罗吉伟；金大地；黄美贤；廖华；徐达传
目的 寻求一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.方法 将大鼠触须毛囊完整拔出后,在37℃缓慢搅拌的条件下加入0.2%胶原酶Ⅰ消化3 h,间断吹打使毛乳头游离,收集上清低速离心(300r/min)后收集毛乳头进行培养,计算其贴壁率,检测α-平滑肌肌动蛋白表达.结果 全毛囊消化法能显著降低工作强度,减少污染机会,具有毛乳头贴壁快和细胞迁出时间短的优点.α-平滑肌肌动蛋白染色阳性.结论 全毛囊消化法是一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.
作者：孙锡金；胡志奇 刊期： 2006年第11期
目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
作者：肖新莉；韩俊；张琳；陈岚；张瑾；陈新林；周伟；姜惠英；张宝云；刘勇；董小平 刊期： 2006年第11期
目的 评估人工全膝关节置换术(TKA)围手术期的显性和隐性失血量.方法 对2002～2005年的40例TKA患者进行回顾性分析,通过Gross方程推算患者术后平均显性失血量及隐性失血量.结果 平均总失血量1538 ml,其中显性失血量747 ml (49%),隐性失血量是791 ml(51%).使用自体血回输患者的总失血量是1650 ml,其中显性失血量903ml(52%),隐性失血量是786 ml(48%);未使用自体血回输患者的总失血量是1370 ml,其中显性失血量572 ml(42%),隐性失血量是798ml(58%).结论 TKA隐性失血占总失血量的比例较高,使用自体血回输不能完全满足机体恢复体循环的需要,在围手术期要注意及时补充血容量.
作者：罗吉伟；金大地；黄美贤；廖华；徐达传 刊期： 2006年第11期
目的 克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2 N末端的多克隆抗体.方法 采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1～153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价.结果 成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞.结论 获得了mTLR-2 N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体.
作者：杨翠兰；赵文忠；刘艳君；朱平；富宁 刊期： 2006年第11期
目的 研究腺病毒介导钙调磷酸酶Aα基因(AdCnAα)过表达对缺血/再灌注和肾上腺素能受体介导的心肌凋亡中的作用及p38MAPK的变化.方法 体外培养乳鼠心肌细胞,分别给予Iso(10 μmo1/L)+缺氧24h/复氧4 h(Iso+H/R)及感染重组腺病毒(AdCnAα)+Iso+H/R处理,观察AdCnAα对Iso+H/R诱导的心肌细胞凋亡的影响.用DNALadder法及流式细胞仪DNA含量测定法(PI标记)检测心肌细胞凋亡,用RT-PCR法和Westernblot法分别检测CaNmRNA及蛋白表达,用Westernblot法检测p38、p-p38MAPK的变化.结果 CnAα过表达组(AdCnAα+Iso+H/R)的心肌细胞凋亡率比Iso+H/R组明显增加(14.247±0.525 vs 10.763±1.554,P＜0.01),且均高于正常对照组;同时p-p38MAPK的表达也比正常对照组增加(2.42±0.19 vs 1.60±0.22,P＜0.01);p38MAPK的表达在干预前后同正常对照组比较无差异性变化(P＞0.05).结论 腺病毒介导的CnAα过表达可使Iso+H/R共同作用诱导的心肌细胞凋亡率增加,p38MAPK可能参与了CaN促进Iso+H/R诱导心肌细胞凋亡的信号转导过程.
作者：沈小梅；张巨艳；成蓓 刊期： 2006年第11期
目的 运用基因芯片技术检测门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中基因表达的差异,探讨其在门静脉高压症脾亢发生中的意义.方法 提取门静脉高压症脾亢脾巨噬细胞和正常脾巨噬细胞的总RNA,分别用标有荧光素的dCTP反转录制备cDNA探针,将探针与含有14112点cDNA的Biostar-H140s cDNA表达谱芯片杂交后扫描荧光强度.上述方法重复3次,从而筛选出恒定的差异表达基因.结果 3张芯片分别检测到896、1330和898个差异表达基因,恒定的差异表达基因共有121个,占总基因数的0.86%.其中表达上调的已知基因有21个,表达下调的已知基因有73个.差异表达基因涉及离子通道和运输蛋白、细胞周期蛋白类、细胞骨架和运动、细胞受体、细胞信号和传递蛋白、代谢、免疫相关等多个方面.这些基因可能与门静脉高压症脾亢的发病机制有关.结论 采用基因芯片技术筛选门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中差异表达的基因,可能为其病因和发病机制的研究提供新思路.
