邱朝霞;孙远;张先杰;罗永彪;罗志敏;王海斌;陈宇祥
目的 对采自我国的6个弓形虫虫株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅱ亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)进行比较分析,并与RH株的相应序列进行比较,研究弓形虫线粒体cox1基因与弓形虫的种群遗传关系.方法 应用聚合酶链反应(PCR)扩增弓形虫不同虫株的pcox1,并进行序列分析比较.结果 每个虫株都获得599 bp的pcox1序列,比较分析表明,弓形虫不同虫株的pcox1序列之间没有差异.结论 弓形虫pcox1序列不能作为种群遗传变异研究的标记,也与弓形虫毒力无关.研究结果为进一步研究弓形虫的群体遗传结构奠定了一定的基础.
作者:周东辉;钟柳艳;张翰;林瑞庆;宋慧群;朱兴全 刊期: 2008年第04期
目的 制备抗HSPC238的单克隆抗体,为HSPC238的功能研究奠定基础.方法 以纯化的重组蛋白HSPC238为抗原,免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备HSPC238单克隆抗体,并用问接ELISA法和Westem-blot法对单克隆抗体的特性进行鉴定.结果 成功建立两株稳定分泌抗HSPC238的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为E001和E002.ELISA检测抗HSPC238单克隆抗体的腹水效价为1:12800和1:25600.两株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为Ig异G1.通过Western-blot实验证实,两株单克隆抗体均能特异性结合真核细胞内源性HSPC238蛋白.结论 成功制备了两株效价高、特异性好的抗HSPC238单克隆抗体,制备的抗HSPC238单克隆抗体可用于HSPC238蛋白的鉴定,为HSPC238蛋白的生物学功能研究奠定了基础.
作者:黄湘;王穗海;潘华政;赵玉梅;牟霞;李明 刊期: 2008年第04期
目的 为获得生菜高频率的离体再生体系.方法 采用正交试验设计,探讨不同生菜品种、不同消毒时间对培养生菜无菌苗的影响,并研究不同浓度的植物生长调节剂、AgNO3 和不同外植体切段对生菜外植体芽分化及生根成苗的影响.应用回归分析法对试验结果进行分析.结果 美国大速生品种用70%乙醇浸泡60 s,再用2%次氯酸钠处理15 min,发芽率达到80%,无菌苗生长好;生菜离体培养再生芽的优分化条件组合为Ms(murashige and skoog's medium)附加BA(6-苄基腺嘌呤,6-benzylaminopurine)0.2 mg/L,NAA(萘乙酸,α-naphthaleneacetic acid)0.1 ms/L,外植体为2~3 d的子叶;生菜再生芽在含低浓度的生长素[NAA浓度为0.05 mg/L,或LAA(吲哚乙酸,indole-3-acetic acid)浓度为0.5 mg/L]的1/2 MS培养基中生根情况较好.结论 优化的,生菜离体再生体系具有很好的重复性,可用于遗传转化获得保健生菜的研究.
作者:朱春燕;雷建军;周浩;吴敏;陈清;陈燕珍;杨素华;俞守义 刊期: 2008年第04期
目的 构建轮状病毒VP7的重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达.方法 克隆编码轮状病毒VP7的基因.并在原核表达系统中表达了带有6 xHis标签的融合蛋白.结果 经双酶切鉴定和基因测序证明成功重组了轮状病毒VP7基因的pQE-30重组质粒;蛋白质PAGE电泳表明,获得了分子量约为48000 Mr的蛋白质.结论 本研究获得了重组的轮状病毒VP7蛋白.
作者:周转;李军涛 刊期: 2008年第04期
目的 探讨玉屏风散对荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子产生的影响.方法 采用体外培养S180肉瘤细胞,接种C57BL/6纯系小鼠,建立荷瘤小鼠模型,设正常对照、荷瘤对照及玉屏风散给药组,检测各组脾脏T淋巴细胞增殖能力及Th1(IL-2、IFN-γ)和Th2(IL-4、IL-10)细胞因子产生水平.结果 荷瘤组T细胞增殖能力明显下降,Th2型细胞因子IL-10的产生明显增加,与正常对照组比较均有统计学意义(P<0.01),而IL-4的含量略有增加,但无统计学意义.Th1型细胞因子IL-2及IFN-γ的产生明显减少,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.01,P<0.05).玉屏风散给药对T细胞增殖能力及细胞因子的产生有较为明显的调节作用,与荷瘤组比较T细胞增殖能力及IL-2、IFN-γ的产生明显增加(P<0.01),Th2型细胞因子IL-10的血清含量下降(P<0.01),IL-4的含量略有下降,但与荷瘤对照组比较无统计学意义.结论 玉屏风散可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能,促进荷瘤鼠Th1型细胞因子的产生,有效纠正荷瘤导致Th1/Th2的失衡,增强机体的抗肿瘤免疫功能.
