李淑华；郑晓克；王芳；李丽；孙世珺；何丹；彭燕；周建文；何琼；朱宇辛；王连唐；柯尊富
环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种成熟的、应用广泛的检测技术.目前LAMP技术已经经历了十余年的研究和发展,开发了多种新型环介导等温扩增技术.其技术改进主要体现在提高检测特异性、加快反应速度、简化样本处理、实现多重扩增以及应用于现场检测平台等方面.本文从免疫环介导等温扩增、微流体环介导等温扩增、电化学发光环介导等温扩增、分子信标指示环介导等温扩增、多重实时环介导等温扩增、结合FTA卡的环介导等温扩增等新型技术,以及环介导等温扩增技术在简单化、快速化与产物检测特异化等方面的改进进行了综述,为环介导等温扩增技术的进一步发展和实际应用提供依据.
作者：张亚平；郑志高；简保磊；朱巍巍 刊期： 2018年第02期
目的 对比分析不同方法学检测乙型肝炎病毒核心抗体(anti-HBc)的阳性率并探讨其定量检测的意义.方法 临床随机收集健康查体者的标本400例,使用化学发光法和酶联免疫吸附测定法的anti-HBc试剂盒进行检测,对比分析其检测anti-HBc的阳性率.另外,对97例临床慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者跟踪随访,收集其药物治疗前后的血清标本并检测anti-HBc浓度,根据治疗前anti-HBc的浓度水平分成高低浓度两组,分析评价抗病毒治疗后不同浓度anti-HBc分组间患者乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen,HBeAg)的浓度变化. 结果 化学发光法的两种anti-HBc试剂盒检测健康查体者的anti-HBc的阳性率均为42.0%;酶联免疫吸附测定法anti-HBc检测试剂盒检测健康查体者标本,1:30稀释后anti-HBc的阳性率为15.0%,原倍检测anti-HBc的阳性率为79.0%.高浓度组(≥9000 IU/mL)治疗后HBeAg转阴率为20.83%;anti-HBc低浓度组(<9000 IU/mL)治疗后HBeAg转阴率为2.04%.经卡方检验,anti-HBc高浓度组HBeAg转阴率比anti-HBc低浓度组HBeAg转阴率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 化学发光法测定anti-HBc的性能优于酶联免疫吸附测定法,可降低酶联免疫吸附测定法测定不稀释标本时的假阳性率和测定稀释标本时的漏检率.通过测定anti HBc的浓度水平,可预测慢性乙肝患者进行药物治疗的效果.
作者：王红翠；林健聪；吴英松；董志宁；李志雄 刊期： 2018年第02期
目的 探讨胎儿染色体非整倍体无创检测在产前诊断中的应用价值. 方法 汇总2016年1月至12月在广州中山大学附属第一医院行无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)的1207例孕妇的检测结果及生育前后追踪随访结果,回顾性分析孕妇行NIPT的指征构成比以及评价NIPT分析性能. 结果 中山大学附属第一医院临床选择NIPT的指征主要是高龄妊娠(62.55%),其次是血清学筛查异常(25.85%)和不良孕产史(17.23%).1207例标本经基因测序检出胎儿染色体非整倍体异常高风险20例,其中21-三体综合征(21-trisomy syndrome,T21)高风险8例,18-三体综合征(18-trisomy syndrome,T18)高风险7例;经染色体核型分析确诊为T21和T18的例数分别为7例和5 例.NIPT检测T21的平均Z值为6.710 ± 2.122,95%置信区间(95% confidence interval,95% CI)为4.936~8.484;检测灵敏度为100%(7/7)、特异度为99.92%(1199/1200)、漏诊率为0(0/7)、误诊率为0.08%(1/1200)、诊断准确度为99.92%(1206/1207)、阳性预测值为87.5%(7/8)、阴性预测值为100% (1199/1199).检测T18的平均Z值为6.593±2.352,95%CI为4.418~8.768;检测灵敏度为100%(5/5)、特异度为99.83%(1200/1202)、漏诊率为0(0/5)、误诊率为0.17%(2/1202)、诊断准确度为99.83% (1205/1207)、阳性预测值为71.43%(5/7)、阴性预测值为100%(1200/1200).结论 NIPT检测胎儿染色体非整倍体异常快速、安全、准确,与染色体核型分析技术具有较高的一致性,在产前诊断中具有良好的临床应用价值.
