学术投稿

表皮葡萄球菌mscL基因突变株的构建及其生物学功能

朱涛;赵艳丰;李朝品

关键词:表皮葡萄球菌, 同源重组, mscL基因, 低渗胁迫, 生物膜
摘要:目的 初步探讨表皮葡萄球菌mscL基因的生物学功能.方法 构建含有壮观霉素抗性基因(spc)的同源重组质粒pMAD-△mscL,电转入表皮葡萄球菌1457,在42℃条件下振荡培养,利用蓝白斑和抗生素抗性筛选表皮葡萄球菌mscL基因敲除突变株(SE1457-△mscL).通过检测低渗胁迫前后突变株和野生株D600值及CFU的变化观察mscL基因对渗透压的调节作用.采用微量板半定量方法检测不同条件下mscL敲除突变对细菌生物膜形成的影响.结果 成功构建同源重组质粒pMAD-△mscL,经PCR扩增和测序验证获得了表皮葡萄球菌mscL基因敲除突变株,并通过RT-PCR在转录水平上得到进一步验证.处于对数生长期的mscL突变株在低渗胁迫下的生存能力显著降低,但其生物膜形成能力与野生株相比无显著差异.结论 表皮葡萄球菌mscL基因可在对数生长期参与渗透压的调节,但对生物膜的形成无影响.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 鳖甲煎丸对肝癌细胞中Wnt信号分子β-catenin、GSK-3β及靶基因CD44v6、VEGF的影响

    目的 通过研究鳖甲煎丸对肝癌细胞HepG2中Wnt信号通路的信号分子及靶基因的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌转移侵袭的分子机制.方法 使用含鳖甲煎丸药物血清培养肝癌细胞HepG2,48 h后采用Western blotting技术检测Wnt/β-catenin通路信号分子β-catenin、GSK-3β和磷酸化GSK-3β表达水平,免疫组化技术检测靶基因CD44v6、VEGF的表达情况.结果 含鳖甲煎丸药物血清可以降低肝癌细胞HepG2中β-catenin表达水平,下调磷酸化GSK-3β表达水平,明显抑制CD44v6、VEGF的表达.结论 鳖甲煎丸抗肝细胞癌转移侵袭的药理作用可能与其下调肝癌细胞HepG2中Wnt/β-catenin信号通路的信号分子β-catenin及磷酸化GSK-3β的表达水平并有效降低靶基因CD44v6、VEGF的表达水平具有相关性,这可能是鳖甲煎丸抑制肝癌细胞HepG2的生长、黏附及转移的重要分子机制之一.

    作者:孙海涛;贺松其;文彬;贾文燕;樊尔艳;郑艳 刊期: 2014年第10期

  • 引导超声聚焦热消融的超高场磁共振射频电磁场匀场技术及人体组织比吸收率安全分析

    目的 探究在超高场磁共振引导下的高强度聚焦超声手术中射频电磁场B1场匀场技术及人体组织比吸收率(SAR)安全性.方法 建立包含温度梯度的女性盆腔模型,分别仿真计算在正常模型匀场系数激励以及在温度梯度模型的匀场系数激励下的射频电磁场B1场的均匀性和局部比吸收率.结果 对包含温度梯度的女性盆腔模型采用正常模型的匀场系数激励,组织局部SAR大值达到10.24 W/kg,超出了国际电工委员会(IEC)对局部SAR值规定的10 W/kg的安全阈值;对包含温度梯度的女性盆腔模型采用温度梯度模型的匀场系数激励,组织局部SAR大值为9.65 W/kg在IEC的安全阈值内.结论 在进行超高场磁共振引导下的高强度聚焦超声手术时,需要考虑超声能量在人体形成的温度分布,在温度梯度的基础上重新进行匀场优化能将组织局部SAR值降低到安全阈值内.

