张金艳;李贻奎;李峰杰;李少春;赵乐;郝伟;翁维良
目的 考察甘草提取物对核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路及其下游基因尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)、γ谷氨酰半胱胺酸合成酶(γGCS)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响.方法 12只小鼠随机分为对照组和甘草提取物组(150 mg· kg-1).给药后24 h处死取肝组织,采用qRT-PCR技术检测小鼠肝中Nrf2、UGT1A1、γ GCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达;Western blot技术测定Nrf2蛋白的表达.结果 与对照组比较,甘草提取物显著诱导了小鼠肝脏中Nrf2 mRNA和蛋白的表达,同时Nrf2下游基因UGT1A1、γGCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达也显著提高(均P<0.05).结论 甘草提取物诱导了小鼠肝脏中Ⅱ相解毒酶UGT1A1、γ GCS及转运体MRP1、MRP2,其机制可能与上调Nrf2转录因子的表达,激活Nrf2细胞信号转导通路有关.
作者:龚慧;颜苗;李焕德;江沛;李瑞丰;孙莉 刊期: 2014年第02期
目的 建立同时测定冠心Ⅴ号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA含量的HPLC方法.方法 采用高效液相色谱法,以甲醇-0.5%醋酸水溶液梯度洗脱,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6×250 mm,5μm),流速为1.0 mL· min-1,检测波长为281 nm,柱温为35℃.结果 丹参素和丹参酮ⅡA分别在0.1~0.8 μg和0.02~0.16 μg范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.17%和99.35%.结论 本方法简便可行、重复性好,可用于同时测定冠心Ⅴ号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA的含量.
作者:周芙琼;高运军;夏崇才;顾宁 刊期: 2014年第02期
目的 观察清热除痹方对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的抗炎消肿作用及对白细胞介素-1 β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的影响.方法 应用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型.实验分清热除痹方高、中、低剂量组(22.4,11.2,5.6 g·kg-1),美洛昔康组(0.746 g·kg-1)、模型组及空白对照组.实验第11天开始给药,连续10 d.分别于实验第10天、第14天、第18天、第20天,测量关节肿胀程度及关节炎指数.末次给药24 h后,采用酶联免疫试验(ELISA)检测大鼠关节滑膜匀浆中IL-1 β、TNF-α的含量.结果 清热除痹方各组在实验第18天开始大鼠足肿胀度明显低于模型组(P<0.05);第14天开始关节炎指数明显低于模型组(P<0.05);与模型组相比,清热除痹方各组IL-1 β、TNF-α含量明显下降(P<0.05),且各实验结果均有一定的剂量依赖性.结论 清热除痹方可明显抑制模型大鼠足肿胀度及关节炎指数,具有一定抗炎消肿作用.降低关节滑膜匀浆中IL-1 β、TNF-α的含量可能是清热除痹方抗炎消肿作用的机理之一.
作者:李静;刘颖琬;孙维峰;王静;朱明敏 刊期: 2014年第02期
流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性上呼吸道传染病,可造成急性肺损伤及严重并发症.研究表明,过度免疫应答是引起病理损伤的主要原因之一.本文对甲型流感病毒感染过程中引发的病理性肺损伤的免疫学机制进行综述,为深入了解流感病毒感染防御机制,寻求新的治疗靶点提供参考.
作者:邵敏明;张奉学 刊期: 2014年第02期
目的 鉴定白头翁中齐墩果酸3-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(B7)在大鼠粪便的代谢产物.方法 采用超高效液相色谱-三重四级杆线性离子肼复合质谱法(LC-LITMS/MS)检测大鼠灌胃B7后粪便中的代谢产物.使用Waters-SunFire C18柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离,并与线性离子阱联用.选择增强型母离子扫描(EMS)和预测离子对扫描模式(pMRM)进行质谱扫描,采用Analyst 1.5软件进行数据处理、鉴定代谢产物的化学结构.结果 在大鼠粪便检测到原型M0(B7)及M1(B7去甲基葡萄糖醛酸化产物)、M2(齐墩果酸-3-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M3(鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M4(齐墩果酸-3-α-L-吡喃阿拉伯糖)和M5(齐墩果酸)等5个代谢产物.结论 B7在大鼠体内以脱糖代谢和葡萄糖醛酸化代谢为主.
