彭鸿娟；陈晓光；卢晓昭；龙綮新
目的建立应用十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethylammoniumbromide,CTAB)PCR产物纯化的方法.方 法应用CTAB对PCR产物进行选择性沉淀.CTAB与DNA形成复合我1.2mol/LNaCl溶液中溶解,再用乙醇将PCR产物沉淀出来.结果这种方法可以去除PCR产物中引物和小分子dNTP.虽然纯化的产率占现在市场上的一些试剂盒产率的80%,但其成本比较低,仍不失是一种PCR产物纯化的方法.结论利用十六烷基三甲基溴化铵可以用于PCR产物纯化.
作者：张宝；马文丽；刘莉扬；吴清华；郭秋野；郑文岭 刊期： 2002年第08期
目的研究体外培养星形细胞牵张损伤后超微结构的变化.方法取新生1～2 d大鼠的皮层细胞原代培养,经纯化后传代培养于乳胶膜培养皿中.采用计算机控制的牵张损伤装置,分别以50、150、250kPa压力牵张损伤培养于乳胶膜上的大鼠皮层星形胶质细胞.用3%戊二醛固定后,行扫描电镜和透射电镜观察.结果当用50kPa驱动压力进行牵张损伤时,细胞结构即有明显破坏,表现为细胞间隙增宽,部分胞体和突起被撕裂;以50kPa牵张损伤后1 h,透射电镜下可见线粒体肿胀、嵴减少;损伤后6h可见线粒体致密、细胞器减少等.当牵张应力增大,星形细胞损伤程度加重,细胞器明显减少,线粒体空泡化,微丝、微管明显减少,直至水样胞质或致密胞体.结论较小的应力即可致星形细胞紧密连接的破坏和超微结构的改变,可能与脑外伤后产生广泛的脑水肿有关.
作者：王克万；漆松涛；杨志焕；王正国；朱佩芳；杨开军；刘承勇；黄理金 刊期： 2002年第08期
对2例治血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者每天进行血浆置换(PE)治疗,每次清除及补充1个血浆量,为40ml/kg新鲜冰冻血浆,并补充红细胞悬液.PE后临床症状迅速消失,实验室检查基本恢复正常,随访无复发.表明PE明显优于传统治疗方法,能改善TTP的预后.
作者：尹芳；孟凡义；周淑芸；牛京娜；李军体；刘富 刊期： 2002年第08期
目的将用表达序列标签(expression sequencetag,EST)策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因--腺苷酸激酶(adenylatekinase,AK)cDNA克隆到表达质粒pET32a(+)上,为下一步研究该基因的功能做准备.方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,用BLASTn程序搜索测序结果,根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRⅠ/Xho取酶切后切下的SjAK基因导人原核可溶性表达质粒pET32a(+)中.结果本研究所发现的新基因与曼氏血吸虫AK基因的同一性达86%,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI及XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段.结论发现日本血吸虫的cDNA与曼氏血吸虫AK cDNA高度同源,并且成功地构建出重组表达质粒pET32a(+)-SjAK.
作者：彭鸿娟；陈晓光；卢晓昭；龙綮新 刊期： 2002年第08期
目的应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)基因缺失和杂合子.方法根据DMD/BMD外显子缺失的多发位点,建立一个多重PCR体系,在不同的PCR条件下对23例DMD/BMD患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选、单链构象多态性(SSCP)/异源双链分析、连锁标记分析、限制性片段长度多态性(RFLPs)分析及微卫星分析.结果23例先证者中有14例为基因缺失,2例为基因重复,40例家系中女性亲属为杂合型.结论利用此PCR体系,可准确地检测出DMD/BMD的基因突变,可靠地筛选携带者并对其家系进行正确的分析.
