曾爱红；董德坤；崔喜梅；郭明明；邹德志；方建培
目的：探讨以改构腺相关病毒2型(AAV-2)为载体，将rAAV/CEA转染树突状细胞（Dendritic cell, DC）制备肺癌治疗性疫苗的可行性。方法取健康人外周血，分离获得贴壁的单个核细胞(Mo)，以rAAV/CEA病毒转染，对照组以CEA多肽刺激，两组细胞均以重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素4（IL-4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导DC成熟。第7天收集DC，取DC与原始T细胞混合，诱导细胞毒性T细胞（CTL），[3H]-TdR掺入法检测DC刺激自体T细胞增殖能力；流式细胞仪分析CTL细胞中IL-4、IFN-γ、CD8、CD4、CD69、CD25的表达情况；取CEA阳性的肺癌细胞株A549为靶细胞，采用51Cr释放法检测CTL对该靶细胞的杀伤效率。结果 rAAV/CEA转染的DC疫苗可诱导特异性细胞免疫，具体表现在：①疫苗具备较强的刺激淋巴细胞增殖的能力，①诱导的CTL较高表达CD8、CD69和IFN-γ，①对CEA阳性的肺癌靶细胞产生较强杀伤活性，且此活性具有抗原特异性和MHC-I类限制性。结论以AAV为载体，rAAV/CEA基因转染DC可成功制备针对肺癌的治疗性疫苗。
作者：尤长宣；钱晓涛；何圆；Yong Liu；Paul L Hermonat 刊期： 2014年第04期
目的：探讨前降支单支病变且接受经皮冠状动脉介入（PCI）治疗的冠心病患者侧支循环的形成情况，并对其侧支循环与心功能之间的关系进行分析。方法入选自2010年1月~2012年12月在我院行冠状动脉造影提示前降支单支病变且行PCI的冠心病患者625例进行回顾性分析，采用Rentrop法评价各组侧支循环的开放情况，并分为存在侧支循环组（A组，包括Rentrop分级1级、2级、3级，n=280）与无侧支循环组（B组，包括Rentrop分级0级，n=345）。A组根据侧支循环来源分为对侧侧支循环（A1组，n=200）、同侧+对侧侧支循环（A2组，n=44）、同侧侧支循环（A3组，n=36），分别比较A组、B组两组；A1组、A2组、A3组3组心功能恢复的差异。结果总侧支循环对心功能恢复的影响：相较于无侧支循环者，存在侧支循环组射血分数升高、脑钠肽前体降低、红细胞体积分布宽度降低的程度较大（P<0.05），左室舒张末容积增大的程度较小（P<0.05）；对侧侧支循环、同侧侧支循环、对侧+同侧侧支循环3种情况下心功能恢复的关系：3种情况下心功能均有改善，对侧+同侧侧支循环对心功能改善佳，对侧侧支循环次之，同侧侧支循环差。结论前降支病变接受PCI治疗冠心病患者存在侧支循环者对心功能的恢复更好；对侧+同侧侧支循环较同侧侧支循环对心功能改善程度大，对侧侧支循环次之。
作者：洪妮娜；李志樑；赵亚男；陈琳琳；曹龙兴；韩越；郭凯；付珊珊 刊期： 2014年第04期
目的：探索和建立同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞，并进一步鉴定和培养的方法。方法联合应用原位灌注、离体灌注、梯度密度离心和差速贴壁等分离方法，获取4种大鼠肝内原代细胞，采用形态学观察、免疫荧光染色和墨汁吞噬实验等方法对所分离的各种原代细胞进行纯度鉴定。结果通过原位灌注结合离体灌注、密度梯度离心结合差速贴壁等分离手段，成功实现了大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞的同步分离，且所得原代细胞得率、活力及纯度等指标均符合后续细胞实验要求。结论通过简易方法同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞是可行的。
作者：李洋；蔡双明；张莉莉；李旭 刊期： 2014年第04期
