学术投稿

新生隐球菌墨汁染色检查实验的改进

梁昌盛;周红;罗海华;李美玉;梁天文

关键词:新生隐球菌, 墨汁负染, 灭活, 实验改进
摘要:目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.
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  • 四种杀虫剂对雷州半岛灭蚤地区印鼠客蚤的毒性观察

    目的 观察四种杀虫剂(奋斗呐、氯菊酯、敌敌畏、马拉硫磷)对灭蚤地区印鼠客蚤的毒性.方法 将用丙酮配制的药液100 μl加在φ35mm的滤纸药膜上,20 min后放入50 ml离心管盖中,接15匹成蚤于离心管(底部有20个φ0.5 mm小孔以通气)中,旋紧盖子并倒置.在温度(25±1)℃,相对湿度(85±5)%的培养箱中接触药膜24 h,检查死虫数,计算LC50及95%可信区间范围.结果 雷州平步、遂溪洋青、廉江营仔和潮洲饶平(对照点)的印鼠客蚤对奋斗呐、氯菊酯、敌敌畏、马拉硫磷相应的LC50分别为510.51 mg/L、923.63 mg/L、10.40mg/L、1224.62 mg/L;293.22 mg/L、349.95 mg/L、9.11 mg/L、775.00 mg/L;255.27 mg/L、219.99 mg/L、8.27 mg/L、559.37 mg/L;176.81 mg/L、199.66 mg/L、5.73 mg/L、583.31 mg/L.雷州平步、遂溪洋青、廉江营仔各自相应的LC50与潮洲饶平(对照点)的LC50的比值分别为2.89、4.63、1.82、2.10;1.66、1.75、1.59、1.33;1.44、1.10、1.44、0.96.结论 除了廉江营仔印鼠客蚤对马拉硫磷毒性敏感外,4种杀虫剂对雷州半岛灭蚤地区的印鼠客蚤的毒性降低,并以雷州平步的情况较为明显.

    作者:梁秋光;易建荣;潘珠;祁美英;杨柳;黄济英;杨华源 刊期: 2010年第02期

  • 阳春市中学生单纯性肥胖症流行病学调查

    目的 研究阳春市中学生超重、肥胖的流行现状及其影响因素.方法 采用分层整群随机抽样的方法,对该市中学生进行现场调查.结果 阳春市中学生超重发生率为6.98%,肥胖率为2.81%;男生超重、肥胖检出率显著高于女生.父母肥胖、进食快、喜吃蔬菜是肥胖的影响因素.结论 中学生肥胖的发生主要与不良饮食习惯、生活方式密切相关,还与父母因素有关.

    作者:陈华政;曾永红 刊期: 2010年第02期

  • 青芥辣对离体肝吸虫囊蚴杀灭作用的研究

    目的 研究青芥辣对离体肝吸虫囊蚴的杀灭作用.方法 采用人工消化法从淡水鱼中获取囊蚴,分组(囊蚴20个/组),将其置于定量青芥辣软膏中,分别作用不同时间,显微镜下观察囊蚴的活动情况.结果 青芥辣对肝吸虫囊蚴作用1~6 min后,囊蚴内后尾蚴活动加强;作用7~180 min后囊蚴活动力降低甚至开始死亡,死亡率范围为11.76%~100%;作用210 min以后囊蚴全部死亡,死亡率达到100%.对照组囊蚴形态和后尾蚴活动无改变.结论 青芥辣对肝吸虫囊蚴具有刺激和轻度杀灭作用,但在短时间内没有杀灭作用,所以期望用青芥辣杀灭肝吸虫囊蚴来达到预防肝吸虫感染的做法不可取.

    作者:许燕佳;崔燕玲;陈虹;沈浩贤;张惠球;麦璟莹;李小敏;何芳;朱蔚云;黎银燕;马长玲;陈代雄;陈新宇 刊期: 2010年第02期

  • 广东登革3型病毒株的分离培养和鉴定

    目的 对2009年发生于广东地区的3例家庭聚集性登革热患者血清进行登革病毒的鉴定和病毒株的培养分离.方法 用胶体金法检测患者血清中登革病毒特异性IgM、IgG抗体;C6/36细胞培养患者血清中登革病毒;RT-PCR扩增C-PrM基因序列的片段以检测患者血清中登革病毒RNA,PCR产物经序列测定后进行生物信息学分析.结果 3例患者血清学检测均为登革病毒特异性IgM阳性、IgG阴性;特异性RT-PCR产物长约290bp,经琼脂糖电泳和测序分析,证实3例患者血清中均存在登革3型病毒;从1例患者血清中培养分离到了登革病毒株,经RT-PCR和测序证实为登革3型病毒.结论 2009年发生于广东地区的3例登革热患者经病毒培养和分子生物学鉴定,证实均为登革3型病毒感染.

