梁秋光;易建荣;潘珠;祁美英;杨柳;黄济英;杨华源
目的 对2009年发生于广东地区的3例家庭聚集性登革热患者血清进行登革病毒的鉴定和病毒株的培养分离.方法 用胶体金法检测患者血清中登革病毒特异性IgM、IgG抗体;C6/36细胞培养患者血清中登革病毒;RT-PCR扩增C-PrM基因序列的片段以检测患者血清中登革病毒RNA,PCR产物经序列测定后进行生物信息学分析.结果 3例患者血清学检测均为登革病毒特异性IgM阳性、IgG阴性;特异性RT-PCR产物长约290bp,经琼脂糖电泳和测序分析,证实3例患者血清中均存在登革3型病毒;从1例患者血清中培养分离到了登革病毒株,经RT-PCR和测序证实为登革3型病毒.结论 2009年发生于广东地区的3例登革热患者经病毒培养和分子生物学鉴定,证实均为登革3型病毒感染.
作者:周伟泽;张复春;胡凤玉;王建;洪文昕 刊期: 2010年第02期
本文综述了华支睾吸虫病与其他肝胆疾病的误诊情况和华支睾吸虫感染与胆囊炎、胆管炎、胆石症、其他肝胆疾病及癌症的关系.临床医生若能提高对华支睾吸虫感染与其他肝胆疾病的鉴别水平,减少误诊;人群增强自我保健意识.改变不良的饮食习惯,将可有效控制华支睾吸虫感染.
作者:黄嘉殷;方小衡 刊期: 2010年第02期
目的 了解蒲公英提取物(extract from Taraxacum mogonon,ETM)中总黄酮、多糖的含量.方法 提取ETM中总黄酮和多糖成分,分光光度法测定样品中总黄酮和多糖的含量.结果 以芦丁和葡萄糖为对照品,测定波长分别选择510hm和490nm,稳定性试验显示总黄酮、多糖1 h内吸光度基本稳定,精密度和重现性较好,回收率在95.73%~102.16%之间;其中总黄酮和多糖的平均含量分别为5.51%、14.91%.结论 分光光度法测定ETM中总黄酮、多糖含量准确,并稳定、简单易行且重复性良好,可作为蒲公英中总黄酮和多糖的检测方法.
作者:吴晓丽;蔡云清 刊期: 2010年第02期
以近年来参与医学微生物学实验教学的实践为基础,从改革课程设置和安排、完善病例引导式问题教学法、增设综合性和设计性实验和改革考核方式这4个方面论述了对医学本科生微生物学实验教学改革的思考.基于学时数,合理安排实验内容,知识循序渐进;进一步完善病例引导式问题教学法,数量适宜,重点突出;增设综合性和设计性实验,提高实验系统性;改革考核方式,综合评价学生实际水平和能力.突出对学生创新能力的培养,使学生真正掌握相关的知识和技能,形成严谨务实的科学工作作风,获得解决实际问题的能力.
作者:周俊梅 刊期: 2010年第02期
目的 通过对120例急性输血反应发生的情况及其预防、处理方式进行总结分析,为临床减少输血反应、有效处理输血反应提供参考.方法 统计分析我院2007年1月至2008年12月各类血液成分的输血反应情况;比较输血前常规用药是否能预防输血反应的发生,并通过对120例输血反应的处理进行分析,总结较为安全有效的处理方式.结果 总的输血反应率为2.0%,各类血液成分输血反应率有一定区别,差异有统计学意义(X2=12.54,P<0.05);输血前用药组与非用药组比较,其输血反应发生率无统计学意义(X=0.096,0.11,0.015,0.342,P>0.5);地塞米松、冰敷、口服百服宁等对治疗非溶血性发热性输血反应(febrile non-hemolytic transfusion reactions,FNHTR)有效,非那根对治疗FNHTR无效,地塞米松、非那根及扑尔敏等抗组胺药对过敏反应有效.结论 输血前用药预防输血反应的作用不明显;非那根等抗组胺药对治疗FNHTR无效.明确输血反应的种类并对症治疗,是处理输血反应的有效手段.
