陈兆煜；袁乔；谈智
目的:探讨WT1异构体比例改变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响.方法:逆转录获得人WT1(17AA-/KTS-)异构体全长cDNA序列,连接到PCDH1-MCS1-EF1-copGFP慢病毒质粒载体上,酶切和测序证实正确构建重组质粒,建立WT1异构体表达比例改变的单克隆细胞株.MTT法检测细胞增殖活性,形态学观察及Annexin Ⅴ检测细胞凋亡.结果:成功构建了真核表达载体PCDH1-MCS1-EF1-copGFP-WT1(17AA-/KTS-),转染HL-60细胞后,实时荧光定量RT-PCR和Western blotting显示重组质粒转染细胞中WT1(17AA-/KTS-)mRNA和蛋白水平明显高于空质粒转染组和正常对照组.重组质粒转染细胞的生长抑制率高于空质粒转染组和正常对照组,差异显著(P＜0.05).加2 μmol/L三氧化二砷(As2O3)培养48h后,形态学观察发现3组细胞都出现了凋亡形态,但重组质粒转染细胞更为明显.流式细胞术结果显示,As2O3作用24h后,重组质粒转染细胞凋亡率较空质粒转染组和正常对照组细胞升高,差异显著(P＜0.05).结论:增加外源性WT1(17AA-/KTS-)异构体的表达能抑制HL-60细胞增殖,促进As2O3诱导的细胞凋亡.
作者：徐菁；覃艳红；张翠明；乔爱秀；李灵敏；王宏伟 刊期： 2013年第05期
目的:通过观察血管紧张素转换酶2(ACE2)基因敲除(KO)小鼠止血带休克(TS)后肾组织血管紧张素转化酶/血管紧张素Ⅱ(ACE/AngⅡ)的表达及损伤程度的变化,探讨ACE2在休克后急性肾损伤中的作用.方法:小鼠双下肢用止血带结扎缺血2h、松带后再灌注4h复制TS模型.将雄性6月龄野生型(WT) C57BL/6小鼠和相同背景的ACE2 KO小鼠各12只分为4组,即WT组、WT+TS组、KO组和KO +TS组,每组6只.Western blotting测肾组织ACE蛋白的表达；ELISA法测定肾组织AngⅡ表达；利用化学比色方法测定肾组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr)含量.结果:与WT小鼠相比,WT+TS小鼠肾组织ACE/AngⅡ表达明显增加,出现肾组织氧化应激损伤和功能改变；与WT小鼠相比,KO小鼠肾组织ACE/AngⅡ表达增加,但未见明显的氧化应激损伤和功能变化；与WT+TS小鼠相比,KO +TS小鼠肾ACE/AngⅡ表达进一步增加,肾组织氧化应激和肾功能损伤明显加重.结论:ACE2基因缺失可能通过增加ACE/AngⅡ表达加重止血带休克肾的氧化应激损伤,针对ACE2靶f点的药物有可能成为防治止血带休克时急性肾损伤的策略之一.
作者：王建军；杨秀红；王银环；刘英超；王小君；张田；孙娜；张连元 刊期： 2013年第05期
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/BiP)是否促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其发生机制.方法:采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型,在4周、6周和8周分别取材.实验1:取心脏称重并测量左室壁厚度,计算左室壁厚度与心脏重量比值及心脏指数.实验2:TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况；免疫组化方法检测心肌组织中GRP78/BiP蛋白以及凋亡相关蛋白CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/生长停滞及DNA诱导蛋白153(CHOP/GADD153)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、B细胞淋巴瘤/白血病蛋白2(Bcl-2)的表达.结果:随肝硬化病程进展,左室壁厚度与心脏重量比值以及心脏指数逐渐增加,8周组增加显著(P＜0.05)；心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153和caspase-12阳性蛋白表达指数逐渐升高,8周组差异显著(P＜0.05)；NF-kB p65和Bcl-2阳性蛋白表达指数呈一致性变化,在4周组较其它组明显增高(P＜0.05)；GRP78/BiP蛋白阳性表达指数与心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153、caspase-12蛋白阳性表达指数呈显著正相关,CHOP/GADD153与NF-κB p65、Bcl-2蛋白阳性表达指数呈显著负相关.结论:GRP78高表达在内质网应激介导的肝硬化心肌病发病中可能发挥重要作用.
作者：张丽丽；庞慧；吕敏丽；张慧英；贾建桃；王黎敏；刘燕；李旭炯；李宝红 刊期： 2013年第05期
目的:探讨肥胖对不同糖耐量人群第一时相胰岛素分泌功能的影响.方法:无糖尿病家族史的正常糖耐量者(正常对照,NC)38例、2型糖尿病一级亲属正常糖耐量(NGT)者32例、糖调节受损(IGR)者67例及新诊断的2型糖尿病(T2DM)患者35例参与本试验.这4个组再分为超重/肥胖及正常体重2个亚组.各组均行静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)和口服葡萄糖-胰岛素释放试验(OG-IRT),计算第一时相胰岛素分泌功能指数(AlR3-5)及胰岛素敏感性指数(ISI),分析肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞功能及胰岛素抵抗的影响.结果:NC超重/肥胖亚组较正常体重亚组AIR3-5显著升高(P＜0.05),其余3对亚组间比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).超重/肥胖亚组ISI较正常体重亚组有降低趋势,其中IGR两亚组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),其余3对亚组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).ISI与体重指数和腰围在各组均呈负相关(P＜0.05),与AIR3-5在NC组呈负相关(P＜0.05),而在其余各组均呈正相关(均P＜0.05).结论:肥胖对不同糖耐量人群胰岛β细胞分泌功能影响各不相同.无糖尿病家族史的正常糖耐量者随着胰岛素抵抗的加重,第一时相胰岛素分泌功能代偿性增加,而2型糖尿病一级亲属正常糖耐量者、糖调节受损者和2型糖尿病患者则不能代偿性增加.
