吴小芳;张梅奎;黄怀
目的 探讨虫草多糖联合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对四氯化碳(CCl4)诱导的肝硬化大鼠MMP-13和TIMP-1表达的影响.方法 取SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、MSCs移植组、虫草多糖组及MSCs移植+虫草多糖组,除正常对照组外所有大鼠皮下注射40%CCl4橄榄油溶液12周制备大鼠肝硬化模型,MSCs移植组与MSCs移植+虫草多糖组注入绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记的MSCs;虫草多糖组、MSCs移植+虫草多糖组在移植后24 h给予虫草多糖悬浊液灌胃,正常对照组、模型组、MSCs移植组给予等量生理盐水灌胃,每天1次.4周末处死大鼠,取肝脏,行冰冻切片荧光检测、肝组织Masson染色、免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达.结果 各治疗组均能减轻肝硬化组织病理改变,减少胶原沉积;与模型组比较,各治疗组MMP-13的表达显著升高(P<0.05),TIMP1表达下降(P< 0.05);MSCs移植+虫草多糖组与MSCs移植组和虫草多糖组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MSCs能迁移定植于受损肝脏,虫草多糖联合MSCs移植能降低肝组织TIMP-1表达,进一步增强MMP-13表达,明显促进胶原降解,减少胶原沉积.
作者:杨谕晨;宋雅芳;张久梅;刘江凯;胡齐;胡芳玉 刊期: 2014年第02期
目的 建立实验性高脂糖尿病小鼠模型,分析桑白皮不同部位对其糖、脂质代谢以及股骨的影响.方法 将70只雄性C57BL/6N小鼠根据体质量、血糖水平随机分为7组:即正常对照组、模型组、阳性药(二甲双胍)组、桑白皮总黄酮(MTF)组、桑白皮总生物碱(MTA)组、桑白皮总多糖(MTP)组、桑白皮药材提取物(ME)组,每组10只.高脂饲料(HFD)喂养,第7周测定小鼠血糖、血脂水平;第8周,用高脂饲料结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病小鼠模型;第9周,测定小鼠血糖、血脂水平,第10周小鼠不禁食,乙醚麻醉,摘眼球取血后解剖取各脏器以及股骨,称质量并测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平,股骨做病理切片.结果 与正常对照组比较,模型组的血糖、血脂指标明显升高(P<0.01);与模型组比较,MTF组、MTA组均能明显控制高脂饲料喂养的小鼠体质量(P<0.05,P< 0.01),其中MTF组能显著降低糖尿病小鼠FBG,TC,TG,LDL-C水平(P< 0.05,P< 0.01); MTA组能明显降低小鼠FBG、TC、TG水平(P< 0.05);MTP组能明显抑制糖尿病小鼠TC、TG水平(P<0.05);MTF组和MTA组均能明显降低糖尿病小鼠尿酸(UA)和总胆红素(TBIL)水平(P<0.05).病理切片表明正常对照组小鼠股骨未见异常;模型组小鼠股骨有不同程度的变形并且伴有骨密度的改变;MTF组小鼠6例中有3例不同程度病变.结论 桑白皮各部位均具有一定的降糖作用,其中MTF对糖尿病小鼠的各项指标改善为显著,同时对糖尿病导致的骨质疏松以及股骨头病变有抑制作用;其次是MTA,对FBG、TC、TG指标的改善作用也非常明显,MTP对指标的改善作用没有MTF和MTA显著,主要改善小鼠TG、TC水平.而ME对小鼠的各项指标均无明显影响,可能与给药剂量和提取方法有关.