    作者:辜石勇;辛学刚 刊期: 2014年第10期

  • 自组装膜表面不同功能团对骨骼肌细胞生物学特性的影响

    目的 探讨自组装膜表面不同的功能团对骨骼肌细胞生物学特性影响.方法 通过自组装技术在金片表面接枝不同的化学功能团(-CH3、-COOH、-NH2、-OH),测定接触角和原子力显微镜确定其表征,将材料与骨骼肌细胞进行共培养,分别通过SEM、DAPI染色、MTT法、钙黄绿素染色和流式检测法等方法观察不同功能团对骨骼肌细胞的形态、粘附、增殖、活力及凋亡的影响.结果 含有-NH2和-COOH基团的材料表面能明显促进骨骼肌的粘附、增殖,具有良好的生物相容性;而含有-CH3基团的基片明显不利于骨骼肌细胞的粘附、增殖,并对骨骼肌细胞凋亡有一定的促进;不同的功能团材料对骨骼肌细胞粘附、增殖率影响的顺序从大到小依次为-NH2>-COOH>-OH>-CH3;不同的化学功能团对细胞凋亡率和毒性的顺序-NH2<-COOH<-OH<-CH3.结论 不同的功能团对骨骼肌细胞的生物特性具有不同的影响,含有-NH2基团的基片能明显促进细胞的粘附和增殖,有利于构建具有促细胞粘附的生物材料界面;而含有-CH3基团的材料不利于细胞的粘附和增殖,有利于构建抗粘附的生物材料表面界面.

    作者:何鹏;李丽华;何晋;李梅;蓝国波;张涛;尹庆水;崔福斋;张余 刊期: 2014年第10期

  • 埃博拉病毒的防治进展

    2014年2月,埃博拉病毒在西非爆发,短短几个月内蔓延至多国,引起世界卫生组织的高度关注.目前还没有有效的针对埃博拉病毒感染的防治疫苗及药物.本文综述了埃博拉病毒的流行情况,生物学特性,可能的药物靶点以及研究中的疫苗和药物,期望对埃博拉病毒的防治研究进展有一个较全面的认识.

    作者:武文姣;刘叔文 刊期: 2014年第10期

  • 非造血组织肿瘤骨髓转移的诊断及肿瘤细胞形态学特点

    目的 分析骨髓转移性肿瘤的临床表现及血液学特征,观察骨髓转移性肿瘤细胞形态学特点,提高对该疾病的诊断.方法 选择我院2009~2014年所有经骨髓细胞学检查确诊的77例骨髓转移性肿瘤患者,对其临床特征及实验室检查(血常规、血生化、肿瘤标志物、血象及骨髓象)进行回顾性分析.结果 50岁以上的中老年患者占64.9%.临床上以骨痛(65%)、贫血伴血小板减少(63.6%)及幼红幼粒细胞血症(61%)常见.血液学指标发现血沉(ESR),血清碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)升高明显,血清白蛋白(ALB)减低.骨髓细胞学检查发现不同原发病灶的骨髓转移癌形态特点不同,共性特点是涂片尾部及边缘可见数量不等的散在或成团、成簇分布的癌细胞,“合胞体”及退化癌细胞.结论 依据骨髓细胞学检查判断肿瘤原发灶较为困难,但对神经母细胞瘤、小细胞肺癌、胃癌(印戒细胞癌)的诊断具有参考意义.骨髓转移性肿瘤的诊断要注重癌症病史-症状体征-实验室检查的综合分析.

    作者:李莉;丛玉隆;蔡力力;邓新立;关杰 刊期: 2014年第10期

  • 急性失血对老年自发性高血压大鼠术后认知功能的影响

    目的 研究围术期老年自发性高血压大鼠(SHR)血容量对术后认知功能的影响.方法 40只老年雄性SHR随机分为假失血组(A,n=13)、失血量20%组(B,n=13)和失血量40%组(C,n=14).经股动静脉建立急性失血模型,补液量按失血量:乳酸钠林格液为1:3的比例进行.采用Morris水迷宫测试大鼠的空间记忆及学习能力,之后断头取脑,观察大鼠海马区的病理变化.结果 C组参考记忆中逃逸潜伏期较术前显著延长(P=0.002).各组工作记忆无差别.与A组比较,B、C组海马CA1区免疫组化结果分析显示p-CREB的表达量无明显差别.C组CA1区部分椎体神经元体积缩小.结论 不同程度急性失血对术后认知功能的影响是有差异的,急性失血至全身血容量的40%时可影响老年SHR的参考记忆,但不影响工作记忆和学习能力.

