学术投稿

大鼠触须毛乳头细胞的分离和培养

孙锡金;胡志奇

关键词:毛乳头, 细胞培养, 触须
摘要:目的 寻求一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.方法 将大鼠触须毛囊完整拔出后,在37℃缓慢搅拌的条件下加入0.2%胶原酶Ⅰ消化3 h,间断吹打使毛乳头游离,收集上清低速离心(300r/min)后收集毛乳头进行培养,计算其贴壁率,检测α-平滑肌肌动蛋白表达.结果 全毛囊消化法能显著降低工作强度,减少污染机会,具有毛乳头贴壁快和细胞迁出时间短的优点.α-平滑肌肌动蛋白染色阳性.结论 全毛囊消化法是一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 术前脑肿瘤患者脑白质束MR-DTI的初步研究

    目的 利用MR-DTI技术行三维脑白质成像,评价脑肿瘤对白质束的改变,探讨脑肿瘤对白质的改变与瘤周部分各向异性值(FA值)改变的量化对应关系.方法 12例脑内恶性肿瘤患者被成功地完成了常规MR检查及DTI检查,分别获得各自的常规MR图、相应感兴趣区(ROI)的部分各向异性图(FA图)、彩色编码张量图、脑白质三维示踪图、脑肿瘤侧和对侧内囊区的FA值.结果 彩色编码张量图、三维示踪图可清楚地显示目标脑白质的位置,走行和受损状况.将患者患侧FA1值与对侧FA2值之比从0~1等分为4个区间,相应地将肿瘤致脑白质束的改变分为4种,Ⅰ:两侧FA值之比>75%,脑白质正常或基本正常;Ⅱ:FA值之比>50%,但<75%,脑白质移位或/和轻度受损;Ⅲ:FA值之比>25%,但<50%,脑白质中度受损但未完全破坏;Ⅳ:FA比值<25%,此时相应脑白质束未见显示.结论 MR-DTI技术可进行脑白质纤维示踪,使其清晰地可视化.FA值的改变程度与脑白质纤维受损程度呈正相关.

    作者:李贻卓;黄子林;魏大年;谢传森;何浩强;魏一飞;陈林;吴沛宏 刊期: 2006年第11期

  • 老年牙周病和冠心病的相关性研究——附662例报告

    目的 通过体检及问卷调查,初步探讨老年人牙周病与冠心病的相关性.方法 选取2003-2005年西安市新城区和阎良区离退休老干部662名,其中男589名、女73名,平均年龄(72.5±8.9)岁,分为冠心病组357例(病例组),包括稳定型心绞痛(SAP)141例,不稳定型心绞痛(UAP)134例及急性心肌梗死(AMI)82例和非冠心病组305例(对照组),均设计相同的问卷进行调查,比较两组牙周指数(PI)及牙齿缺失数的差异.结果 (1)冠心病组PI明显高于对照组(P<0.01),在调整性别、年龄、体重指数、吸烟史、高脂饮食习惯、高血压病及心脑血管病家族史后,PI仍与冠心病显著相关(P<0.01).(2)AMI、UAP和SAP组的PI与对照组比较差异均有显著性(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);牙齿缺失数在冠心病各组与对照组之间差异无显著性.(3)吸烟(OR=0.638,P<0.01)和心脑血管病家族史(OR=0.678,0.01<P<0.05)亦为冠心病的危险因素.结论 老年牙周病与冠心病之间存在一定的相关性.

    作者:李高中;徐琳;权正良;寇植;蔡乐农;苏联珍;李秀燕;种永峰 刊期: 2006年第11期

  • survivin反义寡核苷酸对肝癌耐药细胞的作用及与化疗的关系

    目的 研究survivin反义寡核苷酸对人肝癌耐药细胞株的增殖和凋亡情况,以及对阿霉素化疗敏感性的影响.方法 将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM分为脂质体转染组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染组、正义寡核苷酸转染+阿霉素组、反义寡核苷酸转染组、反义寡核苷酸转染+阿霉素组共6组.MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,RT-PCR和Westemblot印迹法检测细胞survivn mRNA和蛋白表达.结果 survivin-ASODN作用后的人肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM的细胞凋亡率明显增高(P<0.05).survivin mRNA和survivin蛋白表达:脂质体转染对照组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染对照组、正义寡核苷酸转染对照+阿霉素组之间survivin蛋白表达无明显差异(P>0.05).400ng/ml surviving ASODN组和400ng/mlASODN+阿霉素组survivinmRNA较其他4组显著降低(P<0.05),但其两组之间表达无明显差异(P>0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能降低肝癌耐药细胞survivin表达,增强人肝癌耐药细胞对阿霉素的化疗敏感性.

