石卫民;赵新萍;芦婷
目的 研究腺病毒介导钙调磷酸酶Aα基因(AdCnAα)过表达对缺血/再灌注和肾上腺素能受体介导的心肌凋亡中的作用及p38MAPK的变化.方法 体外培养乳鼠心肌细胞,分别给予Iso(10 μmo1/L)+缺氧24h/复氧4 h(Iso+H/R)及感染重组腺病毒(AdCnAα)+Iso+H/R处理,观察AdCnAα对Iso+H/R诱导的心肌细胞凋亡的影响.用DNALadder法及流式细胞仪DNA含量测定法(PI标记)检测心肌细胞凋亡,用RT-PCR法和Westernblot法分别检测CaNmRNA及蛋白表达,用Westernblot法检测p38、p-p38MAPK的变化.结果 CnAα过表达组(AdCnAα+Iso+H/R)的心肌细胞凋亡率比Iso+H/R组明显增加(14.247±0.525 vs 10.763±1.554,P<0.01),且均高于正常对照组;同时p-p38MAPK的表达也比正常对照组增加(2.42±0.19 vs 1.60±0.22,P<0.01);p38MAPK的表达在干预前后同正常对照组比较无差异性变化(P>0.05).结论 腺病毒介导的CnAα过表达可使Iso+H/R共同作用诱导的心肌细胞凋亡率增加,p38MAPK可能参与了CaN促进Iso+H/R诱导心肌细胞凋亡的信号转导过程.
作者:沈小梅;张巨艳;成蓓 刊期: 2006年第11期
目的 自新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞分化的能力.方法 无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代.传代细胞采用诱导分化培养液进行培养,细胞生长至镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色.结果 从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、CD31阳性,CD34、CD45阴性,心肌钙蛋白T(CTnT)阴性.细胞经传代培养两周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩.再次流式鉴定,表型有所改变,主要是CD31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD34、CD45无明显变化.免疫组化再次证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达.结论 成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+CD31+CD34-CD45-CTnT-的细胞,经使用不同成分培养液传代培养,可分化为可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白.
作者:陆东风;吴昊;黄璟;李妍 刊期: 2006年第11期
目的 通过体检及问卷调查,初步探讨老年人牙周病与冠心病的相关性.方法 选取2003-2005年西安市新城区和阎良区离退休老干部662名,其中男589名、女73名,平均年龄(72.5±8.9)岁,分为冠心病组357例(病例组),包括稳定型心绞痛(SAP)141例,不稳定型心绞痛(UAP)134例及急性心肌梗死(AMI)82例和非冠心病组305例(对照组),均设计相同的问卷进行调查,比较两组牙周指数(PI)及牙齿缺失数的差异.结果 (1)冠心病组PI明显高于对照组(P<0.01),在调整性别、年龄、体重指数、吸烟史、高脂饮食习惯、高血压病及心脑血管病家族史后,PI仍与冠心病显著相关(P<0.01).(2)AMI、UAP和SAP组的PI与对照组比较差异均有显著性(分别P<0.05,P<0.01和P<0.01);牙齿缺失数在冠心病各组与对照组之间差异无显著性.(3)吸烟(OR=0.638,P<0.01)和心脑血管病家族史(OR=0.678,0.01<P<0.05)亦为冠心病的危险因素.结论 老年牙周病与冠心病之间存在一定的相关性.
