学术投稿

小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建

张丽;袁红花;袁凤刚;朱孝荣

关键词:遗传载体, 启动子, Nestin, 调控, 转染
摘要:目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达.重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况.结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列.经酶切鉴定及测序证实正确.二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达.结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力.
实用医学杂志相关文献
  • 左卡巴斯汀鼻喷剂辅助治疗儿童慢性鼻窦炎47例

    儿童慢性鼻窦炎是儿童常见病之一,小儿的鼻窦发育不健全.鼻窦与鼻腔相通的暗道,又细又长,而鼻窦的窦口相对较大,鼻腔和鼻窦黏膜较嫩弱,感染很容易引起黏膜水肿,使窦口阻塞引流不畅.

    作者:李焱 刊期: 2012年第03期

  • 丙种球蛋白治疗婴幼儿重症手足口病疗效观察

    目的:探索婴幼儿重症手足口病的综合治疗措施,提高抢救成功率.方法:将68例重症手足口病患儿随机分成3组,均予抗病毒及对症的基础治疗:A组予小剂量[0.4 g/(kg·d)]静脉注射丙种球蛋白(IVIG),B组予1 g/(kg·d)IVIG,C组(对照组)予羚羊角治疗,观察3组神经系统症状好转时间、平均发热缓解时间、临床痊愈时间、危重症发生率.结果:两组IVIG治疗患儿与对照组相比,神经系统症状好转时间、平均发热缓解时间、临床痊愈时间均有缩短,危重症发生率有降低,差异有显著性(P<0.05).结论:重症婴幼儿手足口病和(或)存在危重症的高危因素时,及早使用IVIG,疗效显著;使用大、小剂量IVIG治疗重症手足口病疗效相近,小剂量使用IVIG更适合于基层医院首选.单用中药制剂效果有待研究.

    作者:孔卫乾;王金华;黄洁兴;陈健韵 刊期: 2012年第03期

  • CA19-9对胆管细胞癌的诊断价值评价

    目的:用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清CA19-9对胆管细胞癌的诊断、鉴别诊断价值,并对诊断界点(cut-off value)进行确定,以期对CA19-9应用于胆管细胞癌的诊断价值进行客观评价.方法:采用化学微粒子免疫发光法检测胆管细胞癌患者、肝细胞癌患者、肝血管瘤患者及健康对照血清CA19-9,绘制ROC曲线.结果:胆管细胞癌患者血清CA19-9较肝细胞癌患者、肝血管瘤患者及健康对照均高,有统计学意义(P<0.01).胆管细胞癌与肝血管瘤比较的ROC曲线显示AUC为0.882,诊断界点值为55.09 μ/mL时,敏感度达81.8%,特异度速99.0%;与肝细胞癌比较的AUC为0.830,诊断界点值为63.58 μ/mL时,敏感度达81.8%,特异度达87.5%.结论:血清CA19-9检测对于胆管细胞癌的诊断及与肝细胞癌的鉴别诊断具有较高的价值.

    作者:习浩;刘荣静 刊期: 2012年第03期

  • 不同脑电熵指数水平下靶控输注麻醉诱导对老年患者血流动力学稳定性的影响

    目的:观察老年患者麻醉诱导时合适的脑电熵指数水平和效应部位丙泊酚靶控浓度.方法:60名择期手术的老年患者随机分为A组(SE55组)和B组(SE45组).在脑电熵监测下对两组患者实施靶控输注丙泊酚进行诱导,待A组和B组患者SE值分别降至55和45后,实施气管插管.记录SE值达到目标值时效应部位丙泊酚靶控浓度和麻醉诱导过程中的血流动力学参数.结果:B组患者麻醉诱导后和气管插管前的收缩压、舒张压和平均动脉压明显低于A组(P<0.05).B组患者麻醉诱导中低血压发生率明显高于A组(P<0.05).A组患者效应部位丙泊酚靶控浓度明显低于B组(P<0.05).结论:老年患者实施麻醉诱导时将脑电熵sE目标值设定于55有利于维持血流动力学稳定性.老年患者麻醉诱导的满意效应部位丙泊酚靶控浓度为(3.1±0.8)μg/mL.

