王佳;诸葛洪祥;朱江;周洪福;陈明中
目的寻找新的支持HCV亚基因复制子复制的支持细胞,为研究HCV复制机制、HCV与宿主间的关系,及建立HCV缺陷病毒培养体系提供材料储备.方法质粒pNNeo3-5B含HCV-N亚基因复制子cDNA,该复制子RNA能在Huh7细胞中有效复制.缺失其中的BsaB Ⅰ-Hpa Ⅰ片段(含NS5B的GDD基序),生成缺陷型复制子质粒pNNeo3-5B(△).将以上两个质粒线性化后体外转录出复制子RNA:rNNeo3-5B和rNNeo3-5B(△).将rNNeo3-5B电转染Huh7、SMMC7721、HepG2、BEL7402、Lo2、CBRH7919、BHIK21、Vero E6、293和293T等细胞,以G418筛选3周,观察克隆形成情况,并检测克隆中HCV特异性RNA和蛋白.结果在CBRH7919和BHK21获得G418抗性克隆,转染rNNeo3-5B(△)的细胞和未转染复制子的细胞则全部死亡.RT-PCR检测证实各克隆都含有HCV 5'NTR和新霉素磷酸转移酶基因,间接免疫荧光和Western blot检测证实有大量表达的HCV NS3和NS5A蛋白,未转染复制子的细胞全为阴性.结论本研究证实CBRH7919和BHK21能支持HCV复制子的自主复制,可作为建立HCV病毒培养体系的备选材料.
作者:邬刚;吴英松;董文其;陈白虹;李明 刊期: 2006年第05期
目的了解麻疹的血清流行病学特征,探讨麻疹与风疹之间的血清学鉴别诊断.方法采用酶联免疫吸附法对539例麻疹疑似病例的血清标本进行麻疹IgM和风疹IgM抗体检测.结果539例麻疹疑似病例中7岁前发病占61.0%,而20岁以后发病仍占25.0%.麻疹IgM阳性率为82.6%(445/539),风疹IgM抗体阳性率为1.1%(6/539),以麻疹为主.各年龄组麻疹IgM抗体检测阳性率经x2检验(x2=2.895,P=0.576),无统计学意义.在出疹后第2天前(0~1 d)采集的血清标本其麻疹IgM抗体阳性检出率为72.9%,从出疹后第3天至14天(2~14 d)采集的血清标本其麻疹IgM抗体检测阳性率为88.4%,两者之间经x2检验有统计学意义(x2=21.08,P<0.001).结论本地发热出疹性疾病以麻疹为主;发病年龄分布主要在7岁前,而20岁以后仍然占相当大比例,值得注意;采血时间与检出率密切相关;仍然有16.3%的疑似病例未经过实验室确诊,应提高麻疹实验室诊断的及时性、准确性和敏感性,建议采集双份血(即采集急性发病期及恢复期血清),对麻疹IgM和风疹IgM抗体检测阴性结果的病例,再进行双份血IgG测定,以提高麻疹疑似病例确诊性.
作者:罗小铭;高赛珍;阮坛凤;叶宝青;吕海英 刊期: 2006年第05期
目的探讨大肠癌伴转移性肝癌的门静脉的特点.方法回顾250例大肠癌伴转移性肝癌患者的门静脉流速、直径及癌栓发生率,分析其门静脉的特点.结果大肠癌伴转移性肝癌患者门静脉的直径为(10.4±1.34)mm,门静脉流速为(19.7±5.2)cm/s;门静脉癌栓发生率为0;与原发性肝癌的门静脉癌栓发生率相比,存在显著性差异(P<0.01).结论在大肠癌伴转移性肝癌中,门静脉的流速及直径改变不显著;与原发性肝癌的门静脉癌栓发生率相比较,大肠癌伴转移性肝癌的门静脉癌栓发生率罕见.
作者:王辉;曾山崎;盛立红 刊期: 2006年第05期
针对当前医学专业中实施双语教学的现状,从教师的外语水平、教师对教材的理解和掌握及教学方法三个方面探讨了在医学专业中从事双语教学的教师的素质问题.
作者:陈新宇 刊期: 2006年第05期
目的用分子信标探针PCR快速检测志贺菌属(Shigella).方法根据GenBank上公布的福氏志贺菌M32063株ipaH基因序列,设计引物和分子信标探针,以4种细菌进行对照,进行特异性和灵敏度分析,建立Shigella的实时PCR技术快速检测,应用于食物中毒和食品检测.结果检测20个样本,Shigella呈阳性,其它呈阴性,时间约2 h.结论Shigella分子信标探针技术具有快速、灵敏度高、特异性强等特点,可用于Shigella食物中毒快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的早期、准确诊断提供新的检测手段.