作者：闫峰；李威；陈君填；曾永明；郭毓文；章斐然；李宗芳 刊期： 2006年第11期
目的 探讨三脑室区肿瘤的显微手术方法.方法 156例病人分别采用胼胝体-侧脑室-脉络裂入路、胼胝体一侧脑室一室间孔入路、终板-翼点联合入路等6种不同的术式,均在显微镜下操作,术后观察其手术效果.结果 采用不同的显微手术方法,其肿瘤手术全切除率为56.41%,次全切除率为25.64%,部分切除率为12.82%,死亡8例,死亡率为5.13%.结论 对三脑室区肿瘤的手术,要根据肿瘤所在的不同位置,选择相应的手术入路,且在显微镜下操作,可以减少并发症,降低术后致残率和死亡率,提高生存质量.
作者：陈立一；王东军 刊期： 2006年第11期
目的 构建编码Her2/neu膜外第一受体区、全长膜外区、膜外及跨膜区3个蛋白的重组腺病毒真核表达载体,为信号传导和免疫研究建立实验材料.方法 RT-PCR扩增出3个目的片段的cDNA,克隆进pAdTrack-CMV穿梭质粒,在BJ5183细菌内同源重组形成腺病毒质粒,脂质体法转染293细胞后,荧光显微镜观察病毒噬斑形成和绿色荧光蛋白表达,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 PCR扩增出了预定大小的目的基因cDNA片段,测序结果和GenBank完全相符.病毒质粒转染293细胞后形成了病毒噬斑,绿色荧光蛋白和目的蛋白均获得表达.目的蛋白的表达量随着病毒感染复数的升高而增加.结论 成功地构建了在真核细胞中表达Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的腺病毒载体,为Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的功能研究提供了材料基础.
作者：马树东；罗荣城；丁振华；袁长青；丁雪梅 刊期： 2006年第11期
目的 探讨原发性肝细胞癌经高强度聚焦超声治疗后的总生存率及其影响因素.方法 104例原发性肝细胞癌患者行高强度聚焦超声治疗.肿瘤直径大小3.6～15.5 cm,平均9.6 cm.肝功能Child Pugh分级A、B、C级分别为83、16和5例.结果 104例原发性肝细胞癌治疗后生存期59.5%(3～6个月)、38.7%(12个月)和25.6%(24个月).生存期的影响因素为:肿瘤大小、数目,是否转移,高强度聚焦超声前AFP,高强度聚焦超声前肝功能,Child Pugh分级和TNM分期.按规范化方案治疗,联合经动脉导管化疗栓塞.其中,肝功能在生存率分析中为危险度高的影响因素.结论 生存分析结果提示,保护肝功能,治疗前全面影像学检查,重视规范化治疗和辅助治疗将有助于提高肝癌患者生存期.
作者：薛净；李瑜元；聂玉强；沙卫红；周永键；王红；张亚历；周殿元 刊期： 2006年第11期
目的 研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响.方法 采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响.结果 受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大.结论 在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电.
作者：杨红军；胡三觉 刊期： 2006年第11期
目的 研究survivin反义寡核苷酸对人肝癌耐药细胞株的增殖和凋亡情况,以及对阿霉素化疗敏感性的影响.方法 将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM分为脂质体转染组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染组、正义寡核苷酸转染+阿霉素组、反义寡核苷酸转染组、反义寡核苷酸转染+阿霉素组共6组.MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,RT-PCR和Westemblot印迹法检测细胞survivn mRNA和蛋白表达.结果 survivin-ASODN作用后的人肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM的细胞凋亡率明显增高(P＜0.05).survivin mRNA和survivin蛋白表达:脂质体转染对照组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染对照组、正义寡核苷酸转染对照+阿霉素组之间survivin蛋白表达无明显差异(P＞0.05).400ng/ml surviving ASODN组和400ng/mlASODN+阿霉素组survivinmRNA较其他4组显著降低(P＜0.05),但其两组之间表达无明显差异(P＞0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能降低肝癌耐药细胞survivin表达,增强人肝癌耐药细胞对阿霉素的化疗敏感性.
