学术投稿

体外快速筛选抗HIV药物的一种新方法

曾祥凤;曾耀英;李海仙

关键词:药物筛选模型, 艾滋病, 人免疫缺陷病毒
摘要:目的:介绍一种体外快速筛选抗HIV药物的新方法.方法:采用荧光染料钙荧光素(Cai-cein-AM)标记HIV感染的慢性H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)与不同稀释浓度的药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,2 h后用荧光显微镜观察MT-2和H9/HIV-1ⅢB融合细胞的变化;孵育3 d后用M'IT法检测药物对HIV感染细胞的保护作用和HIV-1p24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清p24抗原含量的变化.结果:药物(双黄连粉针剂)能够抑制MT-2和H9/HIV-1ⅢB细胞融合(双黄连粉针剂抑制融合的EC50为3.18 mg/L,选择指数SI大于314.5);能够保护HIV感染细胞的死亡(EC50为10.59 mg/L,SI大于94.43)和减少HIV-1p24抗原的表达(EC50为23.29mg/L,SI大于42.9).结论:运用此方法4~6 h即可初步判断药物是否具有抗HIV的作用,此方法可简便直观,敏感快速进行抗HIV药物的筛选.
暨南大学学报(自然科学与医学版)杂志相关文献
  • 可溶性EGF受体胞外域在HeLa细胞中的表达及鉴定

    目的:在哺乳动物细胞中表达可溶性人表皮生长因子受体(sEGFR)并进行鉴定.方法:以带信号肽的sEGFR的真核表达载体pEGFRs或pEGFP-N1空载体转染HeLa细胞,利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析外源基因的表达水平,并以免疫印迹法分析培养上清中的sEG-FR.结果:转染pEGFP-N1的HeLa细胞,48 h后EGFP的表达百分率可达83%,而转染pEGFRs载体的HeLa细胞EGFP阳性率为4.8%,表明由于插入的sEGFR基因包含终止密码而抑制了EG-FP的表达;共聚焦显微镜观察也得到一致的结果.进一步以抗EGFR结构域L2的抗血清进行免疫印迹分析证明,转染pEGFRs的HeLa细胞培养上清液中表达sEGFR,存在相对分子质量为83 000和80 000两种产物.结论:转染表达载体的HeLa细胞分泌表达sEGFR.

    作者:徐丽慧;洪岸;何贤辉 刊期: 2006年第02期

  • 血管内栓塞治疗颅内动脉瘤破裂37例

    目的:探讨颅内动脉瘤破裂血管内栓塞治疗的效果及技术要点.方法:对37例破裂的颅内动脉瘤,经血管内途径,采用单纯的可脱性弹簧圈(GDC/EDC)或血管内支架结合可脱性弹簧圈技术进行瘤内栓塞.结果:37例均获成功栓塞,其中动脉瘤完全填塞28例,填塞90%以上9例,无神经系统并发症.一年后复查未见复发.结论:破裂颅内动脉瘤的血管内栓塞是一种安全有效的治疗手段.

    作者:王林;乔宏宇;莫小聪 刊期: 2006年第02期

  • 颈椎计算机X线摄影与传统X线摄影的对比分析

    颈椎X线摄影检查目前仍是评价颈部疾患的重要手段.计算机X线摄影(Computed Radiography,CR)较常规平片能丰富诊断信息,本文旨在通过CR片与感绿片对比分析,对CR在颈椎检查中的作用作出客观评价.

    作者:王能伟;吴何嘉;冼朝晖;刘忠炎;王永安 刊期: 2006年第02期

  • 131I治疗845例甲状腺机能亢进症的近期疗效分析

    目的:评价放射性131I治疗甲状腺机能亢进症(甲亢)的疗效.方法:对845例131I治疗后的甲亢患者随访6个月.结果:845例甲亢患者,1次治愈率为86.4%(730/845),好转100例,无效15例,有效率98.2%(830/845).早发甲状腺机能减低79例,发生率为9.3%.结论:放射性131I治疗甲亢效果好,治愈率高,副作用较低.

