学术投稿

免疫磁珠法在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用

莫雪安;周礼圆;秦超;张德敏;赵伟金

关键词:免疫磁珠法, T淋巴细胞亚群, 分离纯化
摘要:目的:探讨免疫磁珠法(MiniMACS)在分离纯化外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群中的应用.方法:应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononucleate cells,PBMC),采用MiniMACS分别分离和纯化39例标本外周血PBMC中的CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞,并经流式细胞仪分析细胞纯度和台盼蓝染色的方法对细胞活力进行评估.结果:MiniMACS分离外周血CD4+T淋巴细胞前、后细胞纯度分别为(37.38±5.74)%、(97.75±1.03)%(P<0.001),CD8+T淋巴细胞分离纯化前后细胞纯度分别为(20.11±6.83)%、(96.85±1.86)%(P<0.001);外周血分离前PBMC细胞活力为(97.66±2.73)%,纯化为CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞后细胞活力分别为(97.44±3.08)%、(98.05±2.92)%(P>0.05).结论:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞且不改变细胞的活力.
广西医科大学学报杂志相关文献
  • TrkB、P75NTR在颞叶癫痫大鼠海马中的表达及托吡酯干预的研究

    目的:研究托吡酯(TPM)干预红藻氨酸(KA)致大鼠颞叶癫痫(TLE)后海马组织学变化特征及脑源性神经营养因子(BDNF)受体TrkB、P75NTR蛋白在大鼠海马内的表达,探讨TrkB及P75NTR在TLE中的作用及TPM的抗痫机制.方法:KA诱导建立TLE模型,观察大鼠行为学改变;于1 d,1,2,3,4周时间点,用免疫组化法观察各组大鼠TrkB、P75NTR蛋白在海马内表达的改变,Nissl染色观察海马神经元丢失的变化.结果:(1)TPM干预后KA致痫大鼠发作减少.(2)KA致痫后海马神经元丢失以门区和CA1区为主,4周达高峰;TPM干预后海马神经元损伤明显减少.(3)致痫后,TrkB的表达于1 d至4周在齿状回门区、CA3区明显增高(P<0.01),持续4周,在CA1区仅1 d时增高(P<0.01);P75NTR的表达在PoDG、CA1区、CA3区明显增高(P<0.01),并在PoDG和CA3区持续至2周(P<0.05);TPM干预后TrkB、P75NTR于上述各区在时间和空间上的表达均明显减少.结论:致痫后,海马内TrkB和P75NTR的持续较长时间表达增高通过其受体起作用,可能有助于癫痫异常兴奋性网络的形成.TPM干预对海马神经元损伤有明显的保护作用,其机制可能为通过下调海马内TrkB和P75NTR的表达,减少海马神经元损伤从而对癫痫发展起潜在的神经保护作用.

    作者:余璐;梁秀琳;郑金瓯 刊期: 2012年第05期

  • 电视胸腔镜诊治恶性胸腔积液46例

    目的:探讨电视胸腔镜在恶性胸腔积液诊治中的应用.方法:分析2007年10月至2010年5月46例恶性胸腔积液患者经电视胸腔镜诊治的临床资料.结果:所有病例术后均得到明确的病理结果,其中非小细胞肺癌36例,恶性间皮瘤3例,小细胞肺癌3例,直肠癌2例,乳腺癌及卵巢癌各1例.术毕复张性肺水肿1例,术后漏气时间延长2例,肺不张1例,均治愈,胸膜固定术后有效率达95.7%(44/46),复发6例.结论:电视胸腔镜在恶性胸腔积液诊治中具有微创、安全、诊断准确的特点,是有效诊治恶性胸腔积液的方法.

    作者:李刚;肖凌;谭光忠 刊期: 2012年第05期

  • 正常人T淋巴细胞亚群端粒酶活性的观察

    目的:探讨正常人外周血T淋巴细胞亚群端粒酶活性表达情况.方法:采用端粒重复序列扩增-聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(TRAP-PCR-ELISA)方法半定量检测CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的端粒酶活性.结果:CD4+T淋巴细胞端粒酶阳性率43.8%(7/16),CD8+T淋巴细胞端粒酶阳性率37.5%(6/16).结论:正常人外周血CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞可表达端粒酶活性.