作者：刘咏梅；封志纯；方振伟 刊期： 2002年第08期
目的建立表达外源性Fas基因的大肠癌细胞株,观察Fas基因在转导前后的表达.方法采用分子克隆技术将Fas基因插入真核表达载体pBK-CMV的多克隆位点之间,以脂质体介导法将Fas基因导入受体细胞LoVo,用G418筛选克隆细胞.以dotblotting,Westernblotting检测转导细胞Fas基因的表达.结果成功建立了Fas基因表达株.转导株在RNA及其蛋白水平表达均明显高于非转导株,转导细胞增殖速度、倍增时间、对数生长期等均比非转导株更为缓慢,但无显著性差异,在Fas抗体作用下,转导株细胞生长明显受到抑制,有非常显著性差异.结论Fas基因在大肠癌细胞中处于低表达状态;通过真核表达载体介导,Fas基因在RNA及其蛋白水平能有效表达.Fas表达株在Fas抗体作用下可明显抑制体外培养的大肠癌细胞的生长增殖.
作者：李恕军；肖冰；姜泊；韩英 刊期： 2002年第08期
1临床资料患者女,16岁,因活动后心慌、气短16年,于2001年3月18日入院.入院查体:血压15/11kPa,脉搏88次/min,意识清晰,口唇明显紫绀;心尖搏动位于右侧第五肋间锁骨中线内2 cm处,未触及细震颤,心界叩诊不大,心率88次/min,律齐,心尖区及胸骨左、右缘第二肋间可闻及Ⅲ/6级收缩期杂音;指趾端明显紫钳,呈杵状指趾,双下肢无水肿.
作者：蔡开灿；王武军；牛立志；彭月华 刊期： 2002年第08期
目的总结低温保存有活性同种带瓣主动脉(cryopreserved viable aortic homograftCVAH)治疗复杂先天性心脏病的临床经验.方法CVAH取自35岁以下脑死亡或临床死亡3 h以内的非心血管疾病及非传染性疾病供体,经处理后置入液氮中低温保存,使用时置于37～42℃恒温箱中水浴解冻.受体1例为先天性心脏病右室双出口并肺动脉狭窄、冠状动脉异常,CVAH用作心外管道重建右室-肺动脉连接;另1例为重症法乐四联症,CVAH用作带瓣跨肺动脉瓣环补片扩大右室流出道.结果CVAH保存良好,手术治疗近远期效果良好.结论CVAH在治疗复杂先天性心脏病重建右室-肺动脉通道时是一种良好的材料.
作者：骆学全；张文；张波；陈华增；强生廷 刊期： 2002年第08期
目的评价超选择靶区动脉置泵灌注化疗治疗晚期残胃复发癌的疗效.方法对我院经术中证实不能手术切除的18例残胃复发癌,术中超选择靶区动脉置泵,术后灌注化疗的疗效进行分析.结果化疗后,临床症状均有不同程度的改善.肿瘤病灶完全缓解1例,部分缓解13例,稳定2例,恶化2例,有效率为77.8%.肿瘤细胞病理学改变有效率为83.3%.0.5、1.0、1.5、2.0年生存率分别为94.4%、66.7%、50.0%和27.8%.结论超选择动脉灌注化疗是治疗晚期残胃复发癌的有效方法,可以明显延长患者的带癌生存期.
作者：何建苗；蒲永东；曹志宇；朱志东 刊期： 2002年第08期
目的研究爪蟾胞内精子注射法(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)转基因技术的可行性.方法取成熟雄蛙的睾丸分离纯化精子,用毛地黄皂甙(digitonin)崩解精细胞膜并制备精子浓缩液,然后与线性化报告基因载体pCMV-EGFP-N1共处理,后将处理后的精子注射入从雌性爪蟾体内取出的未受精卵中,培养并观察.结果制备的精子质量较高,稀释的精子注射人未受精卵后,卵的受精率为10%,受精卵活过神经胚的比率为20%,但都略微有点畸形.其中,绿色荧光报告基因EGFP的整合率为81%,但镜下未见绿色荧光蛋白的表达.结论ICSI法是制备转基因爪蟾的简便可行的新途径.