作者:张静;高英;罗娇艳;荣向路;张娟;李艳;李卫民 刊期: 2014年第02期
目的 观察清热除痹方对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠的抗炎消肿作用及对白细胞介素-1 β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的影响.方法 应用弗氏完全佐剂诱导大鼠AA模型.实验分清热除痹方高、中、低剂量组(22.4,11.2,5.6 g·kg-1),美洛昔康组(0.746 g·kg-1)、模型组及空白对照组.实验第11天开始给药,连续10 d.分别于实验第10天、第14天、第18天、第20天,测量关节肿胀程度及关节炎指数.末次给药24 h后,采用酶联免疫试验(ELISA)检测大鼠关节滑膜匀浆中IL-1 β、TNF-α的含量.结果 清热除痹方各组在实验第18天开始大鼠足肿胀度明显低于模型组(P<0.05);第14天开始关节炎指数明显低于模型组(P<0.05);与模型组相比,清热除痹方各组IL-1 β、TNF-α含量明显下降(P<0.05),且各实验结果均有一定的剂量依赖性.结论 清热除痹方可明显抑制模型大鼠足肿胀度及关节炎指数,具有一定抗炎消肿作用.降低关节滑膜匀浆中IL-1 β、TNF-α的含量可能是清热除痹方抗炎消肿作用的机理之一.
作者:李静;刘颖琬;孙维峰;王静;朱明敏 刊期: 2014年第02期
目的 研究黄芩素对子宫颈癌Hela细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨黄芩素抗肿瘤的分子机制.方法 采用CCK-8法检测黄芩素对Hela细胞增殖的抑制作用,real-time PCR法和Western blot法检测黄芩素对Hela细胞EGFR表达的影响.结果 黄芩素可在体外抑制Hela细胞的增殖,并对EGFR的表达有显著的抑制作用,呈剂量依赖性.结论 黄芩素可能是通过EGFR通路抑制子宫颈癌Hela细胞的增殖.
作者:邹颖;迟宏罡;李涛;杨敏 刊期: 2014年第02期
目的 观察加味参附颗粒对慢性心力衰竭大鼠的血流动力学、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响.方法 雄性SD大鼠50只,随机分为5组:正常对照组,模型组,曲美他嗪组及加味参附颗粒高、低剂量组,每组各10只.采用腹主动脉缩窄法建立心衰模型,预处理8周后,测定心衰大鼠心率、左室内大上升和下降速率(±dp/dtmax)、血压、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性.结果 加味参附颗粒高、低剂量组心率、血压均低于模型组(P<0.05,P< 0.01),在改善心率方面优于曲美他嗪组(P<0.05).加味参附颗粒高、低剂量组±dp/dtmax、心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性均高于模型组(P<0.05);与曲美他嗪组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 加味参附颗粒可能通过改善心肌能量代谢,进而改善心衰大鼠血流动力学,提高心肌线粒体蛋白浓度及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性.
作者:史振羽;靳利利;袁丁;姚楠;王清海;荣尚一 刊期: 2014年第02期
目的 研究温阳药对糖尿病前期大鼠的降糖作用机制.方法 制备高糖高脂饮食诱导糖尿病前期肥胖大鼠模型,动物随机分为8组:正常对照组、模型组、阳性对照药(二甲双胍)组、阴性复方组(无温阳及补肾药对)、补肾阳药对组、补肾阳复方组、温阳药对组、温阳复方组.模型复制后开始给药,每天1次,连续8周.实验结束后采用Western bolt法检测肝脏葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、肌肉葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达水平.结果 与模型组比较,温阳复方组能减轻大鼠体质量、降低肥胖指数(Lee's Index)、抑制血糖升高(P<0.01,P<0.05),还能明显上调大鼠肝脏GLUT2及骨骼肌GLUT4的表达水平(P<0.01).结论 温阳药的降糖作用可能与改善GLUT2及GLUT4的表达抑制有关.
作者:赵亚;谢芳一;陈长青;梁楚燕;侯少贞;吴凤玲;赖小平 刊期: 2014年第02期
目的 完善溪黄草的定性定量方法,对药品质量进行有效控制.方法 采用薄层鉴别法,对溪黄草中迷迭香酸、齐墩果酸和芦丁进行鉴别.采用高效液相色谱(HPLC法)测定迷迭香酸的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.1%磷酸溶液(30∶70)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为330 nm;柱温为25℃;理论塔板数按迷迭香酸峰计算不低于4000.结果 TLC斑点清晰,分离度高,方法耐用性好;HPLC方法简便、专属性强,迷迭香酸线性范围为1.2 μg~ 12 μg(r=0.9999),平均回收率为98.37%,RSD为1.20%(n=6).结论 所建立的定性、定量方法可用于溪黄草的质量控制.
