学术投稿

SD大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性鉴定

闫磊;李思源;慕晓玲

关键词:干细胞, 细胞培养, 生物学特性
摘要:目的:探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells.rBMSCs)体外分离培养方法,鉴定其生物学特性,为BMSCs应用奠定技术基础.方法:无菌条件下分离SD大鼠股、胫骨,用无血清培养液(α-MEM培养基、100 U/mL青霉素,100 U/mL链霉素)冲出骨髓,采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离纯化rBMSCs,通过传代培养,扩增rBMSCs.倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,绘制细胞生长曲线.免疫细胞化学染色测定rBMSCs表面标志,成骨诱导试剂盒检测rBMSCs向成骨分化的潜能.结果:镜下rBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长.生长曲线分析rBMSCs贴壁2d基本无增殖,处于潜伏期,时数增殖期为3~6 d.第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象.rBMSCs表面标志显示第3代rBMSCs纯度可达99%以上.其细胞表型CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.向成骨诱导rBMSCs 10 d后细胞表现成骨细胞特性,碱性磷酸酶活性明显增高.结论:本实验从细胞取材、细胞接种密度、条件培养基到细胞微环境等各方面的方法进行了优化,建立了一种理想的体外分离扩增rBMSCs的培养体系.实验结果表明所分离培养的rBMSCs纯度高、扩增迅速、生物学形状稳定,可为组织工程提供比较理想的种子细胞,为进一步研究BMSCs生物学行为及临床研究和应用奠定了坚实的基础.
实用医学杂志相关文献
  • 戒指损伤并卡压手指急诊处理1例

    患者男,20岁.因翻墙时挂住戒指后划伤并卡压左手环指2h余人科.伤后患指出现肿胀,伤口有渗血,疼痛明显,因戒指卡压在指根部,而伤口在卡压部远端.

    作者:徐敏;尚辉;李闽云 刊期: 2008年第17期

  • 异丙酚静脉麻醉下行人工流产手术2747例护理体会

    随着医药科学的迅猛发展,一种新型的短效静脉麻醉药棗异丙酚被广泛应用于人工流产手术中.该药具有静脉注射后起效快、诱导平稳、持续时间短、苏醒快等特点[1].我院妇产科门诊2004年1月至2006年12月在异丙酚静脉麻醉下行人工流产手术2747例,麻醉效果满意.现将护理体会总结如下.

    作者:刘玉玲 刊期: 2008年第17期

  • 急诊重度骨盆骨折合并失血性休克介入术的护理对策

    目的:探讨重度骨盆骨折合并失血性休克行介入性血管栓塞治疗的护理对策.方法:对5例急诊重度骨盆骨折合并失血性休克的患者进行抢救配合,介入术前宣教、准备及术后的观察和护理加以探讨.结果:5例患者全部抢救成功.结论:紧急快速的抢救和术前准备,有利于手术的顺利进行,有效的术后观察及护理,能降低患者的病死率.

    作者:王彩芽;李萍;王红娟 刊期: 2008年第17期

  • 高血压冠心病致伪装性束支传导阻滞1例

    患者男,78岁.因反复胸闷、心悸10余年,加重1周人院.临床诊断:冠状动脉粥样硬化性心脏病,原发性高血压3级(高危),心房颤动,心功能Ⅱ级.查体:T 36.8℃.BP 142/80 mmHg.HR 89次/min.

    作者:谢年烽;田路;史嫣慧 刊期: 2008年第17期

  • 川崎病患儿血小板参数的变化与冠状动脉病变的关系

    目的:探讨川崎病患儿血小板参数的变化与冠状动脉病变的关系.方法:用全自动血细胞分析仪测定46例川崎病患儿(川崎病组,包括有冠状动脉病变者18例)血小板参数,动态了解其变化,同时以同期门诊体检健康儿童46例(对照组)进行对照.结果:川崎病组惠儿血小板四项参数急性期、恢复期均显著高于对照组(P<0.01),而恢复期血小板计数(PLT)、血小板平均体积、血小板压积均显著高于急性期(P<0.01),但急性期血小板分布宽度显著高于恢复期(P<0.01).川崎病并冠状动脉病变者急性期除外PLT外,其余三项参数较无冠状动脉病变者均显著增高(P<0.01).结论:血小板参数的变化对川崎病以及川崎病并冠状动脉病变的诊断、治疗及评价预后均具有相当高的参考价值.