作者:李高中;徐琳;权正良;寇植;蔡乐农;苏联珍;李秀燕;种永峰 刊期: 2006年第11期
目的 探讨分析sCD40L检测在评价急性冠脉综合征(ACS)发病风险中的意义.方法 选取经临床确诊的ACS患者200例,随访全部病例为时6个月,以发生死亡及非致命性心肌梗死为试验观察终点.在发病72 h内空腹状态下采取病例前臂静脉血并分离血清,用ELISA方法测定血清sCD40L及C-反应蛋白(CRP)水平;用微粒子化学发光方法测定cTnI水平.结果 200例观察对象中108例血清sCD40L水平高于5.0μg/L.随访观察6个月后,发现高水平的sCD40L、CRP及cTnI与ACS患者发生死亡及非致命性心肌梗死的风险显著相关(P=0.001,P=0.02及P=0.001).结论 血清sCD40L、CRP及cTnI水平升高可用于独立预测ACS患者高风险心血管病事件.三者联合检测可明显提高诊断和预测ACS的灵敏度,并有望取代现有的心肌酶检测而成为新一代心血管病诊断和风险预测的临床实验室项目.
作者:徐邦牢;贝春花;王蓉;雷秀霞 刊期: 2006年第11期
目的 构建编码Her2/neu膜外第一受体区、全长膜外区、膜外及跨膜区3个蛋白的重组腺病毒真核表达载体,为信号传导和免疫研究建立实验材料.方法 RT-PCR扩增出3个目的片段的cDNA,克隆进pAdTrack-CMV穿梭质粒,在BJ5183细菌内同源重组形成腺病毒质粒,脂质体法转染293细胞后,荧光显微镜观察病毒噬斑形成和绿色荧光蛋白表达,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 PCR扩增出了预定大小的目的基因cDNA片段,测序结果和GenBank完全相符.病毒质粒转染293细胞后形成了病毒噬斑,绿色荧光蛋白和目的蛋白均获得表达.目的蛋白的表达量随着病毒感染复数的升高而增加.结论 成功地构建了在真核细胞中表达Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的腺病毒载体,为Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的功能研究提供了材料基础.
作者:马树东;罗荣城;丁振华;袁长青;丁雪梅 刊期: 2006年第11期
目的 探讨和分析羊水注入猕猴、山羊血循环后对动物血液动力学和呼吸的影响,确立羊水栓塞是否存在种属差异性.方法 选择非孕猕猴2只和孕末期山羊16只,2只猕猴予注入人原羊水,山羊根据注入液体性质不同随机分成4组:原羊水组、过滤羊水组,胎粪污染的羊水组和生理盐水对照组,分别在液体注入前、注入后10、30、60、90、180 min进行观察.结果 在羊水注入后,2只猕猴血液动力学和呼吸与羊水注入前无明显差异.孕羊实验组羊水注入后,实验组所有动物都出现了血液动力学的改变,以胎粪组改变为明显,各实验组心率无明显改变;除胎粪组有明显呼吸改变外,原羊水组和过滤羊水组各有1只动物出现呼吸频率改变.结论 羊水注入山羊体内都出现了血液动力学改变,而猕猴未发生血液动力学变化,提示羊水栓塞发生存在种属和个体差异,同时也说明使用猕猴制备羊水栓塞动物模型是不合适的.
作者:黄神姣;余艳红;盛超;吴英 刊期: 2006年第11期
目的 探讨结肠黑变病(MC)的病因,分析其临床表现和预后.方法 回顾性分析经内镜和病理确诊为MC的17例患者的临床、内镜资料.结果 17例患者中有便秘症状者16例,服泻药15例,病变累及全结肠9例,合并腺瘤性息肉3例,上皮不典型增生1例,合并直肠癌1例.结论 MC主要与便秘和长期服泻药有关;年龄与MC发病密切相关;有恶变倾向,临床上应予重视.