目的：探讨屋尘螨（HDM)对气道上皮细胞系（16-HBE）胸腺基质淋巴生成素（TSLP）表达的影响，进一步评价活性维生素D3（1,25VD3）的干预作用。方法四唑盐（MTT）比色法检测不同浓度HDM（200、400、800 U/L）及其联合10-8 mol/L 1,25VD3对16-HBE活力的影响。按下述分组刺激16-HBE，对照组，400 U/L HDM组，10-8 mol/L 1,25VD3组，10-8 mol/L 1,25VD3预处理1 h后400 U/L HDM组，10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组，6 h后，实时荧光定量PCR检测细胞TSLPmRNA表达情况；刺激24 h后，ELISA检测细胞培养上清中TSLP的浓度。结果200~800 U/L HDM作用气道上皮细胞后，可以上调16-HBE TSLP的基因和蛋白表达（P<0.05）；10-8 mol/L 1,25VD3预处理后400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组显著下降（P<0.05）；但10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组无显著差异（P=0.58）。结论HDM和1,25VD3均可增加16-HBE TSLP的表达和释放。1,25VD3预处理气道上皮细胞可减少屋尘螨诱导的TSLP分泌。
作者：周丽芹；董航明；赵海金；邹梦晨；姚利红；邹飞；蔡绍曦 刊期： 2014年第04期
目的：探讨中国汉族人群细胞因子可诱导的SRC同源区2结构域蛋白（CISH）基因rs414171位点与慢性乙型肝炎易感性的关系。方法利用Sequenom MassArray-IPLEX SNP分型技术，对233例慢性乙型肝炎患者和148例健康对照者CISH基因的rs414171位点进行基因分型，采用χ2检验方法统计分析病例组与对照组间等位基因频率和基因型频率的差异。结果病例组和对照组的rs414171位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）。该位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组中的分布无统计学差异（P>0.05）。结论 CISH基因rs414171位点的多态性与中国汉族人慢性乙型肝炎易感性无明显相关性。
作者：张鑫；孙学华；周振华；李曼；高月求 刊期： 2014年第04期
目的：探讨髋臼骨折中应用3D打印技术术后的康复策略。方法筛选1例髋臼骨折患者，先采用3D技术打印患者仿真骨盆模型，并进行钢板螺钉佳位置设计、螺钉长度测量、螺钉进入途径设计等一系列术前模拟手术，然后在腹腔镜辅助下行复位内固定术；术后进行分步骤、渐进性、系统性的康复锻炼。结果手术成功完成，康复周期缩短。结论3D打印技术的应用可使手术更加精准、安全，缩短患者康复周期，使患者早日重返工作岗位，从而减少住院日，降低医疗成本。
作者：邓爱文；熊日波；何伟明；魏东；曾参军 刊期： 2014年第04期
本文通过系统回顾单孔腹腔镜结直肠手术相关文献，从体表切口入路、单孔腹腔镜装置及操作器械三方面阐述单孔腹腔镜结直肠手术的技术实现，并全面分析数据初步证实单孔腹腔镜结直肠手术是安全、可行的，与传统腹腔镜具有相当的近期疗效，然而其潜在的微创优势和远期肿瘤学疗效还有待深入研究。
作者：熊文俊；王亚楠；李国新 刊期： 2014年第04期