作者:张红军;唐小云;鞠宝玲;宋宝辉 刊期: 2008年第04期
目的 评价白纹伊蚊诱蚊诱卵器现场应用效果.方法 在地下停车场布放诱蚊诱卵器,7d后收回,连续3次.结果 每杯诱蚊数在0~8只之间.90.80%的诱蚊诱卵器进蚊数不超过3只;所有布放的诱蚊诱卵器均没有蚊虫产卵;诱捕的蚊虫以白纹伊蚊为主,占有率为80.17%.其中雌性伊蚊47.42%,雄性伊蚊52.58%;3次试验的平均诱蚊指数为63.22%,平均诱蚊密度指数为(1.98±1.24);布放地点的光照强度和距离下水道的远近对诱蚊结果没有显著影响.结论 诱蚊诱卵器对白纹伊蚊具有较好的诱捕效果,适合用于登革热的常规监测,但在不同环境条件下的应用还需进一步研究.
作者:于德宪;任旭琦;周文;廖玉学;陈清;俞守义 刊期: 2008年第04期
临床免疫学和免疫检验是重要的医学检验基础课程,建设临床免疫学和免疫检验教学资源网站,对提高检验医学教学的质量、提高学生学习的兴趣将有重要的作用.通过网络和多媒体的特性使实验教学更灵活、主动,从而提高实验教学的效率和质量.本文介绍临床免疫学和免疫检验教学资源网站的建设过程中的主要内容及其在实验教学中的应用.
作者:袁广卿;黄小荣;曹开源;徐霖;骆晓枫 刊期: 2008年第04期
目的 测定高血压病患者血清N端前体脑钠肽(NT-proBNP)的浓度变化,并探讨其临床意义.方法 采用电化学发光免疫试验(ECLIA)测定119例高血压患者及50名健康体检者的血清NT-proBNP浓度,超声心动图测定左室射血分数(LVEF)、左心室质量指数(LVMI)、舒张早期速度峰值(E)/晚期速度峰值(A)比值,比较不同NYHA、LVEF、LVMl分级下NT-proBNP水平的差异,并分析它们之间的关系;绘制受试者工作特性(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUCROC).结果 高血压病患者的血清LgNT-proBNP水平为3.40,明显高于正常对照组的1.42(P<0.001),不同NYHA、LVEF和LVMI分组下的血清NT-proBNP浓度差异均有统计学意义(P<0.001).NT-proBNP诊断高血压患者心衰的AUCROC为0.863.多变量相关分析表明,血清NT-proBNP浓度与NYHA分级、LVMI、体重指数(BMI)之间具有良好的正相关性(r=0.581,P<0.001,r=0.437,P<0.001及r=0.352,P<0.001),与LVEF分级、E/A比值之间呈良好的负相关关系(r=-0.361,P<0.001和r=-0.626,P<0.001).Iogistic回归分析显示.NT-proBNP是高血压病患者发生左心室肥厚(LVH)强的预测因子(HR=3.392,P<0.01),并与患者的临床治疗结局密切相关.结论 高血压病患者血清NT-pmBNP水平随着心力衰竭程度的增加而升高,可用来评价患者的心功能状况,且与临床预后关系密切.
作者:杨春莉;裘宇容;周芳;冯平峰;陈宇 刊期: 2008年第04期
目的 比较中晚期食管癌的单纯光动力治疗与光动力+化疗联合治疗的短期疗效,探讨中晚期食管癌光动力+化疗的治疗模式的优势.方法 回顾性分析我院自2002年至2005年期间光动力治疗及光动力+化疗治疗的食管癌患者60例(Ⅲ~Ⅳ期),其中单纯光动力治疗27例,光动力+化疗治疗33例.光动力治疗使用光敏剂Photofrin 2 mg/kg,48h后内镜引导下使用波长为630 nm的激光照射,综合治疗组化疗方案为5-FU+DDP,动力治疗后1周开始化疗,共化疗4周期.结果 60例病人随访时间全部满2年,综合治疗组和单纯光动力治疗组症状缓解率分别为85.2%、93.9%,内镜评价有效率分别为85.2%、90.9%,无明显差异;2年生存率分别为54.5%、29.6%,综合治疗组中位生存期明显延长(Ⅲ期为22m、13m;Ⅳ期为7m、5m),差异有统计学意义(P=0.046).结论 光动力+化疗治疗中晚期食管癌优于单纯光动力治疗,短期疗效相当,2年生存期有优势.
