学术投稿

单次差速贴壁法纯化培养大鼠嗅神经鞘细胞的实验研究

李玉安;徐华梓;李万里

关键词:细胞培养技术, 嗅鞘细胞, 嗅球, 差速贴壁法
摘要:目的:探讨单次差速贴壁法纯化培养成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的可行性.方法:选取8~10周龄的成年SD大鼠,无菌条件下切取嗅球、剪碎,胰酶消化制成细胞悬液后接种,采用18 h单次差速贴壁的方法纯化培养嗅鞘细胞,定期在倒置显微镜下观察嗅鞘细胞的形态学变化及生长情况,并对其行神经生长因子受体p75抗体(NGFR p75)及碘化丙啶的免疫荧光鉴定,同时计算嗅鞘细胞的纯度.结果:通过18 h单次差速贴壁法纯化培养的嗅鞘细胞经NGFR p75免疫荧光鉴定后,纯度可达70%~80%,形态上以双极和三极细胞为主,伴有少许单极及多极细胞.结论:应用18 h单次差速贴壁法纯化培养嗅鞘细胞是一种简便、稳定、经济、快捷的方法.
实用医学杂志相关文献
  • 经皮腰椎间盘切吸术治疗腰骶部极外侧型椎间盘突出症的疗效分析

    目的:探讨分析经皮腰椎间盘切吸术(PLD)治疗腰骶部极外侧型腰椎间盘突出症的临床疗效方法:2000-2007年广州医学院第三附属医院收治腰骶部极外侧型腰椎间盘突出症患者11例,均为Ls~S1单节段椎间盘突出症,采用PLD治疗,观察术后患者恢复情况及进行VAS疼痛评分.评价治疗效果.结果:11例患者中7例术后疼痛症状立即消失,4例明显缓解,1例术后有残留感觉迟钝,随访6个月后好转,整体治疗满意度90.9%.结论:PLD治疗腰骶部极外侧型椎间盘突出症创伤小,疗效确切,症状缓解迅速,患者满意度高,优势明显.术中需注意操作要点,防止术后并发症产生.

    作者:杨健齐;李健;叶裕丰;李建安 刊期: 2009年第10期

  • 兔深层巩膜切除术后房水前列腺素E2的定量研究

    目的:评价兔深层巩膜切除术后房水前列腺素E2(PGE2)浓度变化.方法:研究对象为新西兰白兔30只,随机分组.实验组14只行深层巩膜切除术,对照组16只行虹膜周切术.术后1、4、7、14、28、56 d分别抽取房水放射免疫法检测PGE2浓度.两组数据用SAS软件包行统计学分析.结果:术后1、4、7 d两组房水PGE2浓度较术前水平提高(P<0.01).深层巩膜切除组明显低于虹膜周切组(P<0.01).深层巩膜切除组术后14 d房水PGE2浓度恢复到术前水平(P>0.05),虹膜周切组术后28 d房水PGE2浓度恢复到术前水平(P>0.05).结论:兔深层巩膜切除术后房水炎症介质PGE2浓度升高后较快恢复至术前水平.手术对眼内环境的干扰较小.

    作者:徐巍华;盛耀华;岑洁 刊期: 2009年第10期

  • 全自动血红蛋白电泳在诊断地中海贫血中的应用

    目的:探讨全自动血红蛋白电泳在诊断地中海贫血中的价值.方法:使用法国Hydrasyscs电泳系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血,同时采用HbF碱变性试验对同一标本进行HbF含量测定,比较两种方法的检测结果.结果:351例标本中,应用全自动血红蛋白电泳检出α地中海贫血表型阳性19例,阳性率为5.26%;β地中海贫血表型阳性65例,阳性率为18.52%.全自动血红蛋白电泳可以分辨出HbF区带,并且能进行定量扫描,与HbF碱变性试验测得HbF含量基本一致.结论:全自动血红蛋白电泳电泳区带清晰,扫描定量准确,可以为地中海贫血的诊断提供重要依据.