    作者:陈健;徐浩 刊期: 2006年第02期

  • 牛乳清蛋白BALB/c小鼠过敏模型的建立及其优化

    目的:建立牛乳清蛋白的BALB/c小鼠过敏模型,并探讨不同佐剂、免疫途径及饲料纯度等因素对建立牛乳清蛋白的BALB/c小鼠过敏模型的影响.方法:用不含牛乳及乳制品的特制饲料饲养BALB/c小鼠以乳清蛋白致敏,间接ELISA法测定特异性IgE,用荧光法检测体外激发小鼠致敏肥大细胞释放的组胺.结果:成功建立BALB/c小鼠乳清蛋白过敏模型,条件优化结果显示,氢氧化铝佐剂结合皮下注射好地促进特异性IgE产生;用不含牛奶及其他食物过敏原的特制饲料饲养的小鼠特异性IgE的本底水平低,适于建立小鼠过敏模型,荧光法检测肥大细胞释放组胺的结果与特异性IgE检测结果一致.结论:用特制饲料饲养小鼠,氢氧化铝佐剂结合皮下注射乳清蛋白适于建立BALB/c小鼠过敏症模型,该模型可用于过敏症机理研究.

    作者:毛露甜;向军俭;张在军;杨红宇;邓宁 刊期: 2006年第02期

  • 25例帕金森病的临床与病理学特征

    目的:研究帕金森病(PD)的临床和病理学特征及与路易体痴呆(DLB)病理学的关系.方法:对25例PD的临床和病理学特征进行研究.结果:在25例中5例为伴痴呆的帕金森病(PDD),初发症状为震颤11例,步行障碍6例,运动迟缓4例及吞咽困难1例.16例(69.9%)出现了视幻觉,24例(96%)对左旋多巴有反应,15例(65%)死于肺炎,3例死于肠梗阻.按DLB的病理学分类,25例中新皮质型5例,边缘型6例,脑干优势型14例.结论:本组PD的病理学特点主要是DLB的脑干优势型改变.PDD的病理类型是DLB的新皮质型和边缘型.病理上诊断为PD的患者,在临床上有很高的左旋多巴的反应率,晚期患者多数死于肺炎并发症.

    作者:郭黎;森秀生;板谷昌子 刊期: 2006年第02期

  • 暨南大学教工代谢综合征患病率的调查

    目的:了解广州暨南大学代谢综合征患病情况.方法:利用年度体检的机会,对高校人群进行一般情况及病史的问卷调查及全面体检(项目包括身高、体重、血压及腰围,血液生化检查包括血糖、胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白等),并将结果进行了不同性别及年龄组的比较.结果:该人群代谢综合征患病率为12.5%,男多于女,差别具有显著性意义(P<0.01);代谢综合征患病率青年组较低,老年组明显高于青年组及中年组,随年龄上升明显(P<0.01);在该组代谢综合征人群中,高体重指数检出率为高,其次为高血压、高血糖、高甘油三脂及低密度脂蛋白;代谢综合征各项指标无任何一项异常者,男女合计在青年组约72%,中年组约50%,老年组约30%,多项异常者男性多于女性.结论:广州高校人群代谢综合征发病率与北京及上海相近,男多于女,随年龄增加,发病率上升明显.中年人群约半数以上、老年人群约七成出现不同程度代谢异常,提示这2组人群健康状况不容乐观.

    作者:王凤新;刘国宁;郑自华 刊期: 2006年第02期

  • 岩白菜素清除小鼠脑组织自由基及抗脂质过氧化作用

    目的:研究岩白菜素对小鼠脑组织缺血再灌注的保护作用.方法:通过测定小鼠正常脑组织和缺血再灌注脑组织分别与岩白菜素作用后生成脂质过氧化产物及通过比色法测定岩白菜素对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子自由基的清除作用,评价岩白菜素对脑的保护作用.结果:岩白菜素能有效地抑制缺血后脑组织发生的脂质过氧化反应,对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子自由基也有明显的清除作用.结论:岩白菜素对小鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用.