    作者:周礼圆;莫雪安;秦超;张德敏;赵伟金 刊期: 2012年第05期

  • 食管癌术后早期肠内营养对患者免疫功能的影响

    目的:观察早期肠内营养(EN)对食管癌手术后患者免疫功能及并发症的影响.方法:90例食管癌患者术后随机分为EN和肠外营养(PN)组,每组45例.行术前1天、术后第7天IgA 、IgG、IgM、CD3、CD4免疫学指标及并发症等比较.结果:EN组的IgA 、IgG、IgM、CD3、CD4 比PN组稳定,并发症少(P<0.05).结论:EN较PN更能改善食管癌术后患者的营养状况,提高免疫力,减少术后并发症发生,是一种既经济又实惠、简单、安全有效的营养支持方法.

    作者:王庆淮 刊期: 2012年第05期

  • 毒鼠强中毒患者的心肌酶谱变化

    目的:探讨毒鼠强中毒患者的心肌酶谱变化.方法:对13例患者分别在中毒后1~10 d每日抽血检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH),取血2次者取同一天的平均值.结果:中毒当日心肌酶谱全部升高,CK、CK-MB第3~4天达到高峰,AST、LDH 第4~6天达到高峰,然后开始下降.结论:毒鼠强中毒患者的心肌酶明显升高,第3~6天达到峰值,第10天可基本恢复正常.在毒鼠强中毒的第3~6天应预防心脏并发症,降低死亡率.

    作者:冯玉玺;丁怀莹;单洪莉 刊期: 2012年第05期

  • PICU婴幼儿先天性心脏病侵袭性肺部真菌感染临床特点

    目的:分析儿科重症监护病房(PICU)婴幼儿先天性心脏病(先心病)(CHD)侵袭性肺部真菌感染(IPFIs)的临床特点.方法:回顾性分析2009年1月至2011年12月广西医科大学第一附属医院PICU拟诊或临床诊断的26例侵袭性肺部真菌感染先心病婴幼儿临床资料.结果:PICU婴幼儿先心病侵袭性肺部真菌感染症状多为发热13例(50%)或咳嗽12例(46.2%),11例气道分泌物或气管插管管尖标本真菌培养出真菌22株:其中白色念珠菌14株(63.6%),热带念珠菌5株(22.7%),光滑念珠菌3株(13.7%).5例患儿(1-3)-β-D-葡聚糖抗原(G试验)检测阳性.23例首选氟康唑,3例首选伏立康唑,总有效率88.5%.结论:白色念珠菌在PICU婴幼儿先心病肺部真菌感染中是主要致病菌.其肺部真菌感染的临床表现无特异性,要提高对该病的认识、动态观察临床表现及肺部影像学改变,积极开展包括血清学检测在内的病原学检测.

    作者:曹凤娥;韦丹 刊期: 2012年第05期

  • 蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞活力、增殖和迁移的影响

    目的:探讨蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞活力、增殖和迁移的影响.方法:用不同浓度的Agkihpin处理肝癌细胞株后,应用MTT法检测细胞活力,应用细胞计数法检测Agkihpin对细胞增殖和迁移的影响.结果:0.207~4.130 mg/L浓度的Agkihpin作用SMMC-7721细胞后,与对照组比较,各加药组细胞活力明显下降(P<0.01),细胞活力随Agkihpin浓度增加而减弱(r=-0.81,P<0.05),细胞活力抑制率可达12.2%~46.2%;2.065~4.130 mg/L剂量的Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),加药24,48 h和72 h后增殖抑制率分别为29.4%~88.2%、64.1%~84.6%和4.4%~30.5%,且剂量依赖作用明显(P<0.05);3.089 mg/L和4.130 mg/L剂量的Agkihpin对SMMC-7721细胞还有一定的杀伤作用,杀伤率分别为20.0%和79.6%;0.207~4.13 mg/L剂量的Agkihpin对人肝癌SMMC-7721细胞的迁移有明显的抑制作用(P<0.01),细胞迁移抑制率可达7.8%~98.0%,且剂量越大抑制作用越明显(r=0.841,P<0.05).结论:一定剂量的Agkihpin可抑制人肝癌SMMC-7721细胞株的细胞活力、增殖和迁移.