    作者:蒙天生;莫鸿健 刊期: 2009年第10期

  • 布林佐胺治疗青光眼的降眼压疗效及安全性观察

    目的:观察布林佐胺治疗青光眼的临床疗效和安全性.方法:对28例49只眼原发性开角型青光眼、高眼压症及术后残余青光眼患者随机分为治疗组(布林佐胺组)和对照组(马来酸噻吗洛尔组),其中治疗组14例25只眼,对照组14例24只眼.治疗组采用1%布林佐胺滴眼液治疗,对照组采用0.5%马来酸噻吗洛尔滴眼液治疗,比较两种滴眼液的降眼压作用及不良反应.结果:两组患者用药后眼压下降,与用药前相比差异有统计学意义(P<0.05),两组患者平均眼压下降值差异无统计学意义(P>0.05);两组血压与用药前比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组出现心率抑制,治疗组心率无变化,两组无严重不良反应,未发现明显的全身副作用.结论:布林佐胺对青光眼患者具有明显的降眼压作用,且对心率无抑制作用,是理想的抗青光眼药物.

    作者:陈爱菊;高和香 刊期: 2009年第10期

  • 胆固醇性胸腔积液1例

    患者男,68岁,退休工人.因胸闷伴喘气3周入院.既往于20世纪70年代患有肺结核.查体:T 36.5℃,P 80次/min,R18次/min,BP 130/80 mmHg,桶状胸,胸廓不对称,右侧高于左侧,右胸第5肋以下语颤消失,叩诊实音,呼吸音消失,心率80次/min,律齐.各瓣膜听诊区未闻及杂音.入院后行胸腔穿刺,抽出红褐色黏稠液体约480 mL,液体内可见反光晶体.胸水细胞学检查:镜见大量的胆固醇结晶.

    作者:袁文胜 刊期: 2009年第10期

  • 胸交感神经节切除术对健康心脏的影响

    目的:探讨胸腔镜下胸交感神经节切除术对健康心脏的影响.方法:在开展切除胸交感神经节治疗双手多汗症的同时,研究交感神经节切除术对健康心脏的影响.对接受手术的患者进行术前、术后心电图,术前、术后24 h动态心电图,以及术后第6天活动平板运动试验等进行比较分析.结果:本组33例患者手术全部获得成功.患者表现为术前术后一致的夜间睡眠后心率降低,而白天活动后心率在正常范围内增快,心律及心电图波形无异常改变.患者术前术后平均心率、日间平均低心率、夜间平均低心率均无显著性差异(P>0.05).患者活动平板试验均表现出随运动强度加大而心率逐渐加快,休息后心率又逐渐平复.各运动强度活动后,平均心率与正常对照组差异无显著性(P>0.05).结论:胸交感神经节切除术对健康心脏没有明显的负面影响.

    作者:宋奇;兰志祯;王春香 刊期: 2009年第10期

  • 冠状动脉造影不同操作方法91例

    目的:比较单用右造影导管作冠状动脉造影和常规使用左右双造影导管作冠状动脉造影的效果.方法:回顾常规使用左右双造影导管作冠状动脉造影的55例和单用右造影导管作冠状动脉造影36例患者的临床资料,对两种造影方法的操作时间、曝光次数、总曝光时间进行比较.结果:常规双导管造影组专家指导18例,操作时间(20±10)min,曝光次数(9±4)次,总曝光时间(103±20)s;独立操作37例,操作时间(27±10)min,曝光次数(12±4)次,总曝光时间(118±25)s.单导管造影组专家指导10例,操作时间(13±7)min,曝光次数(7±2)次,总曝光时间(58±10)s;独立操作26例,操作时间(18±6) min,曝光次数(9±4)次,总曝光时间(78士15)s.结论:单导管造影组在操作时间、曝光次数、总曝光时间上均优于双导管造影组,即使用右造影导菅作左冠状动脉造影失败,还可改用左造影导管行左冠状动脉造影,值得推广.

    作者:沈建宏;范存忠;石国平;严循成;杨如山 刊期: 2009年第10期

  • 降钙素原在危重病患者导管相关性血行感染中的早期诊断价值

    目的:探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)在危重病患者中心静脉导管相关性血行感染(catheter related bloodstream infections,CRBSI)中的早期诊断价值.方法:对浙江医院55例中心静脉导管置管后怀疑CRBSI的危重病患者进行前瞻性研究,入组当天采集血样分析PCT水平和同时留取血培养和导管标本.结果:25例患者(45.5%)符合CRBIS诊断标准,CRBIS组PCT水平3.98(3.00~5.46)V,μg/L,明显高于非CRBIS组的0.88(0.50~1.51)μg/L(P<0.001);革兰阴性细菌感染CRBIS患者的PCT水平较革兰阳性感染者高(P=0.042);用ROC曲线分析示PCT理想的阳性和阴性预测CRBIS水平为3μg/L,该临界值的敏感性为76.0%、特异性为96.7%、阴性预测值为87.0%、阳性预测值为82.8%.结论:PCT在早期诊断CRBSI中具有较高的特异性和阴性预测值,具有一定的临床价值.