目的：探讨缺氧诱导因子（HIF1α、HIF2α）在高强度聚焦超声（HIFU）治疗后的残余肿瘤中的变化。方法建立肝癌HpG2细胞株裸鼠移植瘤模型30只，采用CZF-Ⅱ型HIFU治疗仪治疗，随机分为对照组、治疗后1 d、3 d、5 d、1周、2周组。HE染色观察标本病理变化；免疫组化、Western blotting和实时荧光定量PCR技术检测HIF1α、HIF2α蛋白和mRNA水平。结果 HE染色表明治疗后有残余肿瘤细胞和大片坏死区域。免疫组化表明HIF1α、HIF2α蛋白在各组中出现强弱不同表达。Western blotting和RT-PCR显示HIF1α蛋白和mRNA水平在治疗后1~3 d表达逐渐升高，在3 d组达到高峰，与其他组比较有统计学意义（P<0.05），在5 d、1周、2周组逐渐下降。同时，HIF2α蛋白和mRNA在治疗后1 d、3 d组与对照组之间无明显差异（P>0.05），在5 d、1周、2周组表达逐渐升高，与对照组之间有差异（P<0.05）。结论 HIFU治疗后的残余肿瘤，HIF1α、HIF2α在不同时间出现的变化，可能与残癌中发生的细胞凋亡和血管生成有关。
作者：付志豪；武伦；乔正荣；周世骥；李生伟 刊期： 2014年第04期
目的：探讨细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因K469E多态性及血小板内皮细胞粘附分子-1（PECAM-1）基因C373G多态性各等位基因及基因型在子痫前期患者及健康孕妇中的分布频率，分析上述基因多态性与子痫前期的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段多态性（PCR-RFLP）方法和DNA序列测序法对110名子痫前期患者及110名健康足月孕妇ICAM-1基因K469E位点及PECAM-1基因C373G位点进行检测，同时比较两组人群中的相关的临床资料。结果 ICAM-1基因K469E位点及PECAM-1基因C373G位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律，具有群体代表性。ICAM-1基因K469E位点基因型频率及等位基因频率在两组人群中均无显著差异（P>0.05）。PECAM-1基因C373G位点CC基因型和CG基因型在两组人群分布中存在显著差异（P<0.05）。CG基因型携带者患子痫前期的风险是CC基因型的1.959倍（OR=1.959，95%CI：1.090-3.520， P=0.024），且通过Logistic回归分析发现该相关性独立于孕妇年龄、孕次、产次及孕前BMI。C等位基因频率和G等位基因频率在两组人群的分布差异无统计学意义（P>0.05）。结论 PECAM-1基因C373G位点CG基因型携带者可能与子痫前期患者较高的遗传易感性相关，而ICAM-1基因K469E多态性则与子痫前期的发病无相关。
作者：何艳红；王志坚；靳瑾；朱晓雯；陈玉英；陈淑滢；曹艳文 刊期： 2014年第04期
目的：探讨跨膜蛋白39A（TMEM39A）基因的3个位点（1880G/A，2442T/G，2456A/T）单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮（SLE）发病的相关性。方法采用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）方法分别对110例中国汉族SLE患者及80例健康对照者TMEM39A基因1880G/A、2442T/G、2456A/T位点进行多态性检测，应用χ2检验统计分析病例组和对照组基因型频率、等位基因频率。结果 SLE患者TMEM39A基因1880G/A位点的AA、GA、GG基因型频率与健康对照组间有显著差异（P=0.002），两组间A、G等位基因频率分布有显著差异（P=0.044）；2442T/G位点的GG、TG、TT基因型频率与健康对照组间有显著差异（P=0.001），两组间G、T等位基因频率分布有显著差异（P=0.041）；2456A/T位点的TT、AT、AA基因型频率与健康对照组间无显著差异（P>0.05），两组间T、A等位基因频率分布无显著差异（P>0.05）；3个位点（1880G/A、2442T/G、2456A/T）的基因型频率和等位基因频率在狼疮性肾炎患者组和非狼疮性肾炎患者组间分布差异均无统计学意义（P>0.05）。结论TMEM39A基因1880G/A、2442T/G多态性与汉族人群SLE的遗传易感性有关，TMEM39A基因2456 A/T位点的多态性与汉族人群SLE的易感性无相关性；1880G/A、2442T/G、2456 A/T的基因型和等位基因对狼疮性肾炎的发生无显著影响。