    作者:高鹏;方驰华;张刚庆;颜政 刊期: 2006年第11期

  • 慢性乙型肝炎患者CXC趋化因子Mig的表达

    目的 探讨慢性乙型肝炎(乙肝)患者CXC趋化因子Mig的表达水平及其与HBV-DNA、丙氨酸转氨酶(ALT)的相关性.方法 以实时PCR法动态检测慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)内Mig mRNA的表达水平,以趋化因 子与GAPDH比值为其终含量.以ELISA法定量检测患者外周血中Mig蛋白含量.结果 慢性乙肝患者PBMC内Mig mRNA表达水平为0.6883±0.0693,与正常对照组相比差异有显著性(P<0.001).Mig血清浓度为(609.6±73.8)pg/ml,与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05).患者PBMC内Mig mRNA与其外周血中Mig含量显著相关(r=0.7157,P<0.001),外周血中Mig含量与血清ALT水平显著相关(r=0.7220,P<0.001),外周血中Mig含量与血清中HBV-DNA含量显著相关(r=0.7266,P<0.001).结论 慢性乙肝患者Mig mRNA及血清Mig含量表达均增高,Mig介导了肝脏炎症细胞浸润,参与了乙肝慢性化病程.

    作者:赵金红;王健;江水清;项桂菊 刊期: 2006年第11期

  • 不同动物羊水栓塞种属差异性探讨

    目的 探讨和分析羊水注入猕猴、山羊血循环后对动物血液动力学和呼吸的影响,确立羊水栓塞是否存在种属差异性.方法 选择非孕猕猴2只和孕末期山羊16只,2只猕猴予注入人原羊水,山羊根据注入液体性质不同随机分成4组:原羊水组、过滤羊水组,胎粪污染的羊水组和生理盐水对照组,分别在液体注入前、注入后10、30、60、90、180 min进行观察.结果 在羊水注入后,2只猕猴血液动力学和呼吸与羊水注入前无明显差异.孕羊实验组羊水注入后,实验组所有动物都出现了血液动力学的改变,以胎粪组改变为明显,各实验组心率无明显改变;除胎粪组有明显呼吸改变外,原羊水组和过滤羊水组各有1只动物出现呼吸频率改变.结论 羊水注入山羊体内都出现了血液动力学改变,而猕猴未发生血液动力学变化,提示羊水栓塞发生存在种属和个体差异,同时也说明使用猕猴制备羊水栓塞动物模型是不合适的.

    作者:黄神姣;余艳红;盛超;吴英 刊期: 2006年第11期

  • 广州市黄埔大道钛白粉厂四氯化钛泄漏事故分析

    目的 评价广州市危险化学品监控与应急救援体系建立的现状.方法 分析广州市天河区黄埔大道东路危险化学品工厂事故发生的原因、应急处置的方式.结果 事故发生的原因为企业经营者及其员工缺乏防范化学事故的意识;事故单位违反国家、行业有关危险化学品经营单位选址规定;事故发生后广州市能及时启动危险化学品事故应急救援预案,科学应对、社会联动、相关部门协同作战是成功控制事态扩大、避免大规模人员伤亡的关键.结论 广州市已具备科学应对和处置突发化学事故的能力,但应进一步加强对城市内重大危险源的辨识和监控工作,以期能从源头上遏制城市化学灾害事故的发生.

    作者:葛长荣;于德宪;俞守义 刊期: 2006年第11期

  • 血清sCD40L检测在评价急性冠脉综合征发病风险中的应用

    目的 探讨分析sCD40L检测在评价急性冠脉综合征(ACS)发病风险中的意义.方法 选取经临床确诊的ACS患者200例,随访全部病例为时6个月,以发生死亡及非致命性心肌梗死为试验观察终点.在发病72 h内空腹状态下采取病例前臂静脉血并分离血清,用ELISA方法测定血清sCD40L及C-反应蛋白(CRP)水平;用微粒子化学发光方法测定cTnI水平.结果 200例观察对象中108例血清sCD40L水平高于5.0μg/L.随访观察6个月后,发现高水平的sCD40L、CRP及cTnI与ACS患者发生死亡及非致命性心肌梗死的风险显著相关(P=0.001,P=0.02及P=0.001).结论 血清sCD40L、CRP及cTnI水平升高可用于独立预测ACS患者高风险心血管病事件.三者联合检测可明显提高诊断和预测ACS的灵敏度,并有望取代现有的心肌酶检测而成为新一代心血管病诊断和风险预测的临床实验室项目.

