冯文峰；漆松涛；彭林；邱炳辉
目的应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)基因缺失和杂合子.方法根据DMD/BMD外显子缺失的多发位点,建立一个多重PCR体系,在不同的PCR条件下对23例DMD/BMD患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选、单链构象多态性(SSCP)/异源双链分析、连锁标记分析、限制性片段长度多态性(RFLPs)分析及微卫星分析.结果23例先证者中有14例为基因缺失,2例为基因重复,40例家系中女性亲属为杂合型.结论利用此PCR体系,可准确地检测出DMD/BMD的基因突变,可靠地筛选携带者并对其家系进行正确的分析.
作者：刘咏梅；封志纯；方振伟 刊期： 2002年第08期
心肌梗死(MI)是由于冠状动脉供血持久而完全中断引起心肌不可逆转性的组织损害所致.供血部位的冠状动脉闭塞可引起相应部位的MI,但优势型冠状动脉闭塞所致的其他部位MI在临床上少见,现结合临床与冠状动脉造影(CAG)对照分析,报告如下.
作者：邱明；李公信；刘映峰 刊期： 2002年第08期
应用自体髂松质骨髓颗粒植入整复10例单侧上颌齿槽突裂,并关闭口鼻瘘.10例伤口一期愈合,术后观察3～6个月,外观改善明显,X线检查有明显骨形成,骨密度近似正常骨组织,两者间无明显界限.
作者：罗渝宁；李少萍；李伟忠；薛宏宇；王天舒 刊期： 2002年第08期
对81例布-加氏综合征(BCS)患者的临床及影像表现进行了综合分析,并提出了分型标准.经DSA、彩超、CT、经皮肝穿刺活检确诊的布-加氏综合征81例.BCS患者主要临床表现为下腔静脉梗阻和门脉高压症状.胆囊壁增厚是其影像诊断的一个间接征象.
作者：张艳莉 刊期： 2002年第08期
目的评价肾移植引起的急性排斥反应的治疗措施及影响愈后的相关因素.方法回顾性研究326例首次移植中86例发生急性排斥反应(AR)的治疗措施、结果及愈后的相关因素.结果86例AR经治疗后5例失败,81例成功,其中68例采用甲基强地松龙(MP)冲击治愈者为48例,11例一线用抗胸腺淋巴细胞球蛋白(ATG)治愈10例,7例一线用OKT3治愈6例;20例MP冲击无效者全部续用ATG或OKT3治疗,14例逆转成功;对上述治疗无效的8例中6例应用环孢素(CSA)的患者改换为普乐可复(FK506)后治愈3例;共5例因AR不能控制,并发感染、移植肾破裂或血管栓塞而切除移植肾.结论MP冲击为治疗AR的常用有效手段,冲击后第2、3天血肌酐(SCr)上升＞10%者多疗效较差.发生AR时SCr较高者治愈率低.ATG和OKT3作为一线或二线治疗措施均有良好效果.对于难治性AR,ATG和OKT3亦无效者,改换基础免疫抑制治疗,即CSA转化为FK506,有一定的治疗效果.
作者：于立新；贾英斌；张勇 刊期： 2002年第08期
目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精子浓缩液,然后与线性化报告基因载体pCMV-EGFP-N1共处理,后将处理后的精子注射入从雌性爪蟾体内取出的未受精卵中,培养并观察.结果制备的精子质量较高,稀释的精子注射人未受精卵后,卵的受精率为10%,受精卵活过神经胚的比率为20%,但都略微有点畸形.其中,绿色荧光报告基因EGFP的整合率为81%,但镜下未见绿色荧光蛋白的表达.结论ICSI法是制备转基因爪蟾的简便可行的新途径.