    作者:虞意华;蔡国龙;吴亮;严静;龚仕金;戴海文 刊期: 2009年第10期

  • 核转录因子κBp65、血管内皮生长因子A和p53在直肠癌中的表达及其临床意义

    目的:探讨核转录因子κBp65(NF-κBp65)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和p53蛋白在直肠癌中的表达及在直肠癌淋巴结转移中的意义.方法:采用免疫组化SP法,对50例原发直肠癌组织中的NF-κBp65、VEGF-A和p53蛋白表达进行检测,结合有无淋巴结转移等临床病理资料进行统计学分析.结果:NF-κBp65、VEGF-A和p53在直肠癌中高表达(分别为66%、54%、58%),三者相互间具相关性(P<0.05);NF-κBp65、VEGF-A和p53阳性表达与直肠癌的淋巴结转移具显著相关性(P<0.05).结论:高度表达NF-κBp65、VEGF-A和p53的直肠癌更易发生淋巴结转移,它们可作为直肠癌浸润、转移的分子学指标.

    作者:孙加升;潘运龙;覃莉;邱思远 刊期: 2009年第10期

  • 应用生物羊膜治疗难治性青光眼的临床观察

    难治性青光眼是药物难以控制眼压而手术效果不良的青光眼,其手术成功率仅为11%~50%[1-2],表现为视力低下,伴有眼疼、眼胀、头疼、恶心等症状,严重影响患者的生活质量.我科于2007年1月至2008年6月对23例难治性青光眼采用小梁切除加生物羊膜移植术,现报告如下.

    作者:陈晶 刊期: 2009年第10期

  • 医源性肝功能异常的常见原因及其防治

    目的:探讨医源性肝功能异常的常见原因及其防治措施.方法:分析临床所见15例医源性肝功能异常患者的临床资料.结果:医源性肝功能异常在临床各科室均常见,常由直接或间接的肝细胞损伤、胆汁淤积以及肝脏循环功能障碍所致,以转氨酶升高及黄疸为主要表现.多因未足够重视相关治疗可能出现的肝脏毒副作用,以至未采取合理的预防措施而导致肝功能异常.结论:避免应用有肝毒性的药物及相关治疗常能有效地预防医源性肝功能异常.对于已发生的医源性肝功能异常,应及时停用有肝毒性的药物及相关治疗,并积极护肝和利胆以及改善肝脏循环,多预后好.有急性肝功能衰竭时,应以人工肝支持治疗,必要时行肝移植.

    作者:李明松;陈村龙;崔生达;刘恩德;姜泊 刊期: 2009年第10期

  • 氟比洛芬酯用于膝关节镜手术超前镇痛的临床效果

    目的:观察氟比洛芬酯对膝关节镜手术超前镇痛的临床效果.方法:60例行膝关节镜手术患者,随机分为氟比洛芬酯超前镇痛组(P组,n=20)、氟比洛芬酯常规镇痛组(R组,n=20)和对照组(C组,n=20).P组于手术切皮前15 min静脉注射氟比洛芬酯100 mg,R组、C组分别于手术结束前15 min静脉注射氟比洛芬酯100mg、生理盐水10 mL,于术后2、4、8、12、24 h随访并记录VAS评分、镇痛满意率、24 h需追加镇痛药时间及例数,观察氟比洛芬酯相关不良反应发生情况.结果:P组术后2、4、8、12 h的VAS评分明显低于同时点C组评分(P<0.05),R组术后2、4、8 h的VAS评分明显低于同时点C组(P<0.05).P组和R组镇痛满意率显著高于C组(P<0.01).P组和R组追加镇痛药时间明显长于C组(P<0.01),且P组和R组追加镇痛药例数明显少于C组(P<0.01).3组间不良反应的发生率差异无显著性.结论:氟比洛芬酯超前镇痛能有效减轻膝关节镜患者术后疼痛,且不会增加术后相关并发症.