    作者:孙海涛;孙莉;薛富善;王海;张国华 刊期: 2012年第03期

  • 抗菌肽PGG酰胺化合成物的生物学特性研究

    目的:对比人工设计合成的抗菌肽PGG与它的酰胺化产物PGG-NH2的生物学特性.方法:根据NCCIS的方法,以天然蜂毒肽Melittin为对照,测定抗菌肽时大肠埃希菌和表皮葡萄球菌的低抑菌浓度(MIC);同时测定在不同盐浓度及不同MgCl2浓度下对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC.使用5%的红细胞悬液,与抗菌肽混合孵育后540 nm的吸光度评价溶血性,用超声完全溶解后红细胞悬液作为评价标准.结果:PGG-NH2对大肠埃希菌和表皮葡萄球菌MIC为4-8 μg/mL和8~16 μg/mL;随着离子浓度的增加,抗菌肽对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC出现不同程度的增高,NaCl和MgCl2浓度对PGG-NH2活性的影响小于PGG;100 μg/mL PGG-NH2的溶血性小于10%.结论:PGG-NH2有较强的抗菌活性,比PGG耐受更高的离子强度,同时具有更低的溶血性.

    作者:陈曼;胡启飞;吴民泸;代娟;赖翼;段佳慧;陈登榜 刊期: 2012年第03期

  • 高迁移率族蛋白-1对骨髓间充质干细胞分泌胰岛素样生长因子-1水平及凋亡的影响

    目的:探讨高迁移率族蛋白-1(HMGB1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分泌胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及凋亡的影响.方法:体外分离和培养昆明小鼠BMSCs,用流式细胞术检测第3代BMSCs表面抗原CD34、CD44的表达率.给予不同浓度HMGB1(0、12.5、25、50、100 ng/mL)干预后,ELISA法检测上清液中IGF-1的浓度,流式细胞术检测BMSCs的凋亡率.结果:体外培养的第3代贴壁细胞表面抗原CD44表达卒为96.7%,CD34表达率为1.1%;24 h后上清液中IGF-1的浓度25、50、100 ng/mL组与0 ng/mL组间差异均有统计学意义(P<0.05).48 h后上清液中IGF-1的浓度12.5、25、100 ng/mL组与0 ng/mL组间差异均有统计学意义(P<0.05).72 h后各浓度组BMSCs凋亡率:50、100 ng/mL组与0 ng/mL组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论:适当浓度的HMGB1(25 ng/mL)可促进BMSCs分泌IGF-1;较高浓度的HMGBI(≥50 ng/mL)可明显诱导BMSCs凋亡.

    作者:陈建军;徐之良 刊期: 2012年第03期

  • 低钙柠檬酸透析的安全性评估及对血浆D-二聚体的影响

    目的:研究低钙柠檬酸透析的安全性及对维持性血液透析患者血浆D-二聚体的影响.方法:选择我院门诊透析患者40例,分为试验组20例,使用低钙柠檬酸透析液进行透析:对照组20例,使用普通碳酸氢盐透析液进行透析.两组患者均每周透析3次,每次透析4.5 h,透析1个月.记录透析前后及透析过程中的各种实验室数据并进行统计分析.结果:(1)试验组患者在透析过程中的收缩压明显低于对照组(P<0.05);试验组患者在透析过程中高血压的发生率为15.0%,明显低于对照组(45.0%,P<0.05):(2)试验组患者透析后出血发生率为10.0%,明显低于对照组(55.0%,P<0.05);(3)试验组患者D-二聚体明显低于对照组(P<0.05);(4)透析后两组患者肌酐、尿素氮、透析过程中血压差异均有统计学意义(P<0.05).两组病例均未出现严重的低血压、低血钙及抽搐等不良反应.结论:低钙柠檬酸透析液能够降低透析患者的血浆D-二聚体,改善透析患者的凝血状况.低钙柠檬酸透析无严重不良反应发生,是安全、有效的.