    作者:徐邦牢;贝春花;王蓉;雷秀霞 刊期: 2006年第11期

  • 新生SD大鼠心肌干细胞的体外分离培养与鉴定

    目的 自新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞分化的能力.方法 无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代.传代细胞采用诱导分化培养液进行培养,细胞生长至镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色.结果 从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、CD31阳性,CD34、CD45阴性,心肌钙蛋白T(CTnT)阴性.细胞经传代培养两周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩.再次流式鉴定,表型有所改变,主要是CD31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD34、CD45无明显变化.免疫组化再次证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达.结论 成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+CD31+CD34-CD45-CTnT-的细胞,经使用不同成分培养液传代培养,可分化为可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白.

    作者:陆东风;吴昊;黄璟;李妍 刊期: 2006年第11期

  • 急性心肌梗死早期冠状动脉介入治疗后血浆脑钠素水平与肌酸磷酸激酶MB峰值变化的关系

    目的 探讨急性心肌梗死(AMI)患者接受早期冠状动脉介入(PCI)治疗后血浆脑钠素(BNP)水平与肌酸磷酸激酶MB(CK-MB)峰值变化的关系,进而通过BNP来定量评价梗死相关动脉是否及时再通.方法 63例AMI患者根据PCI时间分为直接组和非直接组.所有患者均在入院时、入院后4、24、48 h测定BNP水平.CK-MB峰值测定:入院即时采血检查CK-MB,入院第1天每3 h测一次,第2天每6 h测一次,第3天每12 h测一次.结果 患者BNP水平在入院后缓慢上升,并于第24小时达到高峰值,第48小时开始下降.非直接PCI组BNP水平相对于直接PCI组显著增高(P<0.01).直接PCI组达CK-MB峰值时间明显比非直接PCI组前移.结论 血浆BNP水平测定是评价AMI早期PCI后梗死相关动脉是否及时再通的客观指标,可指导临床治疗方案的选择.

    作者:肖长华;杨希立;谭海斌;陈军;许兆延;张健愉 刊期: 2006年第11期

  • 悬雍垂腭咽成型术的麻醉处理(附786例报告)

    目的 探讨悬雍垂腭咽成型术的麻醉方法及麻醉并发症的防治.方法 回顾性分析我院2000年10月~2005年10月786例全麻下行悬雍垂腭咽成型术的麻醉情况.结果 6例因术前存在严重上呼吸道梗阻行预防性气管切开后实施麻醉;5例麻醉清醒拔除气管导管后仍出现呼吸道梗阻;2例手术后2~3 h口咽腔水肿导致上呼吸道不完全梗阻行紧急气管切开.以上麻醉并发症均得到及时有效处理,无一例产生不良后果.结论 悬雍垂腭咽成型术麻醉诱导应充分估计呼吸道梗阻及气管插管的难易程度,麻醉复苏应待患者完全清醒后方可拔除气管导管,且应常规准备正压通气和气管插管设备.

    作者:李申一;雷毅;徐世元;王晓军;赵涛;赵华;彭铖;李杉 刊期: 2006年第11期

  • 全膝关节置换术围手术期失血量的评估

    目的 评估人工全膝关节置换术(TKA)围手术期的显性和隐性失血量.方法 对2002~2005年的40例TKA患者进行回顾性分析,通过Gross方程推算患者术后平均显性失血量及隐性失血量.结果 平均总失血量1538 ml,其中显性失血量747 ml (49%),隐性失血量是791 ml(51%).使用自体血回输患者的总失血量是1650 ml,其中显性失血量903ml(52%),隐性失血量是786 ml(48%);未使用自体血回输患者的总失血量是1370 ml,其中显性失血量572 ml(42%),隐性失血量是798ml(58%).结论 TKA隐性失血占总失血量的比例较高,使用自体血回输不能完全满足机体恢复体循环的需要,在围手术期要注意及时补充血容量.