作者:欧阳辉;郭宜城;何明珍;梁起栋;饶小勇;简晖;冯育林;杨世林 刊期: 2014年第02期
目的 观察雷公藤内酯醇对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的抗炎作用.方法 采用完全弗氏佐剂复制AA大鼠模型,并选取模型复制成功的大鼠随机分为5组:即正常对照组,模型组,雷公藤内酯醇低、中、高剂量组,分别给予生理盐水和100,200,300μg·kg-1的雷公藤内酯醇,灌胃给药14 d.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠白介素1 β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及魏氏法检测血沉水平,观察踝关节病理变化.结果 与模型组比较,雷公藤内酯醇组各剂量组大鼠血清IL-1 β、TNF-α和血沉水平明显降低(P< 0.05,P< 0.01),下降水平呈明显的剂量相关性,其中雷公藤内酯醇高剂量组(300 μg·kg-1)降低显著.结论 雷公藤内酯醇对AA具有良好治疗作用,作用机制与其下调AA大鼠外周血中1L-1 β、TNF-d水平有关.
作者:谈发明;刘颜;陈茂华;胡卫 刊期: 2014年第02期
目的 研究温阳药对糖尿病前期大鼠的降糖作用机制.方法 制备高糖高脂饮食诱导糖尿病前期肥胖大鼠模型,动物随机分为8组:正常对照组、模型组、阳性对照药(二甲双胍)组、阴性复方组(无温阳及补肾药对)、补肾阳药对组、补肾阳复方组、温阳药对组、温阳复方组.模型复制后开始给药,每天1次,连续8周.实验结束后采用Western bolt法检测肝脏葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、肌肉葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达水平.结果 与模型组比较,温阳复方组能减轻大鼠体质量、降低肥胖指数(Lee's Index)、抑制血糖升高(P<0.01,P<0.05),还能明显上调大鼠肝脏GLUT2及骨骼肌GLUT4的表达水平(P<0.01).结论 温阳药的降糖作用可能与改善GLUT2及GLUT4的表达抑制有关.
作者:赵亚;谢芳一;陈长青;梁楚燕;侯少贞;吴凤玲;赖小平 刊期: 2014年第02期
目的 研究黄芩素对子宫颈癌Hela细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨黄芩素抗肿瘤的分子机制.方法 采用CCK-8法检测黄芩素对Hela细胞增殖的抑制作用,real-time PCR法和Western blot法检测黄芩素对Hela细胞EGFR表达的影响.结果 黄芩素可在体外抑制Hela细胞的增殖,并对EGFR的表达有显著的抑制作用,呈剂量依赖性.结论 黄芩素可能是通过EGFR通路抑制子宫颈癌Hela细胞的增殖.
作者:邹颖;迟宏罡;李涛;杨敏 刊期: 2014年第02期
目的 研制单剂量包装不合防腐剂的野菊花滴眼液,并拟定该制剂的质量控制方法.方法 采用羟丙甲纤维素为增稠剂,按处方制备单剂量包装不含防腐剂的野菊花滴眼液,用高效液相色谱法测定野菊花中有效成分绿原酸和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸的含量.结果 该制剂制备工艺简单,可以过滤除菌,并无菌分装至每支0.4 mL单剂量包装的聚丙烯药用滴眼剂瓶中;绿原酸在20.020~45.045 μg/mL(r=0.9986)浓度范围内、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在50.0~100.0 μg· mL-1(r=0.9990)浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.37%和99.92%,RSD分别为0.72%和0.69%,该色谱方法精密度高,耐用性好,对照品溶液和供试品溶液可以在24 h内保持稳定.结论 该制剂含量测定方法简便、准确,质量稳定,是一种较理想的眼用制剂,可用于干眼等眼部疾病的治疗.
