的临床特点,为手足13病的临床诊断、治疗及预防提供依据.方法 对2008年5月1日至2009年3月31日期间收住院的368例手足口病患儿的临床资料进行回顾性分析.结果 368例手足13病患儿中,男女比例为1.3:1,3岁以下发病人数多(76.09%).患者均有皮疹,并发肺炎患儿多(43.5%).经抗炎、抗病毒及对症治疗后,359例患者治愈出院(97.5%),无后遗症,重症9例,死亡1例.结论 患者主要是3岁以下的儿童,成年患者较少,轻型为主,常见并发症为支气管肺炎;及时抗炎抗病毒及对症治疗后,大部分预后良好.
作者：张才儒；蒋骞；马蕾；蒋就喜 刊期： 2010年第02期
目的 了解广州市快餐连锁店冷饮的卫生质量,为监督执法提供有力可靠的科学依据,探讨快餐连锁店冷饮微生物污染的规律.方法 对2005-2008年广州市某快餐连锁店监督抽检的冷饮样品575份进行微生物指标分析;数据采用SPSS.13.0软件包进行统计学处理.结果 冷饮样品微生物指标合格率为83.3%,其中果汁类冷饮的合格率为80.0%:总体是大肠菌群超标比菌落总数为多.结论 2005-2008年该连锁店冷饮卫生质量不稳定;上规模、管理规范的连锁经营,其卫生质量远高于散户小型饮料店.加强企业自身管理、引入HACCP概念,有利于提高食品安全质量.
作者：成莉莉；谭铭雄；黎庆强 刊期： 2010年第02期
目的 对2009年发生于广东地区的3例家庭聚集性登革热患者血清进行登革病毒的鉴定和病毒株的培养分离.方法 用胶体金法检测患者血清中登革病毒特异性IgM、IgG抗体;C6/36细胞培养患者血清中登革病毒;RT-PCR扩增C-PrM基因序列的片段以检测患者血清中登革病毒RNA,PCR产物经序列测定后进行生物信息学分析.结果 3例患者血清学检测均为登革病毒特异性IgM阳性、IgG阴性;特异性RT-PCR产物长约290bp,经琼脂糖电泳和测序分析,证实3例患者血清中均存在登革3型病毒;从1例患者血清中培养分离到了登革病毒株,经RT-PCR和测序证实为登革3型病毒.结论 2009年发生于广东地区的3例登革热患者经病毒培养和分子生物学鉴定,证实均为登革3型病毒感染.
作者：周伟泽；张复春；胡凤玉；王建；洪文昕 刊期： 2010年第02期
目的 观察四种杀虫剂(奋斗呐、氯菊酯、敌敌畏、马拉硫磷)对灭蚤地区印鼠客蚤的毒性.方法 将用丙酮配制的药液100 μl加在φ35mm的滤纸药膜上,20 min后放入50 ml离心管盖中,接15匹成蚤于离心管(底部有20个φ0.5 mm小孔以通气)中,旋紧盖子并倒置.在温度(25±1)℃,相对湿度(85±5)%的培养箱中接触药膜24 h,检查死虫数,计算LC50及95%可信区间范围.结果 雷州平步、遂溪洋青、廉江营仔和潮洲饶平(对照点)的印鼠客蚤对奋斗呐、氯菊酯、敌敌畏、马拉硫磷相应的LC50分别为510.51 mg/L、923.63 mg/L、10.40mg/L、1224.62 mg/L;293.22 mg/L、349.95 mg/L、9.11 mg/L、775.00 mg/L;255.27 mg/L、219.99 mg/L、8.27 mg/L、559.37 mg/L;176.81 mg/L、199.66 mg/L、5.73 mg/L、583.31 mg/L.雷州平步、遂溪洋青、廉江营仔各自相应的LC50与潮洲饶平(对照点)的LC50的比值分别为2.89、4.63、1.82、2.10;1.66、1.75、1.59、1.33;1.44、1.10、1.44、0.96.结论 除了廉江营仔印鼠客蚤对马拉硫磷毒性敏感外,4种杀虫剂对雷州半岛灭蚤地区的印鼠客蚤的毒性降低,并以雷州平步的情况较为明显.
作者：梁秋光；易建荣；潘珠；祁美英；杨柳；黄济英；杨华源 刊期： 2010年第02期
目的 全面了解和掌握广州市各区、县级市人群麻疹抗体水平,为实施有效的控制预防及消除麻疹提供科学依据.方法 2008年在广州市12个区、县级市中随机抽取9个区、县级市,采集孕妇、新生儿及0岁以上11个年龄组的健康人群静脉血各40人份,采用酶标ELISA法检测麻疹IgC抗体.结果 调查4043名健康者,其中抗体阳性2856人,阳性率为70.64%.所调查的9个区(县级市)中,不同区(县级市)之间的麻疹抗体阳性率差别有统计学意义(X2=400.313,P<0.05);12岁以上组则明显下降,各年龄组之间抗体阳性率差别有统计学意义(X2=267.832,P<0.05).结论 应加强计划免疫工作,使整个人群的免疫水平达到一个稳定的水平;在一定年龄组加强免疫接种是进一步控制麻疹爆发和流行的有效措施.