    作者:蒲含林 刊期: 2006年第02期

  • PD-L1基因在正常胃和胃癌组织中的表达及其可变剪接变异体的鉴定

    目的:检测PD-L1基因的常规和可变剪接变异体mRNA在胃癌组织和正常胃组织中的表达.方法:以RT-PCR方法从胃癌和正常胃组织的总RNA中扩增PD-L1的cDNA,并将扩增产物通过测序鉴定.结果:4例胃癌标本中,从病例2中扩增到常规和可变剪接变异体,但以常规剪接体为主,病例3仅扩增到常规剪接体PD-L1 Ⅰ,病例4扩增到其可变剪接变异体PD-L1Ⅱ,而病例1两种剪接形式均未扩增到.在2例正常胃组织中均只扩增到可变剪接变异体PD-L1Ⅱ.结论:PD-L1基因在大多数胃癌组织中表达,正常与胃癌组织中还表达可变剪接变异体PD-L1Ⅱ,提示表达产物的剪接方式具有多样性.

    作者:迟晓云;徐丽慧;查庆兵;何贤辉 刊期: 2006年第02期

  • 49例血培养阳性新生儿败血症的临床特征及耐药分析

    目的:分析新生儿败血症的临床特点、病原菌分布及耐药情况,指导临床诊断、合理选择和使用抗生素.方法:对1995年5月至2005年4月住院的49例血培养阳性败血症患儿临床和实验室资料行回顾性分析.结果:临床主要表现为黄疸、惊厥、拒乳和发热等.49例标本共分离出病原菌50株,其中革兰阳性球菌31株(62%),包括凝固酶阴性葡萄球菌14株,金黄色葡萄球菌14株;革兰阴性杆菌19株(38%),包括单孢菌属6株,肠杆菌属6株,其它杆菌7株.葡萄球菌对青霉素全部耐药,对氨苄青霉素、红霉素及苯唑青霉素的耐药率在70%以上,对万古霉素、头孢呋辛、环丙沙星、克林霉素和庆大霉素敏感,未发现耐万古霉素的葡萄球菌.革兰阴性杆菌对氨苄青霉素的总耐药率超过90%,对第三代头孢、氨基糖甙类药物或亚胺培南部分敏感.结论:新生儿败血症临床表现缺乏特异性;对可疑败血症患儿应及早进行病原学检测及药敏试验,并根据病原菌特点和药敏结果合理地选择抗生素.

    作者:周平;熊爱华;肖昕 刊期: 2006年第02期

  • 广州地区AIDS患者中人类疱疹病毒8感染的检测

    目的:检测广州地区艾滋病AIDS患者中人类疱疹病毒8(HHV-8)的感染状况,探讨本地区AIDS患者发生HHV-8感染相关疾病的可能风险.方法:采用巢式聚合酶链反应(n-PCR)法检测患者唾液中的HHV-8 DNA.结果:在广州地区AIDS患者唾液中HHV-8 DNA阳性率为20.0%,而对照组的阳性率为0,两组比较差异有显著性(P<0.01).结论:在广州地区的AIDS患者中存在较高的HHV-8感染.

    作者:张立伐;兰绍阳 刊期: 2006年第02期

  • 恶性卵巢上皮源性肿瘤多向分化与Ki67蛋白表达的相关性

    目的:探讨恶性卵巢上皮源性肿瘤多向分化与Ki67蛋白表达关系.方法:应用组织化学、免疫组织化学SP法检测22例人正常卵巢组织和20例良性、41例恶性卵巢上皮性肿瘤黏液细胞分化和Ki67、嗜铬粒蛋白A(CgA)表达.结果:(1)恶性卵巢上皮源性肿瘤Ki67表达阳性率85.37%,其表达程度随组织学分级(P<0.01)、临床分期升高而增高(P<0.05),癌细胞增殖指数与神经内分泌细胞数量呈正相关;(2)恶性卵巢上皮源性肿瘤中CgA表达阳性率66.65%,明显高于良性肿瘤及正常卵巢组织(P<0.01),组织分级Ⅲ级表达强度强于Ⅰ级(P<0.05);(3)一些腺癌的腺腔、癌细胞胞浆、黏液上皮可见黏液分布.结论:恶性卵巢上皮性肿瘤存在黏液细胞分化和神经内分泌细胞分化,Ki67蛋白表达与肿瘤的分化成熟程度密切相关.