    作者:吴敏;陈捷 刊期: 2008年第17期

  • 甜菜碱提高长距离PCR扩增效率的研究

    目的:利用甜菜碱优化长距离PCR(LD-PCR),提高血友病A(HA)基因倒位检测效率.方法:在LDPCR反应体系中加入DMSO、甘油及不同浓度的甜菜碱进行LD-PCR扩增,比较扩增结果.用甜菜碱优化LD-PCR检测正常人、不同程度HA患者及携带者的FⅧ基因是否存在FVE基因22号内含子(IVS22)倒位.结果:在反应体系中加入甜菜碱可获得更好的LD-PCR扩增结果:甜菜碱优化LD-PCR的佳终浓度为0.8~1.8 mol/L;应用甜菜碱优化LD-PCR检出3例HA患者、2例携带者和1例可疑携带者FⅧ基因有IVS22倒位.结论:一定浓度的甜菜碱可以显著提高LD-PCR的扩增效率,提高检测出HA患者的FⅧ基因IVS22倒位的效率.

    作者:吴斌;杨威;李强;徐秀月;刘卓刚 刊期: 2008年第17期

  • 面颈部深度烧伤早期切痂术麻醉复苏期的观察与护理

    目的:探讨面颈部深度烧伤早期切痂术麻醉复苏期的护理.方法:对21例面颈部深度烧伤患者,平均在烧伤后3~5 d予以行切痂术.对该21例病例进行密切观察与护理.结果:21例均顺利度过麻醉复苏期,无意外情况发生.结论:麻醉复苏期严密的观察和护理是烧伤患者顺利度过麻醉复苏期的重要因素.

    作者:鲍曼曼;林才 刊期: 2008年第17期

  • 连续性肾脏替代治疗肌病肾病代谢综合征

    目的:探讨急性动脉闭塞术后并发肌病肾病代谢综合征(myonephropathic-metabolic syndrome,MNMs)应用连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)的效果及体会.方法:用百特公司Accura CRRT机,碳酸氢盐置换液,16例MNMS患者接受CRRT治疗,置换液3~4 L/h,平均治疗时间为98.8 h.结果:14例患者存活肾功能恢复正常,死亡1例,1例放弃治疗;CRRT治疗24 h后16例患者血尿素氮、血肌酐、血肌红蛋白明显下降,血碳酸氢根明显升高,和治疗前对比差异有统计学意义(P<0.05).结论:CRRT能有效清除血肌红蛋白恢复肾功能,迅速纠正高钾血症和代谢性酸中毒有助于改善MNMS的预后.

    作者:沈波;李艳;张薇 刊期: 2008年第17期

  • 布托啡诺与吗啡用于患者自控硬膜外术后镇痛的比较

    目的:比较布托啡诺与吗啡在硬膜外术后镇痛的效果及不良反应.方法:选取80例择期硬膜外麻醉下行下肢手术患者,分成2组,分别予布托啡诺复合布比卡因(B组)和吗啡复合布比卡因(M组)硬膜外术后镇痛,记录术后4、8、24 h视觉模拟评分(vAS评分)、呕吐、尿潴留及瘙痒发生率以及满意率.结果:2组患者术后的镇痛效果均满意,VAS评分<3分.呕吐发生率B组为7.5%.M组为22.5%,B组发生率较M组低.尿潴留发生率B组为7.5%,M组为55.0%,B组要低于M组.满意率B组为90.0%,M组为72.5%,B组的满意率要高.结论:布托啡诺复合布比卡因较吗啡复合布比卡因更适合于作为硬膜外术后镇痛配方.