    作者:孙强;于冬男;郑勇;阳志芳;赵国栋 刊期: 2014年第10期

  • 血β-羟丁酸诊断2型糖尿病酮症酸中毒阈值的建立

    目的 探索建立血β-羟丁酸(βOHB)诊断2型糖尿病酮症酸中毒(DKA)的阈值及βOHB水平与DKA严重程度的关系.方法 对急症科收治的2型糖尿病患者的血βOHB与[HCO3-]进行相关分析,同时利用回归方程计算出[HCO3-]为18.0、15.0、10.0 mmol/L时的βOHB值,并以与[HCO3-]为18.0 mmol/L对应的βOHB值作为DKA诊断的阈值,并结合临床评估其诊断性能.结果 血βOHB水平与[HCO3*]浓度具有良好的相关性,R2=0.7023,P<0.001.[HCO3-]为18.0、15.0和10.0 mmol/L时的βOHB值分别为3.0、4.70和7.5 mmol/L,并与DKA病情严重程度相符;结合血糖浓度≥13.9 mmol/L,当血βOHB≥3.0 mmol/L时,诊断DKA的灵敏度为99.0%,特异性为86.0%,总有效性为92.81%.结论 血βOHB≥3.0 mmol/L可作为DKA诊断的阈值,并且βOHB可作为DKA病情严重程度的判断指标.

    作者:柯培锋;周海涛;万泽民;吴晓宾;林海标;黄宪章 刊期: 2014年第10期

  • 苯并二氢吡喃衍生物对人类乳腺癌细胞增殖的影响

    目的 研究苯并二氢吡喃衍生物xy2004对乳腺癌细胞增殖的影响.方法 采用MTT比色法测定化合物对MCF-7细胞的增殖作用;用流式细胞术测定化合物对细胞凋亡的影响,用放射性配体结合法考察化合物与雌激素受体(ER)的亲和力,用蛋白印记杂交法观察细胞内凋亡蛋白的变化.结果 低浓度的xy2004促进MCF-7细胞增殖,其增殖作用可被tamoxifen阻断;高浓度xy2004抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达降低;xy2004对ERα和ERβ的IC50分别为7.38× 10-5 mol/L和4.12×107mol/L.结论 化合物xy2004低浓度促进MCF-7细胞增殖,其增殖作用机制与ERα激动有关,高浓度抑制MCF-7细胞增殖,抗增殖作用与诱导细胞凋亡相关.

