洪妮娜;李志樑;赵亚男;陈琳琳;曹龙兴;韩越;郭凯;付珊珊
目的:探讨淋巴结转移度(LNR)对结直肠癌术后远处转移的预测价值。方法回顾性分析解放军总医院普通外科2007年1月~2012年1月行根治性切除手术的180例结直肠癌患者的临床资料,按照术后有无出现远处转移将患者分为非转移组和转移组,分析LNR与结直肠癌术后出现远处转移的关系。结果非转移组118例(65.6%);转移组62例(34.4%),其中肝转移39例,肺转移12例,骨、肺及多脏器转移11例。两组在肿瘤大体类型、分化程度、检出淋巴结总数及LNR方面差异有统计学意义(P<0.05),溃疡型和浸润型较隆起型,低分化程度较高、中分化程度,LNR≥0.17较LNR<0.17结直肠癌更易发生远处转移;多因素分析结果显示LNR与分化程度及大体类型均是影响结直肠癌术后远处转移的独立相关因素(RR:2.098;CI%:1.050-4.192;P=0.036)。结论 LNR与结直肠癌术后发生远处转移独立相关,可联合分化程度等作为评估结直肠癌术后发生远处转移及预后的参考指标。
作者:薛虎臣;杜晓辉;肖春红;晏阳;邹振玉;徐迎新 刊期: 2014年第04期
目的:探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因K469E多态性及血小板内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1)基因C373G多态性各等位基因及基因型在子痫前期患者及健康孕妇中的分布频率,分析上述基因多态性与子痫前期的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLP)方法和DNA序列测序法对110名子痫前期患者及110名健康足月孕妇ICAM-1基因K469E位点及PECAM-1基因C373G位点进行检测,同时比较两组人群中的相关的临床资料。结果 ICAM-1基因K469E位点及PECAM-1基因C373G位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,具有群体代表性。ICAM-1基因K469E位点基因型频率及等位基因频率在两组人群中均无显著差异(P>0.05)。PECAM-1基因C373G位点CC基因型和CG基因型在两组人群分布中存在显著差异(P<0.05)。CG基因型携带者患子痫前期的风险是CC基因型的1.959倍(OR=1.959,95%CI:1.090-3.520, P=0.024),且通过Logistic回归分析发现该相关性独立于孕妇年龄、孕次、产次及孕前BMI。C等位基因频率和G等位基因频率在两组人群的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PECAM-1基因C373G位点CG基因型携带者可能与子痫前期患者较高的遗传易感性相关,而ICAM-1基因K469E多态性则与子痫前期的发病无相关。
作者:何艳红;王志坚;靳瑾;朱晓雯;陈玉英;陈淑滢;曹艳文 刊期: 2014年第04期
目的:研究人脐带间充质干细胞对白血病细胞株Jurkat体外增殖和存活能力的影响并探讨相关机制。方法组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,将其作为基质细胞与Jurkat细胞进行直接接触共培养。通过免疫磁珠法分离共培养体系中的Jurkat细胞,流式细胞术检测Jurkat细胞增殖能力、细胞周期和自发凋亡率的变化;Western blotting法检测共培养后Jurkat细胞内Notch信号通路的活化状况。结果共培养4 d后,Jurkat白血病细胞的增殖减缓、细胞周期被阻滞于G0/G1期,而其自发凋亡率则出现显著下降,并伴有Notch信号通路靶分子HES-1表达量的增加。结论人脐带间充质干细胞构成的微环境对Jurkat白血病细胞有保护作用,Notch信号通路可能参与了这一过程。
作者:袁茵;陈丹亮;陈璇;邵红伟;黄树林 刊期: 2014年第04期
目的:银屑病是一种慢性炎症性免疫性疾病,与Th17细胞的功能失调密切相关。RORγt影响Th17细胞的分化、成熟;并在该细胞所致的免疫紊乱中发挥极为重要的作用。本文主要探讨地高辛衍生物选择性拮抗RORγt转录活性的潜在机制。方法地高辛为对照,通过分子对接的方法结合分子间的静电势能(MEP)分析地高辛衍生物(Dhd)与RORs(RORα,RORβ和RORγt)的相互作用;通过荧光素酶报告基因系统进一步验证分子对接结果。结果分子对接结果示Dhd仅影响RORγt分子构象;荧光素酶报告基因检测示Dhd选择性拮抗RORγt转录活性,该拮抗作用可呈时-效性和量-效性。结论 Dhd选择性拮抗RORγt转录活性。
作者:钟彩梅;蔡译萱;王美容;郑秀芬;邱贤文;孙乐栋;张帆;张堂德 刊期: 2014年第04期