    作者:刘镭;徐军美;杨昭云 刊期: 2008年第17期

  • 2型糖尿病及代谢综合征患者血清超敏C反应蛋白水平与胰岛素抵抗的关系

    目的:探讨2型糖尿病(T2DM)及代谢综合征(MS)患者超敏c反应蛋白(hs-CRP)与机体胰岛素敏感度、胰岛素分泌功能的关系.方法:选择2004年1月至2007年8月清远市人民医院内分泌科病房及门诊T2DM患者280例,其中合并MS 156例(T2DM并MS组),未合并MS 124例(T2DM非MS组),中老年健康体检者(对照组)40例.比较其血清hs-CRP、血脂、糖化血红蛋白、空腹血糖、空腹胰岛素等水平并进行各指标之间的相关分析,并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素分泌指教,以反映胰岛素敏感度和胰岛细胞功能.结果:T2DM并MS组患者血清hs-CRP水平和HOMA-IR明显高于T2DM非Ms组及对照组(P<0.01).线性相关分析显示,T2DM患者hs-CRP水平与体重指数、收缩压、舒张压、低密度脂蛋白胆固醇、HOMA.IR均呈正相关(P<0.05或P<0.01).结论:hs-CRP水平与T2DM胰岛素抵抗及MS密切相关,对于T2DM及MS除控制血糖、血脂、体重指数外.降低炎症反应应成为综合治疗的重要部分.

    作者:杨彩娴;钟国权;李绍清;黄启亚 刊期: 2008年第17期

  • 靶控输注丙泊酚与吸人异氟醚用于胸腔镜手术麻醉的比较

    目的:比较靶控输注(target-controllde infusion,TCI)丙泊酚全凭静脉麻醉和异氟醚吸入麻醉两种不同方式在胸腔镜手术中的麻醉效果.方法:将30例择期行胸腔镜手术的患者分为两组,TCI组(T组,n=15)设定诱导时靶浓度为4靏/mL,术中维持丙泊酚靶浓度为3~3.5靏/mL,异氟醚组(Ⅰ组,n=15)采用3%异氟醚吸入诱导,1%~2.5%维持.术中监测心率、收缩压、舒张压、平均动脉压,并观察诱导时间、拔管时间、苏醒质量等.结果:T组诱导时间显著短于Ⅰ组(P<0.05),术中T组血流动力学维持相对平稳,术后苏醒T组明显优于Ⅰ组.结论:TCI全凭静脉麻醉方法用于胸腔镜手术,术中血流动力学稳定,术后患者苏醒迅速,优于异氟醚吸入麻醉方法.

    作者:丘伟沛;王昊;梁根强 刊期: 2008年第17期

  • 老年糖代谢异常患者颈动脉硬化与C反应蛋白的关系

    目的:了解老年糖代谢异常患者颈总动脉内中膜厚度(IMT)与C反应蛋白(CRP)水平的关系.方法:158例年龄为68~93岁老年非糖尿病患者.每例均行标准75 g口服糖耐量试验.同时测定血脂、血清CRP水平、空腹胰岛素等生化指标.超声测定颈总动脉内IMT并了解斑块情况.结果:患者中糖耐量正常者(NGT组)48例,糖耐量异常者(IGT组)71例.2型糖尿病(DM组)39例,3组体重指数、血压、血脂等均无明显差异.3组颈总动脉IMT均值分别为0.72、0.78、0.83 mm,DM组及IGT组较NGT组显著升高(P<0.01),DM组与IGT组间差异无显著性,DM组斑块发生率(62%)明显高于其他两组(P<0.01).3组CRP水平分别为(1.05±0.64)、(1.77±0.82)、(2.03±0.63)mg/dL,并呈上升趋势,两两比较DM组及IGT组较NGT组差异有显著统计学意义(P<0.01),而DM组与IGT组间无明显差异.结论:老年糖耐量异常人群颈总动脉IMT明显增厚,CRP水平明显升高,提示慢性亚,临床炎症在2型糖尿病的发生发展过程中起到一定作用.

