何群双；杨云
目的克隆人血管紧张素转换酶2基因(ACE2),并构建其真核表达载体.方法用Trizol试剂从人肺组织提取总RNA,然后经逆转录得到人ACE2的cDNA.半巢式PCR方法扩增人ACE2基因后,先进行T-A连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,接种含IPTG和x-Gal平板筛选重组子,并进一步亚克隆至真核表达质粒载体pcDNA3.1(+).经PCR扩增、酶切和序列测定方法鉴定重组质粒.结果获得了人ACE2的编码基因,并成功构建了其真核表达载体.结论人血管紧张素转换酶2是SARS冠状病毒的功能受体,与SARS冠状病毒Spike蛋白上的受体结合域相结合,在SARS冠状病毒感染和传播中起重要作用,本工作为研究SARS冠状病毒感染及跨种属传播机制奠定了基础.
作者：肖洪广；高俊；刘利东；林勇平；黄泽红；李宁 刊期： 2006年第07期
目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ(HRP-Ⅱ)的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价,为试剂盒的临床应用提供科学依据.方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定,并与国外的同类试剂盒进行比较研究.结果自制试剂盒操作简便,反应快速;以血涂片显微镜检查为金标准,对49例恶性疟血样、30例间日疟血样、43例正常人血样检测的敏感性为98%,特异性为100%;对恶性疟原虫血样的小检出量为原虫密度0.01%,对重组HRP-Ⅱ蛋白的小检出量为10 ng/ml;试剂盒精密度和稳定性均较好;各项性能指标相当或优于国外同类试剂盒.结论自行研制的恶性疟原虫免疫层析检测试剂盒测定结果较为准确、稳定和可靠,适用于恶性疟的快速诊断、流行病学筛查、疟区献血员筛查及过境边民筛查.
作者：郝文波；王萍；李宏斌；陈白虹；高洋；王声亮；李明 刊期： 2006年第07期
目的研究弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠后鼻通道(nasal cavity,NC)的免疫效应及持续时间.方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以STAg(20μg/只)为抗原,CT(1 μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻.滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死6只小鼠.分离NC的淋巴细胞,计数并涂片,用免疫细胞化学法检测其CD4+T、CD8+T细胞亚群水平.结果小鼠免疫后,NC淋巴细胞第1周至第10周持续显著增生(P＜0.05);NC中CD4+T细胞水平第1周至第8周持续显著增高(P＜0.05),CD8+T细胞在第1、2、3周(P＜0.05)显著增高,持续至免疫后第3周,CD4+/CD8+比值无明显变化.结论STAg和CT佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导NC的免疫应答,并可持续较长时间.
作者：刘晋平；殷国荣；孟晓丽；杨亚波；刘红丽 刊期： 2006年第07期
目的研究新装修客房中挥发性有机毒物对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响.方法通过动物实验和人群流行病学调查相结合的方法,应用单细胞凝胶电泳法,分别检测在新装修场所和未装修场所工作半年以上女服务员外周血淋巴细胞DNA的损伤和实验动物外周血淋巴细胞DNA的损伤.结果在新装修场所工作半年以上女服务员的外周血淋巴细胞DNA断裂比对照组高,差别具显著性意义(P＜0.01).动物实验组外周血淋巴细胞DNA的损伤高于对照组,两组比较具有显著性差异(P＜0.01).结论新装修住房中挥发性有机毒物对人体外周血淋巴细胞存在DNA损伤作用.高浓度有机挥发物可引起小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤.
作者：王秀英；余淑苑；牛恩宏；康莉 刊期： 2006年第07期
目的研究肇庆市端州区孕妇TORCH感染与异常妊娠的相关性.方法采用抗体捕获ELISA法对产前检查及近期自然流产诊治的妇女共778例,进行TORCH-IgM抗体检测.结果480例无异常妊娠史者阳性病例54例,IgM总阳性率为11.24%;285例有异常妊娠史者阳性病例126例,IgM总阳性率为44.21%(P＜0.05);13例近期自然流产者阳性病例9例,IgM总阳性率为69.22%(P＜0.05).结论在孕早期自觉进行TORCH感染检测,是做好优生优育工作的首要环节.