作者:赵丽华;周勇;万成松 刊期: 2006年第05期
目的了解某综合医院法定传染病的发病情况,分析其流行病学特点,为今后的传染病防治管理工作提供科学依据.方法对1995~2004年报告的法定传染病疫情资料进行统计分析.结果10年来共报告法定传染病14 793例,其中,甲类传染病24例,乙类传染病14 282例,丙类传染病487例;1999~2004年甲、乙类和丙类传染病的发病率均呈现出逐年上升的趋势,其中丙类传染病尤为显著;报告的主要病种为病毒性肝炎、肺结核、伤寒、痢疾、流行性腮腺炎等;其中,病毒性肝炎、肺结核、伤寒一直排在前三位,占了各年度发病总数的85%以上;从2001年开始,肺结核从原来的第2位升至第1位.结论病毒性肝炎和肺结核仍是传染病防治工作的重点和难点,应加大管理力度,做好各种传染病的预防控制工作.
作者:周霓;陈少虹 刊期: 2006年第05期
目的在CHO细胞中表达小鼠TLR2(mTLR2).方法将目的基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,并将其转染到CHO细胞,用G418筛选阳性克隆.采用PCR方法,检测外源基因的整合.采用Western blot、免疫组织化学对转染细胞的mTLR2表达进行鉴定.结果成功构建了pcDNA-mTLR2重组质粒.将其转染到CHO细胞,经G418筛选获得阳性细胞克隆.阳性细胞克隆经PCR检测表明TLR2基因得到稳定整合.Western blot分析显示在分子量约95 000处可见清晰的阳性反应条带.免疫组织化学检测显示转染细胞表达mTLR2.结论获得了表达mTLR2的细胞株,为进一步进行相关研究奠定了基础.
作者:赵文忠;罗招凡;刘艳君;杨翠兰;朱平;江丽芳 刊期: 2006年第05期
目的了解江门市性病流行趋势和流行特点,为制定防治对策提供科学依据.方法对1993~2004年江门市的性病疫情报告资料进行流行病学分析.结果1993~2004年江门市性病发病呈快速增长趋势,由1993年的1 403例(发病率63.52/10万)上升到2004年的9 101例(发病率225.91/10万),年均增长18.53%,增长幅度大的是梅毒,年均增长55.06%,其次依次是生殖器疱疹(GH)、非淋菌性尿道炎(NGU)、尖锐湿疣(CA)、淋病,年均增长分别是50.73%、36.14%、15.99%、2.93%;女性性病报告病例数从1993年的500例增长到2004年5 010例,年均增长23.3%,高于同期男性的14.7%;20~29岁年龄组发病率高,其次依次为30~39、40~49、≥50岁组,而<15岁组低;非婚性接触是性病传播的一个主要感染源.结论江门市性病流行形势日益严峻,应引起足够重视.
作者:黄东辉;卢和琨;程文海;黄丽卿;谭仲谐 刊期: 2006年第05期
目的研究猪蛔虫不同发育期幼虫的收集方法.方法采用7.5%次氯酸钠氧化感染期蛔虫卵,37℃过夜后,用灭菌生理盐水离心数次,充分洗去次氯酸钠,将沉淀用玻璃珠在振荡器上振荡至全部卵壳破裂,幼虫孵出.用淋巴细胞分离液通过密度梯度离心法将幼虫与卵壳分离,后收集底层的脱鞘第三期(L3)幼虫.在贝尔曼原理的基础上,在漏斗中加入低浓度(0.4%)琼脂凝胶,分别将绞碎的含幼虫的猪肝、肺和小肠内容物及其肠粘膜平均分装在数个漏斗中,放入40℃温箱中孵育3 h,待大部分幼虫游离到管底,后用400目分样筛过滤分离肝中的L3,用300目分样筛过滤分离肺中的L3,用200目分样筛过滤分离肠内容物及其粘膜上的第四期幼虫(L4).结果次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法能够使感染期蛔虫卵几乎完全脱壳,配合淋巴细胞分离液的密度梯度离心法能收集到纯度较高且活力较强的体外脱鞘幼虫.与传统贝尔曼氏分离法相比,采用低浓度琼脂糖凝胶液能获得杂质少、高纯度的猪内脏中的不同发育期幼虫.结论次氯酸钠氧化加玻璃珠震荡法是体外脱鞘分离感染期幼虫的一种较为理想的方法,通过在漏斗内加低浓度的琼脂凝胶的方法是从猪内脏中获得高纯度的不同发育期幼虫的一种有效的方法.本方法不仅适用于猪蛔虫,而且对其它动物和人的寄生线虫幼虫的收集也有参考价值.