作者：张丽科；余学高；黄彬；刘集鸿 刊期： 2018年第02期
目的 探讨Ras相关结构域蛋白家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因甲基化和鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)联合检测对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者术后转移评价的价值. 方法 选择2014年1月至2015年6月在龙岩市第二医院就诊的57例NSCLC患者,测定患者术前血浆RASSF1A基因甲基化、血清SCC水平,同时检测患者术后肿瘤组织RASSF1A基因甲基化水平.出院后随访12个月,根据随访结果分为转移组和非转移组,分析两组血浆及组织RASSF1A基因甲基化阳性率、术前血清SCC水平与术后转移的关系. 结果 发生转移的患者术前血清SCC水平、术后组织和术前血浆RASSF1A甲基化阳性率均高于未发生转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05).根据肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者术后转移判定的ROC曲线,NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平符合预测NSCLC术后转移的条件.将SCC水平4.05 ng/mL、RASSF1A甲基化阳性作为危险分层界值,绘制Kaplan-Meier生存曲线显示,高危组与低危组两组术后转移比较差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平越高,发生术后转移的风险越高,检测NSCLC患者肿瘤组织RASSF1A基因甲基化、术前血清SCC水平对NSCLC患者危险分层及术后转移评估具有一定的临床价值.
作者：张洪彬；张满娥；黄文滨；卢志华 刊期： 2018年第02期
单基因遗传病(monogenic disease)指由单个或单对等位基因突变导致的疾病,一般遵循孟德尔遗传规律,传统的单基因遗传病诊断通常依赖于系谱分析、生化、影像等手段.近年来,分子诊断技术特别是高通量测序技术已经成为单基因遗传病的主要诊断手段,对单基因遗传病的明确诊断、预防和指导治疗发挥着越来越重要的作用.本文对40多年来单基因遗传病分子诊断技术的发展进行回顾,介绍其新进展,并展望其在单基因遗传病未来的研究进展.
作者：蔡奥捷；薛淑文；孔祥东 刊期： 2018年第02期
14-3-3σ是14-3-3蛋白家族的重要成员之一,在多种肿瘤中低表达.作为肿瘤抑制蛋白,14-3-3σ的低表达或活性降低可致癌细胞的过度增殖和凋亡不足,进而促进肿瘤的发生发展、侵袭、转移,甚至影响肿瘤的预后和疗效.本文主要综述和总结14-3-3σ与肿瘤临床生物学特性的关系、肿瘤细胞和患者癌组织14-3-3σ蛋白表达异常的原因、14-3-3σ对肿瘤细胞增殖和凋亡及其信号转导的影响,旨在揭示14-3-3σ的抑癌作用及细胞和分子机制,为临床肿瘤诊疗提供新的药物靶点和肿瘤标志物.
作者：谢蕴灵；罗海丹；杨惠玲 刊期： 2018年第02期
目的 探讨程序性细胞死亡分子-1(programmed death-1,PD-1)及程序性细胞死亡分子配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)表达对宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌(cervical squamous carcinoma,CSC)进展及预后的评估价值. 方法 收集CIN患者40例,根据病理诊断与高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)检测结果,分为CIN 0 HPV(-)组、CIN 0 HPV(+)组、CINⅠHPV(+)组及CINⅡ-ⅢHPV(+)组,每组10例;CSC并行根治手术患者20例,分为盆腔淋巴结非转移组和转移组,每组10例.采用荧光定量PCR方法进行高危型HPV亚型检测,免疫组化方法检测PD-1、PD-L1及细胞增殖周期调控蛋白p16INK4a表达并作对比. 结果 在CIN和CSC患者中HPV16和HPV18亚型感染率高;PD-1和PD-L1表达水平与HPV阳性、CIN级别升高及肿瘤转移呈正相关,同时伴随细胞增殖周期调控蛋白p16INK4a表达上调. 结论 PD-1和PD-L1表达水平可以作为评估CIN和宫颈鳞癌进展和预后的临床检测指标.
作者：杨雯；康佳蕊；金贻铎；王宏伟 刊期： 2018年第02期
目的 了解柳州地区沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)和淋球菌(NG)3种主要生殖系统疾病病原体的感染现状,为临床防治提供依据. 方法 对2014年1月至2016年12月来我院就诊的47618例患者样本,采用实时荧光定量PCR技术检测CT、UU及NG 3种病原体,并对检测结果进行统计分析. 结果3种病原体中,UU的阳性率高(61.50%),NG和CT的阳性率均较低(3.29%、10.90%).在不同性别中,女性患者CT、UU和NG的阳性率均高于男性患者(P<0.05).男性和女性患者均为15~20岁年龄组CT阳性率较高.男性患者各年龄组间UU阳性率差异无统计学意义,女性患者15~20岁年龄组UU阳性率较高.男性高NG阳性感染者主要集中于21~40岁年龄段,女性患者51岁以上年龄组NG阳性率较高.在女性患者中,诊断为生殖系统炎症或不孕症的患者CT、UU、NG的阳性检出率均高于整体的平均检出率,体检、婚检女性人群3种病原体阳性检出率均接近于平均检出率.此外,CT在夏季的阳性检出率高,而UU和NG各季节间比较差异无统计学意义. 结论 CT、UU、NG感染均与生殖系统疾病和不孕症密切相关,应注意个人防护及重视体检,积极防治.
