学术投稿

武汉社区腹泻病人粪便中致病菌的构成与耐药性研究

陈晶;杨春莉;裘宇蓉;张少芬;童晓文;游升荣

关键词:腹泻, 构成, 抗生素, 耐药性, 重复序列PCR
摘要:目的 了解夏秋季武汉社区引起腹泻病原菌的流行性及耐药状况.方法 收集2004年7月1日至10月31日武汉社区4所大型医院4 536份门诊腹泻病人粪便标本进行鉴定及药敏试验;REP-PCR对主要致病菌进行基因分型.结果 4 536份粪便标本中,分离出非伤寒沙门菌64株(1.4%),志贺菌29株(0.6%),致病性大肠杆菌33株(0.7%).其中主要致病菌是鼠伤寒沙门菌33株(52%),D群志贺菌16株(55%).挑选13种抗菌药物进行体外敏感试验,并将分离的致病菌对这13种抗生素的耐药率、敏感率、中介率进行比较,其中非伤寒沙门菌对喹诺酮类的耐药率较其他两种要高,但对第三代头孢的敏感性较强.分离的3种致病菌在第三代头孢抗生素的作用中对头孢他啶的敏感性强.32株鼠伤寒沙门菌基因分型为9种,16株D群志贺菌基因分型为7种.结论 武汉社区内感染性腹泻的致病菌主要以非伤寒沙门菌、致病性大肠杆菌和志贺菌为主,其中非伤寒沙门菌占了51%,基因分型提示有社区流行趋势,而且这些致病菌对肠道杆菌常用抗生素的耐药性较为严重.本次调查结果对该社区临床用药起到一定的提示作用.
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  • 肝素对两种血氨测定方法干扰的研究

    目的 研究不同浓度肝素对干化学法和酶动力学法测定血氨的影响.方法 参照美国临床实验室标准委员会(NCCLS)EP7-P文件,将不同浓度肝素分别加入低、中、高血氨浓度的样本中,用干化学法和酶动力学法测定各样本中血氨的浓度,与未加肝素的基础样本比较,观察肝素对两种方法测定血氨的影响,确定采用肝素抗凝样本的佳浓度.结果 对于干化学法测定血氨,低、中血氨浓度时要求肝素浓度≤40 U/ml,高血氨浓度时要求肝素浓度≤60 U/ml,对血氨测定影响较小.对于酶动力学测定血氨,低浓度样本要求肝素浓度≤40 U/ml,中、高浓度样本,肝素浓度≤60 U/ml时,对血氨测定影响较小.结论 采用肝素抗凝血样本测定血氨浓度,肝素浓度需控制在10-40 U/ml以内为宜.

    作者:高月亭;刘汉欣;范婷婷;陈涛;肖洪广;刘忠民 刊期: 2007年第04期

  • 深圳市肉类食品空肠弯曲菌的污染情况调查

    目的 了解我市常见肉类食品中空肠弯曲菌的污染状况,为控制和预防空肠弯曲菌食物中毒提供科学依据.方法 在食品污监测点随机抽检肉类食品样品117份,用传统国标法和荧光PCR法进行检测.结果 从117份肉类食品中检出4份空肠弯曲菌,阳性检出率为3.4%.结论 深圳市肉类食品中存在空肠弯曲菌的污染,如果加工、销售不当,及监督不严,会对群众健康构成潜在威胁.

    作者:吴平芳;贺连华;刘涛;兰全学;陈妙玲;王瑞端 刊期: 2007年第04期

  • 8例妊娠期急性脂肪肝的诊治分析

    目的 对妊娠期急性脂肪肝进行早期诊断和正确治疗,以降低孕产妇及围产儿的死亡率.方法 对1995-2005年在我院产科经治的8例妊娠期急性脂肪肝患者的资料进行回顾性分析.结果 8例患者中,单胎6例,双胎2例.3例孕产妇死亡,均为非及时终止妊娠者.其中阴道分娩1例,剖宫产2例,病死率为37.50%;围产儿死亡4例,死亡率为40.00%.分娩后的临床表现及化验结果均较产前明显恶化,以3 d内严重,但与分娩方式无关.结论 早期诊断、及时终止妊娠及多学科的综合治疗,可大大改善妊娠期急性脂肪肝的母儿预后.

