学术投稿

单次差速贴壁法纯化培养大鼠嗅神经鞘细胞的实验研究

李玉安;徐华梓;李万里

关键词:细胞培养技术, 嗅鞘细胞, 嗅球, 差速贴壁法
摘要:目的:探讨单次差速贴壁法纯化培养成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的可行性.方法:选取8~10周龄的成年SD大鼠,无菌条件下切取嗅球、剪碎,胰酶消化制成细胞悬液后接种,采用18 h单次差速贴壁的方法纯化培养嗅鞘细胞,定期在倒置显微镜下观察嗅鞘细胞的形态学变化及生长情况,并对其行神经生长因子受体p75抗体(NGFR p75)及碘化丙啶的免疫荧光鉴定,同时计算嗅鞘细胞的纯度.结果:通过18 h单次差速贴壁法纯化培养的嗅鞘细胞经NGFR p75免疫荧光鉴定后,纯度可达70%~80%,形态上以双极和三极细胞为主,伴有少许单极及多极细胞.结论:应用18 h单次差速贴壁法纯化培养嗅鞘细胞是一种简便、稳定、经济、快捷的方法.
实用医学杂志相关文献
  • 高强度聚焦超声治疗良性前列腺增生220例

    目的:评价高强度聚焦超声(HIFU)治疗良性前列腺增生症的临床疗效和安全性.方法:对220例良性前列腺增生症予以HIFU消融治疗.结果:术后1年前列腺体积从(52.76±10.20)mL缩小到(32.10±8.90)mL,国际前列腺症状评分从20±8降到7±3.生活质量评分从5.0±1.0降到1.0±0.6,大尿流率从(5.78±2.61)mL/s上升到(12.86±4.55)mL/s,治疗前后相比,差异有显著性(P<0.01),无明显并发症.结论:经直肠HIFU治疗良性前列腺增生症是一种疗效确切且安全的新技术.很有临床应用价值,值得推广.

    作者:林哲;徐文峰;邓翠芬;张海滨;刘建华;陈勇 刊期: 2009年第10期

  • 经椎弓根钉固定治疗胸腰椎不稳定骨折

    目的:探讨椎弓根钉固定治疗胸腰椎不稳定骨折的手术方法和治疗效果.方法:回顾2005年3月至2008年1月广东省东莞市人民医院普外科采用椎弓根钉固定治疗胸腰椎不稳定骨折46例,对其手术方法和治疗效果进行分析.结果:本组46例均获得随访,平均随访26个月(9~43个月),术后椎间隙高度及胸腰椎生理曲度恢复满意,平均Cobb's角(度)及平均椎管狭窄指数得到明显改善,Frankel分级提高1~3级.结论:经后路短节段的椎弓根钉固定治疗胸腰椎不稳定骨折的疗效肯定.

    作者:梁润林;朱文雄;刘先银;何仲佳;郭建恩;周雪明 刊期: 2009年第10期

  • 颅内肠源性囊肿的MRI诊断

    目的:探讨颅内肠源性囊肿的MRI诊断价值.方法:通过分析5例颅内肠源性囊肿的MRI资料,分析其MRI特征.结果:病灶位于颅-颈交界枕骨大孔区3例,桥小脑角区偏左侧1例,鞍区(向鞍内鞍上生长)1例.病灶呈长椭圆形3例,类圆形2例.4例T1WI呈高信号、T2WI呈等低信号;1例T1WI略低信号,T2WI高信号;增强后4例病灶无明显强化,1例出现囊壁强化.结论:颅内肠源性囊肿的MRI特点与囊液的蛋白含量有关,其MRI表现具有一定的特征性.