作者:张晓娜;李黎波;罗荣城;罗宇玲;廖旺军;缪景霞;张志峰 刊期: 2008年第04期
目的 研究广州地区人巨细胞病毒(HCMV)临床低传代分离株UL143基因的多态性.方法 对3株经多重PCR鉴定的HCMV临床低传代分离株进行HCMV UL143基因全序列扩增,扩增产物克隆到pMD18-T载体上测序,并将其序列与GenBank中公布的其它临床分离株UL143基因一起进行分析.结果 D3株UL143基因因碱基缺失形成多处终止密码无法产生有功能的蛋白:Toledo株UL143基因开放读码框由279个核苷酸组成,编码蛋白由92个氨基酸残基组成;其它临床分离株UL143基因开放读码框均由252个核苷酸组成,DNA序列比较保守,变异均为碱基替换,编码蛋白由83个氨基酸残基组成,氨基酸序列也很保守,不同临床分离株氨基酸变异率为1.2%~2.4%;HCMV UL143蛋白翻译后修饰位点在除Toledo株之外的所有分离株中均高度保守,没有缺失或新增;不同临床分离株UL143蛋白二级结构有所不同;除Toledo株外,其余分离株UL143蛋白的等电点均为8.75.结论 临床低传代分离株HCMV UL143基因DNA及其编码产物的氨基酸序列极为保守,但仍存在一定多态性.
作者:王波;李月琴;叶宁;胡兢晶;苏海浩;何震宇;田传军;张纯青;周天鸿 刊期: 2008年第04期
目的 了解广东省河源市龙川县猫、犬、猪、鼠寄生虫感染情况,为人体寄生虫病防治工作提供科学依据.方法 采用生理盐水直接涂片法和清水自然沉淀集卵法,检查猫、犬、猪、鼠粪便,查找寄生虫虫卵.结果 调查猫、犬、猪、鼠粪便271份,检出寄生虫卵89份,寄生虫总感染率为32.84%.以猫、犬寄生虫感染率高.寄生虫感染度以猫粪中的曼氏迭宫绦虫高,平均每张玻片检出虫卵580个.检出寄生虫卵6种:钩虫卵、蛔虫卵、鞭虫卵、曼氏迭宫绦虫卵、长膜壳绦虫卵和姜片虫卵.猫、犬、猪、鼠各种寄生虫感染情况,以钩虫、蛔虫、鞭虫和曼氏迭宫绦虫感染多见.猪感染寄生虫种类多.结论 广东省河源市龙川县紫市镇猫、犬、猪、鼠寄生虫感染情况比较严重,以猫、犬为甚.寄生虫感染种类较多,提示当地人群也可能有同类寄生虫感染,应引起当地政府和卫生防疫部门的高度重视.
作者:卢春晓;杨丽容;尹丽君;罗燕坤;汤凌佳;李盛;沈浩贤;李小敏;何芳;马长玲;陈代雄;陈新宇 刊期: 2008年第04期
目的 探讨早期大黄联合应用乌司他丁治疗重症急性胰腺炎患者的疗效及其对血清中细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 将来自本院住院的患者(57例)分成标准的常规治疗组(18例)、乌司他丁治疗组(19例)及乌司他丁+大黄治疗组(20例),将本院门诊体检的健康者(16例)作为空白对照.采用放射免疫学法测定其外周血清中IL-6、IL-8水平,并评价各治疗组的病死率、治疗有效率、腹痛腹胀缓解时间和平均住院时间.结果 重症急性胰腺炎早期上述细胞因子在患者血清中水平明显升高,经治疗5d后.存活者各组的上述细胞因子水平下降,前后比较差异有统计学意义(P<0.01).大黄联用乌司他丁治疗后存活者的腹痛腹胀缓解时间、平均住院时间较其它两组缩短,治疗有效率增高(P<0.05),但3种治疗方法的病死率差异无统计学意义(P>0.05);机体细胞因子IL-6、IL-8水平迅速下降,较常规治疗及乌司他丁治疗组下降水平更明显,结果相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 早期大黄联用乌司他丁治疗重症急性胰腺炎患者,有利于提高治疗效果.