    作者:宋鹤兰 刊期: 2007年第04期

  • 乙型肝炎病毒核酸定量检测中不确定度的研究

    目的 研究应用实时荧光定量PCR(Fluorescence Quantitative PCR, FQ-PCR)开展乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)核酸定量检测中的测量不确定度.方法 通过实时荧光定量PCR进行乙型肝炎病毒核酸定量检测的实验分组设计与数据处理分析,计算分析该检测方法不同来源的测量不确定度值.结果 对3组不同水平浓度值样本来源的数据采用两种方法进行统计分析,QDNA的组标准差远远大于LGQDNA的标准差,初始浓度数值经过对数转化后离散程度降低,统计平均值也发生了偏离.LGQDNA为3.465、4.927和6.018的样本.其浓缩过程来源的相对不确定度分别为0.020、0.019和0.009;LGQ无偏估计在3.706、6.750的样本的核酸提取来源相对不确定度分别为0.016和0.009;数据分析来源的LGQ不确定度为0.000~0.008;热循环仪来源的LGQ不确定度为0.002~0.008.结论 使用核酸浓度值QDNA与使用其对数值LGQDNA进行数据统计分析的结果存在差异;标本制备过程中的浓缩和DNA提取是实时荧光定量PCR进行HBV核酸定量检测时测量不确定度的重要来源,标本制备环节是影响该项检测的关键因素,包括试剂、方法和操作者的准确操作能力.

    作者:余南;甘明;詹希美;陈小坚 刊期: 2007年第04期

  • 阴道毛滴虫两个Sir2同源基因的克隆和功能

    目的 探讨寄生性原虫阴道毛滴虫细胞生长和衰老的相关基因.方法 从阴道毛滴虫的cDNA表达文库中分离出两个与酵母沉寂信息调节因子 (Sir2) 有较高同源性的cDNA克隆,分别命名为TvSir2和TvSir2-like,它们的编码框分别长915 bp和1116 bp.结果 序列分析显示这两个cDNA克隆与酵母Sir2同源性很高,其氨基酸序列中含有Sk2p及其同源蛋白三个特征性保守结构域.分别从这两株cDNA克隆中扩增出表达片段植入表达载体pET-41a,转化宿主菌E.coli BL21并用IPTG(isoprupylthio-β-D-galactoside)诱导表达到大量融合蛋白.用亲和层析法纯化的融合蛋白分别免疫豚鼠,获得的抗血清用Western-blot法识别到滴虫虫体全蛋白中大小为34 000 Mr和42 000 Mr的条带.免疫荧光法检测TvSir2和TvSir2-like蛋白位于细胞核外的内质网和高尔基复合体区域.结论 TvSir2和TvSir2-like克隆是酵酶Sir2的同源基因,为TvSir2和TvSir2-like在模式生物阴道毛滴虫的功能研究奠定了基础.

    作者:史咏梅;傅玉才;许铭言;徐晓园;许锦阶;邓致刚 刊期: 2007年第04期

  • LEEP治疗宫颈癌前病变的临床观察和体会

    目的 探讨宫颈环形高频电波刀(LEEP)在诊治宫颈上皮内瘤变(CIN)中的作用.方法 在宫颈门诊中形成检查、治疗、随访一整套体系,选择87例在该门诊治疗的CIN患者作为研究对象,采用LEEP行宫颈锥切术,比较术前宫颈活检与术后病理结果.结果 术前、术后病理结果一致者81例(93.1%),术后病理级别上升者4例(4.6%),病理级别下降者2例(2.3%).87例中85例病理检查呈示基底、切缘未见CIN病灶,病灶切除干净率占97.7%.结论 LEEP是诊断及治疗CIN安全且有效的方法,适合在宫颈门诊中作为治疗方法使用.

    作者:肖翠红;杨小波;凌秀兰;梁菊珍;蓝美霞 刊期: 2007年第04期

  • 1996-2005年广州市水厂原水与出厂水水质卫生状况分析

    目的 探讨广州市自来水水厂原水和出厂水的卫生状况,为保障广大市民饮用水卫生安全提供依据.方法 对广州市1996-2005年自来水水厂原水和出厂水监测资料进行统计,按《地表水环境质量标准》和《生活饮用水卫生规范》分析评价.结果 未发现水源水逐步恶化的趋势,珠江水系广州河段的锰、耗氧量、亚硝酸盐氮污染比珠江水系的北江段和东江段重;出厂水的合格率在62.07%~88.89%之间.结论 需进一步改善珠江水质,各级政府主管部门应重视和加强珠江水源水的保护和治理工作;建设主管部门应加强对水厂建设的投入和制水工艺的改进,提高水厂出厂水的卫生质量;卫生部门应完善新建水厂的卫生学评价,加强饮用水卫生监督监测.