    作者:刘霞;金中高;周林江 刊期: 2009年第10期

  • 医源性肝功能异常的常见原因及其防治

    目的:探讨医源性肝功能异常的常见原因及其防治措施.方法:分析临床所见15例医源性肝功能异常患者的临床资料.结果:医源性肝功能异常在临床各科室均常见,常由直接或间接的肝细胞损伤、胆汁淤积以及肝脏循环功能障碍所致,以转氨酶升高及黄疸为主要表现.多因未足够重视相关治疗可能出现的肝脏毒副作用,以至未采取合理的预防措施而导致肝功能异常.结论:避免应用有肝毒性的药物及相关治疗常能有效地预防医源性肝功能异常.对于已发生的医源性肝功能异常,应及时停用有肝毒性的药物及相关治疗,并积极护肝和利胆以及改善肝脏循环,多预后好.有急性肝功能衰竭时,应以人工肝支持治疗,必要时行肝移植.

    作者:李明松;陈村龙;崔生达;刘恩德;姜泊 刊期: 2009年第10期

  • 荧光染色结合激光共聚焦活细胞成像快速评价人移植胰岛

    目的:探讨一种快速有效的评价分离或培养的人胰岛方法.方法:使用双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF)、高氯酸甲酯荧光素(TMRM)、荧光麦胚凝集素(WCA)三种荧光染色剂标记,评价胰岛细胞氧化应激反应,线粒体膜电位变化以及低聚糖分布.激光共聚焦显微镜使用增强型微透镜Nipkow双重转碟技术,且装配有倒置显微镜对细胞进行观察.结果:新分离的人胰岛细胞中,损伤细胞TMRM染色弱,另外WGA染色人胰岛细胞中内分泌细胞及外分泌细胞表面低聚糖量明显不同,内分泌细胞表面染色弱.DCF进入细胞内但在激光强度10%情况下未发出荧光.结论:TMRM染色线粒体膜对于早期识别损伤或应激细胞十分有益.多种荧光染色结合共聚焦成像系统对于快速评价分离和培养的胰岛细胞具有应用前景.

    作者:刘东斌;M.Hermann;D.Pirkebner;A.Draxl;R.Margreiter;P.Hengster 刊期: 2009年第10期

  • 非法人流手术致结肠损伤2例

    例1患者女,24岁,因诊断早孕10周于2007年3月9日在私人诊所行钳刮术,术中出现剧烈腹痛,给予镇静、止痛药物(具体不详)处理,并告知患者术中、术后出现腹痛是正常现象,不要紧张,并让患者回家休息.回家后患者自觉腹痛,使用止痛药治疗.

    作者:周五一;李伟明;冯智毅;陈铁军;全天一;黄波 刊期: 2009年第10期

  • 急性脑梗死血清脂联素检测的临床价值

    目的:研究急性脑梗死患者血清脂联素水平检测的临床价值.方法:用ELISA法测定344例急性脑梗死患者(初发组252例和复发组92例)及100例正常人血清脂联素水平,并进行统计学分析.结果:(1)各类型急性脑梗死患者血清脂联素均低于正常人(P<0.01);各类型脑梗死患者之间脂联素差异无显著性(P>0.05);(2)脑梗死复发患者血清脂联素低于初发患者(P<0.01);(3)1年内复发患者血清脂联素低于1年后复发者(P<0.05);(4)各类型脑梗死复发患者之间血清脂联素差异无显著性(P>0.05).结论:低脂联素水平与急性脑梗死的发生及复发均有密切关系,血清脂联素水平可以作为急性脑梗死风险因素和预后评估的临床指标.