    作者:侯进;李萍;曾菊绒;胥晓丽;熊晓云;弥曼 刊期: 2014年第10期

  • 脂联素受体2基因+33371Gln/Arg、细胞色素P4502E1基因RsaⅠ 位点多态性和吸烟与非酒精性脂肪性肝病的相关性

    目的 探讨脂联素受体2(AdipoR2)基因+33371Gln/Arg、细胞色素P4502E1 (CYP2E1)基因Rsa Ⅰ位点多态性和吸烟与非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病之间的关系.方法 采用病例-鹏研院的方法,以750例NAFLD患者及750例健康对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术分析了+33371Gln/Arg和CYP2E 1-RsaⅠ基因多态性.结果 +33371Gln/Arg(A/A)基因型和CYP2E1-Rsa Ⅰ (c2/c2)基因型频率分布分别为39.20%、71.73%(病例组)和21.07%、43.07%(对照组).+33371Gln/Arg(A/A)患NAFLD的风险显著增加(OR=2.4156,95%CI=1.8164~4.0725).CYP2E1-saⅠ (c2/c2)基因型者患NAFLD的风险也显著增加(OR=3.3547,95%CI=1.9182~4.5057).+33371Gln/Arg(A/A)/CYP2E1-RsaⅠ(c2/c2)基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为32.67%和6.40%.+33371Gln/Arg(A/A)/CYP2E1-Rsa Ⅰ (c2/c2)基因型者患NAFLD的风险显著增加(OR=9.9264,95%CI=4.2928~12.4241).病例组的吸烟率显著高于对照组的吸烟率(OR=2.5919,95%CI=1.4194~4.9528),+33371Gln/Arg(A/A)/CYP2E1-RsaⅠ (c2/c2)基因型与吸烟有协同作用(OR=34.6764,95%CI=18.9076~61.5825).结论 +33371Gln/Arg(A/A)/CYP2E1-Rsa Ⅰ (c2/c2)基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,三者的联合在NAFLD的发生中起着协同的作用.

    作者:张超贤;郭李柯 刊期: 2014年第10期

  • Exendin-4通过PI3K/Akt信号通路促进脂肪干细胞旁分泌细胞因子

    目的 探讨Exendin-4促进脂肪来源干细胞(ADSCs)旁分泌细胞因子的机制.方法 混合酶消化法提取和培养SD大鼠腹股沟处的脂肪干细胞,使用流式细胞学检测有或无Exendin-4处理后的第4代ADSCs表面标记物,MTT法绘制0、1、5、10、20 nm/L不同浓度Exendin-4下的ADSCs生长曲线;qPCR法检测不同浓度Exendin-4处理12h后bFGF、VEGF、HGF、IGF-1的表达变化.Western blotting和qPCR检测Exendin-4对于Akt通路的作用.同时添加通路阻断剂LY-294002,使用ELISA检测Akt通路阻断后Exendin-4对于旁分泌蛋白的影响.结果 分离培养的ADSCs高表达CD29、CD90、CD105,低表达CD34、CD45,并且能够多向分化为脂肪细胞、骨细胞,符合间充质干细胞的表型特点.Exendin-4处理后,不仅不会改变ADSCs的表型,还能以浓度依赖方式促进ADSCs在体外增殖(P<0.05).不同浓度Exendin-4处理ADSCs 12 h后,旁分泌蛋白bFGF、VEGF、HGF、IGF-1的表达量逐渐提高,其中10 nm/LEx-4处理12 h可能为佳处理浓度(P<0.05).Western blotting和qPCR提示Exendin-4能够显著提高胞内Akt的磷酸化水平,而给予LY-294002后,磷酸化Akt表达减弱,同时ADSCs培养液上清中bFGF、VEGF、HGF、IGF-1的含量也明显降低(P<0.05).结论 短暂Exendin-4处理不会改变ADSCs表型,但能加强细胞的增殖能力,且以剂量依赖方式促进干细胞旁分泌细胞因子bFGF、VEGF、HGF、IGF-1.10 nm/L可能为Exendin-4适促旁分泌浓度,其扩大干细胞旁分泌的机制部分是通过激活PI3K/Akt信号通路来介导.

    作者:周浩;杨俊杰;王晶;胡舜英;陈光辉;陈韵岱 刊期: 2014年第10期

  • 白纹伊蚊嗅觉受体OR7的基因克隆、鉴定和功能分析

    目的 克隆鉴定白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7,并对其表达谱和功能进行分析.方法 提取成蚊总RNA,采用RT-PCR技术扩增白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7的全长编码基因,并检测OR7在不同虫期和不同组织器官中的表达谱;将OR7基因克隆于真核表达载体pME18s中,转染HEK293细胞,利用钙成像技术初步分析其对气味分子刺激的钙调功能.结果 成功克隆出白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7的全长编码基因,经测序得知其编码区序列长度为1395bp;表达谱分析显示,其在蚊幼虫、蛹、成蚊中都有表达,且在雌蚊嗅器中表达显著.钙成像结果显示OR7对气味分子刺激后的钙离子通道有一定的调节功能.结论 克隆出白纹伊蚊的嗅觉受体基因OR7,初步分析显示其在雌蚊中显著表达,并具有对气味分子的识别功能.