作者：张伟；狄飚；吴新伟；许建雄；傅传喜；李魁彪；鲁恩洁 刊期： 2010年第02期
目的 比较恩替卡韦和拉米夫定治疗乙肝病毒(HBV)所致慢加急性肝功能衰竭(subacute-onchronic liver failure,SCLF)的疗效.方法 93例HBV所致慢加急性肝功能衰竭患者随机分为恩替卡韦组(46例)和拉米夫定组(47例)两组.两组患者均在常规内科治疗基础上加用恩替卡韦或拉米夫定,疗程48周.观察用药后两组患者血清生化指标、HBV DNA转阴率、存活率及病毒反跳情况.结果 治疗4周和12周时恩替卡韦组的ALT值分别为(49.9±31.4)U/L和(33.2+20.5)U/L,明显低于拉米夫定组的(88.6±58.2)U/L和(55.4±31.7)U/L,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).其他生化指标两组比较差异无统计学意义.恩替卡韦治疗后4周及48周时HBV DNA转阴率分别为71.7%及97.8%,显著高于拉米夫定组的51.1%和72.3%,差异具有统计学意义(P<0.05).治疗48周内恩替卡韦组的存活率为80.4%,高于拉米夫定组的61.7%.恩替卡韦组46例患者无1例发生病毒反跳,而拉米夫定组47例患者中有5例发生病毒反跳.结论 恩替卡韦治疗慢加急性肝功能衰竭的抗病毒效果及患者存活率均高于拉米夫定,且不容易发生病毒反跳,因此适合慢加急性肝功能衰竭的长期治疗.
作者：文彬；袁静；胡敏冬；张娇红；邬明；姚思敏 刊期： 2010年第02期
目的 优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法.方法 根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针.通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法.结果 该方法敏感度高,特异性强,重复性好.应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4 h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验.结论 本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断.
作者：王佃鹏；朱玉兰；李政良；刘胜牙；董瑞玲；黄宗炎；高朝贤；胡孔新 刊期： 2010年第02期
钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase,CDPKs)全称为钙依赖的而钙调素不依赖的蛋白激酶,在结构上具有明显的特征,从N端到C端存在4个结构域,依次为可变区、催化区、连接区和调控区.研究发现CDPKs存在于植物、绿藻、纤毛虫及顶复器原虫中,参与调控顶复器原虫(如疟原虫、弓形虫、球虫等)的运动,以及参与对宿主细胞的黏附和入侵,在入侵宿主细胞中发挥了重要功能.由于在脊椎动物体内没有发现CDPKs,顶复器原虫的CDPKs将有可能作为新治疗药物的靶标和新型疫苗的靶分子.本文介绍了CDPKs的结构与功能,以及疟原虫、弓形虫、球虫的CDPKs研究现状.
作者：李洋；韩红玉；黄兵 刊期： 2010年第02期
目的 了解疲劳与亚健康的相关性,为亚健康的防治提供依据.方法 采用自制<公务员亚健康调查表>对参加体检的广东省某市税务部门676名公务员进行亚健康现况调查,对数据进行描述性分析、t检验、Logistic回归分析和Linear回归分析.结果 该市税务公务员亚健康总现患率为88.15%,疲劳在亚健康人群中的发生率为78.49%,亚健康人群的疲劳得分显著高于健康人群,疲劳对亚健康的发生和严重程度具有显著相关性,Cox&Snell决定系数R2=0.027,Nagelkerke决定系数R2=0.040.结论 疲劳是亚健康的重要表现症状之一,且对亚健康的发生发展具有重要的促进作用,应对公务员的疲劳症状进行及早干预.
作者：聂晓莉；薛琪；罗仁 刊期： 2010年第02期
目的 通过对120例急性输血反应发生的情况及其预防、处理方式进行总结分析,为临床减少输血反应、有效处理输血反应提供参考.方法 统计分析我院2007年1月至2008年12月各类血液成分的输血反应情况;比较输血前常规用药是否能预防输血反应的发生,并通过对120例输血反应的处理进行分析,总结较为安全有效的处理方式.结果 总的输血反应率为2.0%,各类血液成分输血反应率有一定区别,差异有统计学意义(X2=12.54,P<0.05);输血前用药组与非用药组比较,其输血反应发生率无统计学意义(X=0.096,0.11,0.015,0.342,P>0.5);地塞米松、冰敷、口服百服宁等对治疗非溶血性发热性输血反应(febrile non-hemolytic transfusion reactions,FNHTR)有效,非那根对治疗FNHTR无效,地塞米松、非那根及扑尔敏等抗组胺药对过敏反应有效.结论 输血前用药预防输血反应的作用不明显;非那根等抗组胺药对治疗FNHTR无效.明确输血反应的种类并对症治疗,是处理输血反应的有效手段.