    作者:陈海斌;陈金春;喻小辉;陈盛;李勇;王洁 刊期: 2009年第10期

  • 三维适形放疗同步含铂方案治疗中晚期非小细胞肺癌的临床研究

    目的:观察三维适形放疗同步含铂方案化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效及不良反应.方法:36例中晚期非小细胞肺癌患者按入院顺序分为两组,每组各18例.A组采用三维适形放疗,胸部照射2 Gy/次,5次/周,共6~8周,总荆量(67.3±8.4)Gy,并在放疗开始第1周时同步用含铂两药方案多西紫杉醇+顺铂、紫杉醇+顺铂等化疗,每3周重复,共4~6个周期.B组采用常规放疗,胸部照射2 Gy/次,5次/周,共5~7周,总剂量(58.9±7.9)Gy,同步化疗同A组.结果:A组和B组有效率分别为44.4%和22.2%(P<0.05).A组中位生存期18个月,B组中位生存期12个月,两组1年总生存率分别为94.4%和77.8%.A组和B组1年局部控制率分别为88.9%和55.6%.全组未出现3级以上食管炎及肺炎,毒副反应发生率在不同治疗组间差异无统计学意义.结论:三维适形放疗同步含铂方案化疗明显提高中晚期非小细胞肺癌的生存率而未增加毒副反应发生率.

    作者:袁克华;汤明;阮培刚;邹彦 刊期: 2009年第10期

  • 融合基因Tat-HPV16L1的克隆及在大肠杆菌中的表达

    目的:构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽基因Tat的融合表达载体,以大肠杆菌作为表达系统,探索制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗的新方法.方法:以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与原核表达载体pET28a连接,重组质粒再与自行设计蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入大肠杆菌表达菌株DE3进行诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果:融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳分析,结果诱导表达成功.结论:本研究为制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗打下了基础.

    作者:张进芳;马文丽;危敏;赵慧;朱秀兰;郑文岭 刊期: 2009年第10期

  • DR摄影中不同摄影仟伏对成像质量和辐射效能的影响

    目的:探讨在直接数字化摄影(directly radiography,DR)成像中不同摄影仟伏(KV)的变化对辐射效 能和图像质量的影响.方法:利用图像检测板在飞利浦DR系统上.通过改变摄影KV(50~120 KV)曝光,记录专用图像检测板中心区及空曝区的表面吸收剂量,并测定不同KV成像的中心区、空曝区、各级灰阶的密度值.进行量化分析.结果:摄影KV在80~100变化时表面吸收剂量减少明显,成像的中心区、空曝区、各级灰阶的密度值变化不大,具有较好的辐射效能和影像质量.结论:适当提高摄影KV可明显减少表面吸收剂量,提高辐射效能,而DR成像质量基本不受影响.

    作者:崔志敏;穆晶伟;朱永峰 刊期: 2009年第10期

  • 经尿道前列腺电切术联合耻骨上膀胱穿刺引流治疗重度前列腺增生

    目的:研究经尿道前列腺电切术(TURP)联合耻骨上膀胱穿刺引流治疗重度良性前列腺增生(BPH)的疗效和安全性.方法:回顾性分析38例重度BPH患者行TURP时应用耻骨上膀胱穿刺引流的疗效及安全性.患 者平均年龄76岁,前列腺重量均大于60 g,入院后积极治疗并发症,进行围手术期准备,择期施行TURP术.术中麻醉后先采用耻骨上膀胱穿刺造瘘法置入膀胱引流管,再行TURP术.结果:全部38例手术均顺利完成,患者均能承受该手术治疗.切除前列腺组织平均37 g,手术时间50~100min,无一例出现TURP综合征及围手术期死亡.术后随访6个月,所有患者均排尿通畅,国际前列腺症状评分(I-PSS)和生活质量(QOL)评分显著降低,平均尿流率显著提高,残余尿量显著减少.结论:对于重度BPH患者行TURP时应用耻骨上膀胱穿刺引流临床效果满意,安全性好.

    作者:李志江;程新登;徐旻;李国栋 刊期: 2009年第10期

  • 老年男性气囊导尿管插管深度与气囊注水量的探讨

    目的:观察气囊导尿管插管深度的改进对尿道损伤的影响,观察不同气囊注水量对溢尿的影响.方法:将50例老年男性需插导尿管的患者分为观察组和对照组各25例,对照组将气囊导尿管插入尿道20~22 cm,见有尿液流出后再插入2 cm,向气囊内注入灭菌注射用水12~15 mL,观察组将气囊导尿管插入尿道20~22 cm,见有尿液流出后再插入8 cm,向气囊内注入灭菌注射用水5~8 mL.结果:观察组无一例发生尿道出血及肉眼血尿,溢尿1例;对照组发生尿道出血2例,肉眼血尿2例,溢尿8例.结论:改进导尿管插入深度可减轻尿道损伤,气囊内注入液体量以5~8 mL为宜.这样既可有效地防止尿道口溢尿,又不会增加尿管脱出的机会.