作者：陈金强 刊期： 2006年第07期
目的探讨T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+T细胞在SLE病人发病中的临床意义.方法采用流式细胞术检测了68例SLE患者(其中活动期病人38例,稳定期病人30例)以及30例健康体检者外周血CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD45RA+、CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞亚群以及CD4+CD25+T细胞水平.结果与正常对照组相比,活动期SLE病人CD3+CD4+、CD4+CD45RA+细胞亚群的百分率明显降低(P=0.000,P=0.001),CD3+CD8+、CD8+CD28-细胞亚群的百分率明显升高(P=0.000,P=0.000).稳定期患者CD8+CD28+细胞水平明显高于活动期和对照组(P=0.011,P=0.435),CD3+CD4+、CD4+CD45RA+水平高于活动期,但无显著性差异(P=0.067,P=0.081),CD8+CD28-T细胞亚群无明显变化(P=0.997).活动期病人CD4+CD25+T细胞百分率明显低于正常对照组及稳定期病人(P=0.000,P=0.000),稳定期病人与对照组之间无显著性差异(P=0.572).结论SLE患者T淋巴细胞亚群的水平是异常的.病人外周血CD8+CD28-T细胞亚群的比例升高与疾病的病程和临床表现相关联,它的升高在疾病的稳定中起重要作用.CD4+CD25+T细胞水平降低可能是导致机体抑制自身免疫反应的功能减弱并引发SLE发生发展的重要因素.
作者：裘宇容；杨春莉；李娟；郑磊；王春燕；包杰 刊期： 2006年第07期
目的了解临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)产肠毒素(SE)的情况及耐药现状.方法对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的标准,用K-B法对260株SA进行药物敏感性试验,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测分别用检测头孢西丁及乳胶凝集检测PBP2a方法进行.结果260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA 134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB和SEC为主,分别为19.4%、16.4%和13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%.用头孢西丁及检测PBP2a的方法检测MRSA,检出率无显著意义(P＞0.05);SA对临床常用的抗菌素除万古霉素及替考拉宁较敏感(100.0%敏感),其它的抗菌素存在多重耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强.结论临床分离的SA株大部分都携带肠毒素,MRSA的带毒率及耐药性均高于MSSA;临床应重视SA肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素.
作者：李红玉；龙军；徐霞 刊期： 2006年第07期
目的观察流行性乙型脑炎患者用布洛芬降温治疗的疗效及安全性.方法药物降温组胃管注入布洛芬制剂(美林口服液),按年龄剂量每4 h一次,至体温稳定在38℃以下,其他治疗与对照组相同.结果治挝疗后1 h、2 h、4 h、12 h、24h、48 h两组病例体温对比有显著差异(P＜0.01),治疗组在治疗48 h内降温效果较对照组更好;治疗组神志异常恢复更快(P＜0.05);两组病人均未发生严重副作用.结论流行性乙型脑炎患者用布洛芬降温较单纯物理降温效果更佳,病情恢复更快,并且安全性高.
作者：何日东；庞增；张木春 刊期： 2006年第07期
特异性抗体在蛋白质组学研究中是非常重要的,它们在蛋白质组学研究中的作用和地位就如同PCR技术之于基因组学研究.体外筛选方法可以高通量地筛选到特异性强、效价高的目的抗体.目前有几种不同的高通量筛选抗体的方法,如果能够获得足够数量和纯度的目的蛋白,物理筛选方法就比较合适,物理筛选方法目前包括噬菌体展示、酵母展示、核糖体展示和蛋白质微阵列等.如果只得到了基因序列或者是筛选物纯度不够,则可以使用肽段或基因筛选的方法,尽管这两者无论是在技术的成熟度还是操作的简便性方面都远远落后于物理筛选方法,但这种方法仍不失为一种有效的筛选方法.