    作者:胡启平;黄程新;马军;方玲;袁志刚;韦力嘉 刊期: 2012年第05期

  • 高龄胃癌患者的临床特点及围手术期处理

    胃癌是常见的消化道肿瘤,在我国恶性肿瘤中位居第一位[1].胃癌好发于中老年人,发病原因与各种因素有关,给老年患者的生活带来严重影响.手术治疗可有效提高高龄胃癌病人的生存质量,延长寿命,但手术难度大,术后并发症较多.故加强高龄胃癌患者的围手术期处理对提高手术安全性、降低术后并发症等方面有重要的临床意义.本文对我院普外科2007年1月至2011年10月经手术治疗、有完整临床资料的66例高龄(≥70岁)胃癌患者进行回顾性分析,旨在探讨高龄胃癌患者的临床特点及围手术期处理.

    作者:何文真 刊期: 2012年第05期

  • 俯卧位式分离垫在脊柱骨科手术中的应用

    目的:探讨俯卧位式分离垫在脊骨骨科手术中的应用和优势.方法:选择200例行拟在俯卧位下行脊柱手术的患者,随机分为两组,实验组采用俯卧位分离垫,对照组采用俯卧位支撑架,并记录术后当天及术后第一天受压部位疼痛程度和受压皮肤出现不良反应的情况.结果:实验组的术后当天和术后第一天的VAS评分均较对照组低(均P<0.05),实验组术后当天的皮肤不良反应出现也较对照组低(P<0.05).结论:脊骨骨科手术中应用采用俯卧位式分离垫能减轻术后患者的疼痛,并减少皮肤不良反应的发生.

    作者:欧春红;骆如香;李延;梁绍胜;凌武胆;潘艳芳 刊期: 2012年第05期

  • 海洛因依赖者中抗-HIV抗体阳性人群的心电图分析

    目的:观察静脉注射海洛因依赖者中HIV感染者心电图(ECG)的变化,并探讨海洛因依赖者中HIV感染与心电图改变的有效的因素,以便采取相关防治措施.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)对海洛因依赖者血清进行抗-HIV抗体检测,阳性血清送广西疾病预防控制中心进行确认.对39例抗-HIV抗体阴性的海洛因依赖者(吸毒组)、60例抗-HIV抗体阳性的海洛因依赖者(HIV组)和 30例健康体检人员(对照组)的心电图进行分析.结果:99例海洛因依赖者中共检出心电图异常者54例,其中吸毒组23例,占58.9%;HIV组31例,占51.7%.对照组中检出心电图异常者6例,占20.0%.吸毒组和HIV组的心电图改变率为76.9%和78.3%,分别与对照组(23.3%)比较差异均有统计学意义(均P<0.01).HIV组的ST-T改变率高于吸毒组,差异无统计学意义(P>0.05).吸毒组中20~29岁段的心电图改变率高于30~39岁段,差异有统计学意义(P<0.05).吸毒组和HIV组中吸龄≤49个月段的心电图改变率均较高,两组中男性改变率(63.3%和54.5%)均高于女性(44.4%和43.8%).18例海洛因依赖者合并多重心电图改变,20例海洛因依赖者存在多种药物滥用的情况.结论:海洛因依赖和HIV均对机体和心血管系统造成一定的损害,提示在抗HIV治疗中保护心血管系统的同时,应先予以进行戒毒后方开始为好.