目的:探讨气体信号分子外源性硫化氢(H2S)对高糖条件下培养的原代皮层及海马神经元β位淀粉样前体蛋白裂解酶-1(BACE-1)和β淀粉样蛋白(Aβ)代谢的影响。方法原代培养大鼠皮层及海马神经元,随机分组为正常培养神经元组、高糖(60 mmol/L)培养神经元组、高糖(60 mmol/L)加25μmol/L NaHS组、高糖(60 mmol/L)加50μmol/L NaHS组和高糖(60 mmol/L)加100μmol/L NaHS组,酶联免疫吸附试验检测Aβ1-42水平,荧光实时定量检测BACE-1 mRNA表达,Western blot检测BACE-1蛋白表达水平。结果高糖培养的神经元组Aβ1-42水平明显高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50和100μmol/L NaHS后,Aβ水平显著降低(P<0.05);高糖培养的神经元组BACE-1 mRNA表达显著高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50及100μmol/L NaHS后,BACE-1 mRNA水平显著降低(P<0.05);高糖培养的神经元组BACE-1蛋白显著高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50及100μmol/L NaHS后,BACE-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论在高糖条件下,神经元Aβ1-42、BACE-1 mRNA和蛋白表达明显升高,NaHS呈浓度依耐性降低高糖条件下培养神经元中升高的Aβ1-42水平,降低BACE-1 mRNA及蛋白表达。
作者:朱丽娟;陈筱山;何选丽;戚韵雯;晏勇 刊期: 2014年第04期
目的:探讨牙列缺损患者的种植术前焦虑水平对术后疼痛感受的影响。方法临床随机选取80例牙列缺损种植义齿修复的患者,在种植手术前完成状态-特质焦虑量表(STAI)、修正版牙科焦虑量表(MDAS)的填写,术后即刻采用视觉模拟评分(VAS)和现时疼痛强度问卷(PPI)对患者的疼痛感受进行测评,分析术前状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑与术后VAS评分的相关性,将状态-特质焦虑量表的测评分数分为3组。L组:为较少的或没有焦虑组(20~37);M组:为适中的焦虑组(38~44);H组:为较高的或极度的焦虑组(45~80),研究不同状态焦虑和特质焦虑水平对术后疼痛感受的影响。结果种植术前的状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑评分之间均有显著的正相关关系(P<0.01),种植术后的VAS评分与术前的特质焦虑评分之间存在显著的正相关关系(P<0.01),不同特质焦虑水平分组之间的VAS评分差异具有统计学意义(P<0.01),H组的VAS评分,高于M组和L组(P<0.05)。结论牙列缺损患者种植术前的特质焦虑水平与术后的疼痛感受具有一定的相关性,临床上应对术前的焦虑状况加以重视。
作者:刀俊峰;章锦才;宋光保;信琪 刊期: 2014年第04期
目的:探讨屋尘螨(HDM)对气道上皮细胞系(16-HBE)胸腺基质淋巴生成素(TSLP)表达的影响,进一步评价活性维生素D3(1,25VD3)的干预作用。方法四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度HDM(200、400、800 U/L)及其联合10-8 mol/L 1,25VD3对16-HBE活力的影响。按下述分组刺激16-HBE,对照组,400 U/L HDM组,10-8 mol/L 1,25VD3组,10-8 mol/L 1,25VD3预处理1 h后400 U/L HDM组,10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组,6 h后,实时荧光定量PCR检测细胞TSLPmRNA表达情况;刺激24 h后,ELISA检测细胞培养上清中TSLP的浓度。结果200~800 U/L HDM作用气道上皮细胞后,可以上调16-HBE TSLP的基因和蛋白表达(P<0.05);10-8 mol/L 1,25VD3预处理后400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组显著下降(P<0.05);但10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组无显著差异(P=0.58)。结论HDM和1,25VD3均可增加16-HBE TSLP的表达和释放。1,25VD3预处理气道上皮细胞可减少屋尘螨诱导的TSLP分泌。
作者:周丽芹;董航明;赵海金;邹梦晨;姚利红;邹飞;蔡绍曦 刊期: 2014年第04期
