曾捷
目的 探讨寄生性原虫阴道毛滴虫细胞生长和衰老的相关基因.方法 从阴道毛滴虫的cDNA表达文库中分离出两个与酵母沉寂信息调节因子 (Sir2) 有较高同源性的cDNA克隆,分别命名为TvSir2和TvSir2-like,它们的编码框分别长915 bp和1116 bp.结果 序列分析显示这两个cDNA克隆与酵母Sir2同源性很高,其氨基酸序列中含有Sk2p及其同源蛋白三个特征性保守结构域.分别从这两株cDNA克隆中扩增出表达片段植入表达载体pET-41a,转化宿主菌E.coli BL21并用IPTG(isoprupylthio-β-D-galactoside)诱导表达到大量融合蛋白.用亲和层析法纯化的融合蛋白分别免疫豚鼠,获得的抗血清用Western-blot法识别到滴虫虫体全蛋白中大小为34 000 Mr和42 000 Mr的条带.免疫荧光法检测TvSir2和TvSir2-like蛋白位于细胞核外的内质网和高尔基复合体区域.结论 TvSir2和TvSir2-like克隆是酵酶Sir2的同源基因,为TvSir2和TvSir2-like在模式生物阴道毛滴虫的功能研究奠定了基础.
作者:史咏梅;傅玉才;许铭言;徐晓园;许锦阶;邓致刚 刊期: 2007年第04期
目的 了解夏秋季武汉社区引起腹泻病原菌的流行性及耐药状况.方法 收集2004年7月1日至10月31日武汉社区4所大型医院4 536份门诊腹泻病人粪便标本进行鉴定及药敏试验;REP-PCR对主要致病菌进行基因分型.结果 4 536份粪便标本中,分离出非伤寒沙门菌64株(1.4%),志贺菌29株(0.6%),致病性大肠杆菌33株(0.7%).其中主要致病菌是鼠伤寒沙门菌33株(52%),D群志贺菌16株(55%).挑选13种抗菌药物进行体外敏感试验,并将分离的致病菌对这13种抗生素的耐药率、敏感率、中介率进行比较,其中非伤寒沙门菌对喹诺酮类的耐药率较其他两种要高,但对第三代头孢的敏感性较强.分离的3种致病菌在第三代头孢抗生素的作用中对头孢他啶的敏感性强.32株鼠伤寒沙门菌基因分型为9种,16株D群志贺菌基因分型为7种.结论 武汉社区内感染性腹泻的致病菌主要以非伤寒沙门菌、致病性大肠杆菌和志贺菌为主,其中非伤寒沙门菌占了51%,基因分型提示有社区流行趋势,而且这些致病菌对肠道杆菌常用抗生素的耐药性较为严重.本次调查结果对该社区临床用药起到一定的提示作用.
作者:陈晶;杨春莉;裘宇蓉;张少芬;童晓文;游升荣 刊期: 2007年第04期
目的 从华支睾吸虫全长cDNA质粒文库中识别ATP合酶B亚基,利用生物信息学方法预测其结构和功能特征,用以指导实验研究.方法 利用生物信息学网站的各种在线分析工具和Vector NTI suite软件包,识别华支睾吸虫ATP合酶B亚基基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能特征,并根据该基因构建种系分子进化树.结果 Blastx分析该基因为全长基因,属于ATP合酶B亚基家族,其分子进化树与种系进化过程非常吻合.该基因全长1 008 bp,编码300个氨基酸,含有线粒体转运肽、两个跨膜区、一个核定位序列和多个磷酸化位点,具有较稳定的理化性质.结论 ATP合酶B亚基是一个理想的真核种系进化的分子标志.华支睾吸虫ATP合酶B亚基具有线粒体和细胞核的双重定位序列,提示该蛋白可能在华支睾吸虫的能量代谢途径中发挥独特的调节作用.