    作者:梁纲;黄绍标;李飞;吴锋耀;龙敬伦;朱庆东;黄志忠 刊期: 2012年第05期

  • 趋化因子配体18基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义

    目的:探讨趋化因子配体18(CCL18)基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义.方法:采用荧光定量PCR法对经病理确诊的卵巢恶性肿瘤31例,良性卵巢肿瘤14例和正常卵巢组织14例中CCL18 mRNA表达进行测定并分析其与临床病理的关系.结果:(1)CCL18基因在恶性肿瘤组织中较良性肿瘤组织、正常卵巢组织中的阳性率升高,差异有统计学意义(P<0.05).(2)恶性肿瘤组织中CCL18基因的表达在组织学类型、手术病理分期、病理分级、残余灶等方面,差异均无统计学意义(均P>0.05).(3)CCL18基因阳性患者中位生存时间为(32.088±4.284)个月,阴性患者中位生存时间为(20.625±3.572)个月,CCL18表达阳性的患者其中位生存时间较阴性表达患者长,但两组患者的生存时间差异无统计学意义(P>0.05).(4)Cox比例风险回归模型显示残余灶是影响预后的独立因素,而CCL18 mRNA过度表达与否不是影响预后的独立因素.结论:CCL18基因的过度表达可能与卵巢癌发病相关.

    作者:张玮;杨莹珠;阳志军;潘忠勉;王琪 刊期: 2012年第05期

  • 综合重症病房真菌感染118例临床分析

    为了了解综合性重症医学科(ICU)深部真菌感染的临床特点及好发因素,能更好地指导临床预防及治疗,对2007年1月至2011年12月入住南宁市第一人民医院ICU确诊为院内获得性真菌感染的118例患者临床资料进行分析,现报道如下.

    作者:李振华;谢逢春 刊期: 2012年第05期

  • 两种不同固定方法治疗胫腓骨骨折的疗效观察

    目的:观察分析两种不同固定方法治疗胫腓骨骨折的临床效果.方法:选择本院158例胫腓骨骨折患者,随机分为外固定支架组(施行单臂外固定支架固定手术)和交锁髓内钉内固定组(施行扩髓型交锁髓内钉手术),比较两组骨折并发症发生率、畸形发生率、骨感染率、软组织感染率、骨折延迟愈合率.结果:与交锁髓内钉组相比,外固定支架组的骨感染、延迟愈合、并发症出现少;但软组织感染率、畸形发生率高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:两种方法各有利弊,临床应针对不同病情,灵活运用.

    作者:韦文军;郭家庆;梅华 刊期: 2012年第05期

  • MIPPO技术结合股骨近端锁定钢板治疗股骨转子间骨折26例

    目的:探讨经皮微创钢板接骨(MIPPO)技术结合股骨近端锁定钢板治疗股骨转子间骨折的手术方法和术后疗效.方法:回顾性分析2008年6月至2010年12月我院收治的26例股骨转子间骨折患者,均采用MIPPO技术结合股骨近端锁定钢板治疗.观察指标:手术时间、手术出血量、骨折愈合率,术后并发症发生率和髋关节功能.髋关节功能以Harris评分标准来衡量.结果:24例患者获得随访,随访时间为8~40个月,平均23个月.手术时间(76±12) min;手术出血量(249.6±132.8) mL;骨折均愈合,骨折愈合率为100%;1例术后发生下肢深静脉血栓,未见其他术后并发症,术后并发症发生率为4.2%;术后髋关节功能评分:(89±7)分,优14例,较好5例,良3例,差2例.优良率为91.66%.结论:MIPPO技术结合股骨近端锁定钢板治疗股骨转子间骨折出血量少、创伤小、骨折愈合率高、并发症少、术后髋关节功能良好,是治疗股骨转子间骨折的有效手术方法.