作者：朱跃辉；周立红；王小平；李莹；邵延芹；钟阳青；冯莹 刊期： 2010年第02期
目的 明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子.方法 构建长度依次递减的MIF基因5'调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926.利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5'调控区不同区段的转录活性.通过突变转录活性高的MIF 5'调控区序列.初步确定可能的转录因子结合序列.设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平.结果 双荧光基因报告检测显示,Ang Ⅱ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间.序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5'调控区-350至-339问的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性.AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIF mRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05).结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达.
作者：冯治宽；单志新；林秋雄；朱杰宁；麦丽萍；谭虹虹；邓春玉；邝素娟；余细勇 刊期： 2010年第02期
目的 观察补中益气汤煎剂对卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠的免疫调节作用.方法 Waster雌性大鼠60只,随机分成正常对照组、模型对照组、西药治疗对照组、中药治疗组及中药预防组.除正常组外其他4组均参照国内外公认的造模方法建立肺孢子虫肺炎模型.模型对照组生理盐水灌胃:西药治疗对照组与中药治疗组于实验第5周起至第6周分别给予复方新诺明及补中益气汤煎剂灌胃:中药预防组于实验第1周起以补中益气汤煎剂灌胃.于实验第6周末处死各组大鼠并检测各组大鼠淋巴细胞转化率和T细胞亚群百分比.结果 正常组大鼠淋巴细胞转化率、CD4+T细胞数量和CD4+/CD8+的值高于模型组,其差异具有统计学意义.中药预防组大鼠淋巴细胞转化率、CD4+T细胞数量和CD4+/CD8+的值高于西药治疗组和模型组.预防组大鼠CD4+、CD4+/CD8+的值与正常组差异无统计学意义.西药治疗组CD4+、CD4+/CD8+的值与模型组无差异.结论 正常组与中药预防组大鼠T淋巴细胞转化率高于模型组,CD4+T细胞数量的减少与PCP的发生具有密切关系,正常组与中药预防组CD4+T细胞数量高于模型组,补中益气汤能够提高卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠淋巴细胞转化率和CD4+T细胞的数量,在本实验中中药预防组的效果尤为显著,证实该方剂对大鼠肺孢子虫肺炎具有防治作用.
作者：周季安；马贤德；陈文娜；孙宏伟；陈殿学 刊期： 2010年第02期
目的 探讨重组质粒pET-28a(+)/CTX-M-3分别在大肠埃希菌ER2566和BL21(DE3)中进行原核表达的佳条件.方法 分别在不同的宿主菌、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度中诱导pET-28a(+)/CTX-M-3融合表达载体,目的 产物经SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件分析,以获得佳表达条件.结果 表达载体的佳诱导条件是重组质粒在BL21(DE3)中18℃诱导24 h,IPTG终浓度为0.8 mmol/L:表达载体在佳条件下表达时,目的 蛋白的高表达量占菌体总蛋白的33%.结论 获得pET-28a(+)/CTX-M-3在大肠埃希菌中表达CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)蛋白的佳条件,为此酶的大量纯化奠定了基础.
作者：徐韫健；李翊泉；廖伟娇；江洁华；张东梅 刊期： 2010年第02期
目的 构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA.结论 成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础.
作者：资捷；王前；郑磊；熊石龙；蔡贞 刊期： 2010年第02期
目的 探究广州管圆线虫感染期幼虫(第Ⅲ期幼虫)在不同温度不同时间下的生存及死亡情况(死亡率).方法 采用人工消化法,从自然感染的褐云玛瑙螺中提取广州管圆线虫感染期幼虫,将其放入不同温度(35～90℃)的热水中,分别作用不同时间(1～20 min).取出置解剖镜下观察虫体的变化情况.结果 在1～20 min内,45℃以下温度对感染期幼虫不具有杀灭作用,死亡率为0;50～55℃温度对感染期幼虫有轻度的杀灭作用,死亡率为12.00%～97.33%;60～65℃温度对感染期幼虫有一定强度的杀灭作用,死亡率为57.39%～100.00%:70～75℃温度对感染期幼虫有很强的杀灭作用,死亡率为97.22%～100.00%;在80℃以上温度时感染期幼虫迅速死亡,死亡率为100.00%.结论 45℃以下温度,20 min内对广州管圆线虫感染期幼虫没有杀灭作用;50～75℃温度,1～20 min,对大多数广州管圆线虫感染期幼虫具有杀灭作用,温度越高,时间越长,杀灭作用越强:80℃以上温度,1～20 min,对广州管圆线虫感染期幼虫具有完全杀灭作用.
作者：田旭岩；卢勤声；周丽芬；黄丽云；陈戊荣；沈浩贤；何芳；李小敏；麦璟莹；张惠球；黎银燕；朱蔚云 刊期： 2010年第02期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