    作者:钟嶷;黄汝明;刘世强;傅雪松;杨轶戬;石同幸;孙兰 刊期: 2007年第04期

  • 幽门螺杆菌基因hp0231和hp0410的克隆表达及生物信息学分析

    目的 获取幽门螺杆菌hp0231和hp0410基因的序列,预测其编码蛋白HP0231和HP0410作为候选疫苗的可行性,在大肠杆菌表达系统中表达hp0231和hp0410.方法 提取幽门螺杆菌标准株NCTC11639的基因组DNA,按照GenBank中幽门螺杆菌标准株22695的序列设计引物PCR,扩增hp0231和hp0410基因,克隆入pMD18-T载体中测序,进行生物信息学分析.将hp0231和hp0410克隆入表达载体pGEX-4T-1中,诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定.结果 生物信息学分析表明HP0231和HP0410均为外膜蛋白,具良好的抗原性,并且与其他生物的同源性较低,其作为Hp疫苗不易产生交叉反应以及自身免疫性反应,构建的重组菌可高水平表达可溶性重组蛋白.结论 HP0231和HP0410是有良好应用前景的Hp候选疫苗.

    作者:胡平;罗军;张文炳;龙北国 刊期: 2007年第04期

  • 东莞市一工厂细菌性痢疾爆发的现场流行病学研究

    目的 了解一起工厂细菌性痢疾(菌痢)爆发的特点和流行原因,积累对爆发疫情调查处理的经验并为制定防治对策提供科学依据.方法 采用现场流行病学调查分析和实验室病原分离培养鉴定方法,并结合发病危险因素的病例进行对照研究.结果 2006年10月30日至11月4日,该厂发生细菌性痢疾70例,罹患率为1.00%,发病均为工厂民工,年龄16~42岁,病例呈散在分布,无明显宿舍及工种聚集性,临床表现以发热、腹泻、腹痛、粘液血便、里急后重为主.从病人粪便和肛拭标本中分离培养出15株福氏2b型志贺氏菌.病例对照研究食用凉拌粉丝的OR值为7.75,经采取隔离治疗病人、食品卫生管理等综合措施后,疫情迅速终止.结论 本次疫情为一起菌痢爆发,爆发原因初步排除水源和接触因素,凉拌粉丝为可疑食物.集体食堂卫生安全存在诸多薄弱环节,加强集体食堂的管理是遏止食物中毒和肠道传染病爆发的关键.

    作者:袁耀钦;钟新光;曾耀明;张泽武 刊期: 2007年第04期

  • 乙肝疫苗联合乙肝免疫球蛋白对阻断母婴垂直传播乙型肝炎病毒的临床分析

    目的 探讨孕妇产前用乙肝免疫球蛋白(HBIG)与乙型肝炎疫苗联合免疫阻断母婴传播的效果.方法 将504例HBsAg(+)孕妇分为A(预防组),B(对照组)两组.A组:246名HBsAg阳性孕妇孕晚期每月分别注射基因重组型乙肝疫苗10μg、HBIG 200 IU(200 IU/ml),新生儿出生后采股静脉血,同时在出生后24 h内注射HBIG 200 IU,然后在0、1、6月龄接种基因重组型乙肝疫苗,每次10μg.B组:258例产前未注射HBIG和基因重组型乙肝疫苗的HBsAg阳性孕妇,其所生新生儿在0、1、6(30 μg、30μg、30μg)月龄只用基因重组型乙肝疫苗免疫.A、B两组婴儿都分别在0、3、6、9、12、24月龄静脉采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV标志物,同时随访.结果 A组的宫内感染率为3.25%,B组为4.16%,差异无统计学意义(χ2=1.43,P>0.05).A组没有发生慢性HBV感染的婴儿,而B组中有7例婴儿发生慢性HBV感染,B组婴儿发生慢性HBV的感染率显著高于A组(χ2=4.41,P<0.05).结论 产前用HBIG和新生儿HBIG联合免疫可降低慢性HBV感染率,阻断宫内感染的慢性化,提高产程感染的阻断效果.