作者：高鹏；方驰华；张刚庆；颜政 刊期： 2006年第11期
目的 总结建立大鼠原位肝移植稳定模型的规范和提高成功率的措施,比较经门静脉灌注和经腹主动脉灌注对移植肝功能的影响.方法 手术显微镜下,用改良的二袖套法进行100例大鼠原位肝移植,并依据灌注方式分组:经门静脉灌注和经腹主动脉灌注组(n=50).检测术后肝功能,观察组织病理学改变、术后生存率以及手术并发症.结果 两组组织病理学表现相同.手术成功率分别为98%(49/50)和96%(48/50),3月存活率分别为93.5%(29/31)和93.3%(28/30),术后肝功能、手术成功率和3月存活率差异无显著性(P＞0.05).结论 供肝经门静脉灌注和经腹主动脉灌注均可采用,应根据研究目的选择适当肝移植模型.熟练的显微外科技术、规范细致的手术操作、缩短无肝期时间是提高成功率、减少术后并发症的关键.
作者：许赤；杨扬；易述红；李玺；张琪；陈规划 刊期： 2006年第11期
目的 研究急性心肌梗死时血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1)以及外周血CD34+细胞的动态改变,探讨其在心肌梗死(心梗)中的作用.方法 采集急性心梗患者发病第1、3、7、10、14天外周静脉血,应用酶联免疫方法检测心梗患者以及对照组患者血VEGF和SDF-1的水平.应用流式细胞仪检测心梗患者第1、7、14天外周血CD34+细胞的水平.同时对心梗患者进行心肌酶、肌钙蛋白、心电图及心脏超声等常规检查.结果 (1)心梗后第7天外周血CD34+细胞(个/μl)明显增高(2.35±0.72vs 1.48±0.49,P＜0.05);(2)心梗后血VEGF(pg/ml)明显升高,于第14天达到高峰(197.56±39.87 vs 53.79±18.12,P＜0.01);(3)心梗第1天血SDF-1(pg/m1)明显降低(1683.12±224.79 vs2178.67±265.34,P＜0.01),以后渐恢复至与对照组相同水平;(4)心梗第7天VEGF水平与外周血CD34+细胞高峰值之间有明显相关性;(5)VEGF高峰值与CK-MB高峰值和肌钙蛋白Ⅰ之间均有明显相关性.结论 心肌梗死本身即可动员干细胞至外周血;心梗后VEGF明显升高至少可持续2周以上,SDF-1短暂降低;两者的动态变化可能与干细胞动员及促使更多干细胞归巢至损伤心肌有关.
作者：邓争荣；杨春；马爱群；陈新义；耿涛 刊期： 2006年第11期
目的 检测正常豚鼠及庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉两种状态下的听性脑干反应(ABR),比较两种状态下ABR波形、反应阈及潜伏期等的差别.方法 杂色豚鼠40只(正常组和庆大霉素致耳聋组各20只)分别在麻醉前后记录ABR各数据,用配对t检验进行统计学分析.结果 正常豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR波形,反应阈,Ⅰ、Ⅲ波峰潜伏期,Ⅰ-Ⅲ波峰间期无显著差异(P＞0.05);庆大霉素致耳聋豚鼠在清醒和麻醉状态下ABR各参数亦无显著差异(P＞0.05).结论 豚鼠(正常或耳聋)在清醒或麻醉状态下测试ABR无显著差异,因此为保证实验成功和减少误差可采用非麻醉方法.
作者：陈浩；李永贺；钱宇虹；郭梦和 刊期： 2006年第11期
目的 研究早孕妇女生殖道中胎儿细胞的存在情况,用免疫细胞化学法确证胎儿细胞来源,寻找无创或微创的产前诊断取材方法及时机.方法 将健康早孕妇女宫颈取材标本分为两组:HE染色组(Ⅰ)和免疫细胞化学组(Ⅱ);选择通水术中输卵管通畅的健康妇女为对照,分为两组:HE染色组(Ⅲ)和免疫细胞化学组(Ⅳ).无菌棉拭子术、宫颈粘液吸引术、宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术采集标本,HE染色和免疫细胞化学染色后观察滋养细胞存在情况.结果 (1)早孕妇女经宫颈细胞中存在可代表胎儿细胞的滋养细胞;(2)宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术取材方法较好,获得胎儿细胞较多;(3)取材时机为妊娠50～79 d.结论 早孕妇女生殖道中存在胎儿细胞,在妊娠50～9 d用宫颈灌洗术或官腔内灌洗术取材,是一种较为安全有效的产前诊断技术.
