张艳莉
目的利用阳性重组菌XL1-Blue-Pcomb3表达出人源性大肠癌Fab段噬菌体原始库,固相化人大肠癌组织及细胞的相关抗原后对其进行筛选,鉴定筛选后的抗体库与人大肠癌有无特异性的结合活性.方法PCR鉴定XL1-Blue-Pcomb3重链Fd段和κ链的插入率,表达出人大肠癌Fab段原始库.然后提取3例用于构建原始抗体库的致敏大肠癌组织抗原,13例非致敏大肠癌组织抗原及3种体外培养的大肠癌细胞株LoVo、HT-29、LS-174T的抗原,利用3组混合抗原分别对原始抗体库进行3轮筛选,将筛选后的3个三级库等体积混和后通过ELISA及免疫组化鉴定其与人大肠癌组织及细胞是否具有特异性的结合活性,取胃癌、食管癌及正常肠粘膜组织和胃癌、肝癌细胞进行对照研究.结果Fd片段及κ链的插入率分别为40%和70%,Fd片段及κ链均插入质粒Pcomb3的重组率为28%,Fab段基因库库容为2.1×106,3组大肠癌混合抗原分别对原始库进行3轮筛选后,抗体库均得到了不同程度的富集,ELISA及免疫组化显示富集后的抗体库对人大肠癌组织及体外培养的大肠癌细胞均有较特异性的结合活性.结论利用噬菌体抗体库技术筛选到了人大肠癌相关Fab段抗体群,且筛选后的抗体群与人大肠癌抗原有较特异性的结合活性.
作者：孙逊；吴保平；肖冰；张振书；赖卓胜 刊期： 2002年第08期
作者： 刊期： 2002年第08期
目的建立表达外源性Fas基因的大肠癌细胞株,观察Fas基因在转导前后的表达.方法采用分子克隆技术将Fas基因插入真核表达载体pBK-CMV的多克隆位点之间,以脂质体介导法将Fas基因导入受体细胞LoVo,用G418筛选克隆细胞.以dotblotting,Westernblotting检测转导细胞Fas基因的表达.结果成功建立了Fas基因表达株.转导株在RNA及其蛋白水平表达均明显高于非转导株,转导细胞增殖速度、倍增时间、对数生长期等均比非转导株更为缓慢,但无显著性差异,在Fas抗体作用下,转导株细胞生长明显受到抑制,有非常显著性差异.结论Fas基因在大肠癌细胞中处于低表达状态;通过真核表达载体介导,Fas基因在RNA及其蛋白水平能有效表达.Fas表达株在Fas抗体作用下可明显抑制体外培养的大肠癌细胞的生长增殖.
作者：李恕军；肖冰；姜泊；韩英 刊期： 2002年第08期
目的建立乙型肝炎病毒(HBV)基因型(A-F)多重PCR分型方法,并利用该方法对广东地区HBVPCR阳性血清进行分型.方法将GenBank中114例HBV全序列进行比较分析,找出每种基因型相对于其他五种基因型的独特序列,并根据这些独特序列设计出六对分别针对A-F基因型的特异引物.利用这六对引物建立HBV的多重PCR分型法.结果多重PCR与以前用PCR-限制温度长度多态型分析法的分型结果一致.对广州周边地区HBV携带者的初步分型结果显示,主要为B型和C型,分别占45.00%和38.75%,另外还有16.25%的D型.结论用多重PCR分型法准确易行,灵敏性高,便于推广应用.
作者：杨洁；戴琳；郭亚兵；杨守昌；王燕军；骆抗先 刊期： 2002年第08期
目的观察中国华南地区汉族人群醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与肥厚型心肌病(HCM)的相关 性.方法以15例HCM患者和18例正常对照为研究对象,采集血样本并提取白细胞和基因组DNA.应用PCR、限制性内切酶方法检测CYP11B2基因的多态性分布.结果HCM组CYP11B2基因-344C/T多态性与对照组比较,CT基因型分布有显著性差异.结论CYP11B2基因-344CT基因型可能是部分人群HCM发生的因素之一.
作者：陈爱华；张文秀；李志樑；唐晓明；陆青；钱学贤；李留洋；孙家珍 刊期： 2002年第08期
目的总结低温保存有活性同种带瓣主动脉(cryopreserved viable aortic homograftCVAH)治疗复杂先天性心脏病的临床经验.方法CVAH取自35岁以下脑死亡或临床死亡3 h以内的非心血管疾病及非传染性疾病供体,经处理后置入液氮中低温保存,使用时置于37～42℃恒温箱中水浴解冻.受体1例为先天性心脏病右室双出口并肺动脉狭窄、冠状动脉异常,CVAH用作心外管道重建右室-肺动脉连接;另1例为重症法乐四联症,CVAH用作带瓣跨肺动脉瓣环补片扩大右室流出道.结果CVAH保存良好,手术治疗近远期效果良好.结论CVAH在治疗复杂先天性心脏病重建右室-肺动脉通道时是一种良好的材料.