作者：江培洲；冯湘玲；黄华；沈新明；史剑凌；姚开泰 刊期： 2002年第08期
目的建立表达外源性Fas基因的大肠癌细胞株,观察Fas基因在转导前后的表达.方法采用分子克隆技术将Fas基因插入真核表达载体pBK-CMV的多克隆位点之间,以脂质体介导法将Fas基因导入受体细胞LoVo,用G418筛选克隆细胞.以dotblotting,Westernblotting检测转导细胞Fas基因的表达.结果成功建立了Fas基因表达株.转导株在RNA及其蛋白水平表达均明显高于非转导株,转导细胞增殖速度、倍增时间、对数生长期等均比非转导株更为缓慢,但无显著性差异,在Fas抗体作用下,转导株细胞生长明显受到抑制,有非常显著性差异.结论Fas基因在大肠癌细胞中处于低表达状态;通过真核表达载体介导,Fas基因在RNA及其蛋白水平能有效表达.Fas表达株在Fas抗体作用下可明显抑制体外培养的大肠癌细胞的生长增殖.
作者：李恕军；肖冰；姜泊；韩英 刊期： 2002年第08期
目的将用表达序列标签(expression sequencetag,EST)策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因--腺苷酸激酶(adenylatekinase,AK)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上,为下一步研究该基因的功能做准备.方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,用BLASTn程序搜索测序结果,根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRⅠ/Xho取酶切后切下的SjAK基因导人原核可溶性表达质粒pET32a(+)中.结果本研究所发现的新基因与曼氏血吸虫AK基因的同一性达86%,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段.结论发现日本血吸虫的cDNA与曼氏血吸虫AK cDNA高度同源,并且成功地构建出重组表达质粒pET32a(+)-SjAK.
作者：彭鸿娟；陈晓光；卢晓昭；龙綮新 刊期： 2002年第08期
目的研究纹状体边缘区与具学习记忆功能的重要脑区--海马之间是否存在功能联系.方法用神经系功能活动形态定位法,将低浓度的海人藻酸作为化学刺激剂注射于大鼠海马,用免疫组化法观察c-fos原癌基因在脑内的表达.结果e-Fos在海马、杏仁核、终纹床核、大脑皮层等部位有强烈表达;在纹状体中,e-Fos表达成条带状集中分布在边缘区,而在尾壳核和苍白球少有表达.结论海马与纹状体边缘区存在密切的功能联系.
作者：宁群；舒斯云；包新民 刊期： 2002年第08期
目的探讨癫痫发作和抗癫痫药物治疗对泌乳素(PRL)分泌的影响.方法利用RIA法测定癫痫发作前后和应用不同抗癫痫药物治疗的癫痫患者血清中PRL水平.结果癫痫发作后PRL分泌明显升高,发作后15minPRL分泌达到峰值,是基础PRL水平的5.1倍,发作后90min,有89.4%的病例PRL水平下降;癫痫发作后血清PRL水平的变化与 癫痫病灶位置无关;失神性癫痫发作后,血清PRL水平不升高或升高不明显,而其他类型的癫痫发作后均可引起血清PRL水平升高.苯妥英钠、丙戊酸钠单一治疗和马西平+丙戊酸钠+苯妥英钠联合治疗后,血清PRL水平降低,而纯中药治疗不影响垂体PRL的分泌.结论癫痫发作和抗癫痫药物治疗均明显影响垂体PRL的分泌.
作者：王明芳 刊期： 2002年第08期
目的观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响,为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据.方法以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象,采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长情况.观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响.结果补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用,与空白血清组比较有显著差(P<0.05).结论大鼠以补阳还五汤灌胃给药后,其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用.
作者：佟丽；曲宏达；陈育尧；沈剑刚 刊期： 2002年第08期
目的探讨急诊床旁超声心动图(UCG)在急性心肌梗死病人监护病房(cardiac care unit,CCU)的临床应用价值.方法回顾性分析了2000年4月至2001年3月进行急诊床旁UCG检查的116例临床病例.结果急诊床旁UCG检查的阳性率100%.本组116例中冠心病57例(49%),其中心肌梗死41例(35.0%),心绞痛16例(14.0%);高血压心脏病26例(22.5%);风湿性心脏病9例(7.8%);扩张型心肌病9例(7.8%);主动脉夹层瘤7例(6.0%);其他8例(6.9%).结论急诊床旁UCG检查,作为心脏急症诊断的辅助手段,无论在诊断阳性率方面,还是在对临床干预的结果方面,均具有重要的临床应用价值.