    作者:周宁;王晓明;邓裕华;刘宏美;刘通;陈晓光 刊期: 2014年第10期

  • 基于RAM-HPLC在线富集技术检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米

    目的 通过柱切换技术建立限进性填料柱-高效液相色谱法,实现在线直接进样并检测大鼠血浆及尿液中的呋塞米.方法 以自制限进填料柱为预处理柱,LunaC18柱为分析柱,预处理流动相为水-甲醇(95:5,V/V),含体积百分数为0.1%的甲酸,流速为1 ml/min;分析流动相为血浆:甲醇-水(65:35,V/V),尿液:甲醇-水(55:45,V/V),均含体积百分数为0.1%的甲酸,流速均为1 ml/min,柱温为25℃;检测波长为274nm.结果 呋塞米血浆样品在进样100 μ1时,富集效果良好,在0.1~3.2 μg/ml的浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9995),尿液进样20 μl,呋塞米浓度在0.5~32 μg/ml范围内具有良好的线性关系(r=0.9991),血样及尿样的三个加标水平下的平均回收率分别为101.82%~113.36%,98.75%~112.27%,日内日间精密度均小于5%.结论 药代动力学参数AUC0→24为6.265 μg/(ml·h),t1/2为2.447h,Cmax为1.414μg/ml;24 h内呋塞米的累积排泄率为32.50%~39.08%.本方法简单快速,适用于血浆及尿液中呋塞米的直接进样检测.

    作者:张晓惠;王荣;谢华;尹强;李文斌;贾正平;张娟红 刊期: 2014年第10期

  • 基因组DNA甲基化水平与不明原因早期自然流产的相关性

    目的 探讨基因组DNA甲基化水平与人不明原因早期自然流产的关系并从mRNA表达量上研究DNMT1、DNMT3A和DNMT3B在自然流产绒毛DNA甲基化中的作用.方法 收集45例核型正常自然流产绒毛组织及其中33例母亲外周血和44例核型正常人工流产绒毛组织及其中34例母亲外周血,采用高效液相色谱法(HPLC)测定基因组DNA甲基化水平并用荧光定量PCR法检测其中33例人工流产绒毛和30例自然流产绒毛DNMT mRNA的表达.结果 (1)自然流产绒毛组DNA甲基化水平低于人工流产绒毛组(P<0.01);(2)自然流产母亲组和人工流产母亲组间DNA甲基化水平差异无统计学意义(P>0.05);(3)自然流产绒毛组DNMT1和DNMT3A mRNA的表达低于人工流产绒毛组(P<0.05);(4)自然流产绒毛组DNMT3B mRNA的表达与人工流产绒毛组差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)人类早期自然流产中确实存在着绒毛组织基因组DNA甲基化的不足;(2)自然流产绒毛中DNA甲基化的不足可能与DNMT1和DNMT3A表达降低有关.

    作者:晁远;翁立冬;曾嵘 刊期: 2014年第10期

  • 选择性部位起搏对左室收缩同步性的影响

    目的 应用二维斑点追踪成像超声技术,通过计算起搏后左室各节段收缩时间的差异,比较右室心尖(RVA)起搏与右室流出道(RVOT)间隔起搏时对左室收缩同步性的影响.方法 入选符合起搏器植入适应证的患者60例,随机分为RVA组30例,RVOT组30例.RVA组患者右室电极植于右室心尖部,RVOT组患者右室电极植于右室流出道间隔部.所有患者术后程控心室电极100%起搏,应用二维斑点追踪成像技术,测量左室径向应变达峰时间的差异.结果 RVA组起搏后,左室6节段径向应变达峰时间的大差、标准差分别为105.27士19.74 ms、42.71±17.63 ms;RVOT组起搏后6节段径向应变达峰时间的大差、标准差分别为41.65±-12.17 ms、17.63±5.62 ms,两组比较各指标均有差异(P<0.01).结论 RVOT间隔部起搏后的左室收缩同步性优于RVA起搏.