作者：章俊；马亚琼；邱敏姿；杨蕾；卜阳；汤珣 刊期： 2014年第04期
目的：探讨淋巴结转移度（LNR）对结直肠癌术后远处转移的预测价值。方法回顾性分析解放军总医院普通外科2007年1月~2012年1月行根治性切除手术的180例结直肠癌患者的临床资料，按照术后有无出现远处转移将患者分为非转移组和转移组，分析LNR与结直肠癌术后出现远处转移的关系。结果非转移组118例（65.6%）；转移组62例（34.4%），其中肝转移39例，肺转移12例，骨、肺及多脏器转移11例。两组在肿瘤大体类型、分化程度、检出淋巴结总数及LNR方面差异有统计学意义（P<0.05），溃疡型和浸润型较隆起型，低分化程度较高、中分化程度，LNR≥0.17较LNR<0.17结直肠癌更易发生远处转移；多因素分析结果显示LNR与分化程度及大体类型均是影响结直肠癌术后远处转移的独立相关因素（RR：2.098；CI%：1.050-4.192；P=0.036）。结论 LNR与结直肠癌术后发生远处转移独立相关，可联合分化程度等作为评估结直肠癌术后发生远处转移及预后的参考指标。
作者：薛虎臣；杜晓辉；肖春红；晏阳；邹振玉；徐迎新 刊期： 2014年第04期
目的：调查慢性乙型肝炎病毒感染相关的成年初治肝硬化患者肾功能情况，并探讨其危险因素。方法回顾性收集860名于2011年1月1日~2011年12月31日在南方医院肝病中心住院治疗的慢性乙肝病毒感染相关成年肝硬化且既往未接受过抗乙肝病毒治疗的患者资料，应用Child-Pugh评分系统对患者进行肝功能分级、采用美国肾脏病基金会组织推荐的MDRD公式计算肾小球滤过率（Glomerular Filtration Rate, GFR），评估目标人群肾功能受损（eGFR<60 ml/min/1.73 m2）的发生率，同时分析影响肾功能的危险因素。结果共有296名患者被纳入分析，结果显示肝硬化患者肾功能受损的发生率为8.45%（25/296），Child-Pugh C级患者肾功能受损发生率显著高于Child-Pugh B级和Child-Pugh A级（17.2%[17/99] vs.6.67%[7/105] vs.1.09%[1/92]， P<0.001）；年龄、高尿酸血症、Child-Pugh评分均为肾功能受损的危险因素。结论随着肝硬化患者肝功能的恶化，肾功能受损发生率显著上升，应密切监测肾功能，以指导患者临床用药。
作者：刘颖；樊蓉；陈简；郑志丹；廖宝林；梁携儿；尹军花；周秋根；孙剑 刊期： 2014年第04期
目的：探讨牙列缺损患者的种植术前焦虑水平对术后疼痛感受的影响。方法临床随机选取80例牙列缺损种植义齿修复的患者，在种植手术前完成状态-特质焦虑量表（STAI）、修正版牙科焦虑量表（MDAS）的填写，术后即刻采用视觉模拟评分（VAS）和现时疼痛强度问卷（PPI）对患者的疼痛感受进行测评，分析术前状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑与术后VAS评分的相关性，将状态-特质焦虑量表的测评分数分为3组。L组：为较少的或没有焦虑组（20~37）；M组：为适中的焦虑组（38~44）；H组：为较高的或极度的焦虑组（45~80），研究不同状态焦虑和特质焦虑水平对术后疼痛感受的影响。结果种植术前的状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑评分之间均有显著的正相关关系（P<0.01），种植术后的VAS评分与术前的特质焦虑评分之间存在显著的正相关关系（P<0.01），不同特质焦虑水平分组之间的VAS评分差异具有统计学意义（P<0.01），H组的VAS评分，高于M组和L组（P<0.05）。结论牙列缺损患者种植术前的特质焦虑水平与术后的疼痛感受具有一定的相关性，临床上应对术前的焦虑状况加以重视。