作者：骆学全；张文；张波；陈华增；强生廷 刊期： 2002年第08期
目的建立应用十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethylammoniumbromide,CTAB)PCR产物纯化的方法.方 法应用CTAB对PCR产物进行选择性沉淀.CTAB与DNA形成复合我1.2mol/LNaCl溶液中溶解,再用乙醇将PCR产物沉淀出来.结果这种方法可以去除PCR产物中引物和小分子dNTP.虽然纯化的产率占现在市场上的一些试剂盒产率的80%,但其成本比较低,仍不失是一种PCR产物纯化的方法.结论利用十六烷基三甲基溴化铵可以用于PCR产物纯化.
作者：张宝；马文丽；刘莉扬；吴清华；郭秋野；郑文岭 刊期： 2002年第08期
目的动态观察原位心脏移植术后1年内不同时间段移植心脏超声心动图表现,研究心脏移植术后非排异期超声心动图表现特点.方法应用Acuson彩色多谱勒超声心动图诊断仪观察房室腔大小、室壁及室间隔厚度、二尖瓣及三尖瓣血流频谱、左室肌质量及肌质量指数,计算不同时间段数值平均值并同术前供体作对照.结果患者在术后1年长期存活,无急性排斥反应发生.超声心动图监测表现为:左室、右室及右房内径显著下降,而左房内径则显著上升:室间隔、左室后壁及右室前壁厚度显著增加;左室肌质量及肌质量指数显著增加;二尖瓣E、A峰及三尖瓣E峰均显著下降,三尖瓣A峰变化不明显.术后4个月出现二尖瓣反流,术后持续存在三尖瓣反流.结论心脏移植术后非排异期的形态、结构及功能具有特殊性,某些特点类似早期急性排斥反应,终确诊尚需心内膜心肌活检.
作者：张振；王武军；邹小明；谢志斌 刊期： 2002年第08期
目的从1例不明原因转氨酶升高的病人血清中克隆输血传播病毒(TTV)DNA,并进行序列分析.方法用巢式PCR扩增TTVDNA长片段,连接至pGEM-T载体上,挑选一个克隆(56-B)进行测序.将56-B与GenBank中五株TTV进行氨基酸和核苷酸序列的同源性分析,并用大似然法进行分子进化分析.结果56-B株与TA278等五株TTV序列的核苷酸同源性分别为42.4%、48.2%、47.9%、49.8%、61.7%,氨基酸序列的同源性更低,但其5'和3'两端非编码区的序列仍然很保守.结论56-B株与其他TTV株之间的同源性很低,有很高的基因异质性,是TT的一个新变种,代表TTV的一个新的基因型.
作者：刘志华；骆抗先；何海棠 刊期： 2002年第08期
1临床资料患者男,18岁.因头晕、头痛5月,症状加重3个月入院.入院时主要表现为头晕、头痛,头痛位于枕部及双颞部,呈阵发性,钝痛,无放射,无恶心、呕吐,无视力障碍,无发育迟缓及早熟等入院查发育正常,营养中等,自动体位,言语流利,对答切题,心肺腹部检查无异常,外生殖器呈成人型,神经系统检查无阳性体征发现,无双眼上视障碍.
作者：冯文峰；漆松涛；彭林；邱炳辉 刊期： 2002年第08期
作者： 刊期： 2002年第08期
目的评价肾移植引起的急性排斥反应的治疗措施及影响愈后的相关因素.方法回顾性研究326例首次移植中86例发生急性排斥反应(AR)的治疗措施、结果及愈后的相关因素.结果86例AR经治疗后5例失败,81例成功,其中68例采用甲基强地松龙(MP)冲击治愈者为48例,11例一线用抗胸腺淋巴细胞球蛋白(ATG)治愈10例,7例一线用OKT3治愈6例;20例MP冲击无效者全部续用ATG或OKT3治疗,14例逆转成功;对上述治疗无效的8例中6例应用环孢素(CSA)的患者改换为普乐可复(FK506)后治愈3例;共5例因AR不能控制,并发感染、移植肾破裂或血管栓塞而切除移植肾.结论MP冲击为治疗AR的常用有效手段,冲击后第2、3天血肌酐(SCr)上升＞10%者多疗效较差.发生AR时SCr较高者治愈率低.ATG和OKT3作为一线或二线治疗措施均有良好效果.对于难治性AR,ATG和OKT3亦无效者,改换基础免疫抑制治疗,即CSA转化为FK506,有一定的治疗效果.
作者：于立新；贾英斌；张勇 刊期： 2002年第08期
支气管异物多见于儿童,常见有异物病史,及出现相应呼吸道症状,但部分患儿因病程较长,及未能提供明确异物史,给临床诊治带来困难.现就3例支气管异物的诊断和治疗进行讨论,以供借鉴.