作者：王鹏；武文；谢志斌；曹世平 刊期： 2002年第08期
目的利用阳性重组菌XL1-Blue-Pcomb3表达出人源性大肠癌Fab段噬菌体原始库,固相化人大肠癌组织及细胞的相关抗原后对其进行筛选,鉴定筛选后的抗体库与人大肠癌有无特异性的结合活性.方法PCR鉴定XL1-Blue-Pcomb3重链Fd段和κ链的插入率,表达出人大肠癌Fab段原始库.然后提取3例用于构建原始抗体库的致敏大肠癌组织抗原,13例非致敏大肠癌组织抗原及3种体外培养的大肠癌细胞株LoVo、HT-29、LS-174T的抗原,利用3组混合抗原分别对原始抗体库进行3轮筛选,将筛选后的3个三级库等体积混和后通过ELISA及免疫组化鉴定其与人大肠癌组织及细胞是否具有特异性的结合活性,取胃癌、食管癌及正常肠粘膜组织和胃癌、肝癌细胞进行对照研究.结果Fd片段及κ链的插入率分别为40%和70%,Fd片段及κ链均插入质粒Pcomb3的重组率为28%,Fab段基因库库容为2.1×106,3组大肠癌混合抗原分别对原始库进行3轮筛选后,抗体库均得到了不同程度的富集,ELISA及免疫组化显示富集后的抗体库对人大肠癌组织及体外培养的大肠癌细胞均有较特异性的结合活性.结论利用噬菌体抗体库技术筛选到了人大肠癌相关Fab段抗体群,且筛选后的抗体群与人大肠癌抗原有较特异性的结合活性.
作者：孙逊；吴保平；肖冰；张振书；赖卓胜 刊期： 2002年第08期
对2例治血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者每天进行血浆置换(PE)治疗,每次清除及补充1个血浆量,为40ml/kg新鲜冰冻血浆,并补充红细胞悬液.PE后临床症状迅速消失,实验室检查基本恢复正常,随访无复发.表明PE明显优于传统治疗方法,能改善TTP的预后.
作者：尹芳；孟凡义；周淑芸；牛京娜；李军体；刘富 刊期： 2002年第08期
目的探讨日本血吸虫尾蚴经紫外线(UV)照射后抗原成分的改变.方法日本血吸虫尾蚴经UV(400μW/cm2)照射1 min后,取其可溶性抗原经照射尾蚴抗原(UVCA)与未经照射的尾蚴可溶性抗原(NCA)同步进行SDS-PAGE和免疫印迹试验.结果经UV照射后,日本血吸虫尾蚴新出现了M.212 000和82 000抗原带,M 116000、26 000和16 000抗原带浓度明显升高;NCA的M 67 000分子仅能被UVCA免疫猪血清识别,而不能被感染猪血清识别,M.79 000和94000与免疫猪血清的反应也明显强于感染猪血清.结论UV照射后新出现或含量增加的抗原成分以及仅免疫猪血清所识别的抗原分子可能是照射尾蚴激发高度保护性免疫的主要因素.
作者：李华；陈晓光；杨培梁；周晓红；沈树满；彭鸿娟；吴昆 刊期： 2002年第08期
目的动态观察原位心脏移植术后1年内不同时间段移植心脏超声心动图表现,研究心脏移植术后非排异期超声心动图表现特点.方法应用Acuson彩色多谱勒超声心动图诊断仪观察房室腔大小、室壁及室间隔厚度、二尖瓣及三尖瓣血流频谱、左室肌质量及肌质量指数,计算不同时间段数值平均值并同术前供体作对照.结果患者在术后1年长期存活,无急性排斥反应发生.超声心动图监测表现为:左室、右室及右房内径显著下降,而左房内径则显著上升:室间隔、左室后壁及右室前壁厚度显著增加;左室肌质量及肌质量指数显著增加;二尖瓣E、A峰及三尖瓣E峰均显著下降,三尖瓣A峰变化不明显.术后4个月出现二尖瓣反流,术后持续存在三尖瓣反流.结论心脏移植术后非排异期的形态、结构及功能具有特殊性,某些特点类似早期急性排斥反应,终确诊尚需心内膜心肌活检.