作者：王敬仁；陈杏园；罗世强；许泽辉；蔡鹏飞；覃肖；唐宁 刊期： 2018年第02期
目的 依托广东省临床病理质量控制中心分子病理组对广东省内医院开展的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法检测HER-2基因进行室间质控,全面了解HER-2基因检测的标准操作程序(standard operating procedure,SOP)的关键节点,以更好地指导乳腺癌靶向治疗.方法 选择HER-2不同阳性模式的石蜡切片作为质控片,同一表达模式病例采取连续切片,首尾2张各做FISH检测以确保质控片质量的一致性.各参加实验室采用各自的荧光原位杂交法,根据实际情况选择相应的探针和消化酶等.质控结果由质控小组成员采取双盲形式进行结果判读. 结果 从我省参与HER-2基因检测质控的26家实验室汇报的结果来看,各实验室使用的试剂均为国家食品药品监督管理总局批准的试剂,3种试剂探针本身对质控结果的影响无明显差异;个别实验室仍存在一些细节操作及判读的问题,其中标本①结果吻合率96.15%,一家单位误判为簇状扩增,标本②结果吻合率84.62%,标本③结果吻合率100%;消化液使用了胃蛋白酶和蛋白酶K,2种酶的消化效果无特别明显差异,对质控片进行镜下观察发现有2家单位4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)通道下轮廓显示不清,提示存在消化过度的问题. 结论 各实验室应严格按照各实验室操作流程,保证染色过程中的温度、缓冲液及清洗液的浓度和pH值、探针的配置等参数准确.只有通过不断健全室间质控系统,科学设计基础与临床实验流程步骤和评价标准,配合孰知各项实验内容的检测团队,定期进行监查活动,才能确保提高我省HER-2检测的准确性和一致性.
作者：李淑华；郑晓克；王芳；李丽；孙世珺；何丹；彭燕；周建文；何琼；朱宇辛；王连唐；柯尊富 刊期： 2018年第02期
目的 回顾性分析γ-干扰素释放实验(interferon-gamma release assays,IGRA)在结核病诊断中的应用价值.方法 采用结核IGRA(Tuberculosis-IGRA,TB-IGRA)法分别检测111例结核病患者(包括97例肺结核和14例肺外结核)和98例非结核病患者的γ-干扰素释放量,并以临床诊断为标准,评价TB-IGRA诊断结核病(包含涂阴肺结核和肺外结核)的敏感度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、诊断准确度;同时对TB-DNA、TB-IgG、结核杆菌培养实验间的一致性进行评价. 结果TB-IGRA诊断结核病的敏感度为89.2%,显著高于TB-IgG(35.6%)、结核杆菌培养(40.6%)及结核涂片实验(18.3%)(P均＜0.05);而TB-IGRA诊断结核病的特异度(76.5%)低于TB-IgG(96%)、结核杆菌培养(95%)及结核涂片实验(100%)(P均 ＜0.05);TB-IGRA法诊断涂阴肺结核的敏感度(89.6%)高于TB-IgG(32.9%)及结核杆菌培养法(33.3%),而特异度(76.4%)低于TB-IgG(97.9%)及结核杆菌培养法(97.2%)(P均＜0.05);且TB-IGRA与TB-IgG、结核杆菌培养实验的诊断结果有差异,且差异有统计学意义(P均＜0.05);TB-IGRA与TB-DNA诊断结果的差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 TB-IGRA具有很高的敏感度,阴性预测值显著高于TB-IgG、结核杆菌培养和结核涂片实验,在结核病的诊断方面具有很高的阴性预测价值.
作者：王甲甲；唐义斌；张玲英；洪华；谭泰昌；王智斌 刊期： 2018年第02期
近年研究发现,多种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)参与了生物学过程且发挥了重要的调控功能,如胚胎发育、细胞周期调控、干细胞多能性分化、免疫监视等,其异常调节可导致各类疾病包括肿瘤的发生发展,对于多种恶性肿瘤的早期诊断、治疗和预后判断有非常重要的价值.但到目前为止,lncRNA在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的研究报道还较少,本文将结合国内外新报道对与OSCC相关的lncRNAs的表达及意义和调控机制作一综述,为OSCC的基因诊断和治疗提供新的思路.
作者：黄佳欣；邵婷如；陈跃川；吕晓智 刊期： 2018年第02期
细菌非编码小RNA(sRNA)是长度约为50~500个核苷酸的RNA分子,其编码基因位于基因间区域,在细菌基因组中可被转录但不被翻译为蛋白质.随着生物信息学和RNA测序技术的发展,sRNA功能受到广泛关注.在不断变化的环境中,细菌遇到各种各样的生存压力,sRNA通过感应环境变化调节相应基因的表达,在细菌适应环境的过程中发挥了重要作用.本文对环境胁迫下细菌sRNA的表达变化和其对基因的表达调控进行综述,揭示sRNA对细菌基因转录后调控、生物适应性进化等生命过程的重要意义.
作者：何宇婷；陈茶；黄彬 刊期： 2018年第02期
分子诊断与治疗杂志
主管:中山大学
主办：中山大学