作者：吴芬芳；李明 刊期： 2006年第07期
目的比较三种不同给药方法在老年患者胃镜检查中的镇静作用及对呼吸循环的影响.方法选择老年胃镜检查患者240例,单盲随机分为三组,每组80例.Ⅰ组先静注2%利多卡因2 ml,接着静注丙泊酚1.6 mg/kg,1～2 min静注完毕,待睫毛反射消失后开始进镜;Ⅱ组静注2%利多卡因2ml,再静注依托咪酯0.2mg/kg,待睫毛反射消失后开始进镜;Ⅲ组先静注2%利多卡因2 ml,再静注丙泊酚0.8 mg/kg+依托咪酯0.16mg/kg,待睫毛反射消失后开始进镜.观察术中镇静程度及记忆缺失、苏醒时间、HR、SBP、DBP和脉搏血氧饱和度(SaO2)的变化、术后恶心呕吐.结果Ⅰ组血压下降,注药前后有显著差异(P＜0.05),Ⅱ组、Ⅲ组两组血压注药前后无显著性差异(P＞0.05);三组患者镇静程度和苏醒时间是无显著性差异;Ⅱ组术后有明显恶心呕吐,Ⅰ组、Ⅲ组无恶心呕吐.结论Ⅲ组丙泊酚0.8 mg/kg+依托咪酯0.16 mg/kg辅助老年患者胃镜检查是安全、有效、舒适的.
作者：高林兵；易晓青 刊期： 2006年第07期
目的观察人乳头瘤病毒(HPV)感染者的宫颈组织学变化,探讨HPV及其各基因型对宫颈上皮病理变化影响.方法采用导流杂交法对门诊844例宫颈癌筛查者行6、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304等21种HPV亚型的分型检测,与宫颈组织病理学进行分组对照观察.研究HPV各种基因型感染的宫颈上皮病理变化.结果HPV总感染率为49.2%(416/844),各亚型感染率依次为:16(10.7%)、52(10.0%)、58(7.6%)、CP8304(6.9%)、11(6.4%)、51(6.3%)、33(5.3%)、6(3.8%)、68(3.7%)、18(3.6%)、53(3.4%)、31(3.3%)、66(2.1%)、39(1.9%)、59(1.4%)、45(0.7%)、56(0.6%)、44(0.5%)、43(0.2%)、42(0)、35(0).混合感染率为41.3%(172/416),其中感染2种亚型为29.8%(124/416);3种亚型为7.9%(33/416);4种亚型为2.6%(11/416);5种以上亚型为1.0%(4/416).HPV阳性者191例行宫颈组织活检,其中慢性炎症30.4%(58/191);尖锐湿疣13.6%(26/191);CIN Ⅰ 41.4%(79/191);CINⅡ9.4%(18/191);CINⅢ3.1%(6/191);宫颈癌2.1%(4/191).HPV混合性感染者宫颈CIN病变(CIN Ⅰ～CINⅢ)的发病率为66.7%(54/81),单一型感染者宫颈CIN病变为44.5%(49/110),两者之间有显著性差异(P＜0.05).结论高危型HPV感染与宫颈癌及癌前病变有密切联系,各病毒亚型的混合性感染可能对宫颈CIN的发生与发展有累加作用,对HPV进行分型检测可以指导临床的诊断与治疗.
作者：郜红艺；张佳立；张江宇；吴坤河；梁驹卿；潘小英；张畅斌 刊期： 2006年第07期
目的探讨残胃癌早期诊断、外科治疗与预防.方法回顾分析1995年1月～2005年1月收治的36例残胃癌发病率、临床表现及治疗情况.首次手术方式均为毕Ⅱ式吻合;间隔时间10～35年.结果23例行残胃癌根治术病人的1年、3年、5年累积生存率分别为78.26%、34.80%和26.10%.4例未手术和9例行姑息性手术者均于一年内死亡.若将这23例分为残胃全切除(n=15)和残胃次全切除(n=8)两组,前者的1年、3年、5年生存率分别为80.00%、66.70%和62.50%,而后者1年、3年的生存率为75.00%和33.33%,无一例生存逾5年.两者比较有显著性差异(P＜0.01).结论早期发现、早期诊断对提高残胃癌的手术切除率有重要意义,是提高生存率的关键.手术以根治术为主,无论是早期还是进展期残胃癌均提倡全胃切除.清扫一般包括癌肿周围第1站和第7、8、9、10、11、12、13组淋巴结,同时清除空肠系膜根部第14组淋巴结.重视残胃癌预防,应采取积极有效的预防措施,避免残胃癌的发生.