目的:探讨非肿块型钙化性乳腺癌的微钙化X线表现与病理结果的关系,以期提高对不同病理类型非肿块型钙化性乳腺癌微钙化X线表现的认识。方法收集108例非肿块型钙化性乳腺癌,回顾分析其微钙化形态及分布的X线表现,并与病理结果进行对照研究。结果微钙化形态、分布在不同病理类型的乳腺癌间差异均无统计学差异(P形态=0.743,P分布=0.389)。微钙化形态在浸润性与非浸润性癌中的差异亦不具有统计学意义(P=0.382);且浸润性癌与非浸润性癌均以细小多形性钙化多见(分别约占41.2%、57.5%),而浸润性癌中线样或线样分支状钙化及多种恶性钙化混合较非浸润性多见(32.3%vs 20%)。微钙化分布在浸润性与非浸润性癌中的差异具有统计学意义(P=0.006),浸润性与非浸润性癌中的微钙化分布分别以段样、成簇分布为主(分别约占33.8%、45.0%)。结论(1)非肿块型钙化性乳腺癌中不同病理类型间微钙化的形态及分布均不具有鉴别意义。术前仅根据微钙化特点尚难以鉴别,必须结合其他影像征象及临床资料;(2)术前可依据微钙化形态与分布对浸润性与非浸润性乳腺癌进行初步鉴别。
作者:陈卫国;秦耿耿;徐维敏;廖昕;婵娟;张玲;欧阳晨雨 刊期: 2014年第04期
目的:通过表型和基因型分析方法,初步了解造血干细胞移植术后巨细胞病毒(HCMV)感染患儿的耐药情况。方法采用人包皮成纤维细胞培养分离并鉴定HCMV临床株;Reed.Muench法测定其半数组织培养感染量(TCID50),空斑减数实验测定病毒对丙氧鸟苷的敏感性,同时以HCMV UL97基因为靶序列,用Nested-PCR扩增目的基因,并对PCR产物做直接序列测定。结果成功从患者尿标本中分离出HCMV临床病毒株,测得其TCID50为:10-4.618/0.1 ml;IC50值为5.847μmol/L,对丙氧鸟苷高度敏感;同时基因序列与AD169株的序列相比较,发现四个位点发生碱基突变,分别是1509 T→C、1575 C→T、1794 T→C、1815 C→G;上述突变的编码子分别为503,525、598和605,前3个位点的突变未导致相应氨基酸改变,第四个位点氨基酸则改变为D605E,未发现与耐药有关的基因突变。结论初步建立造血干细胞移植后HCMV耐药表型和基因型检测的实验方法,本次试验从临床标本中尚未发现HCMV耐药现象。
作者:曾爱红;董德坤;崔喜梅;郭明明;邹德志;方建培 刊期: 2014年第04期
目的:探讨中国汉族人群细胞因子可诱导的SRC同源区2结构域蛋白(CISH)基因rs414171位点与慢性乙型肝炎易感性的关系。方法利用Sequenom MassArray-IPLEX SNP分型技术,对233例慢性乙型肝炎患者和148例健康对照者CISH基因的rs414171位点进行基因分型,采用χ2检验方法统计分析病例组与对照组间等位基因频率和基因型频率的差异。结果病例组和对照组的rs414171位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。该位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组中的分布无统计学差异(P>0.05)。结论 CISH基因rs414171位点的多态性与中国汉族人慢性乙型肝炎易感性无明显相关性。
作者:张鑫;孙学华;周振华;李曼;高月求 刊期: 2014年第04期
目的:探讨Sam68在结直肠癌发生发展中的作用。方法建立Sam68稳定过表达和稳定干扰的结直肠癌细胞株,通过克隆形成实验、MTT法和Transwell侵袭实验检测Sam68对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。结果成功建立Sam68稳定过表达和稳定干扰细胞株;过表达Sam68的结直肠癌细胞株SW480和Ls174t增殖、侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05);干扰Sam68的结直肠癌细胞株SW620和HCT116增殖、侵袭和迁移能力明显下降(P<0.05)。结论 Sam68促进结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,在结直肠癌发生发展过程中起重要作用。
作者:王力扬;崔艳梅;廖雯婷;刘思德 刊期: 2014年第04期
目的:探讨简单、方便、可靠、安全的兔经脊柱旁入路腹腔注射方法。方法将60只新西兰兔随机分为两组,分别采用常规入路和改良的经脊柱旁入路进行腹腔注射。常规组注射部位为腹中线两侧平脐旁开3~4 cm;改良组的注射部位为背部第5~6腰椎平面右侧中线旁开3~4 cm处。常规组与改良组穿刺后注射前进行腹部CT扫描。所有兔腹腔注射24 h后处死进行腹腔局部解剖。结果采用常规入路进行腹腔注射的20只新西兰兔有13只一次性成功穿刺,有7只需穿刺2次以上,平均秩和为23.50;采用改良方法进行腹腔注射的40只新西兰兔均一次性穿刺成功,平均秩和为34.00。两组间有显著性差异(P<0.01)。两组间的一次注射成功率亦有显著差异性(P<0.01)。CT扫描和腹腔局部解剖均显示改良组穿刺点距离肝脏、肾脏、膀胱和大血管等重要器官均较远。腹腔局部解剖显示改良组腹腔内充血和渗出等炎症反应较常规组少。结论改良的经脊柱旁入路腹腔穿刺方法操作简单、方便、可靠、安全,是一种值得推广的腹腔注射方法。