作者:姚向超;王延东;黄楚龙 刊期: 2014年第02期
目的 研究芪龙头痛颗粒(Qilong Toutong granule,QLTT)的镇静作用、活血化瘀功效及其抗偏头痛机制.方法 实验动物随机分为6组:即正常对照组,正天丸组,模型组及QLTT高、中、低剂量组.72只昆明小鼠灌胃给药3d后,用自主活动实验和协同催眠实验观察QLTT的镇静催眠作用.60只SD大鼠灌胃给药7d后,皮下注射盐酸肾上腺素注射液2次,期间冰水浸泡5 min复制急性血瘀模型,禁食12 h后取血检测血黏度.60只昆明小鼠经利血平皮下注射9d复制低5-羟色胺(5-HT)偏头痛模型,从模型复制第3天起,给予相应药物进行灌胃,末次灌胃1h后,取血与脑组织进行凝血时间和单胺类递质的测定.结果 QLTT高、中、低剂量组与正天丸组自主活动次数减少,提示具有明显的镇静作用(P< 0.05,P<0.01),但无催眠作用;可显著改善血瘀模型鼠的血液黏度(P<0.01);增加脑组织5-HT、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)的含量(P< 0.05,P< 0.01);QLTT高、中剂量组和正天丸组能显著延长低5-HT偏头痛模型小鼠的凝血时间(P< 0.01);QLTT中剂量组和正天丸组可提高血浆5-HT水平(P<0.05).结论 QLTT具有明显的镇静作用和活血化瘀功效,可能是通过提高血浆和脑组织的5-HT、NE和DA的含量,抑制三叉颈复合体神经元的活化,从而减轻偏头痛的疼痛程度.
作者:吴小芳;张梅奎;黄怀 刊期: 2014年第02期
目的 考察不同产地蜂胶提取物样品的红外指纹图谱差异,构建蜂胶提取物的红外指纹图谱.方法 采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)建立不同产地蜂胶提取物红外指纹图谱,应用OMNIC软件对数据进行预处理,Matlab7.0比较各样品的相似度,SPSS17.0统计软件进行聚类分析.结果 FTIR图谱在690~1760 cm-1波数范围内吸收峰差异较大,可作为蜂胶提取物的指纹特征,红外指纹图谱结合聚类分析的方法,可作为蜂胶快速鉴别的方法.结论 该方法简便、稳定,可用于蜂胶的鉴别和质量评价.
作者:祁龙凯;林励;邓韬;肖凤霞;谭东山 刊期: 2014年第02期
目的 观察加味参附颗粒对慢性心力衰竭大鼠的血流动力学、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响.方法 雄性SD大鼠50只,随机分为5组:正常对照组,模型组,曲美他嗪组及加味参附颗粒高、低剂量组,每组各10只.采用腹主动脉缩窄法建立心衰模型,预处理8周后,测定心衰大鼠心率、左室内大上升和下降速率(±dp/dtmax)、血压、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性.结果 加味参附颗粒高、低剂量组心率、血压均低于模型组(P<0.05,P< 0.01),在改善心率方面优于曲美他嗪组(P<0.05).加味参附颗粒高、低剂量组±dp/dtmax、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性均高于模型组(P<0.05);与曲美他嗪组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 加味参附颗粒可能通过改善心肌能量代谢,进而改善心衰大鼠血流动力学,提高心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性.
