杨俊;邱小忠;余磊;朴英杰;秦建强
目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
作者:肖新莉;韩俊;张琳;陈岚;张瑾;陈新林;周伟;姜惠英;张宝云;刘勇;董小平 刊期: 2006年第11期
目的 利用细菌内同源重组法构建带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)重组腺病毒载体并制备重组腺病毒.方法 将IP-10编码序列克隆入带有EGFP示踪的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移载体pAdTrack-CMV/IP-10,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd/IP-10;酶切鉴定正确后转染HEK293细胞.收集病毒上清,PCR鉴定正确后,扩增并再次感染HEK293细胞检测病毒感染能力.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在HEK293细胞中包装成有感染活性的病毒颗粒.结论 成功地构建了表达IP-10蛋白的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒Ad/IP-10,为研究IP-10的蛋白功能提供了一个重要工具.
作者:邵紫韫;刘志锋;彭毅;徐佳;邓鹏;姜勇 刊期: 2006年第11期
目的 检测正常豚鼠及庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉两种状态下的听性脑干反应(ABR),比较两种状态下ABR波形、反应阈及潜伏期等的差别.方法 杂色豚鼠40只(正常组和庆大霉素致耳聋组各20只)分别在麻醉前后记录ABR各数据,用配对t检验进行统计学分析.结果 正常豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR波形,反应阈,Ⅰ、Ⅲ波峰潜伏期,Ⅰ-Ⅲ波峰间期无显著差异(P>0.05);庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR各参数亦无显著差异(P>0.05).结论 豚鼠(正常或耳聋)在清醒或麻醉状态下测试ABR无显著差异,因此为保证实验成功和减少误差可采用非麻醉方法.
作者:陈浩;李永贺;钱宇虹;郭梦和 刊期: 2006年第11期
目的 评估人工全膝关节置换术(TKA)围手术期的显性和隐性失血量.方法 对2002~2005年的40例TKA患者进行回顾性分析,通过Gross方程推算患者术后平均显性失血量及隐性失血量.结果 平均总失血量1538 ml,其中显性失血量747 ml (49%),隐性失血量是791 ml(51%).使用自体血回输患者的总失血量是1650 ml,其中显性失血量903ml(52%),隐性失血量是786 ml(48%);未使用自体血回输患者的总失血量是1370 ml,其中显性失血量572 ml(42%),隐性失血量是798ml(58%).结论 TKA隐性失血占总失血量的比例较高,使用自体血回输不能完全满足机体恢复体循环的需要,在围手术期要注意及时补充血容量.
作者:罗吉伟;金大地;黄美贤;廖华;徐达传 刊期: 2006年第11期
目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利对心肌梗死大鼠左室重构和心功能的影响,并探讨osteopontin蛋白在其中的作用.方法 将成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组,心肌梗死盐水组和心肌梗死培哚普利组.后两组动物在冠状动脉左前降支结扎第2天起给予生理盐水或者培哚普利灌胃,1次/d.4周后测定有创左室血流动力学,超声心动图测量左室内径和射血分数,组织学方法检测非梗死区心肌细胞直径和胶原纤维沉积,Western blot检测心肌组织osteopontin蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠(盐水组和培哚普利组)均出现显著的左室收缩和舒张功能障碍,表现为LVEF、LVSP和±dp/dtmax下降,LVEDP显著升高.同时左室重量与体质量比值升高,LVEEDD和LVESD增大,非梗死区心肌细胞横径增加,心肌间质胶原纤维沉积增加,提示显著的左室重构.与盐水组相比,培哚普利治疗显著改善心肌梗死大鼠心功能,预防左室扩大,减轻非梗死区心肌细胞肥大和心肌间质胶原纤维沉积.Western blot未检测到osteopontin蛋白在假手术大鼠心肌组织表达,在心肌梗死大鼠心肌组织有大量osteopontin蛋白表达,该上调的蛋白能被培哚普利治疗显著抑制.结论 培哚普利抑制心肌梗死大鼠左室重构,改善心功能,可能与其抑制osteopontin蛋白表达有关.
