学术投稿

日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离

赛雪;何兴;潘卫庆

关键词:肝星状细胞, 分离, 密度梯度离心, CD11b磁珠
摘要:目的 探索稳定、高效的血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离方法. 方法 采用Ⅳ型胶原酶体外灌注、11.5% Optiprep密度梯度离心、CD11b磁珠阴性分选方法相结合分离血吸虫感染小鼠肝星状细胞. 结果 11.5%Optiprep密度梯度离心后细胞得率可达到(7.66±2.43)×106个/鼠,存活率为96%~98%.CD11b磁珠阴性分选后肝星状细胞得率可达到(3.9±1.33)×106个/鼠,CD11b、F4/80双阴性细胞纯度为90.8%~95.8%. 结论 本实验建立的血吸虫感染小鼠肝星状细胞分离方法稳定、高效,能够有效去除kupffer细胞的污染,为进一步研究HSC在血吸虫病肝纤维化中的功能提供基础.
中国热带医学杂志相关文献
  • 韶关地区乙型肝炎患者HBV亚基因型的分布

    目的 探讨韶关地区乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况. 方法 应用PCR法结合琼脂糖电泳方法对378例乙型肝炎患者进行基因分型和检测,根据PCR产物大小直接判定HBV基因型,应用PCR扩增全S基因序列-DNA测序-生物信息学分析方法确定部分样品的亚基因型,并探讨前S区编码情况. 结果 在378例乙型肝炎患者中B基因型263例占69.6%,C基因型113例占29.9%,BC混合型2例占0.5%.B基因型中HBeAg阳性患者占66.5%,抗-HBe阳性占33.5%. 结论 广东韶关地区乙型肝炎患者HBV基因型以B型为主,C型次之,少量BC混合型,HBV复制强弱与病毒基因型无关.

    作者:肖仁飞;杨姝菲;陈星浩;梁小文;姜清明;石玉珍 刊期: 2013年第08期

  • 崇左市2005~2012年狂犬病流行病学分析

    目的 分析广西崇左市2005~2012年狂犬病疫情流行病学特点,为狂犬病防治提供依据. 方法 收集2005~2012年崇左市狂犬病疫情资料和流行病学个案调查资料进行流行病学分析. 结果 崇左市2005~2012年共报告狂犬病116例,年均发病率为0.68/10万,病死率为100%.7县(市、区)均有病例报告,病例多的是宁明县43例,其次是龙州县18例,江州区和扶绥县各16例,4县(区)病例占病例总数的80.17%.男性发病数多于女性,男女比例为1.37∶1,发病主体以农民为主(78.45%),其次是学生(6.90%)和散居儿童(5.17%).夏秋季为狂犬病高发季节,农村地区养犬数量多,犬只免疫率低,伤口处理不及时和不规范,没有注射狂犬疫苗和抗狂犬病毒血清或人源抗狂犬病免疫球蛋白是导致狂犬病发病的主要原因. 结论 加强对狂犬病高发地区的疫情防控工作,控制犬只数量、提高犬只的免疫率,加大狂犬病防治知识宣传,提高狂犬病暴露后人群的治疗率是有效降低发病率的关键.

    作者:陈远东 刊期: 2013年第08期

  • 广西玉林市2001~2010年结核病防治规划实施效果评价

    目的 分析评价玉林市结核病防治规划(2001~2010年)实施效果,为玉林市结核病防治工作可持续发展提供参考. 方法 根据2002年以来玉林市结核病防治机构初诊患者登记本、结核患者登记本、季报表、月报表、结核病网络专报系统和财务报表等相关资料对玉林市10年期间结核病防治规划实施情况进行分析评价. 结果 2002~2010年全市共发现活动性肺结核患者30 950例,其中新涂阳肺结核患者12 159例,新涂阳患者治愈率87.51%以上.共有10 918例新涂阳肺结核患者恢复了健康,避免了9862名健康人患上肺结核病,挽回了671.82万元直接经济损失和7.16亿元的社会总价值. 结论 结核病防治规划实施情况良好,DOTS覆盖率、新涂阳患者发现率、新涂阳患者治愈率、转诊率都达到了规划目标,取得了良好的经济效益和社会效益.

    作者:陈晓;庞武贵;罗凯;朱和斌 刊期: 2013年第08期

  • 宾阳县2010年慢性病监测结果

    目的 了解宾阳县居民慢性病流行状况和主要危险因素. 方法 按照多阶段分层整群抽样的方法,抽取600个调查户,采用KISH表法,从600个调查户中抽取600名18岁及以上常住居民进行调查. 结果 高血压、糖尿病患病率分别为22.2%、3.3%,吸烟、饮酒、高脂饮食、高盐饮食、缺乏身体活动及超重所占比例分别为32.3%、25.3%、38.0%、72.3%、27.7%和 23.7%. 结论 高血压、糖尿病的患病及其危险因素处于高水平状态,吸烟、饮酒、高脂饮食、高盐饮食、缺乏身体活动、超重和肥胖为宾阳县18岁及以上的居民高血压、糖尿病的主要危险因素.

    作者:李秀霞;罗燕;胡燕美 刊期: 2013年第08期

  • 深圳市南山区2012年艾滋病自愿咨询检测情况分析

    目的 了解南山区艾滋病自愿咨询检测(VCT)人群艾滋病病毒感染情况,为制定艾滋病防治策略提供科学依据. 方法 收集2012年在南山区疾病预防控制中心VCT门诊进行自愿咨询检测者的资料进行统计分析. 结果 2012年南山区VCT门诊求询者共730人,其中男性占85.62%(625人),女性占14.38%(105人);未婚者占64.66%,年龄集中在15~44岁,占96.99%,文化程度在大专及以上者占88.49%.初筛并确认HIV抗体阳性者21例,阳性检出率为2.88%;全部为男性.在不同婚姻状况中,离异或丧偶者的阳性率高(16.67%),差异有统计学意义(P<0.01);HIV阳性者的感染途径,全部是通过性接触传播,危险性行为已成为艾滋病传播的主要的途径. 结论 应加大宣传力度,规范VCT门诊,开展咨询员培训,提高咨询技能,推动VCT门诊的普及和发展.