作者:郑通标;黄冠珠;彭海峰;戴璟瑜;唐滔 刊期: 2008年第04期
目的 进一步研究HBV基因型及病毒变异与慢性肝病进展的关系.方法 用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)以及部分PCR产物测序的方法对401例慢性HBV感染者.包括112例HCC患者(HCC组),129例无症状携带者(ASC组),70例肝硬化患者(LC组)和90例慢性肝炎患者(CH组)进行HBV基因分型以及BCP和PC变异检测.结果 401例慢性HBV感染者中181例发生B基因型感染,220例发生C型感染.HCC组中C型分布高于其他3个疾病组;C基因型感染者BCP变异多于B基因型;B基因型感染者PC变异多于C基因型;同时BCP变异发生率随着病程进展而递增:在ASC组、CH组、LC组和HCC组里的BCP变异阳性率分别为22.4%、35.0%、50.0%、74.1%.C1与C2亚型相比,C1有较高BCP变异阳性率,而C2有较高PC变异发生率.结论 BCP变异与肝病进程存在依从关系,因此BCP变异的检测对慢性HBV感染的疾病进展和临床结局的评估有重要意义.
作者:ZHOU Bin;周彬;黄月华;单光华;侯金林;王战会;温淑娟 刊期: 2008年第04期
自从20世纪40年代开始用化学药物治疗麻风病以来,各种药物作用和耐药菌的发生、监测等研究一直是人们非常关注的焦点.随着分子生物学研究的发展,在麻风菌耐药的分子机理的研究上又有新的突破,为采用更简便的分子生物学技术检测耐药菌奠定了基础.本文就麻风病的药物治疗和麻风菌耐药的发生和研究进展做一简要综述.
作者:温艳 刊期: 2008年第04期
目的 探讨经尿道输尿管镜下行腔内会师术及术后留置硅胶尿管在治疗尿道球部损伤中的临床意义.方法 回顾分析2004年1月至2006年9月本院的20例球部尿道损伤患者,采用局麻或腰麻下行输尿管镜腔内会师术及术中、术后放置硅胶尿管2~3周.结果 20例中16例经尿道输尿管镜下会师成功,4例会师失败后改行开放性尿道吻合术,留置硅胶尿管,无1例并发局部感染,拔管后排尿通畅.随访3~24月,其中1例开放手术者拔管1周后尿流变细,予行5次尿道扩张后维持正常排尿,1例开放手术者并发阴茎勃起功能障碍.结论 输尿管镜下尿道会师术具有手术时间短、操作方便、创伤小的特点,尤其适合于球部尿道部分断裂的患者;而采用硅胶尿管,则更易于插管及可以减少尿路感染及局部瘢痕增生,降低尿道狭窄的发生几率.
作者:胡祎民;倪梁朝;吴雄辉;李贤新;陈泽波;周锦棠;刘运初 刊期: 2008年第04期
目的 探讨电离辐射影响人成纤维细胞基因表达的转录调控机制,并构建基因与相应转录因子的调控网络.方法 先对前期研究已经获得的差异表达基因进行功能注释,选择结合功能类基因(数量多)进人研究:再用MaxLAPS,TFME和SCOPE 3种软件预测这些基因的转录因子和转录因子结合位点;利用Bibliosphere软件构建转录因子与基因的转录调控网络.结果 获得25条Gene Symbols,基因本体功能注释集中于结合功能(共19条),2种程序预测得到14个相同的转录因子,得分高的6个转录因子结合位点对应的转录因子与预测的基本一致.按照高水平标准构建的转录调控网络,显示CASPASE-3位于网络的核心.结论 电离辐射很可能经转录因子TP53介导CASPASE-3激活而致人成纤维细胞凋亡.
作者:廖之君;马文丽;梁爽;陈霞;商涛;董云巧;郑文岭 刊期: 2008年第04期
目的 表达Ⅱ型副流感病毒核衣壳蛋白,为制备抗体作前期工作.方法 从分离培养的Ⅱ型副流感病毒标本中RT-PCR扩增出核衣壳蛋白基因,Nde Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切PCR产物,定向连接到原核表达载体pQE2中,得到重组表达质粒pQEHpI2NP,重组表达质粒进行DNA测序鉴定,转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的 蛋白的表达.利用Ni-NTA agarose纯化带6个组氨酸标记的重组蛋白,重组蛋白免疫小鼠,制备抗Hpl2NP多抗,Hep-2细胞培养的Ⅱ型副流感病毒制备可溶性抗原.Western-blot分析.结果 构建了表达重组质粒pQE2_Hpl2NP,测序鉴定了克隆序列的准确性,在大肠杆菌中成功地表达并纯化得到重组核衣壳蛋白.经Western-blot证实,重组蛋白免疫的小鼠血清与细胞培养的Ⅱ型副流感病毒核衣壳蛋白有特异性反应.结论 成功表达了Ⅱ型副流感病毒核衣壳蛋白,并制备了抗Hpl2NP多抗.