作者:周红娟;余新炳;徐劲;胡旭初 刊期: 2007年第04期
目的 了解小学流感爆发的流行特征,分析所采取防制措施的效果,为控制爆发提供科学依据.方法 采用现况流行病学调查方法,对该小学流感爆发的流行特征进行分析;用MDCK细胞进行病毒分离,用血凝抑制试验对分离到的病毒标本进行分型鉴定.结果 全校967人,有63人发病,罹患率为6.51%.采集9份现症病人漱口液中有4份分离出流感病毒,进一步型别鉴定为B型流感病毒.结论 该事件是由B型流感病毒引起的流感爆发疫情,感染来源为社区获得;早期发现、及时隔离治疗病人,是控制流感爆发的重要措施.
作者:李铁钢;刘维斯;秦鹏哲;刘于飞;王玉林;何丽娟 刊期: 2007年第04期
目的 对妊娠期急性脂肪肝进行早期诊断和正确治疗,以降低孕产妇及围产儿的死亡率.方法 对1995-2005年在我院产科经治的8例妊娠期急性脂肪肝患者的资料进行回顾性分析.结果 8例患者中,单胎6例,双胎2例.3例孕产妇死亡,均为非及时终止妊娠者.其中阴道分娩1例,剖宫产2例,病死率为37.50%;围产儿死亡4例,死亡率为40.00%.分娩后的临床表现及化验结果均较产前明显恶化,以3 d内严重,但与分娩方式无关.结论 早期诊断、及时终止妊娠及多学科的综合治疗,可大大改善妊娠期急性脂肪肝的母儿预后.
作者:宋鹤兰 刊期: 2007年第04期
目的 了解1999-2004年庐江县某二甲医院肿瘤住院患者的基本构成,并预测2005-2007年该院肿瘤住院患者人数,为医院管理决策提供科学依据.方法 整理该院1999-2004年《医院疾病分类年报表》资料,进行统计描述和季节趋势预测.结果 1999-2004年该医院肿瘤患者住院人数占同期总住院人数的10.72%,预计2005-2007年肿瘤住院患者分别为1 216例、1 287例和1 359例,且有明显逐年增加趋势.结论 该院肿瘤患者住院人数在同期总住院人数中占有相当比重,且有逐年增加趋势.医院管理者应合理分配卫生资源.加强肿瘤科室的建设.
作者:魏跃红;王鸣;许信红;潘冰莹 刊期: 2007年第04期
目的 了解广州地区临床脓肿、病灶分泌物及创面感染分离病原菌群分布与耐药性特点.方法 耐药性监测网成员医院按《全国临床检验操作规程》要求分离临床送检的各种包括脓肿、病灶分泌物及创面的细菌培养标本.药物敏感试验采用纸片扩散法,耐药性数据分析采用WHONET4软件.结果 2002-2004年间各种临床标本共分离感染病原菌20 087株.其中脓肿、病灶分泌物及创面等标本分离的病原菌2 659株,占13.2%.发生脓肿、分泌物及创面感染的患者主要是青壮年,门诊患者占20%.引起脓肿等感染病原菌以革兰阳性球菌为主,占50.5%.其中葡萄球菌的耐药性及耐甲氧西林(MRS)检出率低于其他标本类型分离的葡萄球菌;铜绿假单胞菌对数种抗生素的耐药率比2002全国资料低,差异有统计学意义;大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对所监测抗生素的耐药率则与2002全国资料较为接近.结论 不同的标本类型其分离株对抗生素耐药特性有所不同,广州地区引起脓肿、病灶及创面等感染的主要病原菌对抗生素的耐药性一般要比其他标本分离菌低.
作者:魏衍超;何启勇;邹伟民;吴晓蔓;肖柯玲;王敏玲 刊期: 2007年第04期
了解广东省内医学媒介生物种类及分布情况,为虫媒病的防治提供有效的背景材料.查阅已发表的关于广东省内媒介生物的文献资料,总结出广东省内的媒介生物的种类及分布状况.结果广东省内报道过的蚊类共有4属23种;蝇类共有5科18亚科157种;蜚蠊2科3属5种;蚤类3科6属6种;恙螨1科2属3种;蜱3属6种.本综述通过资料的总结,掌握了广东省媒介生物本底状况,为虫媒病的防治提供了有效的资料.