    作者:付宇;芮海荣;王章华;袁莉 刊期: 2012年第03期

  • 间歇性高容量血液滤过对严重脓毒症炎症介质的影响

    目的:探讨间歇性高容量血液滤过(PHVHF)对严重脓毒症血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素10(IL-10)等炎症介质的影响,评价其治疗严重脓毒症的临床疗效.方法:2009年3月至2011年3月收住到温州医学附属第六医院的40例严重脓毒症患者纳入本研究,并随机分成对照组(常规治疗)和PHVHF组,PHVHF组患者入选后除接受常规治疗外,还接受72 h的PHVHF治疗.在治疗前和治疗72 h后收集血标本.检测血清中TNF-α、IL-6和IL-10炎症介质水平变化.同时进行急性生理和慢性健康状况评分(APACHE Ⅱ)、简化的急性生理评分(SAPS Ⅱ)和序贯器官功能衰竭评分(SOFA).结果:经PHVHF治疗后,患者的病情和血流动力学指标明显改善.TNF-α、IL-6、IL-10浓度较治疗前明显下降(P<0.05).相反,对照组上述指标却无明显变化(P>0.05).结论:PHVHF治疗可以改善脓毒症患者的临床病情和血流动力学,有效地清除血浆炎症介质.因此,PHVHF是一种治疗严重脓毒症患者可行的辅助治疗模式.

    作者:邱泽亮;张宁;宁易平;徐俊龙;楼天正 刊期: 2012年第03期

  • 益气通脉汤对冠心病心力衰竭患者心功能及N端脑钠肽前体的影响

    目的:观察自拟益气通脉汤在冠心病心力衰竭治疗中的疗效,及对左室功能、血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响.方法:80例符合冠心痛心力衰竭诊断标准的患者,随机分为治疗组和对照组各40例,对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用益气通脉汤口服,观察两组治疗前及治疗后8周的心功能分级、6 min步行距离、心脏超声指标和NT-prpBNP水平变化,评估其有效性.结果:治疗组较对照组能显著改善患者的左室功能并延长6min步行距离(P<0.05),显著降低血浆NT-proBNP水平,增加左心室射血分数(P<0.05).结论:益气通脉汤可明显改善冠心痛心力衰竭患者的心脏功能,提高运动耐量及生存质量,改善心室重构,不良反应少.

    作者:林营;陈智;陈苗苗 刊期: 2012年第03期

  • 64排CT检测颈动脉粥样斑块与缺血性脑卒中及颅内动脉瘤关系的研究

    目的:探讨颈动脉粥样斑块与缺血性脑卒中、颅内动脉瘤的关系.方法:分别对104例缺血性脑卒中患者和126例健康体检者进行回顾性分析.所有病例均行头颈部64排CT血管造影,分析并记录颈动脉粥样斑块的类型、狭窄程度及颅内动脉瘤.结果:(1)梗塞侧颈动脉的中度狭窄率、重度狭窄或闭塞率明显高于正常侧,差异具有统计学意义(P<0.001).梗塞侧颈动脉的易损斑块率明显高于正常侧,差异具有统计学意义(P<0.001).(2)颈动脉粥样硬化组颅内动脉瘤发生率高于无硬化组,差异具有统计学意义(P=0.037).结论:(1)颈动脉狭窄、易损斑块是缺血性脑卒中的重要危险因素.(2)颈动脉粥样硬化对颅内动脉瘤的发生、发展起着重要作用,同时增加了患者的危险性.(3)64排CT能清晰显示颈动脉狭窄及粥样斑块的形态和成分,可作为临床首选的检查方法.

    作者:刘伟;吕国士;王德韧 刊期: 2012年第03期

  • 米力农对先天性心脏病合并肺动脉高压患者肺氧合功能及肺循环动力学的影响

    目的:观察肺动脉内注射米力农对先天性心脏病合并肺动脉高压患者的肺氧合功能及肺循环动力学的影响.方法:对先天性心脏病合并肺动脉高压患者18例行右心导管术时,比较单纯高浓度吸氧患者8例与吸氧联合肺动脉内注射米力农患者10例肺动脉平均压与全肺阻力下降及动脉血氧饱和度改善情况的差异.结果:先天性心脏病合并肺动脉高压患者,吸氧联合肺动脉内注射米力农后肺动脉平均压下降[(10.22±4.78vs 6.00±3.14)mmHg]与全肺阻力的降低[(3.25±1.13vs 1.63±1.98)mmHg],动脉血氧饱和度的提高[(6.93±1.98)%vs(5.01±2.61)%],均优于单纯高浓度吸氧者,差异有统计学意义.结论:米力农能有效降低肺动脉平均压,改善肺氧合功能,是先天性心脏病合并肺动脉高压患者可选择的一种安全、有效的降肺动脉压药物.