作者:吕田明;凌容;潘志勇;梁彦珊;史翠丽;黄小玉 刊期: 2014年第04期
目的:比较心房颤动消融桥接治疗使用磺达肝癸钠与低分子肝素两者的安全性及有效性。方法对2009年1月~2013年7月接受射频消融术的房颤患者进行分析。患者在术前停用华法林5 d,皮下注射磺达肝癸钠或低分子肝素的桥接治疗直到至消融后国际标准化比值为2.0~3.0。对两组患者术后抗凝相关并发症进行比较。并发症识别和归类为血栓栓塞和出血事件。结果共有465名患者,68%的男性,年龄52.3±15(25~80)岁参加了这项研究。磺达肝癸钠组纳入265名患者,低分子肝素组纳入200名患者。在磺达肝癸钠组观察到3例抗凝相关并发症,而低分子肝素组有13例(P=0.002),但是血栓栓塞方面两组无统计学差异(P=0.111)。在磺达肝癸钠组有2例出血并发症,低分子肝素组有8例(P=0.039)。随访观察3个月两组均没有心血管死亡病例。结论房颤导管消融期间使用磺达肝癸钠作为桥接治疗与低分子肝素相比,血栓栓塞并发症的风险无统计学差异,但略减少出血风险。磺达肝癸钠在房颤患者导管消融围手术期抗凝管理方面是安全有效的。
作者:张飞飞;赵冬华;彭新辉;杨浩;朱庭延;黄福美;彭健 刊期: 2014年第04期
目的:观察三黄茵赤汤防治D-氨基半乳糖(D-GalN)联合内毒素(LPS)诱导的大鼠急性肝衰竭氧化应激及肝细胞凋亡的作用。方法48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组,每组8只。各组对应给药5 d,建立急性肝衰竭模型48 h后处死动物,检测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素,检测全血中凝血酶原时间、国际标准比率、血浆纤维蛋白原;HE染色观察肝脏病理的变化,检测肝脏组织匀浆液SOD、MDA的含量;免疫组化、免疫印迹检测肝组织caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较,三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组均能减少血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素的含量、缩短全血中凝血酶原时间、国际标准比率时间,增加血浆纤维蛋白原的含量(P<0.05);明显改善肝脏组织病理变化,提高肝脏组织匀浆液SOD活性,减少MDA含量(P<0.05);下调caspase-3蛋白表达(P<0.05);三黄茵赤汤中剂量组与双环醇组无统计学差异(P>0.05),高剂量组优于双环醇组(P<0.05)。结论三黄茵赤汤防治D-GalN联合LPS诱导的急性肝衰竭大鼠成量效关系,具有抗氧化的作用;三黄茵赤汤可能通过抗氧化应激抑制caspase3表达从而减少肝细胞凋亡,以达到防治大鼠急性肝衰竭的作用。
作者:马文校;杨运高;刁建新;刘亚伟;华何与;文小敏 刊期: 2014年第04期
目的:比较长方案和拮抗剂方案应用于再次接受体外受精/卵细胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗周期患者的临床效果和成本效果比。方法回顾性分析于我中心接受第2次IVF/ICSI助孕治疗患者198例,其中长方案(A组)109例,拮抗剂方案(B组)89例,分别比较两种方案的获卵数、优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、活产率及平均总费用、成本效果比。结果在重复周期患者,两种方案组的优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、及双胎妊娠率均无显著差异;A组临床结局好于B组,但无统计学差异。A组的活产率为20.2%,显著高于B组的9.0%,A组的获卵数为9.13±4.98枚,显著高于B组的7.11±4.74枚(P<0.05);A组平均每周期总费用均高于B组,但A组每获得一枚卵子、一枚优良胚胎和一例临床妊娠的的成本-效果比(CER)均低于B组(A组分别为2729.11、8867.19、77598.06元,B组分别为3038.60、9644.85、96139.85元)。结论对于重复IVF/ICSI周期患者,即使卵巢储备功能减退,长方案仍能获得较好的临床结局和经济效益。
作者:陈潇;耿玲;李红 刊期: 2014年第04期