    作者:罗宏;李军;黄志莲;何伟;连庆泉 刊期: 2009年第10期

  • 超声靶向分子显像在器官移植术后并发症监测中的研究进展

    超声靶向微泡的分子显像是通过超声微泡表面携带的抗体或配体与细胞表面的靶分子特异性的结合,利用超声检测靶向微泡在组织和器官中的分布,在体外观察活体内部的分子水平的生物学变化的影像新技术,是目前超声造影发展的新领域,主要应用在肿瘤、缺血、炎症、血栓、动脉粥样硬化、器官移植术后并发症的监测等方面[1].本文重点就超声靶向微泡在器官移植中应用的现状及发展前景做一探讨.

    作者:李发友;吴凤林;龚渭冰 刊期: 2009年第10期

  • 老年人踝臂指数与颈动脉内膜-中层厚度的关系

    目的:探讨老年人颈动脉内膜-中层厚度(carotid intima-media thickness,IMT)与静息踝臂指数以及运动后踝臂指数的关系.方法:89例老年人根据IMT不同分为IMT增加组(≥0.8 mm)和IMT正常组(<0.8 mm),收集患者年龄、性别、职业等一般情况,并测量所有病例静息与运动后踝臂指数.结果:IMT增加组老年人与IMT正常组老年人比较,静息踝臂指数与运动踝臂指数均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).老年人IMT与静息踝臂指数与运动踝臂指数均呈负相关性(r=0.783,-0.820,P<0.05).结论:运动后踝臂指数可以较好地反映IMT情况,对无症状动脉粥样硬化患者的筛查具有一定意义.

    作者:凌龙;周思朗;谢潮鑫 刊期: 2009年第10期

  • 沉默转化生长因子β1基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响

    目的:探讨以小分子干扰RNA技术沉默肺转化生长因子β1(TGF-β1)基因对新生小鼠晚期肺泡发育的影响.方法:75只新生KM小鼠,随机分为干扰组、空白对照组和阴性对照组各25只,构建TGF-β1 shRNA慢病毒载体,经鼻内吸入法导入干扰组生后3 d新生小鼠肺内,同时设计一无关序列构建阴性表达慢病毒载体同法导入阴性对照组小鼠肺内,空白对照组不予干预.各组别按小鼠生后4、7、14、21、28 d分别取肺组织观察其组织形态学变化,以RT-PCR和Western blot法检测肺组织中TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平.结果:与两对照组相比,干 扰组肺TGF-β1 mRNA在小鼠生后4、7、14、21、28 d明显降低,生后7、14、21、28 d,干扰组肺TGF-β1蛋白水平也明显降低,同时肺泡平均截距明显增大,放射状肺泡计数减少,差异均有统计学意义.阴性对照组和空白对照组各时间点各项指标无统计学差异.结论:沉默TGF-β1基因可阻滞新生小鼠晚期肺泡发育.

    作者:段江;杨志军;黄铃沂;李然;封志纯 刊期: 2009年第10期

  • 他克莫司对特发性膜性肾病的治疗观察

    目的:研究他克莫司(FK 506)治疗表现为肾病综合征(NS)的特发性膜性肾病的疗效和安全性.方法:17例原发性肾病综合征患者经肾活检确诊膜性肾病,单用激素治疗无效或复发.随机分两组分别予FK 506联用糖皮质激素治疗(治疗组),或环磷酰胺(CTX)联用糖皮质激素治疗(对照组),疗程至少6个月,观察各组的疗效及安全性.结果:治疗组24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白、血胆固醇和甘油三酯等指标较对照组均有明显改善,不良反应可以耐受.对照组1例因白细胞减少停止CTX治疗.结论:与CTX相比,FK 506联合激素治疗特发性膜性肾病,短期疗效肯定,不良反应可以耐受.