    作者:周伟泽;张复春;胡凤玉;王建;洪文昕 刊期: 2010年第02期

  • 深圳市酒店三文鱼和北极贝生食中致病菌污染状况调查

    目的 了解酒店、日韩料理餐厅冰鲜海产品(三文鱼、北极贝)的微生物污染状况,为预防病原微生物食物中毒提供科学依据.方法 抽取酒店、日韩料理餐厅、超市商场等冰鲜海产品共168份,依照国家标准方法和荧光PCR方法对样品进行检测.结果 168份样品中共检出不合格大肠菌群101份,阳性率为60.12%;菌落总数29份,阳性率为17.26%;致病菌:检出副溶血性弧菌5份,阳性率为2.98%;金黄色葡萄菌38份,阳性率为22.62%.沙门氏菌和志贺氏菌致病菌未检出.结论 冰鲜海产品三文鱼和北极贝受到病原微生物的污染相当严重,各部门要加强监管监测,积极做好预防控制工作,减少食原性食物中毒发生的危险.

    作者:吴平芳;贺连华;石晓路;扈庆华;王冰;冼慧霞;陈妙玲 刊期: 2010年第02期

  • 登革病毒E蛋白入胞机制研究现状

    登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科黄病毒属,是具有包膜的单股正链RNA病毒.病毒可通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,引起登革热和登革休克综合征,广泛流行于热带和亚热带地区,全球流行超过100个国家.登革病毒依赖包膜蛋白E蛋白构象的改变,从而发生病毒包膜和宿主细胞膜之间的融合将病毒核酸传递入细胞质中,但其感染人胞机理尚不十分清楚.本文就登革病毒相关E蛋白入胞机制的新研究进展作一简要综述.

    作者:李焱;时莹;徐志凯;丁天兵 刊期: 2010年第02期

  • Zeta链蛋白检测在筛查α-地贫东南亚缺失型中的临床应用

    目的 探讨Zeta链蛋白检测在α-地中海贫血东南亚缺失型临床筛查中的应用价值.方法 从本院收集96例疑似标本,采用酶联免疫法和PCR法同时检测α-地贫血东南亚缺失型.以基阒检测为标准,计算ELISA法筛查α-地贫东南亚缺失型的灵敏度、特异性、准确性、阴性预测值(NPV)和阳性预测值(PPV).结果 96例全血标本经酶联免疫法检测阳性64例,阴性32例:64例阳性标本中经基因检测全部确诊为α-地中海贫血东南亚缺失型,32例阴性标本经基因检测无α-地贫东南亚缺失型.ELISA检测α-地贫东南亚缺失型灵敏度为100%,特异度为100%,准确性为100%,阴性试验的预示值为100%,阳性试验的预示值为100%.结论 酶联免疫法检测Zeta链蛋白是一种简便、快速的检测α-地贫东南亚缺失型的方法.

    作者:赵文忠;周冰燚;苗竹林;杨宁;王一峰;秦卫兵 刊期: 2010年第02期

  • 疲劳与亚健康的相关性研究

    目的 了解疲劳与亚健康的相关性,为亚健康的防治提供依据.方法 采用自制<公务员亚健康调查表>对参加体检的广东省某市税务部门676名公务员进行亚健康现况调查,对数据进行描述性分析、t检验、Logistic回归分析和Linear回归分析.结果 该市税务公务员亚健康总现患率为88.15%,疲劳在亚健康人群中的发生率为78.49%,亚健康人群的疲劳得分显著高于健康人群,疲劳对亚健康的发生和严重程度具有显著相关性,Cox&Snell决定系数R2=0.027,Nagelkerke决定系数R2=0.040.结论 疲劳是亚健康的重要表现症状之一,且对亚健康的发生发展具有重要的促进作用,应对公务员的疲劳症状进行及早干预.