    作者:蒋立艳;王自能 刊期: 2006年第02期

  • 鼻咽癌治疗前后TSGF与VCA-IgA的检测意义

    目的:观察鼻咽癌患者治疗前后恶性肿瘤相关物质群(TSGF)与EB病毒VCA-IgA抗体的水平和疗效的关系.方法:联合检测58例鼻咽癌患者在治疗前后TSGF水平与VCA-IgA抗体滴度的变化.结果:58例鼻咽癌患者治疗后TSGF水平与VCA-IgA抗体滴度比治疗前下降(P<0.05).结论:动态监测TSGF和VCA-IgA抗体对于评价鼻咽癌患者的治疗效果有重要临床意义.

    作者:聂林;王奕鸣;李萍;庄承海 刊期: 2006年第02期

  • 原发性肝癌手术切除300例分析

    目的:总结原发性肝癌300例手术治疗的疗效和经验.方法:回顾分析经外科手术切除治疗300例原发性肝癌患者的临床资料.结果:本组手术死亡8例,死亡率2.7%.术后1、3、5、10年生存率分别为58.2%、26.7%、17.2%、10.8%;<5 cm的肝癌切除后1、3、5年生存率分别为87.0%、54.5%、34.3%.34例二期肝切除者,无手术死亡,术后1年、3年、5年生存率分别为85.3%、70.0%和58.3%.规则性肝切除术与非规则切除术比较,1、3、5年生存率差异均无显著性(P>0.05),微波凝固切肝法出血量少,出血量与其他控制出血的方法比较差异有显著性(P<0.05).结论:巨大肝癌规则性肝切除手术安全,疗效满意;微波凝固后断肝,有助于减少术中出血量,二期手术切除可提高总体疗效.

    作者:曹明溶;劳学军;龚瑾;梁忠平 刊期: 2006年第02期

  • 肺放线菌病误诊为周围型肺癌一例

    1病例患者,男,49岁.无明显诱因出现咳嗽、咳痰5 d,多为阵发性干咳,有时痰中带少量鲜血.发病以来无发热、胸痛、胸闷等症状.实验室检查:白细胞12.92×109/L,中性粒细胞72.7%,淋巴细胞17.3%.门诊以咯血原因待查而行CT检查.CT表现为左肺下叶基底段紧邻后胸壁处团块状致密影,大层面约3.1 cm×3.7 cm,边缘毛糙,其内密度不均匀、无钙化,平扫CT值15~53 Hu(图1),增强扫描病灶不均匀强化,强化值0~70 Hu,并有多个周围有环形强化的低密度区(图2);病灶周围肺组织内见片状模糊影;纵隔内多发小淋巴结,大者直径约0.8 cm.所见肋骨无骨质破坏改变.

    作者:殷亮;李恒国;罗良平 刊期: 2006年第02期

  • 8例儿童可疑美克尔憩室放射性核素显像检查

    美克尔憩室是一种先天性胃肠道疾病,是小儿消化道出血常见病因之一,发病率1.5%~3.0%,症状严重者需手术治疗[1].但术前对美克尔憩室的诊断较为困难.本文对8例因腹痛、消化道出血疑诊为美克尔憩室的儿童腹部放射性核素显像结果进行分析,探讨其对美克尔憩室的诊断价值.