    作者:花奇凯;熊凯;赵劲民 刊期: 2012年第05期

  • 血浆后输入法在重症病人血浆置换中的应用

    目的:探讨血浆后输入法在重症病人治疗性血浆置换(TPE)中的应用.方法:股静脉穿刺置管进行TPE,TPE液总量为1.2倍的血浆量,由复方氯化钠500 mL和羟乙基淀粉组成.TPE结束后即刻输入新鲜冰冻血浆(FFP),FFP量为拟定TPE量的20%~25%(常规600~800 mL),然后再输入白蛋白20~30 g.监测TPE前(T0)、TPE后即刻(T1)、输入血浆和白蛋白后(T2)的心电图、血压、血气、血电解质、血常规、凝血功能、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB),并用脉搏指示剂连续心排出量法(PICCO)监测血管外肺水(EVLWI)、肺毛细血管通透性(PVPI).结果:所有患者T0、T1、T2时点的血压、心率、呼吸频率、气道压、SPO2比较,差异无统计学意义(P>0.05).与T0比较,T1时点TP、ALB 、纤维蛋白原(Fib)均降低(P<0.05),T2时点TP、ALB 、Fib恢复至原来水平(P>0.05);T1、T2时点的血小板(PLT)、红细胞压积(Hct)、血红蛋白(Hb)、凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血酶原时间(APTT)、血乳酸、EVLWI、PVPI、PaO2、PaO2/FiO2、中心静脉血氧饱和度(ScvO2)与T0比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:在TPE中以羟乙基淀粉为置换液的主要成分,置换结束时再快速输入一定量的FFP和白蛋白,能够明显减少血浆的用量,并能维持机体稳定,是安全、有效节约血源、值得临床推广的TPE方法.

    作者:何雪明;何文评;许尹丽;龚珊鸿;陈维觉;黄福羽;李洁连;卢冠解;黄芝 刊期: 2012年第05期

  • 广西急性中毒原因与相关影响因素研究

    目的:探讨广西急性中毒的主要原因与相关因素.方法:查阅了广西市级医院36所,县级医院12所及15个乡镇卫生院的相关病历,收集资料作分类描述性分析.结果:在5 988例急性中毒病例中,以意外性与自杀性中毒(2 337例、1 886例,占39.62%、31.97%)高,两者占总数的70.52%.意外性中毒主要见于城镇(1 174例,占51.58%)、男性(1 172例,占41.81%)、36~60岁与>61岁组(852例、249例,40.88%、40.75%)及化学类、动物类与其它类(915例、311例、359例,86.24%、72.66%、48.71%)引起的中毒;自杀性主要见于农村(1 441例,占39.07%)、女性(1 271例,占39.92%)、19~35岁组(893例,占43.80%)及农药类与医药类(1 512例、299例,59.64%、33.71%)引起的中毒.城镇≥36岁男性意外中毒病例数、化学类与其它类毒物病例数以及三类毒物合计病例数各占54.84%、39.92%、29.41%、81.51%,均明显高于农村的38.97%、15.27%、8.08%、49.70%(P<0.01);农村女性的自杀中毒病例数、农药类与两类毒物合计例数各占65.87%、83.71%、90.27%,均明显高于城镇的34.84%、27.46%、81.35%(P<0.01).结论:由CO、酒类所致城镇≥36岁男性的意外性中毒,及其由有机磷农药所致农村19~35岁女性的自杀性中毒为广西地区急性中毒的主要原因.

    作者:蒋东方;刘清华;胡德宏;张振明 刊期: 2012年第05期

  • 胸乳径路腔镜甲状腺手术的临床应用

    近年来甲状腺疾病的发病率呈升高趋势,以结节性甲状腺肿居首位[1],并以中青年女性多见,绝大部分需要手术治疗.传统的甲状腺手术在颈部留下6~8 cm的瘢痕,影响患者的外形美观,给患者造成极大的心理负担,尤其是年轻女性.经胸乳径路腔镜甲状腺手术能将手术切口微小化并加以隐藏,以达到颈部无瘢痕的美容效果[2].我院普外科于2010年2月至2011年12月完成了56例经胸乳径路腔镜甲状腺手术,效果满意,现报道如下.