作者:黄聪武;詹海勇;李壁宏;李国平;郑宗茂;吴灵飞 刊期: 2006年第11期
目的 研究survivin反义寡核苷酸对人肝癌耐药细胞株的增殖和凋亡情况,以及对阿霉素化疗敏感性的影响.方法 将人肝癌耐药细胞系SMMC-7721/ADM分为脂质体转染组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染组、正义寡核苷酸转染+阿霉素组、反义寡核苷酸转染组、反义寡核苷酸转染+阿霉素组共6组.MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,RT-PCR和Westemblot印迹法检测细胞survivn mRNA和蛋白表达.结果 survivin-ASODN作用后的人肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM的细胞凋亡率明显增高(P<0.05).survivin mRNA和survivin蛋白表达:脂质体转染对照组、阿霉素组、正义寡核苷酸转染对照组、正义寡核苷酸转染对照+阿霉素组之间survivin蛋白表达无明显差异(P>0.05).400ng/ml surviving ASODN组和400ng/mlASODN+阿霉素组survivinmRNA较其他4组显著降低(P<0.05),但其两组之间表达无明显差异(P>0.05).结论 survivin反义寡核苷酸能降低肝癌耐药细胞survivin表达,增强人肝癌耐药细胞对阿霉素的化疗敏感性.
作者:高鹏;方驰华;张刚庆;颜政 刊期: 2006年第11期
目的 研究早孕妇女生殖道中胎儿细胞的存在情况,用免疫细胞化学法确证胎儿细胞来源,寻找无创或微创的产前诊断取材方法及时机.方法 将健康早孕妇女宫颈取材标本分为两组:HE染色组(Ⅰ)和免疫细胞化学组(Ⅱ);选择通水术中输卵管通畅的健康妇女为对照,分为两组:HE染色组(Ⅲ)和免疫细胞化学组(Ⅳ).无菌棉拭子术、宫颈粘液吸引术、宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术采集标本,HE染色和免疫细胞化学染色后观察滋养细胞存在情况.结果 (1)早孕妇女经宫颈细胞中存在可代表胎儿细胞的滋养细胞;(2)宫颈管灌洗术和官腔内灌洗术取材方法较好,获得胎儿细胞较多;(3)取材时机为妊娠50~79 d.结论 早孕妇女生殖道中存在胎儿细胞,在妊娠50~9 d用宫颈灌洗术或官腔内灌洗术取材,是一种较为安全有效的产前诊断技术.
作者:黄莺莺;余艳红 刊期: 2006年第11期
目的 观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌形成的影响.方法 DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,90只大鼠分为3组:单纯诱癌组作为阴性对照、三苯氧胺组作为阳性对照和塞来昔布组,观察塞来昔布对大鼠乳腺肿瘤发生率和COX-2、VEGF蛋白表达的影响.结果 三苯氧胺组(48.15%)和塞来西布组(50.00%)肿瘤发生率明显低于单纯诱癌组(85.71%),差异具有显著性(p=0.003;P=0.004).塞来昔布组COX-2蛋白表达率(28.57%)低于单纯诱癌组(83.33%)和三苯氧胺组(69.23%),差异具有显著性(P=0.001;P=0.035).塞来昔布组VEGF蛋白表达率(42.86%)低于单纯诱癌组(79.17%)(P=0.023);和三苯氧胺组(46.15%)无显著性差异(P=0.863).结论 塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生、发展,下调COX-2和VEGF蛋白表达可能是其机制之一.
作者:康华峰;王西京;刘小旭;代志军;薛锋杰;薛兴欢 刊期: 2006年第11期
目的 建立扩增片段<130bp,包括CSF1PO、TH01和TPOX及性染色体amelogenin基因座的miniCTTA扩增系统.方法 采用不同荧光染料标记引物,通过PCR扩增,利用ABI3100遗传分析仪进行片段长度分析,对100份无关个体血样,10个家系样本以及30份高度降解检材进行检测.结果 miniCTTA系统DNA分型结果与AmpFLSTR(R)Identifiler(R)试剂盒完全一致.结论 miniCTTA系统可以应用于个人识别和亲权鉴定,为降解DNA样本分型提供了新的方法.