    作者:罗吉伟;金大地;黄美贤;廖华;徐达传 刊期: 2006年第11期

  • 基因芯片筛选门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中差异表达基因

    目的 运用基因芯片技术检测门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中基因表达的差异,探讨其在门静脉高压症脾亢发生中的意义.方法 提取门静脉高压症脾亢脾巨噬细胞和正常脾巨噬细胞的总RNA,分别用标有荧光素的dCTP反转录制备cDNA探针,将探针与含有14112点cDNA的Biostar-H140s cDNA表达谱芯片杂交后扫描荧光强度.上述方法重复3次,从而筛选出恒定的差异表达基因.结果 3张芯片分别检测到896、1330和898个差异表达基因,恒定的差异表达基因共有121个,占总基因数的0.86%.其中表达上调的已知基因有21个,表达下调的已知基因有73个.差异表达基因涉及离子通道和运输蛋白、细胞周期蛋白类、细胞骨架和运动、细胞受体、细胞信号和传递蛋白、代谢、免疫相关等多个方面.这些基因可能与门静脉高压症脾亢的发病机制有关.结论 采用基因芯片技术筛选门静脉高压症脾亢脾和正常脾巨噬细胞中差异表达的基因,可能为其病因和发病机制的研究提供新思路.

    作者:闫峰;李威;陈君填;曾永明;郭毓文;章斐然;李宗芳 刊期: 2006年第11期

  • 经蝶海绵窦手术静脉腔隙的解剖学研究

    目的 探讨经蝶海绵窦(CS)手术中相关静脉腔隙的解剖位置和形态特点.方法 取血管灌注的尸头标本10例,经蝶入路暴露鞍底硬膜和CS下壁并切开,确定前、下海绵间窦在鞍底的相对位置.对CS静脉腔隙进行观察和测量,分析可利用的静脉空间.结果 4例标本有明显的前海绵间窦,5例有下海绵间窦,前海绵间窦位于视神经隆突下方,而下海绵间窦位于鞍底隆突向斜坡压迹转折处.CS分为内侧、下外侧和背外侧静脉腔,内侧和下外侧腔在经蝶手术中能方便使用,但背侧腔由于鞍旁段颈内动脉上水平部的阻挡,对经蝶入路影响较大.结论 经蝶海绵窦手术时,了解海绵间窦在鞍底的相对位置,并合理利用各CS静脉腔隙,能减少不必要的静脉出血,避免血管、神经的损伤.

    作者:陆云涛;黄传平;潘军;漆松涛 刊期: 2006年第11期

  • 小剂量氯胺酮联合利多卡因在人工流产术中镇痛效果分析

    目的 观察小剂量氯胺酮联合利多卡因在人流中的麻醉效果及安全性.方法 选取我院妇科门诊人流病例105例,随机分成两组:氯胺酮联合利多卡因组(A组)58例,静脉注射氯胺酮2.0mg/kg及宫颈局部注射利多卡因;宫颈局部注射利多卡因组(B组)47例,进行人工流产术.结果 在人工流产术中采用小剂量氯胺酮联合利多卡因镇痛无痛率达到91.4%,宫颈松弛为93.1%.结论 小剂量氯胺酮联合利多卡因应用于人工流产术安全有效.

    作者:李国成;陈清霞;陈志辽 刊期: 2006年第11期

  • 结肠黑变病17例临床分析

    目的 探讨结肠黑变病(MC)的病因,分析其临床表现和预后.方法 回顾性分析经内镜和病理确诊为MC的17例患者的临床、内镜资料.结果 17例患者中有便秘症状者16例,服泻药15例,病变累及全结肠9例,合并腺瘤性息肉3例,上皮不典型增生1例,合并直肠癌1例.结论 MC主要与便秘和长期服泻药有关;年龄与MC发病密切相关;有恶变倾向,临床上应予重视.