作者:王婴;廖远忠;林玉婷;林伟鑫;王岩 刊期: 2014年第02期
目的 研制单剂量包装不合防腐剂的野菊花滴眼液,并拟定该制剂的质量控制方法.方法 采用羟丙甲纤维素为增稠剂,按处方制备单剂量包装不含防腐剂的野菊花滴眼液,用高效液相色谱法测定野菊花中有效成分绿原酸和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸的含量.结果 该制剂制备工艺简单,可以过滤除菌,并无菌分装至每支0.4 mL单剂量包装的聚丙烯药用滴眼剂瓶中;绿原酸在20.020~45.045 μg/mL(r=0.9986)浓度范围内、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸在50.0~100.0 μg· mL-1(r=0.9990)浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.37%和99.92%,RSD分别为0.72%和0.69%,该色谱方法精密度高,耐用性好,对照品溶液和供试品溶液可以在24 h内保持稳定.结论 该制剂含量测定方法简便、准确,质量稳定,是一种较理想的眼用制剂,可用于干眼等眼部疾病的治疗.
作者:姚向超;王延东;黄楚龙 刊期: 2014年第02期
目的 研究没食子酸(gallic acid,GA)体外诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其作用机制.方法 体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,噻唑蓝(MTF)法观察细胞增殖;Hoechst-33258、AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法研究凋亡抑制基因Survivin mRNA的变化.结果 6.25 ~ 50 μmol· L-1 GA可抑制SMMC-7721细胞的生长,并呈剂量依赖性;不同剂量的GA作用48 h后,SMMC-7721细胞出现明显的凋亡形态,细胞凋亡率有显著的剂量依赖性.RT-PCR法检测结果显示,GA能明显抑制肝癌细胞中Survivin mRNA的表达.结论 GA可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,这可能与下调凋亡抑制基因Survivin有关.
作者:李沐涵;王明艳;陈海彬;周红光;李文婷;吴勉华 刊期: 2014年第02期
目的 考察甘草提取物对核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路及其下游基因尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)、γ谷氨酰半胱胺酸合成酶(γGCS)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响.方法 12只小鼠随机分为对照组和甘草提取物组(150 mg· kg-1).给药后24 h处死取肝组织,采用qRT-PCR技术检测小鼠肝中Nrf2、UGT1A1、γ GCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达;Western blot技术测定Nrf2蛋白的表达.结果 与对照组比较,甘草提取物显著诱导了小鼠肝脏中Nrf2 mRNA和蛋白的表达,同时Nrf2下游基因UGT1A1、γGCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达也显著提高(均P<0.05).结论 甘草提取物诱导了小鼠肝脏中Ⅱ相解毒酶UGT1A1、γ GCS及转运体MRP1、MRP2,其机制可能与上调Nrf2转录因子的表达,激活Nrf2细胞信号转导通路有关.
作者:龚慧;颜苗;李焕德;江沛;李瑞丰;孙莉 刊期: 2014年第02期
流行性感冒是由流感病毒引起的一种急性上呼吸道传染病,可造成急性肺损伤及严重并发症.研究表明,过度免疫应答是引起病理损伤的主要原因之一.本文对甲型流感病毒感染过程中引发的病理性肺损伤的免疫学机制进行综述,为深入了解流感病毒感染防御机制,寻求新的治疗靶点提供参考.