作者:刘超;王会品;孙宏钰;王慧君 刊期: 2006年第11期
目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
作者:肖新莉;韩俊;张琳;陈岚;张瑾;陈新林;周伟;姜惠英;张宝云;刘勇;董小平 刊期: 2006年第11期
目的 评估人工全膝关节置换术(TKA)围手术期的显性和隐性失血量.方法 对2002~2005年的40例TKA患者进行回顾性分析,通过Gross方程推算患者术后平均显性失血量及隐性失血量.结果 平均总失血量1538 ml,其中显性失血量747 ml (49%),隐性失血量是791 ml(51%).使用自体血回输患者的总失血量是1650 ml,其中显性失血量903ml(52%),隐性失血量是786 ml(48%);未使用自体血回输患者的总失血量是1370 ml,其中显性失血量572 ml(42%),隐性失血量是798ml(58%).结论 TKA隐性失血占总失血量的比例较高,使用自体血回输不能完全满足机体恢复体循环的需要,在围手术期要注意及时补充血容量.
作者:罗吉伟;金大地;黄美贤;廖华;徐达传 刊期: 2006年第11期
目的 探讨原发性肝细胞癌经高强度聚焦超声治疗后的总生存率及其影响因素.方法 104例原发性肝细胞癌患者行高强度聚焦超声治疗.肿瘤直径大小3.6~15.5 cm,平均9.6 cm.肝功能Child Pugh分级A、B、C级分别为83、16和5例.结果 104例原发性肝细胞癌治疗后生存期59.5%(3~6个月)、38.7%(12个月)和25.6%(24个月).生存期的影响因素为:肿瘤大小、数目,是否转移,高强度聚焦超声前AFP,高强度聚焦超声前肝功能,Child Pugh分级和TNM分期.按规范化方案治疗,联合经动脉导管化疗栓塞.其中,肝功能在生存率分析中为危险度高的影响因素.结论 生存分析结果提示,保护肝功能,治疗前全面影像学检查,重视规范化治疗和辅助治疗将有助于提高肝癌患者生存期.
作者:薛净;李瑜元;聂玉强;沙卫红;周永键;王红;张亚历;周殿元 刊期: 2006年第11期
目的 探讨经蝶海绵窦(CS)手术中相关静脉腔隙的解剖位置和形态特点.方法 取血管灌注的尸头标本10例,经蝶入路暴露鞍底硬膜和CS下壁并切开,确定前、下海绵间窦在鞍底的相对位置.对CS静脉腔隙进行观察和测量,分析可利用的静脉空间.结果 4例标本有明显的前海绵间窦,5例有下海绵间窦,前海绵间窦位于视神经隆突下方,而下海绵间窦位于鞍底隆突向斜坡压迹转折处.CS分为内侧、下外侧和背外侧静脉腔,内侧和下外侧腔在经蝶手术中能方便使用,但背侧腔由于鞍旁段颈内动脉上水平部的阻挡,对经蝶入路影响较大.结论 经蝶海绵窦手术时,了解海绵间窦在鞍底的相对位置,并合理利用各CS静脉腔隙,能减少不必要的静脉出血,避免血管、神经的损伤.
作者:陆云涛;黄传平;潘军;漆松涛 刊期: 2006年第11期
目的 探讨悬雍垂腭咽成型术的麻醉方法及麻醉并发症的防治.方法 回顾性分析我院2000年10月~2005年10月786例全麻下行悬雍垂腭咽成型术的麻醉情况.结果 6例因术前存在严重上呼吸道梗阻行预防性气管切开后实施麻醉;5例麻醉清醒拔除气管导管后仍出现呼吸道梗阻;2例手术后2~3 h口咽腔水肿导致上呼吸道不完全梗阻行紧急气管切开.以上麻醉并发症均得到及时有效处理,无一例产生不良后果.结论 悬雍垂腭咽成型术麻醉诱导应充分估计呼吸道梗阻及气管插管的难易程度,麻醉复苏应待患者完全清醒后方可拔除气管导管,且应常规准备正压通气和气管插管设备.