    作者:袁中满;徐浩 刊期: 2006年第02期

  • 富硒螺旋藻对肝叶切除大鼠肝细胞的抗氧化作用

    目的:探讨富硒螺旋藻(Se-SP)对大鼠肝叶切除术后肝细胞的抗氧化效应.方法:采用Wistar大鼠复制67%肝切除模型,3个不同剂量组的大鼠于术前连续7 d按每天每公斤体质量灌胃150 mg(H)、50 mg(M)、15mg(L)的Se-SP,另设生理盐水(P)和假手术(F)对照组.在手术前(0h)及术后12 h和48 h等不同时间点取大鼠肝细胞,检测肝细胞中硒(Se)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)浓度以及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:与P、F组相比,H、M组肝细胞中Se、GPx和SOD水平均明显升高(P<0.05),MDA水平则明显降低(P<0.05);Se水平与GPx活性呈明显正相关(R2=0.75,P<0.05)而与MDA呈明显负相关(R2=0.70,P<0.05).结论:Se-SP对肝切除大鼠肝细胞具有良好的抗氧化保护效应,对GPx活性具有明显上调作用.

    作者:黄峰;黄峙;杨芳;郑文杰;丁自海;钟世镇 刊期: 2006年第02期

  • 双排螺旋CT容积重建在腹部血管检查中的应用

    目的:探讨双排螺旋CT动脉血管成像(CTA)、门静脉血管成像(CTP)对腹部血管检查的临床价值.方法:157例按正常组、肝癌组、肝功能差组及腹主动脉瘤组进行不同时相的CTA、CTP扫描,根据三维容积重建影像质量分为1、2、3级血管影像.结果:CTA 18~22 s,CTP 42~47 s扫描一级影像高达75%~85%,主动脉瘤组在18 s时扫描影像质量好,正常组与肝功能差组无区别.肌腱韧带重建窗重建影像达一级影像者多.结论:双排螺旋CT的CTA、CTP腹部血管检查对血管外科、介入治疗科、器官移植科的术前、术后评价及对肝脏肿瘤的诊断和分期有重要意义.筛选恰当的扫描延迟时间,选择合适的准直器厚度和螺距,使用相应的三维容积重建技术从而得到了优质影像.

    作者:罗蒂林;李国岱 刊期: 2006年第02期

  • 体外快速筛选抗HIV药物的一种新方法

    目的:介绍一种体外快速筛选抗HIV药物的新方法.方法:采用荧光染料钙荧光素(Cai-cein-AM)标记HIV感染的慢性H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)与不同稀释浓度的药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,2 h后用荧光显微镜观察MT-2和H9/HIV-1ⅢB融合细胞的变化;孵育3 d后用M'IT法检测药物对HIV感染细胞的保护作用和HIV-1p24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清p24抗原含量的变化.结果:药物(双黄连粉针剂)能够抑制MT-2和H9/HIV-1ⅢB细胞融合(双黄连粉针剂抑制融合的EC50为3.18 mg/L,选择指数SI大于314.5);能够保护HIV感染细胞的死亡(EC50为10.59 mg/L,SI大于94.43)和减少HIV-1p24抗原的表达(EC50为23.29mg/L,SI大于42.9).结论:运用此方法4~6 h即可初步判断药物是否具有抗HIV的作用,此方法可简便直观,敏感快速进行抗HIV药物的筛选.

    作者:曾祥凤;曾耀英;李海仙 刊期: 2006年第02期

  • 用DXA测量大鼠骨密度和身体成分的精密度

    目的:采用双能X线吸收法(DXA)进行大鼠骨密度(BMD)和身体软组织成分测量的精密度试验,探讨DXA对大鼠骨密度和身体软组织成分测量结果的可靠性.方法:对30只SD大鼠进行了DXA二次重复扫描,采用小动物专用软件分别分析大鼠上肢、下肢、躯干、全身等部位的骨密度,以及脂肪(fat)组织、肌肉(lean)组织和fat百分比,计算其精密度(以变异系数的均方根RMS-CV表示).结果:SD大鼠全身骨密度测量精密度(RMS-CV)为0.9%,小显著变化值为0.003g/cm2;大鼠全身软组织成分:脂肪、肌肉组织的含量和fat组织所占软组织的百分比的精密度分别为9.6%、1.3%和9.7%.结论:DXA能较准确测量大鼠全身骨密度和软组织成分.

    作者:弓健;吴秋莲;徐浩 刊期: 2006年第02期

暨南大学学报(自然科学与医学版)杂志

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主管:广东省教育厅

主办:暨南大学