作者：刘宏杰；曾山崎；唐伟镖 刊期： 2006年第07期
目的探讨带状疱疹后遗神经痛(PHN)伴发内脏反应的临床特点.方法分析25例带状疱疹后遗神经痛伴发内脏反应的临床表现、病程特征及诊疗经过,并追踪随访.结果25例的PHN均为脊神经损害,呈节段性分布,伴有感觉过敏带,8例(32%)有轻微脊髓横贯性损害;内脏反应为反复发作的功能性激惹症状,其中消化系18例占72%,泌尿系7例占28%,与PHN同时或随后发生,早期漏诊误诊21例(84%);以抗病毒为主的综合治疗有效,复发率低.结论PHN临床特征为胸段脊神经痛,呈节段性分布;伴发内脏反应常见为消化、泌尿系统激惹性症状,病程呈反复发作性经过;临床误诊漏诊率较高;本病预后良好.
作者：黄宗青；李爱东；刘洪涛；陈锦辉 刊期： 2006年第07期
目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)潜伏和活动性感染状态下病毒基因复制特点.方法选择两种不同滴度HCMV感染传代培养的人胚肺成纤维细胞,建立持续稳定感染和活动感染细胞模型.在感染不同时段,分别采用FQ-PCR和RT-PCR法监测HCMV DNA复制及其主要衣壳蛋白(MCP)mRNA转录情况,光镜观察致细胞病变作用(CPE)、电镜检查细胞超微结构改变.结果两组细胞内均检测到HCMV DNA复制,但活动性感染的B组细胞内HCMV DNA负荷量显著高于A组(P＜0.05),其复制速度也较快,并且检测到了水平逐渐升高的MCP mRNA转录,细胞出现进行性加重的CPE和超微结构改变;而潜伏感染的A组未检到MCP mRNA,亦未发现细胞病变.结论高负荷量HCMV DNA复制和晚期蛋白MCP mRNA转录是HCMV活动性感染的重要特点.
作者：左约维；赵杨；陈敦金；闻良珍 刊期： 2006年第07期
目的研究体外缺氧对乳腺癌细胞系MCF7浸润能力及其细胞表面金属蛋白酶MMP-2、丝氨酸蛋白酶u-PA受体u-PAR和细胞基质蛋白FN的表达的影响.方法本实验模拟体外缺氧环境,观察缺氧对乳腺癌细胞MCF7浸润穿透Metrigel的能力;以及采用半定量RT-PCR检测细胞表面MMP-2、u-PAR和FN表达情况.结果缺氧状态下MCF7细胞的浸润能力明显增强;其表面的MMP-2、u-PAR、FN基因表达升高.结论缺氧可以上调与乳腺癌浸润转移有关的基因的表达,缺氧条件促进乳腺癌细胞的浸润转移.
作者：郭煜；方荸荠；潘学谊；石菁华 刊期： 2006年第07期
目的构建含人幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B(Urease B,UreB)编码基因的重组质粒,测定、分析其核苷酸序列,并在E.coli Top10中表达,研究其抗原性.方法应用PCR技术从Hp DNA染色体中扩增UreB编码基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其它Hp菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至表达载体pGEX-4T-1中进行表达,用GST亲和层析对其进行纯化,纯化产物用于对29株小鼠抗Hp-全菌单克隆抗体(mAb)的鉴定及与Hp感染患者血清进行Western blot.结果扩增的UreB基因全长1 704 bp,并在GenBank上登录(No.DQ141576),与GenBank公布的其它Hp菌株的核酸同源性为97%～99%,表达的UreB融合蛋白的相对分子量为91 000.29株小鼠抗Hp-全菌mAb中有6株是针对UreB抗原的,纯化产物可被病人血清和抗UreB的鼠单克隆抗体识别.结论重组UreB具有较好的抗原性,为Hp检测诊断和疫苗的研究奠定了基础.