作者:史振羽;靳利利;袁丁;姚楠;王清海;荣尚一 刊期: 2014年第02期
目的 采用体外炎症模型观察小叶榕叶水提物及其不同极性萃取部位对炎症介质一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 采用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞,建立体外炎症模型.采用噻唑蓝(MTT)法检测小叶榕叶水提物及其不同萃取部位对RAW264.7巨噬细胞的毒性作用;Griess法检测培养液中NO含量;采用酶联免疫试验(ELISA)法检测培养液中TNF-α的含量.结果 LPS刺激RAW264.7巨噬细胞后,培养液中NO和TNF-α含量显著增加(P<0.01);小叶榕叶水提物及其不同萃取部位对NO和TNF-α的释放有不同程度的抑制作用,其中水提物高、中、低浓度组对NO的抑制率分别为17.0%,30.0%,33.0%;乙酸乙酯部位中、低浓度组对NO的抑制率分别为40.0%、27.0%;水相部分低浓度组对NO的抑制率为37.0%;水提物中浓度组和乙酸乙酯部位高浓度组对TNF-α的抑制率分别为58.0%,43.5%,与LPS组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 小叶榕叶可能通过抑制NO和TNF-α释放而发挥抗炎作用,其中乙酸乙酯部位、水相部分是小叶榕叶的主要抗炎活性成分.
作者:黄洋;李康;邵慧凯;刘盛权 刊期: 2014年第02期
目的 观察毛冬青对SD大鼠慢性心力衰竭(CHF)炎症相关因子及心功能的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为模型组和假手术组,模型组50只,假手术组10只.结扎腹主动脉建立CHF模型,将模型复制成功的大鼠随机分为4组:毛冬青低剂量组,毛冬青高剂量组,卡托普利组和模型组.分别给予毛冬青、卡托普利或生理盐水灌胃,2周后行经胸超声心动图检测,测定血清白介素-1β (IL-1β)和核因子κB(NF-κB).结果 毛冬青高、低剂量组CHF大鼠血清IL-1β、NF-κB水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).心脏彩超显示:毛冬青高、低剂量组大鼠提高射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 毛冬青可以改善慢性心力衰竭的炎症状态和心功能.
作者:郑惠萍;张双伟;陈洁;李小兵;杨忠奇;冼绍祥 刊期: 2014年第02期
目的 探讨白藜芦醇诱导鼻咽癌CNE-1细胞凋亡及其分子机制.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;活细胞染色法(PI)流式细胞仪分析细胞周期和PI-AnnexinⅤ双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫印迹检测蛋白表达水平.结果 MTT结果表明白藜芦醇呈浓度和时间依赖性抑制鼻咽癌CNE-1细胞活力,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P< 0.01); PI单染流式细胞仪分析表明白藜芦醇引起S期的CNE-1比例明显增多,相应免疫印迹结果显示细胞周期蛋白Cyclin E和Cyclin A显著下调,呈药物浓度依赖;PI-Annexin Ⅴ双染流式细胞仪分析表明白藜芦醇呈药物浓度依赖诱导CNE-1细胞凋亡;免疫印迹分析显示抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,而促凋亡蛋白Bax表达上调.结论 白藜芦醇能抑制鼻咽癌CNE-1细胞的增殖,使其阻滞在S期,并可能通过线粒体介导的凋亡通路诱导其凋亡.
作者:赵青;谭宇蕙;吴映雅;张广献;杜标炎;肖建勇 刊期: 2014年第02期
目的 完善溪黄草的定性定量方法,对药品质量进行有效控制.方法 采用薄层鉴别法,对溪黄草中迷迭香酸、齐墩果酸和芦丁进行鉴别.采用高效液相色谱(HPLC法)测定迷迭香酸的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.1%磷酸溶液(30∶70)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为330 nm;柱温为25℃;理论塔板数按迷迭香酸峰计算不低于4000.结果 TLC斑点清晰,分离度高,方法耐用性好;HPLC方法简便、专属性强,迷迭香酸线性范围为1.2 μg~ 12 μg(r=0.9999),平均回收率为98.37%,RSD为1.20%(n=6).结论 所建立的定性、定量方法可用于溪黄草的质量控制.