    作者:于运福;史景柏 刊期: 2012年第03期

  • 肺栓塞合并尿路感染并发类白血病反应1例

    患者男,81岁,因左侧股骨颈骨折人院.入院查体:左下肢屈曲外旋畸形,左髋部活动障碍,血运、感觉未见明显异常.查血常规示白细胞13.2×109/L,NE 90.2%,尿常规示上皮细胞计数增高,白细胞、红细胞计数均正常范围.

    作者:王洋;吕媛媛;周岩 刊期: 2012年第03期

  • 腕背隆凸综合征误诊为腱鞘囊肿临床分析

    目的:通过临床分析鉴别腕背隆凸综合征和腕背腱鞘囊肿,以减少误诊率.方法:2007年以来我门诊手术处理腕背腱鞘囊肿102例,其中复发17例,11例经再次手术后至今无复发,另外6例手术后再次复发,后经X线片检查明确诊断为腕背隆凸综合征.结果:6例患者分别行手术治疗.切除腕背滑囊及凿除增生骨质,随访5例患者均无复发,4例患者无任何症状,1例患者仍感腕背疼痛、腕无力.结论:腕背隆凸综合征临床上较为少见,绝大多数患者以腕背逐渐增大的囊性包块就诊.临床上极易误认为是单纯的腱鞘囊肿,通过仔细询问病史及经第2、3腕掌关节背侧切线位x线片即可资以鉴别.

    作者:孙洋;李涓涓;朱国新;赵鸿 刊期: 2012年第03期

  • 母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用

    目的:定量检测疑似人巨细胞病毒(HCMV)感染婴儿尿液及对应母亲乳汁中HCMV DNA,评估两者在诊断HCMV感染中的价值,并比较两者浓度之间的关系.方法:选取51例疑似HCMV感染的婴儿,收集其新鲜尿液及对应的母亲乳汁,分别用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测HCMV DNA.结果:5l例疑似HCMV感染婴儿尿液中,有49例检测出HCMV DNA,阳性率为96.0%(49/51).51份婴儿母亲乳汁中,有37份检测出HCMV DNA阳性,阳性率为72.5%(37/51).对37例尿液与乳汁HCMV DNA均为阳性的患几,分别对尿液与乳汁HCMV DNA浓度取对数,将两者进行相关性分析,结果显示两者之间存在一定的相关性,相关系数为0.332(P<0.05).结论:婴儿尿液中HCMV DNA检测对于婴儿HCMV的感染具有重要的价值,同时对其母乳HCMV DNA检测,可以发现婴儿尿液和母乳HCMV DNA具有一定的相关性.

    作者:谢而付;黄珮珺;陈丹;张丽霞;戎国栋;潘世扬 刊期: 2012年第03期

  • 白细胞介素-17对英夫利昔单抗治疗类风湿关节炎疗效的预测作用

    目的:通过检测类风湿关节炎(BA)患者在接受英夫利昔单抗治疗前后外周血中白细胞介素-17(IL-17)的基因表达水平,探讨IL-17能否在英夫利昔单抗治疗RA疗效预测中发挥作用.方法:分别提取BA患者(n=20)和健康志愿者(n=20)的外周血单核细胞(PBMC),通过real-time PCR方法测定PBMC中IL-17的基因表达水平.观察英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与疾病活动度评分(DAS)改变的相关性,以及治疗前IL-17/TNF-α基因表达水平与治疗反应之间的关系.结果:在RA患者的PBMC中IL-17基因的表达水平明显高于健康志愿者(P<0.05).英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与DAS的改变无显著相关性.虽然本研究发现RA患者治疗前的IL-17/TNF-α基因表达水平比值越低,则倾向于时治疗反应越好,但两者间无显著相关性(r=-0.28,P=0.070).结论:从本研究现有的结果来看,IL-17尚不足以对英夫利昔单抗治疗RA的疗效起到良好的预测作用,其相关关系仍需进一步研究.