作者:邵敏明;张奉学 刊期: 2014年第02期
目的 观察黄芪甲苷(AS)对缺血模型诱导的乳鼠心肌细胞自噬的影响,探讨黄芪甲苷的心肌保护作用及机制.方法 建立乳鼠心肌缺血的细胞损伤模型,采用分子生物学及免疫细胞化学法观察心肌细胞在缺血模型及黄芪甲苷处理后的自噬与细胞损伤变化.结果 心肌细胞的自体吞噬程序会被缺血刺激激活,缺血可致心肌细胞死亡.黄芪甲苷可明显恢复缺血处理诱导的心肌细胞损伤,10,20 μmol· L-1的黄芪甲苷分别使细胞活性恢复至80%及85%(均P<0.05),使凋亡细胞数目降低至正常对照组的2.6倍及1.8倍(均P<0.05),且呈现出剂量依赖效应.同时,黄芪甲苷可促进自噬蛋白(LC3)的表达;10,20 μmol· L-1的黄芪甲苷分别使细胞LC3升高至正常对照组的1.5倍及1.7倍(均P< 0.05).结论 黄芪甲苷可恢复缺血降低的心肌细胞活性,降低缺血诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与促进缺血诱导的心肌细胞自噬相关.
作者:屈玉春;王大伟;严夏;黄伟新;王津 刊期: 2014年第02期
目的 鉴定白头翁中齐墩果酸3-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(B7)在大鼠粪便的代谢产物.方法 采用超高效液相色谱-三重四级杆线性离子肼复合质谱法(LC-LITMS/MS)检测大鼠灌胃B7后粪便中的代谢产物.使用Waters-SunFire C18柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离,并与线性离子阱联用.选择增强型母离子扫描(EMS)和预测离子对扫描模式(pMRM)进行质谱扫描,采用Analyst 1.5软件进行数据处理、鉴定代谢产物的化学结构.结果 在大鼠粪便检测到原型M0(B7)及M1(B7去甲基葡萄糖醛酸化产物)、M2(齐墩果酸-3-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M3(鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷)、M4(齐墩果酸-3-α-L-吡喃阿拉伯糖)和M5(齐墩果酸)等5个代谢产物.结论 B7在大鼠体内以脱糖代谢和葡萄糖醛酸化代谢为主.
作者:欧阳辉;郭宜城;何明珍;梁起栋;饶小勇;简晖;冯育林;杨世林 刊期: 2014年第02期
目的 建立同时测定冠心Ⅴ号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA含量的HPLC方法.方法 采用高效液相色谱法,以甲醇-0.5%醋酸水溶液梯度洗脱,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6×250 mm,5μm),流速为1.0 mL· min-1,检测波长为281 nm,柱温为35℃.结果 丹参素和丹参酮ⅡA分别在0.1~0.8 μg和0.02~0.16 μg范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.17%和99.35%.结论 本方法简便可行、重复性好,可用于同时测定冠心Ⅴ号颗粒中丹参素和丹参酮ⅡA的含量.
作者:周芙琼;高运军;夏崇才;顾宁 刊期: 2014年第02期
易损斑块的稳定性是继发性血栓是否形成的主要原因,及时识别易损斑块并进行有效的治疗对预防急性冠状动脉综合症(ACS)具有重要意义.中药组分及有效成分对影响动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)易损斑块形成的相关信号通路的作用研究已经取得了一定的成果,对Toll-like receptor4 (TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、酪氨酸蛋白激酶信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)等信号通路具有一定的干预作用,并已从分子水平阐释了中药组分及有效成分稳定As易损斑块的作用机制.
作者:李晓;刘剑刚;刘龙涛;李浩;郭刚 刊期: 2014年第02期
目的 观察金仁陈子方对母子分离复合应激诱导的肠易激综合征(IBS)大鼠的治疗作用,并探讨其作用机理.方法 采用新生大鼠母子分离与避水应激复合法复制内脏高敏感性IBS大鼠模型,观察金仁陈子方对IBS大鼠内脏敏感性、避水应激排便粒数、血清一氧化氮(NO)含量、血清及结肠组织5-羟色胺(5-HT)含量的影响.结果 与模型组比较,金仁陈子方高、低剂量组大鼠内脏敏感性显著降低(P<0.01),避水应激排便粒数显著减少(P<0.01),血清NO含量显著升高(P<0.01),血清及结肠组织5-HT含量均显著降低(P<0.05).结论 金仁陈子方可通过调节大鼠体内NO、5-HT水平,显著改善IBS模型大鼠肠道功能.