作者:张玉玲;周淑娴;王铭辉;王景峰 刊期: 2006年第11期
目的 研究survivin反义寡核苷酸对人肝癌耐药细胞株的增殖和凋亡情况,以及对阿霉素化疗敏感性的影响.方法 将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM分为脂质体转染组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染组、正义寡核苷酸转染+阿霉素组、反义寡核苷酸转染组、反义寡核苷酸转染+阿霉素组共6组.MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,RT-PCR和Westemblot印迹法检测细胞survivn mRNA和蛋白表达.结果 survivin-ASODN作用后的人肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM的细胞凋亡率明显增高(P<0.05).survivin mRNA和survivin蛋白表达:脂质体转染对照组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染对照组、正义寡核苷酸转染对照+阿霉素组之间survivin蛋白表达无明显差异(P>0.05).400ng/ml surviving ASODN组和400ng/mlASODN+阿霉素组survivinmRNA较其他4组显著降低(P<0.05),但其两组之间表达无明显差异(P>0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能降低肝癌耐药细胞survivin表达,增强人肝癌耐药细胞对阿霉素的化疗敏感性.
作者:高鹏;方驰华;张刚庆;颜政 刊期: 2006年第11期
目的 研究螺旋CT插值算法引起的锥形伪影的特征.方法 根据插值算法和反投影重建基本原理建立重建图像的数学模型,阐明锥形伪影与扫描参数和被扫描物属性的函数关系;采用自制体模在Siemens Plus 4扫描仪上进行实验验证.结果 理论分析发现,伪影占图像的比重与扫描仪机架旋转1周的进床距离和锥形体模半锥角的正切值成正比,与重建位置的体模半径成反比.体模实验结果与理论分析相符.结论 插值算法引起的锥形伪影与扫描参数和被扫描物属性存在确定关系.
作者:林意群;杨克柽;余晓锷 刊期: 2006年第11期
目的 分析皮质下动脉硬化性脑病(SAE)的病因、病理、临床表现、影像学特征.方法 对63例SAE患者进行回顾性分析.结果 SAE组危险因素以高血压为主,均有神经局灶体征,较明显的认知功能障碍,多缓慢起病,临床症状呈阶梯样进展.58例CT扫描在双侧侧脑室周围白质区及半卵圆中心可见不同程度大致对称的低密度影,均合并腔隙性梗死.44例做MRI检查,T2加权像均表现为环绕侧脑室周围对称、大片融合的长T1、长T2异常信号,腔隙性梗死灶数目明显多于CT,呈点条状高信号影.结论 SAE以高血压、较明显的认知功能障碍,常见卒中样发作为主要临床特征,CT及MRI表现为侧脑室周围广泛融合成片的脑白质病变,并有脑室周围白质的明显萎缩及双侧脑室对称性扩大.
作者:高国栋;莫建伟;徐书雯 刊期: 2006年第11期
目的 利用MR-DTI技术行三维脑白质成像,评价脑肿瘤对白质束的改变,探讨脑肿瘤对白质的改变与瘤周部分各向异性值(FA值)改变的量化对应关系.方法 12例脑内恶性肿瘤患者被成功地完成了常规MR检查及DTI检查,分别获得各自的常规MR图、相应感兴趣区(ROI)的部分各向异性图(FA图)、彩色编码张量图、脑白质三维示踪图、脑肿瘤侧和对侧内囊区的FA值.结果 彩色编码张量图、三维示踪图可清楚地显示目标脑白质的位置,走行和受损状况.将患者患侧FA1值与对侧FA2值之比从0~1等分为4个区间,相应地将肿瘤致脑白质束的改变分为4种,Ⅰ:两侧FA值之比>75%,脑白质正常或基本正常;Ⅱ:FA值之比>50%,但<75%,脑白质移位或/和轻度受损;Ⅲ:FA值之比>25%,但<50%,脑白质中度受损但未完全破坏;Ⅳ:FA比值<25%,此时相应脑白质束未见显示.结论 MR-DTI技术可进行脑白质纤维示踪,使其清晰地可视化.FA值的改变程度与脑白质纤维受损程度呈正相关.
作者:李贻卓;黄子林;魏大年;谢传森;何浩强;魏一飞;陈林;吴沛宏 刊期: 2006年第11期
目的 克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2 N末端的多克隆抗体.方法 采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1~153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价.结果 成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞.结论 获得了mTLR-2 N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体.