    作者:陈东骊;汤娇娇;陈泗林;林纯莹;刘烈;张黔桓;梁远红;彭湖;陈燕 刊期: 2014年第10期

  • 3.0T高分辨率磁共振成像评估大脑中动脉粥样硬化狭窄的可信度

    目的 探讨3.0 T高分辨率磁共振成像(HR MRI)评估大脑中动脉粥样硬化性狭窄的可信度.方法 2011年2月~2013年12月,对66例经DSA确诊的动脉粥样硬化性MCAM1段中重度狭窄(50%~99%)患者进行HR MRI检查,测定MCA狭窄处管腔面积(lumen area,LAnarrow)、血管面积(vessel area,VAnarrow)及参考血管LAreference及VAreference,分析MCA斑块分布部位(前壁、后壁、上壁、下壁);比较2位研究者的定量测量及定性分析结果,对比分析其中一位研究者首次及1个月后的再次分析结果;ICC法分析观察者自身差异及不同观察者间差异.结果 HR MRI测量VAnarrow、AVreference、LAreference具有非常好的组间(ICC 0.801、0.843、0.808)及组内一致性(ICC 0.811、0.916、0.958);LAnarrow测定结果的一致性一般(ICC 0.584、0.625),要差于其他3个指标.HR MRI判断有无斑块的一致性非常好(ICC0.917、0.960);HRMRI判定MCA不同部位(上壁、下壁、前壁、后壁)斑块的组间(ICC 0.856、0.836、0.791、0.905)、组内(ICC 0.876、0.827、0.825、0.950)一致性较好.结论 基于HR MRI的MCA粥样硬化性狭窄定量、定性分析具有较好的可重复性,但对血管狭窄处的定量分析可信度仍有待提高.

    作者:贾泽军;袁渊;杨志刚;赵瑞;许奕;黄清海;赵文元;马小龙;邓晓群 刊期: 2014年第10期

  • 色霉素A2诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

    目的 研究色霉素A2对人肝癌细胞HepG2的凋亡诱导作用,以期为肝癌的治疗提供新的治疗药物.方法 MTT法检测色霉素A2作用HepG2、MCF-7、A549、7901细胞后对细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察HepG2细胞在色霉素A2(0、60 nmol/L)的作用下,细胞染色质的变化;色霉素A2(0、20、40、60 nmol/L)作用HepG2细胞24 h,显微镜观察细胞形态变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,活性氧水平及膜电位水平的变化.结果 色霉素A2对人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制效果,且呈时间,剂量依赖关系;药物作用细胞后,细胞染色质凝聚,染色加深;细胞形态方面发生细胞皱缩,并且细胞数目变少;流式细胞仪测定结果显示,细胞凋亡率随药物浓度升高而增大,并且细胞内活性氧水平上升,线粒体膜电位水平降低.结论 色霉素A2诱导人肝癌HepG2细胞产生凋亡,其诱导HepG2细胞凋亡的机制可能与活性氧的升高及线粒体膜损伤有关.

    作者:王琰;陆园园;鲍维维;谢美娟;杜振宁 刊期: 2014年第10期

  • 壳聚糖纳米粒介导的PIK3CA基因干扰对胃癌细胞侵袭转移能力的影响

    目的 观察PIK3CA siRNA-聚糖纳米粒子处理胃癌细胞BGC823后,胃癌细胞BGC823侵袭能力的变化,研究壳聚糖纳米粒子介导PIK3CA干扰在抑制胃癌侵袭转移中的应用价值.方法 使用壳聚糖包被PIK3CA siRNA制备纳米粒子,纳米粒子粒径在350 nm.用其处理胃癌细胞,通过western blot及PCR检测PIK3CA沉默情况,并通过Traswell实验观察细胞侵袭性的变化.结果 PIK3CA siRNA-壳聚糖纳米粒子可显著下调胃癌细胞BGC823中PIK3CA的表达(P<0.01),并且可明显抑制胃癌细胞的侵袭性(P.<0.001).结论 通过壳聚糖纳米粒子介导的PIK3CA基因干扰可以显著降低胃癌细胞的侵袭能力.