作者:张蓓;袁凤娟;洪煜鹏;尹西拳;吴依娜;李震华;刘小虹 刊期: 2014年第02期
目的 观察毛冬青对SD大鼠慢性心力衰竭(CHF)炎症相关因子及心功能的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为模型组和假手术组,模型组50只,假手术组10只.结扎腹主动脉建立CHF模型,将模型复制成功的大鼠随机分为4组:毛冬青低剂量组,毛冬青高剂量组,卡托普利组和模型组.分别给予毛冬青、卡托普利或生理盐水灌胃,2周后行经胸超声心动图检测,测定血清白介素-1β (IL-1β)和核因子κB(NF-κB).结果 毛冬青高、低剂量组CHF大鼠血清IL-1β、NF-κB水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).心脏彩超显示:毛冬青高、低剂量组大鼠提高射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 毛冬青可以改善慢性心力衰竭的炎症状态和心功能.
作者:郑惠萍;张双伟;陈洁;李小兵;杨忠奇;冼绍祥 刊期: 2014年第02期
目的 建立血复生片中芍药苷含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱法测定.色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(21∶79),检测波长:230 nm,柱温:30℃,流速:1.0 mL· min-1.结果 芍药苷进样量在0.066~0.396 μg范围内,选样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994);平均加样回收率为98.72%,RSD为1.88 %(n=6).结论 该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于血复生片的质量控制.
作者:白雪媛;常桂娟;杨吉平;赵大庆 刊期: 2014年第02期
目的 研究大鼠心肌缺血再灌注后无复流现象中心肌梗死面积和无复流面积的动态变化及其相关性.方法 采用健康雄性Wistar大鼠,分两批进行实验.第1批实验,固定再灌注时间为2h,将大鼠随机分为4组:①缺血2h组,②缺血3h组,③缺血4h组,④假手术组.第2批实验,固定缺血时间为4h,大鼠随机分为6组:①再灌注2h组,②再灌注4h组,③再灌注8h组,④再灌注24 h组,⑤再灌注3d组,⑥假手术组.缺血再灌注组结扎冠状动脉左前降支一定时间后再灌注,假手术组只穿线不结扎.分别用硫磺素S和硝基四氮唑蓝(N-BT)染色评估心肌无复流面积和梗死面积.结果 所有缺血再灌注组均出现明显的心肌无复流现象.心肌梗死面积和无复流面积随缺血时间的延长而扩大,缺血2h,即可见明显的心肌无复流现象,无复流区与血液灌注区界限明确;缺血3h,可见明显心肌梗死,但界限不清;缺血4h梗死区与未梗死区界限清晰.再灌注8h内,心肌梗死面积和无复流面积随再灌注时间的延长明显扩大、延展,无复流面积略大于梗死面积;再灌注8h后,心肌梗死的扩展速度进入平台期,而无复流面积则呈逐渐减少趋势;再灌注3d后,心肌梗死和无复流区域基本重合,二者面积趋于一致.结论 在本研究选定的缺血时间和再灌注时间的条件下,心肌缺血再灌注模型大鼠的心肌无复流发生率是100%,可作为心肌无复流模型使用.心肌梗死面积和无复流面积随缺血时间和再灌注时间的延长而扩大,并均在再灌注8h达峰值;此后梗死面积基本固定,而无复流现象出现部分恢复和改善.
作者:张金艳;李贻奎;李峰杰;李少春;赵乐;郝伟;翁维良 刊期: 2014年第02期
目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定灵芝孢子油中1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯含量的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil C18(250 mm× 4.6 mm,5μm)柱,流动相:乙腈-异丙醇(体积比为51∶49),流速:1.0 mL·min-1,ELSD漂移管温度:40℃,载气流速:2.4 L·min-1.结果 1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯在2.7~27.0 μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为99.3%,RSD值为2.3%.结论 该方法简便、准确、分离度好,可用于灵芝孢子油中1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯的含量测定.
作者:万明珠;王腾华;张丽媛;任灵芝;谭敏;高幼衡 刊期: 2014年第02期