作者:林斌;田新贵;唐启慧;王长兵;游爱萍;周荣 刊期: 2008年第04期
目的 分析重庆市1992-2006年霍乱弧菌菌株的相关性.方法 94株霍乱弧菌基因组DNA经NotⅠ酶切,通过脉冲场凝胶电泳获得电泳图谱,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析.结果 检测94株霍乱弧菌毒力基因,ctxA阳性92株,其中有2株水产品市场霍乱监测中分离的菌株ctxA为阴性:tcpA阳性91株,其中有2株水产品市场霍乱监测中发现菌株,1株从病人分离的0139群霍乱弧菌tcpA为阴性.94株霍乱弧菌被分为44种脉冲场凝胶电泳图谱,聚类分析将大部分菌株分为三群.从甲鱼分离的0139群霍乱弧菌与同期流行的0139群霍乱弧菌优势PFGE型别一致,并且也为产毒株.结论 重庆市霍乱弧菌存在紧密相关的流行克隆群.甲鱼中分离的0139群霍乱弧菌与霍乱疫情分离菌株之间高度同源,被污染的甲鱼可能是食源性霍乱暴发的主要传染来源之一,海、水产品的监测是霍乱防控的重点.霍乱弧菌的脉冲场凝胶电泳分析,有助于霍乱的主动监测和传染来源的追踪.
作者:吴国辉;ZHAO Bo;赵波;王豫林;肖邦忠;熊鸿燕;王文斟;段刚 刊期: 2008年第04期
目的 了解基层防保所公共卫生事件应急调查人力资源状况,为构建和评价基层防保组织应急调查能力提供依据.方法 用问卷对镇(区)防保所应急调查人员(下称基层应急人员)进行调查,因事外出的调查对象事后用电话完成调查:调查资料双录入电脑,用Excel软件进行统计分析.结果 ①该市本地人口和全人口每万人拥有基层应急人员分别为0.91人和0.45人.②应急人员以男性和40岁以下者为主,各占80.77%0③学历以本科为主,占58.46%;所学专业以预防医学/公共卫生为主,占71.54%;职称以初级为主,占63.08%.④大学英语四级以上者占39.235%,能使用Word、Excel、Powerpoint和其它统计软件者分别占89.23%、86.15%、84.61%和63.08%;能上网查找专业资料者占92.31%.⑤参加过现场调查、3d以上培训、撰写计划、撰写总结、撰写预案、媒体应对、学术会议、发表论文和科研项目的 人数比例分别为79.23%、72.31%、61.54%、61.54%、47.69%、35.38%、30.77%、16.15%和13.85%.⑥获得专业知识的主要途径是实践;专业知识主要来源是专业杂志、专业网络、专业书籍;认为不能满足工作需要的知识是英语,希望提高的知识是专业技能,想的培训方式是小于7d的短期培训.结论 该市基层应急人员基本素质和部分业务素质较高,但专业技能、媒体应对、科研能力和英语能力等业务和学术素质存在不足,应采取实战演练和短期培训的方式提高该方面能力.
作者:李桂娇;罗小铭;梁惠贤;谭天;温丽娴;苏子行 刊期: 2008年第04期
目的 构建缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431真核表达载体.方法 以pGM-T/HBx-d382和pGM-T/HBx-d431质粒为模板,PCR扩增含Kpn Ⅰ和Apa Ⅰ酶切位点的HBx基因片段.双酶切后再与载体pcDNA3载体重组连接.重组质粒转化到大肠杆菌DH5a后,经酶切鉴定和DNA序列测定,筛选出重组pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体.结果 成功构建了重组pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体,经DNA序列测定与比对,重组前后HBx基因片段序列一致.结论 pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体构建成功,可为HBx基因缺失型突变体,特别是HBx-d382基因的生物学功能研究提供基因材料.
作者:朱平安;谭德明;陈莉;彭忠田;宋琳 刊期: 2008年第04期