    作者:曾捷 刊期: 2007年第04期

  • 广州地区医院脓肿、病灶分泌物及创面感染病原菌群分布与耐药性特点

    目的 了解广州地区临床脓肿、病灶分泌物及创面感染分离病原菌群分布与耐药性特点.方法 耐药性监测网成员医院按《全国临床检验操作规程》要求分离临床送检的各种包括脓肿、病灶分泌物及创面的细菌培养标本.药物敏感试验采用纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET4软件.结果 2002-2004年间各种临床标本共分离感染病原菌20 087株.其中脓肿、病灶分泌物及创面等标本分离的病原菌2 659株,占13.2%.发生脓肿、分泌物及创面感染的患者主要是青壮年,门诊患者占20%.引起脓肿等感染病原菌以革兰阳性球菌为主,占50.5%.其中葡萄球菌的耐药性及耐甲氧西林(MRS)检出率低于其他标本类型分离的葡萄球菌;铜绿假单胞菌对数种抗生素的耐药率比2002全国资料低,差异有统计学意义;大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对所监测抗生素的耐药率则与2002全国资料较为接近.结论 不同的标本类型其分离株对抗生素耐药特性有所不同,广州地区引起脓肿、病灶及创面等感染的主要病原菌对抗生素的耐药性一般要比其他标本分离菌低.

    作者:魏衍超;何启勇;邹伟民;吴晓蔓;肖柯玲;王敏玲 刊期: 2007年第04期

  • 一起多种型别副溶血弧菌引起食物中毒的实验室检测

    目的 对一起可疑食物中毒的病原菌进行实验室检测.方法 依据GB/T 4789-2003(食品卫生微生物检验》进行肠道致病菌的检测,同时采用实时荧光定量PCR的方法,共同鉴定病原菌.结果 选取的6份样本中,有5份副溶血弧菌PCR结果为阳性,16份病人肛拭子中有11份分离出副溶血弧菌,生化反应呈三种模式,血清学分型亦有K6、K41和K56三种.结论 该起食物中毒是由多种型别副溶血弧菌引起.

    作者:侯炎昌;杨晓华;肖娜 刊期: 2007年第04期

  • 季节周期回归模型在肿瘤住院病人中的应用分析

    目的 了解1999-2004年庐江县某二甲医院肿瘤住院患者的基本构成,并预测2005-2007年该院肿瘤住院患者人数,为医院管理决策提供科学依据.方法 整理该院1999-2004年《医院疾病分类年报表》资料,进行统计描述和季节趋势预测.结果 1999-2004年该医院肿瘤患者住院人数占同期总住院人数的10.72%,预计2005-2007年肿瘤住院患者分别为1 216例、1 287例和1 359例,且有明显逐年增加趋势.结论 该院肿瘤患者住院人数在同期总住院人数中占有相当比重,且有逐年增加趋势.医院管理者应合理分配卫生资源.加强肿瘤科室的建设.

    作者:魏跃红;王鸣;许信红;潘冰莹 刊期: 2007年第04期

  • 抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体的构建及其对虫体的杀灭作用

    目的 构建抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体并测定表达产物对隐孢子虫的杀灭作用.方法 利用基因工程原理,以含抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素的菌株为模板,利用设计合成的一对引物扩增出ScFv-PE,利用pMAL-p2X载体构建重组毒素pMAL-ScFv-PE,并将其导人大肠杆菌中进行表达,产物进行SDS-PAGE和Weatern-blot,纯化后治疗感染隐孢子虫的小鼠.结果 重组质粒经酶切鉴定正确,IPTG诱导后可看到明显的条带.凝胶薄层扫描分析目的蛋白表达量占菌体蛋白总量的21%.纯化后的表达产物治疗感染隐孢子虫的小鼠治疗组比对照组肠滞留物中卵囊计数(P<0.05)与肠道平均累计感染积分明显减少(P<0.01).结论 利用原核表达载体成功构建了可溶性形式表达的pMAL-ScFv-PE重组质粒,重组毒素对隐孢子虫具有明显的杀灭作用.