作者：李妍；宁云山；龙敏；董文其；李明 刊期： 2006年第07期
目的了解性病门诊中,女性患者以生殖器溃疡为主要表现的疾病的病因.方法根据病史、临床表现,结合暗视野显微镜检查、梅毒血清学试验,PCR检测HSV-DNA等进行诊断.结果96例女性生殖器溃疡性疾病患者中,梅毒22例,占22.9%;生殖器疱疹30例,占31.3%;梅毒和生殖器疱疹混合感染2例,占2.1%;疑诊软下疳2例,占2.1%;白塞氏综合症5例,占5.2%;急性女阴溃疡6例,占6.3%;29例未能明确诊断,占30.2%.结论女性生殖器溃疡性疾病患者中,病因以生殖器疱疹、梅毒占多,软下疳少见.
作者：周丽丽；谭雪玲 刊期： 2006年第07期
目的了解三水区健康人群百日咳、白喉、破伤风抗体水平,评价百白破疫苗的免疫效果,为今后免疫规划工作制定科学的免疫方案和接种质量监测提供依据.方法选择2～4、6～8、13～15、25～39岁4个年龄组的健康人群进行抗体水平监测.结果百日咳、白喉、破伤风抗体水平保护率分别为90.58%、76.97%和84.82%.各年龄组GMRT差异有非常显著性(x2=14.9,P＜0.01),抗体水平高是6～8岁组,低的是25～39岁组.白喉和破伤风抗毒素,各年龄组间平均抗毒素差异有非常显著性(P＜0.01);2～15岁各年龄组抗体水平均较高,25～39岁组则明显较低.25岁以上的育龄妇女破伤风免疫水平,平均抗毒素为0.0082IU/ml,低于保护水平者近50%.结论三水区健康人群百日咳、白喉、破伤风抗体达到保护水平者在75%以上,百日咳、白喉、破伤风在15岁以下群体中形成较好的免疫屏障,保护水平在82%～100%之间,显示目前使用的百白破联合疫苗免疫效果良好,育龄妇女破伤风低于保护水平者近50%,提示今后应加强育龄妇女破伤风免疫水平监测,在巩固儿童接种率和接种质量的基础上,有必要制订可行的成人免疫程序.
作者：蔡文安；范子健 刊期： 2006年第07期
目的探讨云浮市流感的流行特征及掌握病毒毒株变异情况,为制定流感防控策略提供有力的科学依据.方法通过云浮市流感监测网络系统,对流感作流行病学、病原学监测,并严密监控云浮市各地流感暴发情况.结果2004～2005年监测医院上报流感样病例14 655例,占监测医院内科门诊(或儿科门诊、发热门诊)病例的3.60%,病例以少年儿童为主,占86.48%,全年均有病例发生,冬春季病例较多;两年共分离到106株流感病毒毒株,有甲3(H3N2)、甲1(H1N1)亚型和B型,病毒毒株以甲3(H3N2)为优势株;暴发疫情五起,均发生在中、小学校,四起由甲3(H3N2)亚型病毒毒株引起,一起由B型毒株引起.结论云浮市2004年和2005年的流感发病相对平静,未发生较大规模的暴发流行,病毒毒株未发现有明显的变异,建议继续加强流感监测网络建设,建立流感早期预警系统.
作者：陈伟文；岑玫喜 刊期： 2006年第07期
目的探讨肝移植术后乙肝复发的预防方法,提高乙肝相关疾病患者肝移植的疗效.方法对120例成人乙肝患者肝移植的临床资料进行回顾性研究,比较小剂量HBIG+Lamivudine与单纯应用Lamivudine预防肝移植术后乙肝复发的区别.结果Lamivudine组75例患者,12例患者发现有肝炎复发,复发率为16.7%(12/75),其中4例检测到YMDD变异株.联合用药组45例患者有3例乙肝复发,复发率为6.7%(3/45),未检测到YMDD变异株.结论小剂量HBIG+Lamivudine比单纯使用Lamivudine能更有效预防肝移植术后乙肝复发,且术后发生YMDD变异的危险性降低.
作者：巫林伟；何晓顺；朱晓峰；马毅；王东平；钱世鹍；鞠卫强；黄洁夫 刊期： 2006年第07期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