作者：何扬；王川；黎锋；程桦；严励 刊期： 2013年第05期
骨钙素(osteocalcin,OCN)作为骨细胞外基质的重要成分,现已被广泛视为一种能反映骨转换过程的特异性标志物[1].经γ-谷酰基羧化酶介导,OCN可通过依赖于维生素K和二氧化碳的γ-羧化对其所含的3个谷氨酸残基行翻译后修饰,从而增加其与游离钙离子及羟基磷灰石的亲附性并大量聚集在骨基质中,少量OCN则进入血液循环中,因此OCN也被称为骨γ-羧基谷氨酸蛋白(bone γ-carboxyglutamic acid protein,BGP) [2-3].实验表明,未羧化OCN(uncarboxylated osteocalcin,OCuc)及羧化不全OCN(undercarboxylated osteocalcin,ucOC)具有一定的生物活性,两者存在于血液循环中可参与调节血糖代谢,且整体呈现为正性调控的作用,完全羧化OCN(carboxylated osteocalcin,cOC)则处于失活状态并影响着骨质形成、吸收及矿化[4-5].
作者：戴小宇；滕华建；徐兴全；姚尧；葛启婷；蒋青 刊期： 2013年第05期
动脉粥样硬化性疾病(如冠状动脉粥样硬化和脑动脉粥样硬化)仍是全球范围内引起死亡的主要原因[1].在动脉粥样硬化的演变过程中,血管壁首先表现为动脉内膜的增厚,内膜增厚可以由于年龄和应对逐渐升高的血压导致内膜损伤而产生[2].在内膜损伤后,多种细胞包括内皮细胞、血小板和炎症细胞释放多种介质(如生长因子和细胞因子)能够激活血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和单核-巨噬细胞,引起VSMCs从血管肌层迁移到内膜层并且在内膜层增殖和产生大量基质和吸引单核巨噬细胞趋化、迁移至内膜层[3-4].内膜增厚与内膜层中VSMCs数目的增多和VSMCs相关的细胞外基质的增加有关[2].
作者：陈兆煜；袁乔；谈智 刊期： 2013年第05期
目的:通过检测肝细胞核因子4α (HNF4α)在小鼠实验性结肠炎肠组织中表达水平,探讨其在溃疡性结肠炎(UC)发病过程中的作用及意义.方法:分别采用2％和2.5％的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液诱导BALB/c小鼠急性结肠炎模型,以疾病活动指数(DAI)、组织学损伤及炎症细胞因子表达水平评价炎症严重程度.分析HNF4α表达水平与结肠炎严重程度及内皮型钙黏蛋白(E-CAD)、连接黏附分子1(JAM-1)和桥粒糖蛋白2(DSC-2)表达的相关性.结果:与正常对照组相比,DSS处理组小鼠DAI、组织学损伤及炎症因子表达显著增高(P＜0.05),结肠黏膜中HNF4α蛋白及mRNA表达显著降低(P＜0.01).相关性分析结果提示HNF4α蛋白表达与DAI及组织学损伤程度呈负相关(P＜0.01),HNF4α mRNA表达与E-CAD、JAM-1和DSC-2 mRNA表达呈正相关(P＜0.01).结论:HNF4α表达水平与实验性结肠炎严重程度及细胞间连接蛋白表达密切相关,提示HNF4α低表达可削弱肠道黏膜屏障功能,从丽促进UC的发生发展.
作者：张剑美；王娟；宋春艳；袁宗丽；陈岳祥 刊期： 2013年第05期
目的:探讨丹参素对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的防治作用及其可能机制.方法:SD大鼠经气管内滴注博莱霉素诱导肺间质纤维化,随后分别腹腔内注射丹参素15 mg·kg-1·d-1(DA组)、地塞米松1mg·kg-1·d-1(DXM组)和生理盐水2mL·d-1(BLM组)进行干预,正常对照组(NC组)气管内滴注和腹腔内注射均用生理盐水.于造模后第28天处死所有大鼠,通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色来评价治疗效果；免疫组化技术检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；实时荧光定量PCR测定转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及Smad7 mRNA的表达.结果:DA组与BLM组相比,肺泡炎症及肺纤维化程度均明显减轻,肺组织α-SMA表达明显减少,肺组织TGF-β1和Smad3 mRNA表达明显减少,Smad7 mRNA明显增多.结论:丹参素早期应用可减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1、Smad3 mRNA和促进Smad7 mRNA的表达而实现.
作者：秦静；赵铭山；李君 刊期： 2013年第05期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