    作者:刘晓峰;李淑红;张西臣;尹继刚;李建华;宫鹏涛;张国才 刊期: 2007年第04期

  • 肺炎克雷伯菌随机扩增多态性DNA的分子流行病学研究

    目的 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测肺炎克雷伯菌医院感染.方法 对临床分离的36株肺炎克雷伯菌进行RAPD基因分型,并通过指纹图谱比较与分析,确证医院感染爆发.结果 36株肺炎克雷伯菌共分得33型,肺炎克雷伯菌医院感染局部流行共1起.结论 RAPD可对肺炎克雷伯菌进行分子流行病学调查.

    作者:龙军;周韶松;彭永正;林裕锋 刊期: 2007年第04期

  • 广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原分析及其诊断价值的探讨

    目的 分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值.方法 广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解.与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体.结果 SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32 000 Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少.两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少.结论 广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32 000 Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原.

    作者:顾金保;刘敏;李华;吴焜;陈晓光 刊期: 2007年第04期

  • RACE:一种研究新基因的有效方法

    RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术是以PCR和RNA反转录为基础,通过部分已知基因序列(如EST)快速扩增cDNA的3'端或5'端未知序列区域,获得全长cDNA,研究新基因的一种有效方法.本文针对该项技术自身存在的优缺点,同时结合国内外的新研究改进方案,对该技术作一概述.

    作者:周维;黄翠琴;王寿昆;朱兴全 刊期: 2007年第04期

  • Genistein调节肝癌HepG2细胞Caspase3蛋白表达诱导凋亡的作用研究

    目的 探讨三磷酸肌醇(IP3)和Caspase3蛋白表达变化在genistein诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 以肝癌HepG2细胞培养72 h为对照组,实验各组以60 μmol/L的genistein作用于HepG2细胞不同时间后,应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量,Western blotting分析细胞Caspase3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 Genistein作用于肝癌HepG2细胞12、24、48、72 h,各时相IP3含量显著低于对照组[(12.0±1.4)pmol/106 cells、(7.5±0.8)pmol/106 cells、(5.6±0.5)pmol/106 cells、(4.3±0.6)pmol/106 cells vs (29.2±0.6)pmol/106 cells,P<0.01];24 h后Caspase3蛋白的RI显著高于对照组(2.7±0.2,7.4±0.5,7.4±0.5,30.7±1.6 vs 0.24±0.06,P<0.05);24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组[(2.7±0.2)%、(7.4±0.5)%、(20.5±2.0)%、(30.7±1.6)% vs (2.6±0.1)%,P<0.01].结论 Genistein能减少IP3生成,上调Caspase3蛋白表达,诱导肝癌细胞凋亡.

    作者:洪迅;张继红;郭中敏;刘培庆 刊期: 2007年第04期

  • 德清县1951-2005年疟疾防治策略和效果分析

    目的 分析德清县55年来的疟疾防治成果,为制定疟疾防治策略提供依据.方法 总结和分析德清县疟疾流行趋势、疟疾防治策略和措施及其效果.结果 德清县疟疾发病率从五、六十年代的1000/10万以上逐步下降到1979年的10/10万以下,并持续保持低水平.目前,年均发病率为0.68/10万,患者以外地输人为主.结论 德清县在不同时期采取的疟疾防治措施,取得了显著效果.必须继续重视和加强疟疾防治工作,以防止疟疾的死灰复燃和输入性疟疾的发生.

    作者:宋建根;黄亦雄 刊期: 2007年第04期

  • 梅州市诺瓦克样病毒胃肠炎爆发疫情分析

    目的 分析梅州市群体性诺瓦克样病毒胃肠炎流行特征,为诺瓦克样病毒胃肠炎的预防和控制提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法.对2004-2006年梅州市群体性诺瓦克样病毒胃肠炎疫情进行分析.结果 2004-2006年梅州市共报告4起群体性诺瓦克样病毒胃肠炎,共发病382例,无死亡病例.疫情全部发生在学校,发病时间均在冬春季,症状以恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热为主,每起疫情均从部分患者粪便标本中检出诺瓦克样病毒抗原.结论 学校是诺瓦克样病毒爆发疫情的高发场所.预防诺瓦克样病毒疫情的关键是搞好学校的食品卫生和饮用水卫生工作.

    作者:林立新;杨翼龙 刊期: 2007年第04期

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