作者:李申一;雷毅;徐世元;王晓军;赵涛;赵华;彭铖;李杉 刊期: 2006年第11期
目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利对心肌梗死大鼠左室重构和心功能的影响,并探讨osteopontin蛋白在其中的作用.方法 将成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组,心肌梗死盐水组和心肌梗死培哚普利组.后两组动物在冠状动脉左前降支结扎第2天起给予生理盐水或者培哚普利灌胃,1次/d.4周后测定有创左室血流动力学,超声心动图测量左室内径和射血分数,组织学方法检测非梗死区心肌细胞直径和胶原纤维沉积,Western blot检测心肌组织osteopontin蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠(盐水组和培哚普利组)均出现显著的左室收缩和舒张功能障碍,表现为LVEF、LVSP和±dp/dtmax下降,LVEDP显著升高.同时左室重量与体质量比值升高,LVEEDD和LVESD增大,非梗死区心肌细胞横径增加,心肌间质胶原纤维沉积增加,提示显著的左室重构.与盐水组相比,培哚普利治疗显著改善心肌梗死大鼠心功能,预防左室扩大,减轻非梗死区心肌细胞肥大和心肌间质胶原纤维沉积.Western blot未检测到osteopontin蛋白在假手术大鼠心肌组织表达,在心肌梗死大鼠心肌组织有大量osteopontin蛋白表达,该上调的蛋白能被培哚普利治疗显著抑制.结论 培哚普利抑制心肌梗死大鼠左室重构,改善心功能,可能与其抑制osteopontin蛋白表达有关.
作者:张玉玲;周淑娴;王铭辉;王景峰 刊期: 2006年第11期
目的 分析皮质下动脉硬化性脑病(SAE)的病因、病理、临床表现、影像学特征.方法 对63例SAE患者进行回顾性分析.结果 SAE组危险因素以高血压为主,均有神经局灶体征,较明显的认知功能障碍,多缓慢起病,临床症状呈阶梯样进展.58例CT扫描在双侧侧脑室周围白质区及半卵圆中心可见不同程度大致对称的低密度影,均合并腔隙性梗死.44例做MRI检查,T2加权像均表现为环绕侧脑室周围对称、大片融合的长T1、长T2异常信号,腔隙性梗死灶数目明显多于CT,呈点条状高信号影.结论 SAE以高血压、较明显的认知功能障碍,常见卒中样发作为主要临床特征,CT及MRI表现为侧脑室周围广泛融合成片的脑白质病变,并有脑室周围白质的明显萎缩及双侧脑室对称性扩大.
作者:高国栋;莫建伟;徐书雯 刊期: 2006年第11期
目的 分析益母草属4种植物nrDNA ITS序列,探讨其在益母草药材DNA分子鉴别中的作用.方法 对4种益母草属植物分别进行ITS序列的PCR扩增和测序,并运用CLUSTRALX和MEGA软件进行分析.结果 测得4种植物的ITS序列,包括ITS1、5.8S和ITS2全长序列以及18S、26S部分序列;益母草及其易混淆的3种植物ITS1、ITS2序列的差异性分别为7.2%~18.8%和14.2%~27%.根据ITS序列特征所构建的系统树与传统分类有所不同.结论 ITS序列特征可作为益母草种间鉴别的有效分子标记.
作者:杨志业;晁志;霍克克;吴炳义;潘胜利 刊期: 2006年第11期
目的 评价广州市危险化学品监控与应急救援体系建立的现状.方法 分析广州市天河区黄埔大道东路危险化学品工厂事故发生的原因、应急处置的方式.结果 事故发生的原因为企业经营者及其员工缺乏防范化学事故的意识;事故单位违反国家、行业有关危险化学品经营单位选址规定;事故发生后广州市能及时启动危险化学品事故应急救援预案,科学应对、社会联动、相关部门协同作战是成功控制事态扩大、避免大规模人员伤亡的关键.结论 广州市已具备科学应对和处置突发化学事故的能力,但应进一步加强对城市内重大危险源的辨识和监控工作,以期能从源头上遏制城市化学灾害事故的发生.
作者:葛长荣;于德宪;俞守义 刊期: 2006年第11期