作者：张振；王武军；邹小明；谢志斌 刊期： 2002年第08期
目的观察中国华南地区汉族人群醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T多态性与肥厚型心肌病(HCM)的相关 性.方法以15例HCM患者和18例正常对照为研究对象,采集血样本并提取白细胞和基因组DNA.应用PCR、限制性内切酶方法检测CYP11B2基因的多态性分布.结果HCM组CYP11B2基因-344C/T多态性与对照组比较,CT基因型分布有显著性差异.结论CYP11B2基因-344CT基因型可能是部分人群HCM发生的因素之一.
作者：陈爱华；张文秀；李志樑；唐晓明；陆青；钱学贤；李留洋；孙家珍 刊期： 2002年第08期
目的建立应用十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethylammoniumbromide,CTAB)PCR产物纯化的方法.方 法应用CTAB对PCR产物进行选择性沉淀.CTAB与DNA形成复合我1.2mol/LNaCl溶液中溶解,再用乙醇将PCR产物沉淀出来.结果这种方法可以去除PCR产物中引物和小分子dNTP.虽然纯化的产率占现在市场上的一些试剂盒产率的80%,但其成本比较低,仍不失是一种PCR产物纯化的方法.结论利用十六烷基三甲基溴化铵可以用于PCR产物纯化.
作者：张宝；马文丽；刘莉扬；吴清华；郭秋野；郑文岭 刊期： 2002年第08期
目的总结低温保存有活性同种带瓣主动脉(cryopreserved viable aortic homograftCVAH)治疗复杂先天性心脏病的临床经验.方法CVAH取自35岁以下脑死亡或临床死亡3 h以内的非心血管疾病及非传染性疾病供体,经处理后置入液氮中低温保存,使用时置于37～42℃恒温箱中水浴解冻.受体1例为先天性心脏病右室双出口并肺动脉狭窄、冠状动脉异常,CVAH用作心外管道重建右室-肺动脉连接;另1例为重症法乐四联症,CVAH用作带瓣跨肺动脉瓣环补片扩大右室流出道.结果CVAH保存良好,手术治疗近远期效果良好.结论CVAH在治疗复杂先天性心脏病重建右室-肺动脉通道时是一种良好的材料.
作者：骆学全；张文；张波；陈华增；强生廷 刊期： 2002年第08期
目的研究体外培养星形细胞牵张损伤后超微结构的变化.方法取新生1～2 d大鼠的皮层细胞原代培养,经纯化后传代培养于乳胶膜培养皿中.采用计算机控制的牵张损伤装置,分别以50、150、250kPa压力牵张损伤培养于乳胶膜上的大鼠皮层星形胶质细胞.用3%戊二醛固定后,行扫描电镜和透射电镜观察.结果当用50kPa驱动压力进行牵张损伤时,细胞结构即有明显破坏,表现为细胞间隙增宽,部分胞体和突起被撕裂;以50kPa牵张损伤后1 h,透射电镜下可见线粒体肿胀、嵴减少;损伤后6h可见线粒体致密、细胞器减少等.当牵张应力增大,星形细胞损伤程度加重,细胞器明显减少,线粒体空泡化,微丝、微管明显减少,直至水样胞质或致密胞体.结论较小的应力即可致星形细胞紧密连接的破坏和超微结构的改变,可能与脑外伤后产生广泛的脑水肿有关.
作者：王克万；漆松涛；杨志焕；王正国；朱佩芳；杨开军；刘承勇；黄理金 刊期： 2002年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