作者:陈亮;彭鸿娟 刊期: 2007年第04期
目的 探讨广州市自来水水厂原水和出厂水的卫生状况,为保障广大市民饮用水卫生安全提供依据.方法 对广州市1996-2005年自来水水厂原水和出厂水监测资料进行统计,按《地表水环境质量标准》和《生活饮用水卫生规范》分析评价.结果 未发现水源水逐步恶化的趋势,珠江水系广州河段的锰、耗氧量、亚硝酸盐氮污染比珠江水系的北江段和东江段重;出厂水的合格率在62.07%~88.89%之间.结论 需进一步改善珠江水质,各级政府主管部门应重视和加强珠江水源水的保护和治理工作;建设主管部门应加强对水厂建设的投入和制水工艺的改进,提高水厂出厂水的卫生质量;卫生部门应完善新建水厂的卫生学评价,加强饮用水卫生监督监测.
作者:钟嶷;黄汝明;刘世强;傅雪松;杨轶戬;石同幸;孙兰 刊期: 2007年第04期
目的 探讨孕妇产前用乙肝免疫球蛋白(HBIG)与乙型肝炎疫苗联合免疫阻断母婴传播的效果.方法 将504例HBsAg(+)孕妇分为A(预防组),B(对照组)两组.A组:246名HBsAg阳性孕妇孕晚期每月分别注射基因重组型乙肝疫苗10μg、HBIG 200 IU(200 IU/ml),新生儿出生后采股静脉血,同时在出生后24 h内注射HBIG 200 IU,然后在0、1、6月龄接种基因重组型乙肝疫苗,每次10μg.B组:258例产前未注射HBIG和基因重组型乙肝疫苗的HBsAg阳性孕妇,其所生新生儿在0、1、6(30 μg、30μg、30μg)月龄只用基因重组型乙肝疫苗免疫.A、B两组婴儿都分别在0、3、6、9、12、24月龄静脉采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV标志物,同时随访.结果 A组的宫内感染率为3.25%,B组为4.16%,差异无统计学意义(χ2=1.43,P>0.05).A组没有发生慢性HBV感染的婴儿,而B组中有7例婴儿发生慢性HBV感染,B组婴儿发生慢性HBV的感染率显著高于A组(χ2=4.41,P<0.05).结论 产前用HBIG和新生儿HBIG联合免疫可降低慢性HBV感染率,阻断宫内感染的慢性化,提高产程感染的阻断效果.
作者:曾捷 刊期: 2007年第04期
目的 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测肺炎克雷伯菌医院感染.方法 对临床分离的36株肺炎克雷伯菌进行RAPD基因分型,并通过指纹图谱比较与分析,确证医院感染爆发.结果 36株肺炎克雷伯菌共分得33型,肺炎克雷伯菌医院感染局部流行共1起.结论 RAPD可对肺炎克雷伯菌进行分子流行病学调查.
作者:龙军;周韶松;彭永正;林裕锋 刊期: 2007年第04期
目的 获取幽门螺杆菌hp0231和hp0410基因的序列,预测其编码蛋白HP0231和HP0410作为候选疫苗的可行性,在大肠杆菌表达系统中表达hp0231和hp0410.方法 提取幽门螺杆菌标准株NCTC11639的基因组DNA,按照GenBank中幽门螺杆菌标准株22695的序列设计引物PCR,扩增hp0231和hp0410基因,克隆入pMD18-T载体中测序,进行生物信息学分析.将hp0231和hp0410克隆入表达载体pGEX-4T-1中,诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定.结果 生物信息学分析表明HP0231和HP0410均为外膜蛋白,具良好的抗原性,并且与其他生物的同源性较低,其作为Hp疫苗不易产生交叉反应以及自身免疫性反应,构建的重组菌可高水平表达可溶性重组蛋白.结论 HP0231和HP0410是有良好应用前景的Hp候选疫苗.