作者：黄莺莺；余艳红 刊期： 2006年第11期
目的 分析益母草属4种植物nrDNA ITS序列,探讨其在益母草药材DNA分子鉴别中的作用.方法 对4种益母草属植物分别进行ITS序列的PCR扩增和测序,并运用CLUSTRALX和MEGA软件进行分析.结果 测得4种植物的ITS序列,包括ITS1、5.8S和ITS2全长序列以及18S、26S部分序列;益母草及其易混淆的3种植物ITS1、ITS2序列的差异性分别为7.2%～18.8%和14.2%～27%.根据ITS序列特征所构建的系统树与传统分类有所不同.结论 ITS序列特征可作为益母草种间鉴别的有效分子标记.
作者：杨志业；晁志；霍克克；吴炳义；潘胜利 刊期： 2006年第11期
目的 观察小剂量氯氨酮复合芬太尼术后静脉镇痛应用于老年病人的临床效果和并发症,并与单纯芬太尼进行比较.方法 选择行胸腹部手术后老年(年龄≥65岁)患者80例,随机分为两组,每组40例.氯氨酮-芬太尼组(联合组):氯氨酮0.5 mg/ml+芬太尼5.0 μg/ml+咪唑安定50μg/ml;单纯芬太尼组:芬太尼7.5 μg/ml+咪唑安定50μg/ml.各组镇痛泵中药物均用生理盐水稀释至200ml.观察各组患者术后镇痛48 h内的静息镇痛评分、镇静评分以及恶心呕吐、皮肤瘙痒、幻觉的发生情况.结果 两组用药总量及PCA量均相似(P＞0.05).两组术后各时段静息镇痛评分均无显著性差异(P＞0.05).联合组在各时段的镇静效果明显地优于单纯芬太尼组(P＜0.05).在术后镇痛48 h内,联合组的恶心、呕吐、皮肤瘙痒发生率明显低于单纯芬太尼组(P＜0.05),两组患者均无幻觉发生.结论 小剂量氯氨酮用于老年病人术后镇痛可明显减少芬太尼的剂量,并使恶心呕吐、皮肤瘙痒的发生率降低,而镇痛效果并无差异.
作者：梁仕伟；陈晔明；林春水 刊期： 2006年第11期
目的 探讨溶瘤病毒与丝裂霉素联合应用对膀胱癌T-24细胞体内外生长的抑制效应和机制.方法 将溶瘤病毒不同的感染复数或与丝裂霉素(0.1 mg/L)联合应用,通过细胞生长抑制实验及裸鼠皮下移植瘤模型,观察其对膀胱癌T-24细胞的作用及其机制.结果 与单独应用相比,溶瘤病毒与低剂量的MMC联合可明显抑制T-24细胞体外生长,诱导T-24细胞凋亡,裸鼠体内肿瘤发生时间延迟,4周后肿瘤体积与单独应用时相比,差异有显著性(P＜0.05).与体外处理结果一致.结论 溶瘤病毒与MMC联合应用可显著增强MMC对T-24细胞的杀伤作用,进一步提高膀胱癌的疗效.
作者：赵国志；谭万龙；郑少斌；吴远东；谢毅；朱文辉 刊期： 2006年第11期
目的 探讨儿茶素对小鼠的辐射防护作用.方法 采用6MVX直线加速器一次性全身照射小鼠,儿茶素加照射组以200mg/kg·d儿茶素灌服动物10 d后施行照射.比较两组小鼠体质量变化、外周血白细胞总数、平均存活时间及30d生存率.结果 儿茶素加照射组小鼠体质量减轻低于照射组,平均生存时间明显长于照射组,30 d存活率比对照组明显升高,而且儿茶素能加快单纯受照射小鼠外周血白细胞的恢复.结论 儿茶素对受照射小鼠有明显的辐射防护作用.
作者：石卫民；赵新萍；芦婷 刊期： 2006年第11期
目的 分析皮质下动脉硬化性脑病(SAE)的病因、病理、临床表现、影像学特征.方法 对63例SAE患者进行回顾性分析.结果 SAE组危险因素以高血压为主,均有神经局灶体征,较明显的认知功能障碍,多缓慢起病,临床症状呈阶梯样进展.58例CT扫描在双侧侧脑室周围白质区及半卵圆中心可见不同程度大致对称的低密度影,均合并腔隙性梗死.44例做MRI检查,T2加权像均表现为环绕侧脑室周围对称、大片融合的长T1、长T2异常信号,腔隙性梗死灶数目明显多于CT,呈点条状高信号影.结论 SAE以高血压、较明显的认知功能障碍,常见卒中样发作为主要临床特征,CT及MRI表现为侧脑室周围广泛融合成片的脑白质病变,并有脑室周围白质的明显萎缩及双侧脑室对称性扩大.
作者：高国栋；莫建伟；徐书雯 刊期： 2006年第11期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