作者:黄翠琴;陈宁;邹丰才;林瑞庆;朱兴全 刊期: 2006年第05期
目的通过分析先天性梅毒患儿肺部、四肢骨骼X线征象的改变及颅脑超声的表现,总结出早期诊断的方法.方法对84例确诊的先天性梅毒患儿进行胸部和四肢骨骼的X线检查及颅脑超声检查,并进行分析、总结.结果84例患儿中胸片异常的有54例,占64.2%,以肺炎表现为主;四肢骨骼改变的有30例,占35.7%,病变以长骨干骺端为主;颅脑超声异常27例,占32.1%,以室管膜下出血及囊性改变为主.结论简便的胸及骨骼X线摄片与颅脑超声检查有助于先天性梅毒的早期诊断,可为治疗和预后提供重要参考.
作者:郭小芳;张丽范;张霞;王坤林 刊期: 2006年第05期
在肺结核病例中,痰涂片阴性肺结核病占很大比例,其诊断比较复杂,目前仍无统一标准.本文对近年来涂阴肺结核病诊断研究进行了综述,分别对涂阴肺结核、涂阴肺结核的诊断、涂阴肺结核的鉴别诊断及改进诊断进行了阐述.
作者:宋烨;杨本付 刊期: 2006年第05期
目的分析重庆市2002年霍乱疫情流行特点及规律,为制定防制措施提供依据.方法对确诊的霍乱患者及其密切接触者进行个案调查,采肛拭和(或)大便取样,进行霍乱弧菌培养分离和鉴定.结果全市发生霍乱疫情23起,确诊病例173例,死亡5例,带菌者101人.霍乱感染率、发病率、死亡率和病死率分别为0.884/10万、0.558/10万、0.016/10万、2.89%.病例相对集中在渝西地区,6~8月为发病高峰,以农民发病为主.食物因素引起的病例数显著高于其它传播因素(U=6.62,P<0.01).优势流行菌型为埃尔托霍乱弧菌稻叶1d菌型,同时首次出现霍乱弧菌O139群.结论重庆市霍乱传播方式以食源性传播为主,流行株发生改变,应制定针对性强的综合防制措施,控制和减少疫情的发生和流行.
作者:罗兴建;肖邦忠;张静秋;吴国辉;易娟;龙江 刊期: 2006年第05期
目的研制岛津CL8000全自动生化分析仪碱性清洗液代替产品,在保证检测质量的前提下,降低试剂成本.方法根据岛津CL8000系列全自动生化分析仪清洗原理,并结合次氯酸钠所具有的良好的冲洗和去污能力,加入非离子表面活性剂、消泡剂等配制成碱性清洗液.结果经比对试验、精密度实验、稳定性测试及日常病人标本应用测试证实,该自配碱性清洗液可达到原装碱性清洗液的清洁效果.结论自配碱性清洗液配制方法简单,成分稳定,可较好地满足日常工作的需要,同时又大大降低了成本.
作者:陈光辉;陈慧;梁映亮;唐从国 刊期: 2006年第05期
目的了解2型糖尿病并发急性心肌梗死的临床特点及预后.方法对255例糖尿病并急性心肌梗死和200例非糖尿病急性心肌梗死做临床对比研究.结果发现2型糖尿病发生无痛性急性心肌梗死的构成比(36.47%)较非糖尿病者发生的构成比(10.5%)高(P<0.005);发生大面积梗死的构成比(32.94%)比对照组的发生构成比(15.5%)明显升高(P<0.005);严重心律失常的发生构成比(60.39%)及死亡构成比(22.35%)均明显高于非糖尿病者(39%、9%)(P<0.025和0.005),主要死因均为泵衰竭和心跳骤停;入院第一周内的死亡构成比(13.73%)较非糖尿病者(4%)明显升高(P<0.005).结论2型糖尿病并发急性心肌梗死患者较无糖尿病的急性心肌梗死患者病情重、预后差、第一周内及住院期的死亡率高.
作者:夏碧文;马中富;何建桂;马虹;何玉辉 刊期: 2006年第05期
目的建立一种比现有方法敏感、特异性高、重复性好的实时荧光定量PCR检测的新方法检测人类mdr1基因.方法以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1/A为阳性模板,用Primer express 2.0引物设计软件设计引物和Taq Man-MGB探针,建立荧光定量PCR检测方法.结果当待扩增DNA浓度在3.601×103cps/ml~3.601×109cps/ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,相关系数r2大于0.98.结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确度高等优点,可作为进一步研究人类mdr1基因的方法.
作者:邹亚伟;胡斌;何蕴韶;陈福雄;封志纯 刊期: 2006年第05期
目的对钩端螺旋体黄疸出血群赖株ompL1基因进行克隆、表达及产物的纯化.方法从我国钩端螺旋体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长ompL1基因片段,克隆至pGEM-T载体,回收经EcoR Ⅰ+HindⅢ双酶切产物,将其与表达载体pET32a连接,通过酶切图谱和序列分析法筛选出重组质粒.将含重组质粒的宿主菌诱导表达后,提取全菌总蛋白进行SDS-PAGE电泳分析.结果获得pET9L重组质粒,经诱导表达后得到分子量为31 000的重组蛋白.测序得到的ompL1基因核苷酸序列与已发表ompL1基因序列(GenbankI61405)同源性为99.8%,所推导的氨基酸序列(Genbank LA3138)的同源性达100%.结论成功构建了ompL1基因的原核表达系统,为进一步制备以OmpL1为检测靶抗原的免疫层析试剂盒奠定基础.