作者:朱跃辉;周立红;王小平;李莹;邵延芹;钟阳青;冯莹 刊期: 2010年第02期
目的 构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA.结论 成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础.
作者:资捷;王前;郑磊;熊石龙;蔡贞 刊期: 2010年第02期
目的 评估MCE-PEG富集法(混合硝酸纤维素膜第一次富集和PEG沉淀第二次富集)对水中诺如病毒的富集效果及检测灵敏度,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供有效的实验室检测方法.方法 把含有诺如病毒的粪便加入纯净水中,用MCE-PEG方法富集后,荧光PCR绝对定量检测富集前后水的病毒浓度,评估该方法的病毒回收率.同时梯度稀释粪便悬液,分别加入纯净水中,评估该方法的灵敏度.结果 经过混合硝酸纤维素膜第一次富集后待滤水被浓缩100倍,病毒平均回收率为56.12%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为10拷贝/μl.PEG沉淀第二次富集后,浓缩倍数为1000倍,病毒平均回收率为42.47%,灵敏度是待滤水中病毒浓度为1拷贝/μl.结论 MCE-PEG富集法操作简单、材料价格实惠、易于购买、病毒回收率及灵敏度较高,可望进一步优化后广泛应用于不同水中病毒富集浓缩检测,为水源性诺如病毒胃肠炎疫情暴发的确定提供了有效的实验室检测方法.
作者:周晓红;李晖;杨杏芬;柯昌文;陈传德;郑焕英;周惠琼;陈秋霞;邹丽容 刊期: 2010年第02期
目的 了解中山市医疗机构实验室生物安全管理现状,为进一步加强和规范医疗机构实验室生物安全管理工作提供依据.方法 设计<实验室生物安全自查表>,对中山市各类医疗卫生机构共29家单位进行问卷调查,使用Excel软件对数据进行统计分析.结果 中山市医疗机构生物安全实验室在安全管理制度的制定、防护设备使用方面与生物安全管理要求尚有一定差距,尤其在菌毒种管理和运送方面存在安全隐患.结论 中山市生物安全实验室的管理工作需要加强,应尽快建立健全的实验室生物安全管理体制.
作者:刘延;徐庆锋;黄毓文;陈宇轩;朱利;吴声穗;赵卫 刊期: 2010年第02期
目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.
作者:梁昌盛;周红;罗海华;李美玉;梁天文 刊期: 2010年第02期
目的 探讨重组质粒pET-28a(+)/CTX-M-3分别在大肠埃希菌ER2566和BL21(DE3)中进行原核表达的佳条件.方法 分别在不同的宿主菌、诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度中诱导pET-28a(+)/CTX-M-3融合表达载体,目的 产物经SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件分析,以获得佳表达条件.结果 表达载体的佳诱导条件是重组质粒在BL21(DE3)中18℃诱导24 h,IPTG终浓度为0.8 mmol/L:表达载体在佳条件下表达时,目的 蛋白的高表达量占菌体总蛋白的33%.结论 获得pET-28a(+)/CTX-M-3在大肠埃希菌中表达CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamase,ESBLs)蛋白的佳条件,为此酶的大量纯化奠定了基础.
作者:徐韫健;李翊泉;廖伟娇;江洁华;张东梅 刊期: 2010年第02期
目的 研究青芥辣对离体肝吸虫囊蚴的杀灭作用.方法 采用人工消化法从淡水鱼中获取囊蚴,分组(囊蚴20个/组),将其置于定量青芥辣软膏中,分别作用不同时间,显微镜下观察囊蚴的活动情况.结果 青芥辣对肝吸虫囊蚴作用1~6 min后,囊蚴内后尾蚴活动加强;作用7~180 min后囊蚴活动力降低甚至开始死亡,死亡率范围为11.76%~100%;作用210 min以后囊蚴全部死亡,死亡率达到100%.对照组囊蚴形态和后尾蚴活动无改变.结论 青芥辣对肝吸虫囊蚴具有刺激和轻度杀灭作用,但在短时间内没有杀灭作用,所以期望用青芥辣杀灭肝吸虫囊蚴来达到预防肝吸虫感染的做法不可取.