作者：朱平 刊期： 2002年第08期
目的应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)基因缺失和杂合子.方法根据DMD/BMD外显子缺失的多发位点,建立一个多重PCR体系,在不同的PCR条件下对23例DMD/BMD患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选、单链构象多态性(SSCP)/异源双链分析、连锁标记分析、限制性片段长度多态性(RFLPs)分析及微卫星分析.结果23例先证者中有14例为基因缺失,2例为基因重复,40例家系中女性亲属为杂合型.结论利用此PCR体系,可准确地检测出DMD/BMD的基因突变,可靠地筛选携带者并对其家系进行正确的分析.
作者：刘咏梅；封志纯；方振伟 刊期： 2002年第08期
1临床资料患者女,16岁,因活动后心慌、气短16年,于2001年3月18日入院.入院查体:血压15/11kPa,脉搏88次/min,意识清晰,口唇明显紫绀;心尖搏动位于右侧第五肋间锁骨中线内2 cm处,未触及细震颤,心界叩诊不大,心率88次/min,律齐,心尖区及胸骨左、右缘第二肋间可闻及Ⅲ/6级收缩期杂音;指趾端明显紫钳,呈杵状指趾,双下肢无水肿.
作者：蔡开灿；王武军；牛立志；彭月华 刊期： 2002年第08期
目的定量分析两种治疗方案与危险指数对慢性髓系白血病(CML)临床缓解率的影响.方法按治疗方案与Soka1危险指数分别进行分组,定量分析三尖杉酯碱联合阿糖胞苷(HA)与羟基脲(Hu)二种治疗方案和病人初诊时所处的危险度对慢性期CML患者所获临床疗效的影响.结果尽管HA方案治疗初诊CML慢性期患者的近期疗效优于Hu,但它并不能延长病人的慢性期维持时间(DCP);而且病人的危险指数对完全缓解率(CR)、获CR所需时间及DCP的影响均远超出治疗方案的作用.结论HA方案不能延长病人的DCP,不宜作为初诊CML慢性期患者的一线治疗方案;按危险指数将病人作出合适分层,有利于治疗方案的合理选择及科学评价.
作者：杜庆锋；刘晓力；刘启发；李荣；陈琪；周淑芸 刊期： 2002年第08期
目的探讨急诊床旁超声心动图(UCG)在急性心肌梗死病人监护病房(cardiac care unit,CCU)的临床应用价值.方法回顾性分析了2000年4月至2001年3月进行急诊床旁UCG检查的116例临床病例.结果急诊床旁UCG检查的阳性率100%.本组116例中冠心病57例(49%),其中心肌梗死41例(35.0%),心绞痛16例(14.0%);高血压心脏病26例(22.5%);风湿性心脏病9例(7.8%);扩张型心肌病9例(7.8%);主动脉夹层瘤7例(6.0%);其他8例(6.9%).结论急诊床旁UCG检查,作为心脏急症诊断的辅助手段,无论在诊断阳性率方面,还是在对临床干预的结果方面,均具有重要的临床应用价值.
作者：王鹏；武文；谢志斌；曹世平 刊期： 2002年第08期
目的观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响,为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据.方法以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象,采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长情况.观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响.结果补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用,与空白血清组比较有显著差(P<0.05).结论大鼠以补阳还五汤灌胃给药后,其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用.
作者：佟丽；曲宏达；陈育尧；沈剑刚 刊期： 2002年第08期
目的探讨白细胞的粘附在初发期急性肾小管坏死(ATN)的病理生理学过程中所起的作用.方法Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组.肌肉注射甘油制作ATN动物模型,应用细胞间粘附分子-1单抗防治初发期大鼠ATN,观察其肾脏病理学及血尿素氮和血肌酐变化.结果给药24 h后治疗组血肌酐值[(412.31±94.42)μmol/L]明显低于CD3对照组血肌酐[(990.21±171.25)umo1/L](P＜0.05).模型组与CD3对照组可见明显肾小管坏死,而治疗组仅2例出现较轻的坏死灶.结论白细胞的粘附在ATN发病过程中具有重要作用,应用细胞间粘附分子-1单抗阻断白细胞的粘附能明显减轻肾脏病理改变.
作者：刘俊；王力；王小宁 刊期： 2002年第08期
目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精子浓缩液,然后与线性化报告基因载体pCMV-EGFP-N1共处理,后将处理后的精子注射入从雌性爪蟾体内取出的未受精卵中,培养并观察.结果制备的精子质量较高,稀释的精子注射人未受精卵后,卵的受精率为10%,受精卵活过神经胚的比率为20%,但都略微有点畸形.其中,绿色荧光报告基因EGFP的整合率为81%,但镜下未见绿色荧光蛋白的表达.结论ICSI法是制备转基因爪蟾的简便可行的新途径.
作者：江培洲；冯湘玲；黄华；沈新明；史剑凌；姚开泰 刊期： 2002年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