作者:林琳;赵卫;罗军;龙敏;张文炳;杨军;曹虹 刊期: 2006年第05期
目的了解肺结核患者MTB-L型的感染情况,并探讨其培养的临床意义.方法选取2004年1月~2004年12月确诊为肺结核患者的痰标本372例进行MTB-L型培养.结果MTB-L型总培养阳性率为16.7%.菌阳肺结核组MTB-L型培养阳性率为21.8%,菌阴组为9.6%;活动性肺结核组MTB-L型培养阳性率为18.6%,非活动性组为2.5%,两者差异极显著(P<0.01);服药时间>6个月组MTB-L型培养阳性率为33.8%,服药时间<1个月组MTB-L型培养阳性率为10.9%,两者有极显著差异(P<0.01).初治肺结核组MTB-L型培养阳性率为13.9%,复治组MTB-L型培养阳性率为35.4%,两者差异极显著(P<0.01).结论肺结核患者MTB-L型感染占一定比例,服药时间>6个月和复治的患者MTB-L型感染率较高,若在痰结核分枝杆菌培养的同时进行MTB-L型培养,不仅可使肺结核患者细菌学的诊断率提高一定比例,而且对肺结核患者的治疗以及判断预后也具有重要意义.
作者:黄燊德 刊期: 2006年第05期
目的探讨神经内镜技术和手术显微镜结合单鼻孔经蝶微侵袭垂体瘤切除的效果.方法从2003年7月~2005年8月在神经内镜和手术显微镜下单鼻孔经鼻蝶入路切除23例垂体瘤.结果在神经内镜和手术显微镜下全切肿瘤19例,近全切4例,术后21例内分泌化验恢复正常,10例视力好转,4例病人出现暂时性尿崩,2例病人出现脑脊液漏,均于1~2周后恢复.23例病人随访3~16个月,未见复发,无传统唇下入路常见的唇部麻木、鼻中隔穿孔等并发症.结论神经内镜辅助下经鼻蝶入路切除垂体瘤能达到微创的目的,能更好显示鞍上和鞍旁的肿瘤,神经内镜能清晰显示手术显微镜不能看清的部位,而手术显微镜能提供三维视野,在经鼻入路过程及切除鞍区肿瘤的主体等方面具有其优势,二者结合能更安全更完全切除肿瘤.
作者:杨炳湖;罗洪海;荆国杰;黄月红 刊期: 2006年第05期
目的观察抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体(TSP-2)对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.方法用RT-PCR、免疫组化检测了小鼠肥大细胞瘤P815细胞在mRNA水平的表达及膜表面TLR2与抗体TSP-2的结合;利用激光共聚焦显微镜观察小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒的影响.结果P815细胞在mRNA水平以及膜表面均有TLR2表达,抗体TSP-2能有效抑制C48/80诱导的肥大细胞瘤P815细胞脱颗粒反应所致的形态学改变与钙流出.结论抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2可与P815细胞膜表面TLR2结合,并能抑制C48/80诱导的P815肥大瘤细胞脱颗粒.
作者:杨翠兰;郑健;罗冰;刘艳君;富宁 刊期: 2006年第05期
目的探讨白细胞介素12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)在梅毒发病机制中的意义.方法采用双抗体夹心ELISA法检测23例治疗前梅毒患者及其中15例治疗后二期梅毒患者血清中IL-12(p40)和IFN-γ的水平,并以15例正常人作为对照.结果23例梅毒患者血清中IL-12、IFN-γ的中位数(M)水平分别为21.32 pg/ml、1.01 pg/ml,分别与正常对照组(0.52 pg/ml、0.17 pg/ml)比较显著升高(P<0.01,P<0.01);15例二期梅毒患者治疗前血清中IL-12和IFN-γ的中位数水平分别为28.32 pg/ml、7.99 pg/ml,与治疗后(2.36 pg/ml、0.77 pg/ml)比较显著升高(P<0.01,P<0.01);治疗后IL-12和IFN-γ的中位数水平与正常对照组比较显著升高(P<0.01,P<0.01).结论IL-12和IFN-γ参与了梅毒螺旋体进入体内后的免疫过程,可能在梅毒螺旋体的清除过程中发挥重要的免疫调节作用.
作者:郑利雄;李放娟;吴育庆;杜晓红;张桂梅;魏丽虹;齐晖 刊期: 2006年第05期