作者:许燕佳;崔燕玲;陈虹;沈浩贤;张惠球;麦璟莹;李小敏;何芳;朱蔚云;黎银燕;马长玲;陈代雄;陈新宇 刊期: 2010年第02期
目的 研究安络化纤丸联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效.方法 60例慢性乙型肝炎患者随机分为A、B两组,A组采用安络化纤丸联合阿德福韦酯治疗,B组单独采用阿德福韦酯治疗,疗程均为半年.观察治疗前、治疗6个月后的血清HA、LN、PCIII、IV-C水平和肝功能指标(TBIL、ALT、AST、ALB)及HBV-DNA定量.结果 A、B两组血清HA、LN、PCIII、IV-C、TBIL、ALT、AST均随治疗时间逐渐降低,除PCIII外(P>0.05),其余三项指标治疗后两组差异有统计学意义(P<0.05).两组治疗后,肝功能指标均较治疗前改善,但A组改善较B组更为明显,差异有统计学意义(P<0.05).在HBV-DNA定量方面,两组治疗后均较治疗前下降,均有统计学意义(P<0.05),但两组对比差异无统计学意义(P>0.05).结论 安络化纤丸联合阿德福韦酯对慢性乙型肝炎肝纤维化有良好的抗纤维化效果.并能改善生化指标,疗效优于单独使用阿德福韦酯组.
作者:吴启文;谭行华;林炳亮;吴振新 刊期: 2010年第02期
目的 明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子.方法 构建长度依次递减的MIF基因5'调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926.利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5'调控区不同区段的转录活性.通过突变转录活性高的MIF 5'调控区序列.初步确定可能的转录因子结合序列.设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平.结果 双荧光基因报告检测显示,Ang Ⅱ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间.序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5'调控区-350至-339问的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性.AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIF mRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05).结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达.
作者:冯治宽;单志新;林秋雄;朱杰宁;麦丽萍;谭虹虹;邓春玉;邝素娟;余细勇 刊期: 2010年第02期
登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科黄病毒属,是具有包膜的单股正链RNA病毒.病毒可通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,引起登革热和登革休克综合征,广泛流行于热带和亚热带地区,全球流行超过100个国家.登革病毒依赖包膜蛋白E蛋白构象的改变,从而发生病毒包膜和宿主细胞膜之间的融合将病毒核酸传递入细胞质中,但其感染人胞机理尚不十分清楚.本文就登革病毒相关E蛋白入胞机制的新研究进展作一简要综述.
作者:李焱;时莹;徐志凯;丁天兵 刊期: 2010年第02期
目的 构建在哺乳动物细胞中表达的septin 8红色荧光蛋白融合表达载体(pmCherry-C2/septin 8),并观察其在细胞内的表达和定位情况.方法 采用PCR的方法从人脑胶质细胞瘤cDNA文库中扩增获得septin 8基因编码区序列,将其克隆至红色荧光蛋白载体pmCherry-C2上,重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后转染NIH3T3细胞,并利用Western blotting和细胞免疫化学技术分析重组蛋白在细胞内的表达和定位.结果 重组pmCherry-C2/septin 8融合蛋白在NIH3T3细胞中得到高量表达且主要分布于细胞浆.结论 成功构建了pmCherry-C2/septin 8融合表达载体,该载体能在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究septin 8细胞内生物学功能打下了良好的基础.
作者:王丹;梅柱中;刘爱华;明小燕;王达安;王旭;姜勇 刊期: 2010年第02期
目的 优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法.方法 根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针.通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法.结果 该方法敏感度高,特异性强,重复性好.应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4 h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验.结论 本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断.