    作者:黄聪武;詹海勇;李壁宏;李国平;郑宗茂;吴灵飞 刊期: 2006年第11期

  • 乙酰胆碱对大鼠慢性压迫背根节神经元放电的影响

    目的 研究乙酰胆碱(ACh)对大鼠慢性压迫背根节(DRG)神经元放电的影响.方法 采用单纤维记录神经元自发放电的方法,在DRG慢性压迫模型上观察ACh对受损DRG神经元自发放电的影响.结果 受损DRG神经元有丰富的自发放电,77.9%有自发放电的受损DRG神经元对ACh有反应,其中反应类型有单纯兴奋和先兴奋后抑制两种形式,而且反应的幅度随ACh浓度的延长而逐渐增大.结论 在慢性压迫DRG神经元有大量的自发放电,ACh可明显影响受损DRG神经元的自发放电.

    作者:杨红军;胡三觉 刊期: 2006年第11期

  • 早孕期经宫颈细胞中寻找胎儿细胞及免疫细胞化学研究

    目的 研究早孕妇女生殖道中胎儿细胞的存在情况,用免疫细胞化学法确证胎儿细胞来源,寻找无创或微创的产前诊断取材方法及时机.方法 将健康早孕妇女宫颈取材标本分为两组:HE染色组(Ⅰ)和免疫细胞化学组(Ⅱ);选择通水术中输卵管通畅的健康妇女为对照,分为两组:HE染色组(Ⅲ)和免疫细胞化学组(Ⅳ).无菌棉拭子术、宫颈粘液吸引术、宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术采集标本,HE染色和免疫细胞化学染色后观察滋养细胞存在情况.结果 (1)早孕妇女经宫颈细胞中存在可代表胎儿细胞的滋养细胞;(2)宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术取材方法较好,获得胎儿细胞较多;(3)取材时机为妊娠50~79 d.结论 早孕妇女生殖道中存在胎儿细胞,在妊娠50~9 d用宫颈灌洗术或官腔内灌洗术取材,是一种较为安全有效的产前诊断技术.

    作者:黄莺莺;余艳红 刊期: 2006年第11期

  • 肺癌全肺切除术后严重心肺并发症相关因素分析

    目的 探讨非小细胞肺癌全肺切除术后严重心肺并发症的相关风险因素.方法 收集1999年9月~2005年12月施行全肺切除手术的52例非小细胞肺癌患者的临床资料.对影响全肺切除术后严重心肺并发症的相关因素进行单因素和多因素分析.结果 围术期无死亡病例,11例(21%)术后出现严重心肺并发症.单因素分析时,胸膜外全肺切除、依据核素肺显像预测的术后FEV1.0%及MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.当预测的术后FVC%、FEV1.0%或MVV%<50%时,严重心肺并发症的发生率接近50%.多因素分析时,胸膜外全肺切除是严重心肺并发症的相关风险因素;忽略手术性质的影响时,预测的术后FEV1.0%和MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.结论 胸膜外全肺切除是非小细胞肺癌全肺切除术后严重心肺并发症密切的相关风险因素;不考虑胸膜外全肺切除因素时,预测的术后FEV1.0%及MVV%是严重心肺并发症的相关风险因素.

    作者:翁毅敏;谷力加;钟文昭;黄邵洪;廖洪映;张健 刊期: 2006年第11期

  • 塞来昔布预防大鼠乳腺癌发生及其机制

    目的 观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌形成的影响.方法 DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,90只大鼠分为3组:单纯诱癌组作为阴性对照、三苯氧胺组作为阳性对照和塞来昔布组,观察塞来昔布对大鼠乳腺肿瘤发生率和COX-2、VEGF蛋白表达的影响.结果 三苯氧胺组(48.15%)和塞来西布组(50.00%)肿瘤发生率明显低于单纯诱癌组(85.71%),差异具有显著性(p=0.003;P=0.004).塞来昔布组COX-2蛋白表达率(28.57%)低于单纯诱癌组(83.33%)和三苯氧胺组(69.23%),差异具有显著性(P=0.001;P=0.035).塞来昔布组VEGF蛋白表达率(42.86%)低于单纯诱癌组(79.17%)(P=0.023);和三苯氧胺组(46.15%)无显著性差异(P=0.863).结论 塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生、发展,下调COX-2和VEGF蛋白表达可能是其机制之一.

    作者:康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢 刊期: 2006年第11期

  • 人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备

    目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.

    作者:肖新莉;韩俊;张琳;陈岚;张瑾;陈新林;周伟;姜惠英;张宝云;刘勇;董小平 刊期: 2006年第11期

南方医科大学学报杂志

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主管:广东省教育厅

主办:南方医科大学