作者：江培洲；冯湘玲；黄华；沈新明；史剑凌；姚开泰 刊期： 2002年第08期
目的动态观察原位心脏移植术后1年内不同时间段移植心脏超声心动图表现,研究心脏移植术后非排异期超声心动图表现特点.方法应用Acuson彩色多谱勒超声心动图诊断仪观察房室腔大小、室壁及室间隔厚度、二尖瓣及三尖瓣血流频谱、左室肌质量及肌质量指数,计算不同时间段数值平均值并同术前供体作对照.结果患者在术后1年长期存活,无急性排斥反应发生.超声心动图监测表现为:左室、右室及右房内径显著下降,而左房内径则显著上升:室间隔、左室后壁及右室前壁厚度显著增加;左室肌质量及肌质量指数显著增加;二尖瓣E、A峰及三尖瓣E峰均显著下降,三尖瓣A峰变化不明显.术后4个月出现二尖瓣反流,术后持续存在三尖瓣反流.结论心脏移植术后非排异期的形态、结构及功能具有特殊性,某些特点类似早期急性排斥反应,终确诊尚需心内膜心肌活检.
作者：张振；王武军；邹小明；谢志斌 刊期： 2002年第08期
支气管异物多见于儿童,常见有异物病史,及出现相应呼吸道症状,但部分患儿因病程较长,及未能提供明确异物史,给临床诊治带来困难.现就3例支气管异物的诊断和治疗进行讨论,以供借鉴.
作者：朱平 刊期： 2002年第08期
应用自体髂松质骨髓颗粒植入整复10例单侧上颌齿槽突裂,并关闭口鼻瘘.10例伤口一期愈合,术后观察3～6个月,外观改善明显,X线检查有明显骨形成,骨密度近似正常骨组织,两者间无明显界限.
作者：罗渝宁；李少萍；李伟忠；薛宏宇；王天舒 刊期： 2002年第08期
目的观察含补阳还五汤的药物血清对体外培养大鼠脑皮层神经元生长的影响,为补阳还五汤治疗缺血性脑损伤提供实验依据.方法以体外培养新生SD乳鼠大脑皮层神经元为观察对象,采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长情况.观察含药血清对常规培养及在缺氧状态下神经元生长的影响.结果补阳还五汤对常规培养及在缺氧条件下培养的神经元有显著促进生长作用,与空白血清组比较有显著差(P<0.05).结论大鼠以补阳还五汤灌胃给药后,其血清中的药物成份有促进体外培养神经元细胞生长的作用.
作者：佟丽；曲宏达；陈育尧；沈剑刚 刊期： 2002年第08期
目的评价肾移植引起的急性排斥反应的治疗措施及影响愈后的相关因素.方法回顾性研究326例首次移植中86例发生急性排斥反应(AR)的治疗措施、结果及愈后的相关因素.结果86例AR经治疗后5例失败,81例成功,其中68例采用甲基强地松龙(MP)冲击治愈者为48例,11例一线用抗胸腺淋巴细胞球蛋白(ATG)治愈10例,7例一线用OKT3治愈6例;20例MP冲击无效者全部续用ATG或OKT3治疗,14例逆转成功;对上述治疗无效的8例中6例应用环孢素(CSA)的患者改换为普乐可复(FK506)后治愈3例;共5例因AR不能控制,并发感染、移植肾破裂或血管栓塞而切除移植肾.结论MP冲击为治疗AR的常用有效手段,冲击后第2、3天血肌酐(SCr)上升＞10%者多疗效较差.发生AR时SCr较高者治愈率低.ATG和OKT3作为一线或二线治疗措施均有良好效果.对于难治性AR,ATG和OKT3亦无效者,改换基础免疫抑制治疗,即CSA转化为FK506,有一定的治疗效果.