作者:王佃鹏;朱玉兰;李政良;刘胜牙;董瑞玲;黄宗炎;高朝贤;胡孔新 刊期: 2010年第02期
目的 探讨以葛根素为主要有效成分的葛根提取物对颈神经根性痛大鼠体感诱发电位的影响.方法 首先对葛根中葛根素的提取方法进行优化,确定佳提取工艺.然后通过椎管插线法建立神经根型颈椎病根性疼痛模型.将符合入组条件的大鼠随机分成5组:颈复康组,葛根提取物高、中、低剂量组,生理盐水组,每组8只.治疗前和治疗10 d后,分别对大鼠进行疼痛行为及步态评分、正中神经体感诱发电位测量.结果 葛根提取物各剂量组及颈复康组均能显著改善模型大鼠根性疼痛的相关行为,且能显著改善体感诱发电位潜伏期、波幅和传导速度,与生理盐水组相比差异有显著性意义(P<0.05).其中葛根提取物高剂量组(葛根素含量266.1 mg·kg-1·d-1)疗效佳,中剂量组(葛根素含量133.0 mg·kg-1·d-1)与高剂量组之间差异无统计学意义.结论 以葛根素为主要有效成分的葛根提取物能明显减轻颈神经根根性疼痛,并提示存在量效关系.
作者:于林;陈宝田;谢炜;赵伟宏 刊期: 2010年第02期
目的 分析手足口病的临床特点,为手足13病的临床诊断、治疗及预防提供依据.方法 对2008年5月1日至2009年3月31日期间收住院的368例手足口病患儿的临床资料进行回顾性分析.结果 368例手足13病患儿中,男女比例为1.3:1,3岁以下发病人数多(76.09%).患者均有皮疹,并发肺炎患儿多(43.5%).经抗炎、抗病毒及对症治疗后,359例患者治愈出院(97.5%),无后遗症,重症9例,死亡1例.结论 患者主要是3岁以下的儿童,成年患者较少,轻型为主,常见并发症为支气管肺炎;及时抗炎抗病毒及对症治疗后,大部分预后良好.
作者:张才儒;蒋骞;马蕾;蒋就喜 刊期: 2010年第02期
目的 了解疲劳与亚健康的相关性,为亚健康的防治提供依据.方法 采用自制<公务员亚健康调查表>对参加体检的广东省某市税务部门676名公务员进行亚健康现况调查,对数据进行描述性分析、t检验、Logistic回归分析和Linear回归分析.结果 该市税务公务员亚健康总现患率为88.15%,疲劳在亚健康人群中的发生率为78.49%,亚健康人群的疲劳得分显著高于健康人群,疲劳对亚健康的发生和严重程度具有显著相关性,Cox&Snell决定系数R2=0.027,Nagelkerke决定系数R2=0.040.结论 疲劳是亚健康的重要表现症状之一,且对亚健康的发生发展具有重要的促进作用,应对公务员的疲劳症状进行及早干预.
作者:聂晓莉;薛琪;罗仁 刊期: 2010年第02期
目的 探讨对比标准大骨瓣开颅(Standard large craniotomy)血肿清除去大骨瓣减压并天幕裂孔疝复位术与常规大骨瓣开颅血肿清除去大骨瓣减压术对高血压脑出血伴天幕裂孔疝的治疗效果.方法 66例高血压脑出血伴天幕裂孔疝患者(格拉斯哥昏迷评分GCS≤8分)随机分成研究组(标准大骨瓣开颅)和对照组(常规大骨瓣开颅),术后记录1、3、7 d腰穿置管监测颅内压(intracranial pressure ICP)值、脑脊液细胞数、头颅CT检查并测量脑水肿范围和中线结构移位、TCD(transcranial doppler system)监测脑血管痉挛等指标,根据主要并发症比较两组疗效.结果 术后3 d研究组较对照组的颅内压、脑脊液细胞数、脑水肿范围和中线结构移位等指标改善有显著性差异(P<0.01).术后7 d研究组的上述各项指标接近正常.研究组并发症和死亡率明显少于对照组.结论 用标准大骨瓣开颅血肿清除去大骨瓣减压并天幕裂孔疝复位术治疗高血压脑出血伴天幕裂孔疝能减少并发症,降低死亡率,是手术治疗高血压脑出血伴天幕裂孔疝的有效方法.
作者:向进;郭伟;吕文;王莉莉;陈东;赵永阳 刊期: 2010年第02期