    作者:李海滨;龚义伟;盘新辉;胡海;彭承东 刊期: 2012年第05期

  • 胃肠手术快速康复外科治疗优化设计方案的临床研究

    目的:探讨胃肠手术应用快速康复外科(FTS)优化设计方案治疗的安全及可行性.方法:选取施行胃肠道手术患者194例,随机分组:快速康复外科组(治疗A组)60例;微波照射治疗结合快速康复外科组(治疗B组)73例;传统手术组(对照C组)61例,比较3组病例的各项临床指标和实验室指标.结果:3组患者的手术时间、术中出血量、出现急性胃扩张而需要重置胃肠减压管并禁食和吻合口漏方面无明显差异(P>0.05);A组与C组在切口感染和肺部感染方面无明显差异(P>0.05),在术后肛门恢复排气时间、体重减轻、术后停输液时间、切口愈合时间、术后住院时间、治疗费用、恶心呕吐、咽喉疼痛和尿路感染等方面明显减少(P<0.01);A组与B组在术后停输液时间、术前和术后1周的体重差无明显差异(P>0.05),B组较A组在术后肛门恢复排气时间、切口愈合时间、术后住院时间、恶心呕吐、咽喉疼痛、肺部感染和治疗费用方面明显减少 (P<0.01),切口感染也减少(P<0.05).结论:胃肠手术患者的快速康复外科治疗是一种全新外科理念,较传统手术治疗有明显优势.采用微波照射治疗结合快速康复外科治疗的优化方案更有利于患者的术后康复,是安全、可行的治疗方法之一.

    作者:颜冰;韩伟;张志哲;周瑞仁;李新萍;陆春秀;林桦;孙兴;谢丽娟;冯关荣;苏泽;黄敏红;许国定;黄江明 刊期: 2012年第05期

  • 改进免疫酶染色法EB病毒抗体检测实验的研究

    目的:研究改进免疫酶染色法EB-VCA-IgA检测鼻咽癌EB病毒,以提高检测实验结果的稳定性和准确性.方法:通过培养靶细胞B95-8及在电子显微镜下观察EB病毒在细胞内外的变化状况,以指导降低操作说明书原配方中磷酸缓冲液的结晶盐的浓度.结果:滴加在靶细胞孔上的酶标抗体和染色液滴珠状的表面张力没有受到破坏,无以前原说明书配制的磷酸缓冲液试剂实验时溢出孔外现象,能在规定时间内完整地吸附在靶细胞孔表面,保证了抗原抗体能充分结合.结论:一定范围内较低的渗透压洗涤液,可以使EB病毒溢出B95-8细胞外,而宿主B95-8细胞却生长发育良好,细胞结构在电子显微镜下未见改变.并且改进后的免疫酶染色法EB-VCA-IgA检测鼻咽癌EB病毒的准确性和稳定性有很大的提高.

    作者:潘敏;沈菁;秦雪;蒋杰球;覃锦耀 刊期: 2012年第05期

  • 急性肺栓塞46例临床分析

    目的:探讨急性肺栓塞(APE)的临床特征以及辅助检查手段.方法:对2007年1月至2011年12月收治的46例APE患者的发病情况及辅助检查进行评估分析.结果:呼吸困难、胸痛、晕厥、下肢肿痛、咯血等为APE常见的表现,晕厥是单一症状中有诊断意义的.心电图呈典型表现SⅠQⅢTⅢ征、右束支传导阻滞占61%,螺旋CT肺动脉造影及心脏超声可直接显示肺动脉血栓.结论:APE有较常见的临床表现和较典型的心电图表现,超声及CT肺动脉造影是主要的确诊手段,对有高危因素的患者突然出现病变时,应及时行其相关检查并动态观察,以防漏诊误诊.

    作者:孔令坚 刊期: 2012年第05期

广西医科大学学报杂志

广西医科大学学报杂志

主管:广西医科大学

主办:广西医科大学