作者:王婴;廖远忠;林玉婷;林伟鑫;王岩 刊期: 2014年第02期
目的 探讨虫草多糖联合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对四氯化碳(CCl4)诱导的肝硬化大鼠MMP-13和TIMP-1表达的影响.方法 取SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、MSCs移植组、虫草多糖组及MSCs移植+虫草多糖组,除正常对照组外所有大鼠皮下注射40%CCl4橄榄油溶液12周制备大鼠肝硬化模型,MSCs移植组与MSCs移植+虫草多糖组注入绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的MSCs;虫草多糖组、MSCs移植+虫草多糖组在移植后24 h给予虫草多糖悬浊液灌胃,正常对照组、模型组、MSCs移植组给予等量生理盐水灌胃,每天1次.4周末处死大鼠,取肝脏,行冰冻切片荧光检测、肝组织Masson染色、免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达.结果 各治疗组均能减轻肝硬化组织病理改变,减少胶原沉积;与模型组比较,各治疗组MMP-13的表达显著升高(P<0.05),TIMP1表达下降(P< 0.05);MSCs移植+虫草多糖组与MSCs移植组和虫草多糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MSCs能迁移定植于受损肝脏,虫草多糖联合MSCs移植能降低肝组织TIMP-1表达,进一步增强MMP-13表达,明显促进胶原降解,减少胶原沉积.
作者:杨谕晨;宋雅芳;张久梅;刘江凯;胡齐;胡芳玉 刊期: 2014年第02期
目的 探讨六味地黄丸主要入血成分对自杀基因系统(HSV-tk/GCV)杀伤黑色素瘤B16细胞的增效作用及作用机制.方法 采用MTT法检测六味地黄丸主要入血成分丹皮酚、马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸和獐牙菜苷5种化合物及其混合组分对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的影响;入血成分混合组分处理脾淋巴细胞后培养上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的影响;荧光显微镜观察及流式细胞术结合荧光示踪法分析含药淋巴细胞上清对细胞间缝隙连接通讯(GJIC)功能的影响及Western blot分析缝隙连接蛋白(Cx43)表达;MTT法检测含药淋巴细胞上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的增敏作用.结果 HSV-tk/GCV联合丹皮酚、马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸和獐牙菜苷5种化合物及5种化合物的混合组分,均未显示其对自杀基因的杀伤有直接增效作用;而混合组分处理脾淋巴细胞后培养上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞具有协同增效作用,并呈一定的量效关系.含药淋巴上清可明显促进Cx43表达,改善B16细胞间缝隙通讯功能.含药淋巴上清对HSV-tk/GCV的B16细胞杀伤敏感性则无明显影响.结论 六味地黄丸主要入血成分可能刺激脾淋巴细胞产生某些活性物质,并对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞起增效作用,这些淋巴细胞产生的免疫活性物质可能才是六味地黄丸对肿瘤自杀基因疗法增效作用的药效物质基础;其增效机制可能与改善B16细胞间GJIC相关.
作者:张广献;王苏萍;曾玲;谭宇蕙;吴映雅;杜标炎 刊期: 2014年第02期
易损斑块的稳定性是继发性血栓是否形成的主要原因,及时识别易损斑块并进行有效的治疗对预防急性冠状动脉综合症(ACS)具有重要意义.中药组分及有效成分对影响动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)易损斑块形成的相关信号通路的作用研究已经取得了一定的成果,对Toll-like receptor4 (TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、酪氨酸蛋白激酶信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)等信号通路具有一定的干预作用,并已从分子水平阐释了中药组分及有效成分稳定As易损斑块的作用机制.
作者:李晓;刘剑刚;刘龙涛;李浩;郭刚 刊期: 2014年第02期
目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定灵芝孢子油中1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯含量的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm× 4.6 mm,5μm)柱,流动相:乙腈-异丙醇(体积比为51∶49),流速:1.0 mL·min-1,ELSD漂移管温度:40℃,载气流速:2.4 L·min-1.结果 1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯在2.7~27.0 μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为99.3%,RSD值为2.3%.结论 该方法简便、准确、分离度好,可用于灵芝孢子油中1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯的含量测定.
作者:万明珠;王腾华;张丽媛;任灵芝;谭敏;高幼衡 刊期: 2014年第02期