作者：刀俊峰；章锦才；宋光保；信琪 刊期： 2014年第04期
目的：比较长方案和拮抗剂方案应用于再次接受体外受精/卵细胞浆内单精子注射（IVF/ICSI）治疗周期患者的临床效果和成本效果比。方法回顾性分析于我中心接受第2次IVF/ICSI助孕治疗患者198例，其中长方案(A组)109例，拮抗剂方案（B组）89例，分别比较两种方案的获卵数、优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、活产率及平均总费用、成本效果比。结果在重复周期患者，两种方案组的优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、及双胎妊娠率均无显著差异；A组临床结局好于B组，但无统计学差异。A组的活产率为20.2%，显著高于B组的9.0%，A组的获卵数为9.13±4.98枚，显著高于B组的7.11±4.74枚（P<0.05）；A组平均每周期总费用均高于B组，但A组每获得一枚卵子、一枚优良胚胎和一例临床妊娠的的成本-效果比（CER）均低于B组（A组分别为2729.11、8867.19、77598.06元，B组分别为3038.60、9644.85、96139.85元）。结论对于重复IVF/ICSI周期患者，即使卵巢储备功能减退，长方案仍能获得较好的临床结局和经济效益。
作者：陈潇；耿玲；李红 刊期： 2014年第04期
目的：研究人脐带间充质干细胞对白血病细胞株Jurkat体外增殖和存活能力的影响并探讨相关机制。方法组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞，将其作为基质细胞与Jurkat细胞进行直接接触共培养。通过免疫磁珠法分离共培养体系中的Jurkat细胞，流式细胞术检测Jurkat细胞增殖能力、细胞周期和自发凋亡率的变化；Western blotting法检测共培养后Jurkat细胞内Notch信号通路的活化状况。结果共培养4 d后，Jurkat白血病细胞的增殖减缓、细胞周期被阻滞于G0/G1期，而其自发凋亡率则出现显著下降，并伴有Notch信号通路靶分子HES-1表达量的增加。结论人脐带间充质干细胞构成的微环境对Jurkat白血病细胞有保护作用，Notch信号通路可能参与了这一过程。
作者：袁茵；陈丹亮；陈璇；邵红伟；黄树林 刊期： 2014年第04期
目的：通过表型和基因型分析方法，初步了解造血干细胞移植术后巨细胞病毒（HCMV）感染患儿的耐药情况。方法采用人包皮成纤维细胞培养分离并鉴定HCMV临床株；Reed.Muench法测定其半数组织培养感染量（TCID50），空斑减数实验测定病毒对丙氧鸟苷的敏感性，同时以HCMV UL97基因为靶序列，用Nested-PCR扩增目的基因，并对PCR产物做直接序列测定。结果成功从患者尿标本中分离出HCMV临床病毒株，测得其TCID50为：10-4.618/0.1 ml；IC50值为5.847μmol/L，对丙氧鸟苷高度敏感；同时基因序列与AD169株的序列相比较，发现四个位点发生碱基突变，分别是1509 T→C、1575 C→T、1794 T→C、1815 C→G；上述突变的编码子分别为503，525、598和605，前3个位点的突变未导致相应氨基酸改变，第四个位点氨基酸则改变为D605E，未发现与耐药有关的基因突变。结论初步建立造血干细胞移植后HCMV耐药表型和基因型检测的实验方法，本次试验从临床标本中尚未发现HCMV耐药现象。
作者：曾爱红；董德坤；崔喜梅；郭明明；邹德志；方建培 刊期： 2014年第04期
作者： 刊期： 2014年第04期