    作者:刘芳;潘志红;潘永瑜;李东霞 刊期: 2008年第17期

  • 尿环氧化酶-2蛋白诊断膀胱移行细胞癌的价值

    目的:分析比较尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白检测与尿脱落细胞学检查诊断膀胱移行细胞癌的临床价值.方法:选择35例膀胱移行细胞癌和30例作为对照组的前列腺增生症患者,分别行尿Cox-2蛋白和尿脱落细胞学检查,比较2种方法的敏感性、特异性和阳性预测值.结果:尿Cox-2蛋白和尿脱落细胞学的敏感性分别为82.9%和25.7%,差异有显著性(P<0.01),特异性分别为79.1%和100.0%,阳性预测值分别为60.4%和100.0%.结论:尿Cox-2蛋白检测是一种简单、敏感性高、无创的早期诊断膀胱移行细胞癌的方法,适合于膀胱移行细胞癌的诊断与随访.

    作者:卓文利;靳风烁;李黔生;谭建明 刊期: 2008年第17期

  • 外翻缝合进针操作完成消化道前壁内翻缝合39例

    目的:介绍外翻缝合进针操作完成消化道前壁内翻缝合的临床经验.方法:对39例消化道重建手术采用消化道前壁分层切开,开放式、传统方法完成消化道后壁双层内翻缝合及转角处内层内翻缝合,外翻缝合进针操作完成消化道前壁内层内翻缝合,再用传统方法完成转角处及前壁外层缝合,并包埋内层吻合口.结果:术中置入饲食管者,于24 h后经饲食管注入10%氯化钾溶液60 mL/d,48~72 d后经饲食管注入流质饮食.食管胃吻合术后10 d,经口进流质饮食.毕Ⅰ式、毕Ⅱ式、回肠端端吻合,术后3~4 d经口进流质饮食.结肠端端吻合、结直肠吻合,术后5~6 d经口进流质饮食.本组均未出现吻合口出血、吻合口瘘、吻合口狭窄.结论:外翻缝合进针操作完成消化道前壁内翻缝合操作简便,可减少消化道重建手术吻合口并发症.安全、有效.

    作者:安远 刊期: 2008年第17期

  • 酚妥拉明和多巴胺联合佐治小儿重症肺炎并心力衰竭

    目的:观察酚妥拉明和多巴胺联合佐治小儿重症肺炎并心力衰竭(心衰)的疗效.方法:选择2004年1月至2007年12月收治的42例重症肺炎并心衰患儿为观察组,在综合治疗基础上给予酚妥拉明0.2~0.3mg/(kg·次),2~4次/d,多巴胺0.5 mg/(kg·次),以5~10 靏/(kg穖in)的速度静滴,2~4次/d,疗程2~3 d.2000年1月至2003年12月收治的39例重症肺炎并心衰患儿为对照组.结果:42例患儿总有效40例(95.2%),显著高于对照组的69.2%(P<0.01).结论:酚妥拉明和多巴胺联合佐治重症肺炎并心衰疗效肯定.

    作者:张大荣 刊期: 2008年第17期

  • 肺曲菌病19例护理体会

    目的:探讨肺曲菌病的护理.方法:对19例肺曲菌病患者的护理进行回顾性分析.结果:19例肺曲茵病患者经系统治疗配合严密的护理后.除1例因合并Ⅱ型呼吸衰竭死亡外,其余均痊愈出院.结论:肺曲茵病的护理要点是加强病情观察、保持呼吸道通畅、防止大咯血、做好用药护理、重视心理护理.