    作者:陈伟珍;陈德君;徐光标 刊期: 2009年第10期

  • 不同手术方式治疗精索静脉曲张的临床疗效分析

    目的:探讨精索静脉曲张不同手术方式的临床效果.方法:回顾分析319例精索静脉曲张患者的临床资料,其中经腹股沟管精索静脉结扎32例(腹股沟组)、腹膜后小切口精索静脉结扎204例(腹膜后组)、腹腔镜精索静脉结58例(腹腔镜组)及经皮穿刺精索静脉栓塞25例(静脉栓塞组).结果:腹股沟组复发率达28.1%,显著高于其他3组(P<0.05),其他3组间复发率差异无统计学意义(P>0.05).腹股沟组手术并发症发生率为25.0%,显著高于其他3组(P<0.05),包括睾丸萎缩、急慢性附睾炎、慢性精索疼痛等.腹腔镜组并发症为肠梗阻、腹膜炎和急、慢性附睾炎等.静脉栓塞组包括穿刺点出血、栓子脱落等,3组间并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05).4组之间以腹股沟组成功率低,显著低于其他3组(P<0.05),而腹膜后组、腹腔镜组和静脉栓塞组之间无明显差异(P>0.05).腹股沟组和腹膜后组平均住院时间要长于腹腔镜组和静脉栓塞组,腹股沟组住院费用少于腹腔镜组和静脉栓塞组(P<0.05).结论:腹股沟组复发率高,腹膜后小切口是精索静脉曲张的首选手术方式,腹腔镜组较适合双侧及复发者,静脉栓塞组易出现严重的并发症.

    作者:何顺东;潘毓明 刊期: 2009年第10期

  • 脊髓拴系综合征伴隐性脊柱1例

    患者女,13岁,主因骶尾部多毛6年,右下肢无力进行性加重2年于2007年12月22日入院.腰椎平片显示:腰骶部椎板缺如,腰椎左侧弯;腰椎MRI显示:终丝增粗,在L4,5处和背侧硬脊膜粘连.人院诊断:脊髓拴系综合征(TCS)伴隐性脊柱裂.于2007年12月26日全麻下行脊髓拴系终丝切断+粘连松解术.

    作者:陈琳;黄红云;张健;解自行 刊期: 2009年第10期

  • 融合基因Tat-HPV16L1的克隆及在大肠杆菌中的表达

    目的:构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽基因Tat的融合表达载体,以大肠杆菌作为表达系统,探索制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗的新方法.方法:以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与原核表达载体pET28a连接,重组质粒再与自行设计蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入大肠杆菌表达菌株DE3进行诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果:融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳分析,结果诱导表达成功.结论:本研究为制备经济而高效的人乳头瘤病毒疫苗打下了基础.

    作者:张进芳;马文丽;危敏;赵慧;朱秀兰;郑文岭 刊期: 2009年第10期

  • 黄芩素对2型糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响及其作用机制

    目的:探讨黄芩素(baicalein,BAI)对2型糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响及机制.方法:对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的2型糖尿病大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组[黄芩素(80 mg/(kg·d)]和高剂量组[黄芩素(160mg/(ks·d)],治疗12周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖(BG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、内生肌酐清除率(Ccr)等变化;测定肾组织中丙二醛(MDA)的含量及谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性.应用RT-PCR方法检测P22phox mRNA及P47phoxmRNA的表达.结果:两治疗组较模型组尿白蛋白、尿素氮水平和肾脏肥大指数明显改善.与对照组比较,模型组大鼠的MDA含量显著增加(P<0.01),SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低(P<0.01);两治疗组糖尿病大鼠肾组织中MDA含量明显降低,SOD、CAT、GSH-Px活性显著增强.P22phox mRNA及P47phox mRNA的相对含量在模型组分别为(0.370±0.028)、(1.005±0.116)明显高于对照组(0.098±0.029)、(0.340±0.055),(P<0.01);低剂量组较模型组显著降低,分别为(0.275±0.029)、(0.740±0.088)(P<0.01).高剂量组降低更明显,分别为(0.193±0.013)、(0.660±0.083)(P<0.01).两治疗组之间各指标无明显差异.结论:BAI对2型糖尿病大鼠肾组织具有明显的保护作用,其机制可能是通过下调P22phox mRNA及P47phox mRNA的表达,提高肾组织中SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA含量,从而减轻自由基对糖尿病大鼠肾组织的氧化损伤,延缓糖尿病及其并发症的发生发展.

    作者:吴泽成;刘慎微;尹超 刊期: 2009年第10期

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主办:广东省医学情报研究所