    作者:郑蓉 刊期: 2009年第10期

  • Ghrelin的研究进展

    自20世纪70年代末Momany和Bowers等人合成了一种能够促进生长激素分泌的多肽--生长激素释放肽(GHRP)以来,人们陆续合成了一组具有相同作用的物质-生长激素促分泌素(GHS)[1].1996年人们在人类大脑和垂体等部位发现并克隆出GHS的受体--生长激素促分泌素受体(GHSR)[2].1999年,日本科学家首次在大鼠胃中发现了GHSR的内源性配体Ghrelin.

    作者:张捷;刘荣凤 刊期: 2009年第10期

  • 冠状动脉造影不同操作方法91例

    目的:比较单用右造影导管作冠状动脉造影和常规使用左右双造影导管作冠状动脉造影的效果.方法:回顾常规使用左右双造影导管作冠状动脉造影的55例和单用右造影导管作冠状动脉造影36例患者的临床资料,对两种造影方法的操作时间、曝光次数、总曝光时间进行比较.结果:常规双导管造影组专家指导18例,操作时间(20±10)min,曝光次数(9±4)次,总曝光时间(103±20)s;独立操作37例,操作时间(27±10)min,曝光次数(12±4)次,总曝光时间(118±25)s.单导管造影组专家指导10例,操作时间(13±7)min,曝光次数(7±2)次,总曝光时间(58±10)s;独立操作26例,操作时间(18±6) min,曝光次数(9±4)次,总曝光时间(78士15)s.结论:单导管造影组在操作时间、曝光次数、总曝光时间上均优于双导管造影组,即使用右造影导菅作左冠状动脉造影失败,还可改用左造影导管行左冠状动脉造影,值得推广.

    作者:沈建宏;范存忠;石国平;严循成;杨如山 刊期: 2009年第10期

  • 脑脉Ⅱ号口服液对高血压脑出血大鼠血肿周围组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3活性和细胞凋亡的影响

    目的:观察中药复方制剂脑脉Ⅱ号口服液对高血压脑出血大鼠血肿周围组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)活性和细胞凋亡的影响.方法:将55只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组.向双肾双夹肾血管性高血压大鼠右侧尾状核注入Ⅶ型胶原酶诱导脑出血.注射后2 h开始,每日灌胃给予脑脉Ⅱ号口服液(8 mL/d)或等容积蒸馏水直至处死.注射后6、12 h,1、3、7 d取脑,用流式细胞术检测细胞凋亡百分率,用荧光分光计测定caspase-3活性.结果:与假手术组比较,模型组细胞凋亡百分率在注射6 h后显著增加(P<0.01),3 d达到高峰,持续增加至7 d以后;模型组caapaae-3活性值在注射6 h后开始增加(P<0.01),1 d后达到峰值,之后开始下降.持续增加至7 d以后.注射后12 h~7 d各时间点.治疗组细胞凋亡百分率和caspase-3活性值均较模型组显著降低(P<0.05).结论:抑制caspase-3活化可能是脑脉Ⅱ号口服液抗高血压脑出血后细胞凋亡作用机制之一.

    作者:何纲;黄培新;刘茂才 刊期: 2009年第10期

  • 稳心颗粒治疗更年期室上速疗效观察

    更年期室上速是妇女进入40岁以后南于生殖器官卵巢功能的下降,雌激素分泌减少引起的心血管系统发生的功能改变,表现为心悸、胸闷、一过性眩晕,严重者伴有恶心、呕吐.临床检查:心率>100次/min,心电图表现为ST-T改变.本文报道步长稳心颗粒对更年期室上速治疗的效果.