作者:胡平;罗军;张文炳;龙北国 刊期: 2007年第04期
目的 分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值.方法 广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解.与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体.结果 SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32 000 Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少.两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少.结论 广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32 000 Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原.
作者:顾金保;刘敏;李华;吴焜;陈晓光 刊期: 2007年第04期
遗传性耳聋可分为综合征性耳聋(syndromic hearing impairment,SHI)和非综合征性耳聋(nonsyndromic hearing impairment,NSHI).综合征性耳聋除听力损伤外,还有非听力方面的症状和体征,约占遗传性耳聋的30%;其余70%为非综合征性耳聋,即只有听力损害,不伴有非听力方面的症状和体征.学语前耳聋中绝大多数属于后者.人类约有15种连接蛋白,现已证实有6种与遗传性耳聋有关.迄今,对非综合征性常染色体显性遗传耳聋(ARNSHL)研究较多的基因是Connexin26(Cx26)基因,它的高频突变与NSHI密切相关,同时Connexin26基因突变与常染色体显性遗传性耳聋DFNA3和常染色体隐性遗传性耳聋DFNBI也有关,故称其为耳聋易感基因.本文主要从基因突变类型、器官和组织的表达,以及引起耳聋的机制和相关的治疗研究加以综述,重点探讨以Connexin26为代表的连接蛋白与遗传性耳聋的关系.
作者:徐聪;陆家海 刊期: 2007年第04期
目的 对一起可疑食物中毒的病原菌进行实验室检测.方法 依据GB/T 4789-2003(食品卫生微生物检验》进行肠道致病菌的检测,同时采用实时荧光定量PCR的方法,共同鉴定病原菌.结果 选取的6份样本中,有5份副溶血弧菌PCR结果为阳性,16份病人肛拭子中有11份分离出副溶血弧菌,生化反应呈三种模式,血清学分型亦有K6、K41和K56三种.结论 该起食物中毒是由多种型别副溶血弧菌引起.
作者:侯炎昌;杨晓华;肖娜 刊期: 2007年第04期
目的 研究应用实时荧光定量PCR(Fluorescence Quantitative PCR, FQ-PCR)开展乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)核酸定量检测中的测量不确定度.方法 通过实时荧光定量PCR进行乙型肝炎病毒核酸定量检测的实验分组设计与数据处理分析,计算分析该检测方法不同来源的测量不确定度值.结果 对3组不同水平浓度值样本来源的数据采用两种方法进行统计分析,QDNA的组标准差远远大于LGQDNA的标准差,初始浓度数值经过对数转化后离散程度降低,统计平均值也发生了偏离.LGQDNA为3.465、4.927和6.018的样本.其浓缩过程来源的相对不确定度分别为0.020、0.019和0.009;LGQ无偏估计在3.706、6.750的样本的核酸提取来源相对不确定度分别为0.016和0.009;数据分析来源的LGQ不确定度为0.000~0.008;热循环仪来源的LGQ不确定度为0.002~0.008.结论 使用核酸浓度值QDNA与使用其对数值LGQDNA进行数据统计分析的结果存在差异;标本制备过程中的浓缩和DNA提取是实时荧光定量PCR进行HBV核酸定量检测时测量不确定度的重要来源,标本制备环节是影响该项检测的关键因素,包括试剂、方法和操作者的准确操作能力.
作者:余南;甘明;詹希美;陈小坚 刊期: 2007年第04期
目的 了解2003年广州市疾病预防控制中心门诊部接诊的狂犬病疫苗免疫者的流行病特征及抗体产生情况,为我市狂犬病监测提供部分信息和依据.方法 对广州市疾病预防控制中心门诊部2003年狂犬病接种者的登记资料进行统计分析.采用ELISA法对2003年在我门诊注射狂犬疫苗1701例人群进行抗体检测.结果 不同年龄组人群的抗体阳性率在89.66%~98.41%,低年龄组人群的抗体阳性率高于高年龄组人群.结论 注射狂犬疫苗的人群抗体阳性率仍未能达到100%,对结果阴性者应及时补种疫苗.