作者:杨翠兰;赵文忠;刘艳君;朱平;富宁 刊期: 2006年第11期
目的 观察小剂量氯氨酮复合芬太尼术后静脉镇痛应用于老年病人的临床效果和并发症,并与单纯芬太尼进行比较.方法 选择行胸腹部手术后老年(年龄≥65岁)患者80例,随机分为两组,每组40例.氯氨酮-芬太尼组(联合组):氯氨酮0.5 mg/ml+芬太尼5.0 μg/ml+咪唑安定50μg/ml;单纯芬太尼组:芬太尼7.5 μg/ml+咪唑安定50μg/ml.各组镇痛泵中药物均用生理盐水稀释至200ml.观察各组患者术后镇痛48 h内的静息镇痛评分、镇静评分以及恶心呕吐、皮肤瘙痒、幻觉的发生情况.结果 两组用药总量及PCA量均相似(P>0.05).两组术后各时段静息镇痛评分均无显著性差异(P>0.05).联合组在各时段的镇静效果明显地优于单纯芬太尼组(P<0.05).在术后镇痛48 h内,联合组的恶心、呕吐、皮肤瘙痒发生率明显低于单纯芬太尼组(P<0.05),两组患者均无幻觉发生.结论 小剂量氯氨酮用于老年病人术后镇痛可明显减少芬太尼的剂量,并使恶心呕吐、皮肤瘙痒的发生率降低,而镇痛效果并无差异.
作者:梁仕伟;陈晔明;林春水 刊期: 2006年第11期
目的 研究急性心肌梗死时血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1)以及外周血CD34+细胞的动态改变,探讨其在心肌梗死(心梗)中的作用.方法 采集急性心梗患者发病第1、3、7、10、14天外周静脉血,应用酶联免疫方法检测心梗患者以及对照组患者血VEGF和SDF-1的水平.应用流式细胞仪检测心梗患者第1、7、14天外周血CD34+细胞的水平.同时对心梗患者进行心肌酶、肌钙蛋白、心电图及心脏超声等常规检查.结果 (1)心梗后第7天外周血CD34+细胞(个/μl)明显增高(2.35±0.72vs 1.48±0.49,P<0.05);(2)心梗后血VEGF(pg/ml)明显升高,于第14天达到高峰(197.56±39.87 vs 53.79±18.12,P<0.01);(3)心梗第1天血SDF-1(pg/m1)明显降低(1683.12±224.79 vs2178.67±265.34,P<0.01),以后渐恢复至与对照组相同水平;(4)心梗第7天VEGF水平与外周血CD34+细胞高峰值之间有明显相关性;(5)VEGF高峰值与CK-MB高峰值和肌钙蛋白Ⅰ之间均有明显相关性.结论 心肌梗死本身即可动员干细胞至外周血;心梗后VEGF明显升高至少可持续2周以上,SDF-1短暂降低;两者的动态变化可能与干细胞动员及促使更多干细胞归巢至损伤心肌有关.
作者:邓争荣;杨春;马爱群;陈新义;耿涛 刊期: 2006年第11期
目的 分析益母草属4种植物nrDNA ITS序列,探讨其在益母草药材DNA分子鉴别中的作用.方法 对4种益母草属植物分别进行ITS序列的PCR扩增和测序,并运用CLUSTRALX和MEGA软件进行分析.结果 测得4种植物的ITS序列,包括ITS1、5.8S和ITS2全长序列以及18S、26S部分序列;益母草及其易混淆的3种植物ITS1、ITS2序列的差异性分别为7.2%~18.8%和14.2%~27%.根据ITS序列特征所构建的系统树与传统分类有所不同.结论 ITS序列特征可作为益母草种间鉴别的有效分子标记.
作者:杨志业;晁志;霍克克;吴炳义;潘胜利 刊期: 2006年第11期
目的 探讨结肠黑变病(MC)的病因,分析其临床表现和预后.方法 回顾性分析经内镜和病理确诊为MC的17例患者的临床、内镜资料.结果 17例患者中有便秘症状者16例,服泻药15例,病变累及全结肠9例,合并腺瘤性息肉3例,上皮不典型增生1例,合并直肠癌1例.结论 MC主要与便秘和长期服泻药有关;年龄与MC发病密切相关;有恶变倾向,临床上应予重视.
作者:黄聪武;詹海勇;李壁宏;李国平;郑宗茂;吴灵飞 刊期: 2006年第11期
目的 研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系.结果 (1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P<0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P>0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P<0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P<0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P<0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P<0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P<0.001).结论 食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标.