目的：探讨18F-FDG PET/CT双时相显像在膀胱癌术前分期中的应用价值。方法2003年5月~2012年5月进行18F-FDG PET/CT检查的膀胱癌初诊患者73例，男54例，女19例，年龄58.7（41~80）岁。所有患者18F-FDG PET/CT常规全身显像后，口服40 mg呋塞米并多饮水，多次排尿，服呋塞米后约2 h憋尿充盈膀胱，再进行18F-FDG PET/CT盆腔延迟显像。所有患者于18F-FDG PET/CT检查后1周内进行手术治疗，将PET/CT与手术病理学检查结果进行对比分析，评价18F-FDG PET/CT双时相显像在膀胱癌术前分期中的应用价值。结果18F-FDG PET/CT双时相显像对膀胱癌原发灶的T分期与病理分期符合率为63.0%（46/73），其中pT4期膀胱癌的分期符合率为100%（7/7）；另外检出75.0%（6/8）的淋巴结转移灶，100%（4/4）的远隔器官转移灶和100%（4/4）原发性第二种恶性肿瘤病灶。结论本研究结果表明18F-FDG PET/CT双时相显像在T分期方面，尽管对pTa、pT1、pT2、pT3期膀胱癌的T分期价值不大，但对pT4期膀胱癌的T分期可能有重要的应用价值；在膀胱癌的N分期、M分期及发现第二种原发癌方面也可能有重要的应用价值。
作者：李洪生；吴湖炳；王巧愚；韩彦江；王全师 刊期： 2014年第04期
目的：观察三黄茵赤汤防治D-氨基半乳糖（D-GalN）联合内毒素（LPS）诱导的大鼠急性肝衰竭氧化应激及肝细胞凋亡的作用。方法48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组，每组8只。各组对应给药5 d，建立急性肝衰竭模型48 h后处死动物，检测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素，检测全血中凝血酶原时间、国际标准比率、血浆纤维蛋白原；HE染色观察肝脏病理的变化，检测肝脏组织匀浆液SOD、MDA的含量；免疫组化、免疫印迹检测肝组织caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较，三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组均能减少血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素的含量、缩短全血中凝血酶原时间、国际标准比率时间，增加血浆纤维蛋白原的含量（P<0.05）；明显改善肝脏组织病理变化，提高肝脏组织匀浆液SOD活性，减少MDA含量（P<0.05）；下调caspase-3蛋白表达（P<0.05）；三黄茵赤汤中剂量组与双环醇组无统计学差异（P>0.05），高剂量组优于双环醇组（P<0.05）。结论三黄茵赤汤防治D-GalN联合LPS诱导的急性肝衰竭大鼠成量效关系，具有抗氧化的作用；三黄茵赤汤可能通过抗氧化应激抑制caspase3表达从而减少肝细胞凋亡，以达到防治大鼠急性肝衰竭的作用。
作者：马文校；杨运高；刁建新；刘亚伟；华何与；文小敏 刊期： 2014年第04期
目的利用无血清条件悬浮培养人大细胞肺癌H460系，从中分离到肺癌干细胞并进行其生物学特性研究。方法无血清条件培养法悬浮培养H460细胞形成悬浮细胞球，通过qPCR、Western blot、流式细胞术、平皿克隆形成等实验，比较H460细胞和H460细胞球中干性相关分子表达水平及细胞增殖能力强弱，并利用裸鼠移植瘤形成实验研究肺癌细胞干细胞球的体内生物学特性。结果利用无血清条件培养法成功从H460细胞中分离出悬浮生长的肿瘤干细胞样细胞，其增殖能力强于H460贴壁细胞（P<0.05），干细胞相关转录因子Sox2、Oct4和Nanog表达在mRNA及蛋白水平均有增加（尤以Nanog提升水平明显（P<0.01）），细胞球在裸鼠体内具有较强成瘤能力。结论无血清条件培养法可以有效富集到H460细胞系中的肺癌干细胞，Nanog可能与H460细胞系中CSLCs的干性特征维持相关。
作者：刘攀；周向东 刊期： 2014年第04期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