作者：于立新；贾英斌；张勇 刊期： 2002年第08期
目的建立并发症少、成活率高的兔原位肾脏移植模型.方法健康成年新西兰白兔24只,随机分为两组,每组12只,Ⅰ组为对照组,术中行右肾动、静脉暂时夹闭做为对照;Ⅱ组为异体原位肾移植组,采取配对方式将甲兔左肾切取并经过4℃H-CA液灌洗后利用显微外科技术将甲、乙两兔动、静脉及输尿管端端吻合.结果吻合口无血栓形成及狭窄,12只接受异体原位肾移植的兔子存活率为91.7%(11/12).结论此模型具有并发症少、存活率高的特点,并且稳定、可靠、实用.
作者：张勇；于立新；贾英斌；王亦斌；杨培梁 刊期： 2002年第08期
目的定量分析两种治疗方案与危险指数对慢性髓系白血病(CML)临床缓解率的影响.方法按治疗方案与Soka1危险指数分别进行分组,定量分析三尖杉酯碱联合阿糖胞苷(HA)与羟基脲(Hu)二种治疗方案和病人初诊时所处的危险度对慢性期CML患者所获临床疗效的影响.结果尽管HA方案治疗初诊CML慢性期患者的近期疗效优于Hu,但它并不能延长病人的慢性期维持时间(DCP);而且病人的危险指数对完全缓解率(CR)、获CR所需时间及DCP的影响均远超出治疗方案的作用.结论HA方案不能延长病人的DCP,不宜作为初诊CML慢性期患者的一线治疗方案;按危险指数将病人作出合适分层,有利于治疗方案的合理选择及科学评价.
作者：杜庆锋；刘晓力；刘启发；李荣；陈琪；周淑芸 刊期： 2002年第08期
卵巢癌的转移以腹腔壁腹膜及腹腔脏器的浆膜直接种植转移及局部扩散为主,主要是接触性侵润和直接蔓延,其次为淋巴引流扩散,血行播散极为少见.肝肺脾实质内转移仅见于个别极晚期病例.本文报道1例卵巢浆液性囊腺癌脾脏转移诊治情况.
作者：刘国炳；张广亮；邢福祺 刊期： 2002年第08期
目的探讨癫痫发作和抗癫痫药物治疗对泌乳素(PRL)分泌的影响.方法利用RIA法测定癫痫发作前后和应用不同抗癫痫药物治疗的癫痫患者血清中PRL水平.结果癫痫发作后PRL分泌明显升高,发作后15minPRL分泌达到峰值,是基础PRL水平的5.1倍,发作后90min,有89.4%的病例PRL水平下降;癫痫发作后血清PRL水平的变化与 癫痫病灶位置无关;失神性癫痫发作后,血清PRL水平不升高或升高不明显,而其他类型的癫痫发作后均可引起血清PRL水平升高.苯妥英钠、丙戊酸钠单一治疗和马西平+丙戊酸钠+苯妥英钠联合治疗后,血清PRL水平降低,而纯中药治疗不影响垂体PRL的分泌.结论癫痫发作和抗癫痫药物治疗均明显影响垂体PRL的分泌.
作者：王明芳 刊期： 2002年第08期
目的探讨白细胞的粘附在初发期急性肾小管坏死(ATN)的病理生理学过程中所起的作用.方法Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组.肌肉注射甘油制作ATN动物模型,应用细胞间粘附分子-1单抗防治初发期大鼠ATN,观察其肾脏病理学及血尿素氮和血肌酐变化.结果给药24 h后治疗组血肌酐值[(412.31±94.42)μmol/L]明显低于CD3对照组血肌酐[(990.21±171.25)umo1/L](P＜0.05).模型组与CD3对照组可见明显肾小管坏死,而治疗组仅2例出现较轻的坏死灶.结论白细胞的粘附在ATN发病过程中具有重要作用,应用细胞间粘附分子-1单抗阻断白细胞的粘附能明显减轻肾脏病理改变.
作者：刘俊；王力；王小宁 刊期： 2002年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