    作者:聂晓莉;薛琪;罗仁 刊期: 2010年第02期

  • 不同温度对广州管圆线虫感染期幼虫的杀灭作用

    目的 探究广州管圆线虫感染期幼虫(第Ⅲ期幼虫)在不同温度不同时间下的生存及死亡情况(死亡率).方法 采用人工消化法,从自然感染的褐云玛瑙螺中提取广州管圆线虫感染期幼虫,将其放入不同温度(35~90℃)的热水中,分别作用不同时间(1~20 min).取出置解剖镜下观察虫体的变化情况.结果 在1~20 min内,45℃以下温度对感染期幼虫不具有杀灭作用,死亡率为0;50~55℃温度对感染期幼虫有轻度的杀灭作用,死亡率为12.00%~97.33%;60~65℃温度对感染期幼虫有一定强度的杀灭作用,死亡率为57.39%~100.00%:70~75℃温度对感染期幼虫有很强的杀灭作用,死亡率为97.22%~100.00%;在80℃以上温度时感染期幼虫迅速死亡,死亡率为100.00%.结论 45℃以下温度,20 min内对广州管圆线虫感染期幼虫没有杀灭作用;50~75℃温度,1~20 min,对大多数广州管圆线虫感染期幼虫具有杀灭作用,温度越高,时间越长,杀灭作用越强:80℃以上温度,1~20 min,对广州管圆线虫感染期幼虫具有完全杀灭作用.

    作者:田旭岩;卢勤声;周丽芬;黄丽云;陈戊荣;沈浩贤;何芳;李小敏;麦璟莹;张惠球;黎银燕;朱蔚云 刊期: 2010年第02期

  • 120例急性输血反应的临床分析

    目的 通过对120例急性输血反应发生的情况及其预防、处理方式进行总结分析,为临床减少输血反应、有效处理输血反应提供参考.方法 统计分析我院2007年1月至2008年12月各类血液成分的输血反应情况;比较输血前常规用药是否能预防输血反应的发生,并通过对120例输血反应的处理进行分析,总结较为安全有效的处理方式.结果 总的输血反应率为2.0%,各类血液成分输血反应率有一定区别,差异有统计学意义(X2=12.54,P<0.05);输血前用药组与非用药组比较,其输血反应发生率无统计学意义(X=0.096,0.11,0.015,0.342,P>0.5);地塞米松、冰敷、口服百服宁等对治疗非溶血性发热性输血反应(febrile non-hemolytic transfusion reactions,FNHTR)有效,非那根对治疗FNHTR无效,地塞米松、非那根及扑尔敏等抗组胺药对过敏反应有效.结论 输血前用药预防输血反应的作用不明显;非那根等抗组胺药对治疗FNHTR无效.明确输血反应的种类并对症治疗,是处理输血反应的有效手段.

    作者:朱跃辉;周立红;王小平;李莹;邵延芹;钟阳青;冯莹 刊期: 2010年第02期

  • 新生隐球菌墨汁染色检查实验的改进

    目的 为消除生物安全隐患,让学生能安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验.方法 分别用10%甲醛或56℃水浴5 min对腹腔液、脑脊液中的新生隐球菌进行灭活处理,使其不再具有活性和致病性,镜下观察其形态的改变.结果 用10%甲醛处理过的新生隐球菌,其荚膜形态已不能观察,而经56℃水浴灭活的新生隐球菌,其荚膜形态没有发生变化.结论 新生隐球菌腹腔液或脑脊液采用56℃水浴5 min即可灭活而不影响其荚膜形态,为学生安全高效地完成新生隐球菌墨汁染色检查实验提供了条件.

    作者:梁昌盛;周红;罗海华;李美玉;梁天文 刊期: 2010年第02期

  • 甲型H1N1流感双重荧光PCR快速筛查方法的研究

    目的 优化一种甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法.方法 根据WHO推荐的甲型H1N1流感检测方案合成、标记引物和探针.通过改进反应条件与参数,优化了甲型H1N1流感的双重荧光PCR检测方法.结果 该方法敏感度高,特异性强,重复性好.应用该方法检测患者实际样品,结果与WHO推荐方法的检测结果一致;应用该法可在4 h内完成对样品中甲型H1N1流感的检验.结论 本研究优化的甲型H1N1流感的双重荧光PCR快速筛查方法可用于甲型H1N1流感的诊断.