    作者:周新科;何璐;梁敏;刘季芳 刊期: 2014年第10期

  • 急性肺损伤患者诱导性多能干细胞系的建立

    目的 利用急性肺损伤患者皮肤成纤维细胞构建诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)系.方法 采用慢病毒介导逆转录的方法,将含有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog四个因子的混合慢病毒转染人皮肤成纤维细胞,诱导出胚胎干细胞样克隆,根据人胚胎干细胞的特性,利用AP染色、实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术、免疫荧光、畸胎瘤形成实验对获得的iPS细胞进行鉴定.结果 获得的iPS细胞镜下观察呈典型的ES样克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲养层细胞分界清楚;AP染色阳性,RT-PCR及免疫荧光检测iPS细胞高表达人胚胎干细胞标志性基因及蛋白,移植到免疫缺陷鼠体内能够形成向三胚层分化的畸胎瘤.结论 成功建立了急性肺损伤患者iPS细胞系,可为急性肺损伤的发病机制研究和临床药物筛选提供良好的细胞模型.

    作者:丁桃;李阳;唐睿珠;张旋;云雨;李健;王殿华 刊期: 2014年第10期

  • 维格列汀联合门冬胰岛素治疗老年2型糖尿病患者的疗效及安全性

    目的 观察维格列汀联合门冬胰岛素治疗老年2型糖尿病患者的疗效及安全性.方法 对66例使用门冬胰岛素血糖控制不佳的老年2型糖尿病患者随机分两组:观察组36例,加用维格列汀50 mg,2次/d口服;对照组30例,加用阿卡波糖50 mg,3次/d餐中嚼碎服.使用12周后观察两组空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹C肽、餐后2hC肽(2 hC肽)、体质量指数(BMI)、肾小球滤过率(GFR)的变化.结果 观察组治疗后FBG、2 hPG、HbA1c均较治疗前下降(P<0.05),空腹及2 hC肽较治疗前升高(P<0.05),BMI、GFR与治疗前无明显变化(P>0.05);对照组治疗后2 hPG、HbA1c较治疗前下降(P<0.05),FBG、空腹C肽、2 hC肽、BMI、GFR与治疗前比无明显变化(P>0.05);观察组与对照组相比,FBG显著降低(P<0.05),空腹C肽、2hC肽显著升高(P<0.05),2hPG、HbA1c、BMI、GFR无明显差异(P>0.05).低血糖:两组均无一次发生.结论 维格列汀联合门冬胰岛素与阿卡波糖联合门冬胰岛素对降低2 hPG、HbA1c疗效相当,且无体重增加及GFR下降,无低血糖发生.而且维格列汀联合胰岛素较对照组在降低FBG、改善胰岛β细胞功能上作用更明显.

    作者:许翎;林凯;邓海鸥;黎映兰;智喜梅;张伟杰;吴文 刊期: 2014年第10期

  • 慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达

    目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础.方法 以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点,设计4组靶向Fas的shRNA序列,合成寡核苷酸,与经过BamHI、EcoRI双酶切后的LV3载体连接获得重组慢病毒,通过感染293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定.体外培养人UC-MSCs,使用包装好的慢病毒感染UC-MSCs,应用Real time-PCR和Western blotting检测感染后细胞中Fas mRNA及蛋白的表达情况.结果 经酶切以及基因测序鉴定证明慢病毒载体构建成功,病毒悬液滴度为3×l08 TU/ml.Real time-PCR和Western blotting结果显示干扰组细胞的Fas表达水平较对照组显著降低.结论 慢病毒介导的SiRNA能有效沉默UC-MSCs中Fas基因的表达.

    作者:王露;翟玮玮;杨向荣;王芳;李见;张强;李玉云 刊期: 2014年第10期

南方医科大学学报杂志

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