作者:蒋爱玲;李秀珍;黎淑端 刊期: 2007年第04期
目的 探讨三磷酸肌醇(IP3)和Caspase3蛋白表达变化在genistein诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 以肝癌HepG2细胞培养72 h为对照组,实验各组以60 μmol/L的genistein作用于HepG2细胞不同时间后,应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量,Western blotting分析细胞Caspase3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 Genistein作用于肝癌HepG2细胞12、24、48、72 h,各时相IP3含量显著低于对照组[(12.0±1.4)pmol/106 cells、(7.5±0.8)pmol/106 cells、(5.6±0.5)pmol/106 cells、(4.3±0.6)pmol/106 cells vs (29.2±0.6)pmol/106 cells,P<0.01];24 h后Caspase3蛋白的RI显著高于对照组(2.7±0.2,7.4±0.5,7.4±0.5,30.7±1.6 vs 0.24±0.06,P<0.05);24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组[(2.7±0.2)%、(7.4±0.5)%、(20.5±2.0)%、(30.7±1.6)% vs (2.6±0.1)%,P<0.01].结论 Genistein能减少IP3生成,上调Caspase3蛋白表达,诱导肝癌细胞凋亡.
作者:洪迅;张继红;郭中敏;刘培庆 刊期: 2007年第04期
目的 探讨本地区尿路结石成分构成情况,并根据尿路结石成分构成指导尿路结石的治疗和预防.方法 收集江门市中心医院住院和门诊上、下尿路结石标本120例,采用化学显色法对尿路结石中磷酸盐、尿酸盐、草酸盐、碳酸盐、钙、铵、胱氨酸等化学成分进行定性分析.结果 本组尿路结石样本中含钙结石多,占80.8%,含磷酸盐结石次之,占67.5%.单纯性结石占35%,其中草酸钙结石为多,占69%.感染性结石中以磷酸盐结石多,占68.7%,含铵结石占61.2%.复发结石含磷酸盐占88.2%,其比例显著高于初发结石.上尿路结石中含钙和磷酸盐结石显著高于下尿路结石,下尿路结石中含尿酸盐结石显著高于上尿路.结论 根据结石分析得到的结石化学成分特点,可有针对性地指导临床治疗,并可指导患者从饮食、生活习惯等方面预防尿路结石的发生和复发.
作者:孙明;庞健;黄健;陈立新;林天歆;黄海;吴荣海;程洲平 刊期: 2007年第04期
目的 构建抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素原核表达载体并测定表达产物对隐孢子虫的杀灭作用.方法 利用基因工程原理,以含抗隐孢子虫ScFv-PE重组毒素的菌株为模板,利用设计合成的一对引物扩增出ScFv-PE,利用pMAL-p2X载体构建重组毒素pMAL-ScFv-PE,并将其导人大肠杆菌中进行表达,产物进行SDS-PAGE和Weatern-blot,纯化后治疗感染隐孢子虫的小鼠.结果 重组质粒经酶切鉴定正确,IPTG诱导后可看到明显的条带.凝胶薄层扫描分析目的蛋白表达量占菌体蛋白总量的21%.纯化后的表达产物治疗感染隐孢子虫的小鼠治疗组比对照组肠滞留物中卵囊计数(P<0.05)与肠道平均累计感染积分明显减少(P<0.01).结论 利用原核表达载体成功构建了可溶性形式表达的pMAL-ScFv-PE重组质粒,重组毒素对隐孢子虫具有明显的杀灭作用.
作者:刘晓峰;李淑红;张西臣;尹继刚;李建华;宫鹏涛;张国才 刊期: 2007年第04期