    作者:王佃鹏;朱玉兰;李政良;刘胜牙;董瑞玲;黄宗炎;高朝贤;胡孔新 刊期: 2010年第02期

  • 清新县流动人口血吸虫病监测效果分析

    目的 通过对清新县流动人口监测结果的分析,探讨优化输入性血吸虫病人的防控措施.方法 对清新县流动人口血吸虫病的监测结果进行统计分析.结果 2005年清新县对流动人口67045人进行调查,显示有66%的流动人口居住在该县的城乡结合部或农村地区,来自疫区的人群约占流动人口的12%.2001-2008年,采用常规主动监测1052人、选择性主动监测1456人,血吸虫血清抗体阳性率分别为2.57%(27/1052)和4.81%(70/1456),两者差异有统计学意义(X2=8.25,P<0.01);发现输入性临床诊断慢性病人分别为0例和13例(0.89%),病原确诊病人分别为0例和2例(0.14%).显示选择性主动监测对查获输入性病例的效果明显优于常规主动监测.结论 来自疫区的流动人口中存在一定数量的血吸虫病患者,为做好输入性传染源的防控工作,现阶段要重点开展选择性主动监测,同时加强被动监测,并通过选择灵敏度较高的检查方法以提高监测效果.

    作者:周志珊;黄德厚;李初升;许广才 刊期: 2010年第02期

  • 葛根提取物对颈神经根性痛大鼠体感诱发电位的影响

    目的 探讨以葛根素为主要有效成分的葛根提取物对颈神经根性痛大鼠体感诱发电位的影响.方法 首先对葛根中葛根素的提取方法进行优化,确定佳提取工艺.然后通过椎管插线法建立神经根型颈椎病根性疼痛模型.将符合入组条件的大鼠随机分成5组:颈复康组,葛根提取物高、中、低剂量组,生理盐水组,每组8只.治疗前和治疗10 d后,分别对大鼠进行疼痛行为及步态评分、正中神经体感诱发电位测量.结果 葛根提取物各剂量组及颈复康组均能显著改善模型大鼠根性疼痛的相关行为,且能显著改善体感诱发电位潜伏期、波幅和传导速度,与生理盐水组相比差异有显著性意义(P<0.05).其中葛根提取物高剂量组(葛根素含量266.1 mg·kg-1·d-1)疗效佳,中剂量组(葛根素含量133.0 mg·kg-1·d-1)与高剂量组之间差异无统计学意义.结论 以葛根素为主要有效成分的葛根提取物能明显减轻颈神经根根性疼痛,并提示存在量效关系.

    作者:于林;陈宝田;谢炜;赵伟宏 刊期: 2010年第02期

  • 疟疾的防控现状及进展

    近年来,随着流行病学监测和实验室检测技术的进步、防蚊灭蚊措施的改进及抗疟疾药物的研究的进展,人类的疟疾防控工作也不断进步,但同时也不断面临着新的挑战.本文综述了我国及全球疟疾的流行现状、检测技术及防控措施的现状.

    作者:车河龙;林栋 刊期: 2010年第02期

  • Septin 8红色荧光蛋白融合载体的构建及表达

    目的 构建在哺乳动物细胞中表达的septin 8红色荧光蛋白融合表达载体(pmCherry-C2/septin 8),并观察其在细胞内的表达和定位情况.方法 采用PCR的方法从人脑胶质细胞瘤cDNA文库中扩增获得septin 8基因编码区序列,将其克隆至红色荧光蛋白载体pmCherry-C2上,重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后转染NIH3T3细胞,并利用Western blotting和细胞免疫化学技术分析重组蛋白在细胞内的表达和定位.结果 重组pmCherry-C2/septin 8融合蛋白在NIH3T3细胞中得到高量表达且主要分布于细胞浆.结论 成功构建了pmCherry-C2/septin 8融合表达载体,该载体能在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步研究septin 8细胞内生物学功能打下了良好的基础.