作者:张惠忠;刘金耿;魏益平;吴澄;曹永科;王梅 刊期: 2006年第11期
目的 探讨持续硬膜外阻滞分娩镇痛(以下简称分娩镇痛)的子宫收缩(以下简称官缩)和产程特点,为分娩镇痛产程观察与处理提供临床依据.方法 (1)自然临产宫口开大3 cm实施分娩镇痛的产妇213例,由专人在分娩镇痛前和镇痛显效后30、60、120min时,应用美国惠普公司M135lA型胎儿监护仪,分别监测宫缩周期、持续时间、强度、宫缩曲线类型,研究分娩镇痛的宫缩特点.(2)比较分娩镇痛421例与非分娩镇痛237例产妇第1产程活跃期、第2和第3产程时间的差异,研究分娩镇痛的产程特点.结果 (1)镇痛前与镇痛显效后不同时间段宫缩各项客观指标与镇痛前比较差异有显著性(P<0.05),提示镇痛后宫缩减弱有统计学意义;(2)镇痛后不同时间段宫缩各项客观指标比较差异无显著性(P>0.05);(3)镇痛组平均第1产程活跃期短于对照组(P<0.05),严密监测下合理使用催产素,平均第2、3产程时间差异无显著性(P>0.05);(4)分娩镇痛组产钳助产率高于对照组(P<0.05).结论 分娩镇痛对宫缩和产程有一定的影响,正确认识分娩镇痛的宫缩和产程特点、进行积极有效的产程处理是分娩镇痛成功的关键.
作者:尹春艳;周敬珍;吕小燕;黄小鹏;何桂华;陈建飞 刊期: 2006年第11期
目的 探索白细胞介素-1β(IL-1β)激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体,修复神经缺损.方法 体外培养纯化的许旺细胞经IL-1β激活前、后与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处.S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白共培养情况,原位杂交法观察人发角蛋白降解及神经生长因子(NGF)在坐骨神经内的表达,移植术4周后检测坐骨神经功能指数.结果 经IL-1β激活后的许旺细胞能更好地黏附于人发角蛋白表面,进行分裂、增殖.3~4周,桥接体内的人发角蛋白开始降解,其周围可见IL-1β激活后的处于增殖分裂期的许旺细胞NGF表达强阳性,坐骨神经功能恢复时间提前.结论 经IL-1β激活后的许旺细胞与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白复合培养构建成人工神经桥接体,具有修复神经缺损的同时还能够加速坐骨神经损伤后功能的恢复.
作者:杨俊;邱小忠;余磊;朴英杰;秦建强 刊期: 2006年第11期
目的 研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响.方法 采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响.结果 受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大.结论 在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电.
作者:杨红军;胡三觉 刊期: 2006年第11期
目的 探讨和分析羊水注入猕猴、山羊血循环后对动物血液动力学和呼吸的影响,确立羊水栓塞是否存在种属差异性.方法 选择非孕猕猴2只和孕末期山羊16只,2只猕猴予注入人原羊水,山羊根据注入液体性质不同随机分成4组:原羊水组、过滤羊水组,胎粪污染的羊水组和生理盐水对照组,分别在液体注入前、注入后10、30、60、90、180 min进行观察.结果 在羊水注入后,2只猕猴血液动力学和呼吸与羊水注入前无明显差异.孕羊实验组羊水注入后,实验组所有动物都出现了血液动力学的改变,以胎粪组改变为明显,各实验组心率无明显改变;除胎粪组有明显呼吸改变外,原羊水组和过滤羊水组各有1只动物出现呼吸频率改变.结论 羊水注入山羊体内都出现了血液动力学改变,而猕猴未发生血液动力学变化,提示羊水栓塞发生存在种属和个体差异,同时也说明使用猕猴制备羊水栓塞动物模型是不合适的.
作者:黄神姣;余艳红;盛超;吴英 刊期: 2006年第11期
目的 通过体检及问卷调查,初步探讨老年人牙周病与冠心病的相关性.方法 选取2003-2005年西安市新城区和阎良区离退休老干部662名,其中男589名、女73名,平均年龄(72.5±8.9)岁,分为冠心病组357例(病例组),包括稳定型心绞痛(SAP)141例,不稳定型心绞痛(UAP)134例及急性心肌梗死(AMI)82例和非冠心病组305例(对照组),均设计相同的问卷进行调查,比较两组牙周指数(PI)及牙齿缺失数的差异.结果 (1)冠心病组PI明显高于对照组(P<0.01),在调整性别、年龄、体重指数、吸烟史、高脂饮食习惯、高血压病及心脑血管病家族史后,PI仍与冠心病显著相关(P<0.01).(2)AMI、UAP和SAP组的PI与对照组比较差异均有显著性(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);牙齿缺失数在冠心病各组与对照组之间差异无显著性.(3)吸烟(OR=0.638,P<0.01)和心脑血管病家族史(OR=0.678,0.01<P<0.05)亦为冠心病的危险因素.结论 老年牙周病与冠心病之间存在一定的相关性.
作者:李高中;徐琳;权正良;寇植;蔡乐农;苏联珍;李秀燕;种永峰 刊期: 2006年第11期