    作者:覃丽 刊期: 2008年第17期

  • 计算机摄影钼靶检查在乳腺癌普查中的应用

    目的:探讨计算机摄影(CR)钼靶检查在大规模乳腺疾病普查中的应用价值,提高早期乳腺癌的诊断水平.方法:应用钼铑双靶乳腺机和带有计算机辅助诊断(CAD)软件的CR系统.对8270例普查对象进行乳腺摄影检查,回顾性分析检查结果.其中有手术或病理活检结果的414例.结果:手术或病理活检证实的414例中,乳腺癌59例,其中临床触诊阴性的早期乳腺癌19例.早期乳腺癌主要X线表现为单纯簇状细微钙化、小结节、局部结构不良和小斑片状致密影.结论:乳腺CR钼靶摄影结合CAD是较为可靠的影像学方法,对早期乳腺癌的诊断有价值,可以应用于大规模乳腺疾病普查中.

    作者:汪建华;金永源;张剑;叶伙华 刊期: 2008年第17期

  • 阿托伐他汀对充血性心力衰竭的治疗作用及对TNF-α、IL-10水平的影响

    目的:研究不同荆量阿托伐他汀时充血性心力衰竭(CHF)的治疗作用以及对肿瘤坏死因子-?TNF?和白细胞介素-10(IL-10)水平的影响.方法:60例CHF患者分为3组,对照组(n=18)常规予强心、利尿和血管扩张剂治疗,小剂量阿托伐他汀组(n=20)在前者基础上加用阿托伐他汀片(10 mg/d),大剂量阿托伐他汀组(n=22)则在基础治疗上加用阿托伐他汀片(40mg/d),各治疗8周.观察治疗前后心功能NYHA分级、心脏超声指标、血清TNF-岷虸L-10水平的变化.结果:经8周治疗后,3组的临床症状及心功能均有所改善,阿托伐他汀组的心脏超声指标改善与对照组相比差异有显著性(P<0.01).大剂量阿托伐他汀组的疗效更为显著;无论小剂量还是大剂量阿托伐他汀组的血清TNF-崴骄隙哉兆槊飨越档?而IL-10水平则明显升高(P<0.01).结论:在常规治疗的基础上加用阿托伐他汀可以更好地改善CHF患者的心功能,大剂量者疗效更为显著.阿托伐他汀能明显降低血清TNF-崴?升高IL-10水平.这可能是阿托伐他汀治疗CHF的机制之一.

    作者:梁道业;马春林;王政林;钟勇 刊期: 2008年第17期

  • 大脑中动脉动脉瘤手术探讨

    目的:探讨大脑中动脉(MCA)动脉瘤显微外科手术的经验.方法:回顾性分析31例外科手术治疗MCA动脉瘤的临床资料.结果:所有病例均经翼点入路手术.施行动脉瘤颈夹闭者28例,夹闭加包裹者3例.术后1~6个月行DSA造影复查无动脉瘤复发.GOS预后评分优良28例,中残3例,无重残及死亡病例.结论:显微外科手术明显提高MCA动脉瘤的治疗效果.

    作者:隋强波;丁璇;王成伟;王志刚 刊期: 2008年第17期

  • Caspase-9在结直肠正常黏膜和癌中的表达

    目的:定量测定Caspase-9基因在人类结直肠癌及癌旁正常组织中的表达.从而探讨其在结直肠癌发病中的作用.方法:采用实时荧光定量PCR技术测定88例配对的结直肠癌组织及癌旁正常组织中Capase-9mRNA的表达,并分析表达的变化与临床病理特征的关系.结果:Caspase-9在结直肠癌中相对于癌旁正常组织表达下调(P=0.003).结直肠癌组织分化程度与Caspase-9表达下调相关(P=0.048),与Dukes分期、年龄、性别及是否淋巴结转移无关.结论:Caspase-9在结直肠癌的发病中可能发挥了重要作用.并参与了肿瘤组织的分化.

    作者:沈小钢;周总光;王存;王铃;周兵 刊期: 2008年第17期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所