    作者:王丹;梅柱中;刘爱华;明小燕;王达安;王旭;姜勇 刊期: 2010年第02期

  • 1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达

    目的 构建1.3倍乙型肝炎病毒(HBV)全基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 以质粒pMD18T-HBV上的HBV DNA序列为模板,构建1.3倍HBV全基因序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),用酶切、PCR及测序鉴定,并把该载体转染Bewo细胞,以Western免疫印迹、微粒子酶免疫分析法(MEIA)和荧光定量PCR法分别检测胞内和上清中HBsAg、HBeAg蛋白的表达及HBV DNA水平.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建1.3倍HBV全基因表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达和分泌HBsAg与HBeAg,并可检测到高水平的HBV DNA.结论 成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBV1.3,为研究胞内HBV宫内感染奠定了基础.

    作者:资捷;王前;郑磊;熊石龙;蔡贞 刊期: 2010年第02期

  • 血培养常见菌株的分布及金黄色葡萄球菌耐药性的分析

    目的 调查同济医院2006年1月至2008年12月血培养中常见非重复分离菌株的构成;分析金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 采用WHONET5.4软件分析连续3年血培养中的非重复分离菌株的分布;采用K-B纸片法测定金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的敏感性.结果 2006年1月至2008年12月共分离细菌1336株,其中革兰阳性球菌占58.5%(781/1336)、革兰阴性杆菌占37.2%(497/1336)、真菌占4.27%(57/1336).分离的前10位菌株依次为凝周酶阴性葡萄球菌(CNS,40.42%)、大肠埃希菌(13.47%)、肠球菌属(5.54%)、克雷伯菌属(4.94%)、金黄色葡萄球菌(4.34%)、草绿链球菌(4.34%)、真菌(4.27%)、沙门菌属(3.59%)、铜绿假单胞菌(3.29%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3.14%).金黄色葡萄球菌共58株,其中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)占44.8%(26/58).MRSA对头孢菌素类、氨苄西林/舒巴坦、红霉素、克林霉索、复方新诺明、庆大霉素和左氧氟沙星、磷霉素、利福平耐药率明显高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA),且差异具有统计学意义(P<0.001).未发现对万古霉素和替考拉宁不敏感的菌株.结论 本院血培养分离株中,凝同酶阴性葡萄球菌仍占据第一位.金黄色葡萄球菌占分离菌株第五位,其中MRSA检出率较高,且耐药性严重.MRSA病区的分布及耐药谱分析提示可能存在MRSA的克隆传播.

    作者:石祖亮;简翠 刊期: 2010年第02期

  • 高血压脑出血伴天幕裂孔疝手术治疗的临床研究

    目的 探讨对比标准大骨瓣开颅(Standard large craniotomy)血肿清除去大骨瓣减压并天幕裂孔疝复位术与常规大骨瓣开颅血肿清除去大骨瓣减压术对高血压脑出血伴天幕裂孔疝的治疗效果.方法 66例高血压脑出血伴天幕裂孔疝患者(格拉斯哥昏迷评分GCS≤8分)随机分成研究组(标准大骨瓣开颅)和对照组(常规大骨瓣开颅),术后记录1、3、7 d腰穿置管监测颅内压(intracranial pressure ICP)值、脑脊液细胞数、头颅CT检查并测量脑水肿范围和中线结构移位、TCD(transcranial doppler system)监测脑血管痉挛等指标,根据主要并发症比较两组疗效.结果 术后3 d研究组较对照组的颅内压、脑脊液细胞数、脑水肿范围和中线结构移位等指标改善有显著性差异(P<0.01).术后7 d研究组的上述各项指标接近正常.研究组并发症和死亡率明显少于对照组.结论 用标准大骨瓣开颅血肿清除去大骨瓣减压并天幕裂孔疝复位术治疗高血压脑出血伴天幕裂孔疝能减少并发症,降低死亡率,是手术治疗高血压脑出血伴天幕裂孔疝的有效方法.

    作者:向进;郭伟;吕文;王莉莉;陈东;赵永阳 刊期: 2010年第02期

  • 日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

    目的 构建日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,分析该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达情况.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST和Sj32抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Sj26GST和Sj32,得到Sj26GST-Sj32融合基因,克隆至原核表达载体pET32α(+),构建重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 基因拼接法扩增出约1991 bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入pET32a(+)中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量约82000 Mr的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的22%;Westem-blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.

    作者:李文桂;肖邦忠;罗兴建;陈雅棠;吴成果 刊期: 2010年第02期

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