本文通过系统回顾单孔腹腔镜结直肠手术相关文献,从体表切口入路、单孔腹腔镜装置及操作器械三方面阐述单孔腹腔镜结直肠手术的技术实现,并全面分析数据初步证实单孔腹腔镜结直肠手术是安全、可行的,与传统腹腔镜具有相当的近期疗效,然而其潜在的微创优势和远期肿瘤学疗效还有待深入研究。
作者:熊文俊;王亚楠;李国新 刊期: 2014年第04期
目的:探索和建立同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞,并进一步鉴定和培养的方法。方法联合应用原位灌注、离体灌注、梯度密度离心和差速贴壁等分离方法,获取4种大鼠肝内原代细胞,采用形态学观察、免疫荧光染色和墨汁吞噬实验等方法对所分离的各种原代细胞进行纯度鉴定。结果通过原位灌注结合离体灌注、密度梯度离心结合差速贴壁等分离手段,成功实现了大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞的同步分离,且所得原代细胞得率、活力及纯度等指标均符合后续细胞实验要求。结论通过简易方法同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞是可行的。
作者:李洋;蔡双明;张莉莉;李旭 刊期: 2014年第04期
目的:探讨以改构腺相关病毒2型(AAV-2)为载体,将rAAV/CEA转染树突状细胞(Dendritic cell, DC)制备肺癌治疗性疫苗的可行性。方法取健康人外周血,分离获得贴壁的单个核细胞(Mo),以rAAV/CEA病毒转染,对照组以CEA多肽刺激,两组细胞均以重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC成熟。第7天收集DC,取DC与原始T细胞混合,诱导细胞毒性T细胞(CTL),[3H]-TdR掺入法检测DC刺激自体T细胞增殖能力;流式细胞仪分析CTL细胞中IL-4、IFN-γ、CD8、CD4、CD69、CD25的表达情况;取CEA阳性的肺癌细胞株A549为靶细胞,采用51Cr释放法检测CTL对该靶细胞的杀伤效率。结果 rAAV/CEA转染的DC疫苗可诱导特异性细胞免疫,具体表现在:①疫苗具备较强的刺激淋巴细胞增殖的能力,①诱导的CTL较高表达CD8、CD69和IFN-γ,①对CEA阳性的肺癌靶细胞产生较强杀伤活性,且此活性具有抗原特异性和MHC-I类限制性。结论以AAV为载体,rAAV/CEA基因转染DC可成功制备针对肺癌的治疗性疫苗。
作者:尤长宣;钱晓涛;何圆;Yong Liu;Paul L Hermonat 刊期: 2014年第04期
全食管深度烧伤在上消化道疾病中极其罕见,本文报道1例高度烧伤病人,导致全身多处皮肤、双眼、咽喉、食管等部位烧伤。经内镜诊断急性坏死性食管炎并胃内金属异物。经过烧伤创面清创、镇痛、补液抗休克、抗感染、支持对症等治疗处理,但是患者的病情持续加重。在发生严重的并发症败血症后终于因呼吸、循环衰竭而死亡。
作者:杨炎;肖能坎;谢汉秋;汤钟铭 刊期: 2014年第04期
目的:探讨跨膜蛋白39A(TMEM39A)基因的3个位点(1880G/A,2442T/G,2456A/T)单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮(SLE)发病的相关性。方法采用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分别对110例中国汉族SLE患者及80例健康对照者TMEM39A基因1880G/A、2442T/G、2456A/T位点进行多态性检测,应用χ2检验统计分析病例组和对照组基因型频率、等位基因频率。结果 SLE患者TMEM39A基因1880G/A位点的AA、GA、GG基因型频率与健康对照组间有显著差异(P=0.002),两组间A、G等位基因频率分布有显著差异(P=0.044);2442T/G位点的GG、TG、TT基因型频率与健康对照组间有显著差异(P=0.001),两组间G、T等位基因频率分布有显著差异(P=0.041);2456A/T位点的TT、AT、AA基因型频率与健康对照组间无显著差异(P>0.05),两组间T、A等位基因频率分布无显著差异(P>0.05);3个位点(1880G/A、2442T/G、2456A/T)的基因型频率和等位基因频率在狼疮性肾炎患者组和非狼疮性肾炎患者组间分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TMEM39A基因1880G/A、2442T/G多态性与汉族人群SLE的遗传易感性有关,TMEM39A基因2456 A/T位点的多态性与汉族人群SLE的易感性无相关性;1880G/A、2442T/G、2456 A/T的基因型和等位基因对狼疮性肾炎的发生无显著影响。
作者:章俊;马亚琼;邱敏姿;杨蕾;卜阳;汤珣 刊期: 2014年第04期