    作者:丁振华;王小冬;熊俊慧;陈坚 刊期: 2012年第03期

  • 环磷酰胺治疗原发性中小血管炎的系统评价

    目的:系统评价静脉冲击与连续口服环磷酰胺,用于原发性中小血管炎诱导缓解期治疗的有效性和安全性.方法:电子检索Cochran图书馆临床对照试验资料库、PubMed、EMbase、CBM、维普中文科技期刊数据库,收集比较静脉冲击与连续口服环磷酰胺治疗原发性中小血管炎的随机对照试验(RCT),根据纳入和排除标准筛选文献,质量评价及提取资料后,应用RevMan5.0软件对数据进行Meta分析.结果:共纳入5篇RCT论文合计325名患者,Meta分析结果显示试验组(激素加静脉冲击用环磷酰胺)与对照组(激素加连续口服环磷酰胺)相比:复发率较高[RR=1.64,95%CI(1.06,2.54)],白细胞减少的发生率[RR=0.51,95%CI(0.36,0.73)]较低,诱导缓解失败率、感染、出血性膀胱炎、女性患者闭经、终末期肾衰竭的发生率及死亡率均无明显差异.结论:静脉冲击用环磷酰胺治疗原发性中小血管炎与连续口服相比诱导缓解效果相似,白细胞减少的发生率较低,但复发率较高.

    作者:邓进;廖蕴华;霍冬梅;伍巧源 刊期: 2012年第03期

  • 脂联素、同型半胱氨酸在退行性心瓣膜病患者中的水平变化及其临床意义

    目的:探讨老年退行性心瓣膜病患者脂联素及同型半胱氨酸的水平变化及其意义.方法:选择老年退行性心瓣膜病患者80例作为观察组.健康者60例作为对照组.比较组间脂联素、同型半胱氨酸水平差异,分析其与瓣膜病变程度、瓣膜病变数量之间的关系.结果:观察组血清脂联素水平明显低于对照组(P<0.01)、同型半胱氨酸水平明显高于对照组(P<0.01);随着瓣膜病变数量增多及返流程度加重,脂联素水平进行性下降(P<0.05),同型半胱氨酸水平进行性升高(P<0.05).结论:低脂联素血症及高同型半胱氨酸血症可能是老年退行性心瓣膜病的危险因素.

    作者:周华兰;徐培敬;胡得飞;张枫林;陈颖 刊期: 2012年第03期

  • 氧化应激与重症哮喘研究进展

    支气管哮喘是一种嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T细胞等多种炎症细胞参与的气道慢性非特异性疾病.流行病学研究表明.哮喘的发病率和病死率具有全球性上升的趋势.

    作者:蓝楠 刊期: 2012年第03期

  • 分次伽玛刀治疗单发脑转移瘤的疗效及预后分析

    目的:探讨单发脑转移瘤患者行分次伽玛刀治疗的疗效及预后情况.方法:对2008年1月至2010年12月在我院进行分次伽玛刀治疗且随访到的49例单发脑转移瘤患者进行回顾性分析,患者治疗剂量为4~6 Gy/次,总剂量32~36 Gy,分6-8次完成,等剂量曲线50%.结果:全组随访1~31个月,中位随访时间7.98个月,总有效率为73.47%,临床获益率为95.92%;中位生存时间为10.3个月,1年生存率36.73%,2年生存率10.20%.结论:分次伽玛刀治疗单发脑转移瘤疗效好,副反应小,症状改善明显,可以提高惠者生存质量.

    作者:周燕华;徐子海;容谦;农惠惠 刊期: 2012年第03期

  • 检测胃癌血清和腹水中CA72-4抗原水平的临床意义

    目的:对胃癌患者进行CA72-4含量的检测,分析血清和腹水中的CA72-4水平与胃癌的相关性,预期判定腹膜复发的可能性.方法:研究了48例胃癌患者血清和腹水中的CA72-4水平、损伤部位及根除和淋巴结转移的数量.结果:淋巴结转移的胃癌患者与血清和腹水中的高水平CA72-4含量显著相关.浆膜浸润胃癌与血清中的CA72-4水平含量无显著统计学相关性,然而,与腹水中的CA72-4水平含量显著相关.尽管血清中的CA72-4水平含量与晚期胃癌无显著相关性,但腹水中的CA72-4水平含量与晚期胃癌呈显著相关.结论:腹水中的CA72-4高水平含量与淋巴结转移和浆膜浸润胃癌显著相关.血清中的CA72-4水平含量仅与淋巴结转移相关,与浆膜浸润胃癌无显著相关.

    作者:孙萍;盛家和;王征帆 刊期: 2012年第03期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所