    作者:孙翠红 刊期: 2009年第10期

  • 老年人踝臂指数与颈动脉内膜-中层厚度的关系

    目的:探讨老年人颈动脉内膜-中层厚度(carotid intima-media thickness,IMT)与静息踝臂指数以及运动后踝臂指数的关系.方法:89例老年人根据IMT不同分为IMT增加组(≥0.8 mm)和IMT正常组(<0.8 mm),收集患者年龄、性别、职业等一般情况,并测量所有病例静息与运动后踝臂指数.结果:IMT增加组老年人与IMT正常组老年人比较,静息踝臂指数与运动踝臂指数均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).老年人IMT与静息踝臂指数与运动踝臂指数均呈负相关性(r=0.783,-0.820,P<0.05).结论:运动后踝臂指数可以较好地反映IMT情况,对无症状动脉粥样硬化患者的筛查具有一定意义.

    作者:凌龙;周思朗;谢潮鑫 刊期: 2009年第10期

  • 外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平与肝癌切除术后肿瘤复发的关系

    目的:探讨术前外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T细胞)水平与肝癌切除术后肿瘤复发的关系.方法:收集2005年1月至2007年11月实施手术的35例肝癌患者的术前外周血,采用流式细胞技术检测外周血CD4+CD25+T细胞比例,以27例肝硬化患者的外周血作对照.对35例肝癌患者随访14~24个月,观察肿瘤复发情况.分析术前CD4+CD25+T细胞水平与肝癌切除术后肿瘤复发的相关性,判断术前CD4+CD25+T细胞水平对肿瘤复发的影响.结果:肝癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平显著高于肝硬化患者(P<0.01);术前外周血CD4+CD25+T细胞水平与肝癌患者术后肿瘤复发率呈负相关(r=-0.83,P<0.05);术前CD4+CD25+T细胞水平是影响术后肿瘤复发的独立危险因素(P<0.01);高CD4+CD25+T细胞组患者术后肿瘤复发率高于低CD4+CD25+T细胞组患者(P<0.05).结论:外周血CD4+CD25+T细胞水平可作为肝癌切除术后肿瘤复发的预测指标之一.

    作者:刘锡文;徐晓武;周光耀;程馥艳 刊期: 2009年第10期

  • 他克莫司对特发性膜性肾病的治疗观察

    目的:研究他克莫司(FK 506)治疗表现为肾病综合征(NS)的特发性膜性肾病的疗效和安全性.方法:17例原发性肾病综合征患者经肾活检确诊膜性肾病,单用激素治疗无效或复发.随机分两组分别予FK 506联用糖皮质激素治疗(治疗组),或环磷酰胺(CTX)联用糖皮质激素治疗(对照组),疗程至少6个月,观察各组的疗效及安全性.结果:治疗组24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白、血胆固醇和甘油三酯等指标较对照组均有明显改善,不良反应可以耐受.对照组1例因白细胞减少停止CTX治疗.结论:与CTX相比,FK 506联合激素治疗特发性膜性肾病,短期疗效肯定,不良反应可以耐受.

    作者:陈伟珍;陈德君;徐光标 刊期: 2009年第10期

  • 肌腱细胞相关基础研究进展

    肌腱缺损的修复是临床常见问题,肌腱移植虽然简便易行,但常受来源紧缺和供区继发损害的制约,而组织工程技术有可能成功解决此问题.肌腱的组织工程化构建已经取得了一定的成果,然而种子细胞的来源问题始终困扰着人们.目前,较多使用的种子细胞有肌腱细胞、真皮成纤维细胞和骨髓间充质干细胞,各有优缺点.肌腱细胞是肌腱的基本功能单位,它合成和分泌胶原等细胞外基质,维持肌腱组织的新陈代谢.

    作者:刘运晃;邢更彦 刊期: 2009年第10期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所