    作者:曾玲荣 刊期: 2013年第08期

  • 输入性恶性疟2例误诊死亡调查报告

    调查2例输人性恶性疟就诊经过,分析患者被误诊死亡原因.经流行病学调查、临床症状和体征和体征以及实验室检查,结果显示2例患者临床表现均不典型,确诊前曾被误诊为多种疾病,应关注出现肝、肾、脑损害等严重的并发症,是患者死亡的主要原因.因此,医疗卫生工作者对从高疟区归国发热患者真正的病因未得到及时的治疗,加之病程进展较快,流行病学接触史,加强对疟疾诊断标准的掌握,提高临床医生对疟疾病例的认识,及时做出诊断,尽早应用抗疟药品,防止疟疾误诊误治.

    作者:李云霞 刊期: 2013年第08期

  • 北京地区宋内志贺菌分子流行病学特征分析

    目的 了解北京地区宋内志贺菌毒力基因分布及分子流行病学特征. 方法 采用实时荧光PCR方法检测毒力基因、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,多位点序列分型(MLST)及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)等方法对北京地区2001~2009年50株志贺菌菌株进行分子流行病学特征分析. 结果 50株菌中,ipaH、set1、sen三种毒力基因的携带率分别为98%,18%和78%.选取19株流行病学和遗传背景无关的菌株,进行MLST、MLVA与PFGE分型方法的比较,MLST为1个序列型ST152 complex:adk(11)、fumC (63)、gyrB(7)、icd(1)、mdh(14)、purA (7)、recA(7); MLVA被分成15个型别,D值为0.9708;PFGE分成12个型别,D值为0.9532.MLVA初筛得到的8个可变数目串联重复(VNTR)位点用于扩大菌株分析,发现50株志贺菌被分为21个MLVA的型别,TS002和TS001为主要型别. 结论 北京地区近年来流行的宋内志贺菌存在毒力基因的丢失,MLVA分子型别复杂,存在多克隆来源,提示需要进行连续系统的分子流行病学监测.

    作者:刘桂荣;曲梅;张新;吴晓娜;李锡太;贾蕾;严寒秋;梁志超;王全意 刊期: 2013年第08期

  • 42例流动人口结核病患者诊断延误及其影响因素分析

    目的 调查城区流动人口中结核病患者诊断延误情况和向相关影响因素. 方法 收集儋州市区2010年9月1日~2011年8月30日期间诊治的42例流动人口肺结核患者的就诊经历和治疗转归资料,分析该部分结核病患者诊治延误情况和相关影响因素. 结果 42例流动人口结核病患者中,男性患者有22例,女性患者有20例,城区24例(57.14%),农村18例(42.86%).90.48% (39/42)患者的的结核病防治知识缺乏、因症就诊发现病人38例,占病人总数的90.48%,健康检查3例,占7.3%;其它1例,占1.2%.误诊时间为3~ 23d,平均12d.首诊延误(14.17±2.21)d,病人延误(30.19±9.28)d,医生延误(21.46±7.38)d,治疗延误(1.52±0.54)d.执行全程督导化疗(DOTS)治愈40例患者,治愈率为95.3%,治疗失败2例,占4.76%.结论 流动人口中的结核病患者结核病知识缺乏,对专业机构不了解,普遍存在诊治延误情况,不但加重患者的痛苦和经济负担,也可导致传染源扩散.因此,应裁决包括加大流动人口结核病管理力度,广泛开展结核病健康教育和健康促建活动在内的综合性预防和控制措施,以便提高结核病发现率和治愈率.

    作者:王琳彬 刊期: 2013年第08期

  • 气相色谱法测定磷酸哌喹中1-溴-3氯丙烷的残留

    目的 建立1-溴-3氯丙烷在磷酸哌喹中的GC检测方法. 方法 样品采用DMF萃取.色谱系统采用DB-1(30m×0.320mm,3.0μm)气相色谱柱,柱温为程序升温,氢火焰离子化检测器(FID),分流比为5∶1. 结果 1-溴-3氯丙烷在1~15 μg/ml内进样,按外标法以峰面积计呈良好的线性关系,平均回收率为99.48%,RSD为1.67%(n=9).精密度RSD为0.47%(n=6).低检测浓度为0.2272μg/ml,可检出样品中含有0.002%的1-溴-3氯丙烷.结论 该方法简单、准确,重复性好且专属性强.

    作者:吴成杰;潘正斐 刊期: 2013年第08期

  • 转苏云金杆菌CrylVD基因蓝藻实验室杀蚊幼毒效的观察

    目的 观察转苏云金杆菌CrylVD基因蓝藻实验室对淡色库蚊、白纹伊蚊和中华按蚊不同龄期幼虫杀灭效果. 方法 利用不同浓度的工程藻,分别作用于淡色库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊敏感品系Ⅲ龄幼虫,以及它们不同龄期的幼虫,并设计阴性及空白对照,分别于24H、48H计数死亡率,从而分析基因蓝藻的杀蚊幼毒效.结果 工程藻对三种蚊种Ⅲ龄幼虫均具有杀灭作用,对淡色库蚊、白纹伊蚊幼虫杀灭效果较高,对中华按蚊幼虫效果较差.48H对以上三种蚊虫Ⅲ龄幼虫的杀灭率分别为100%、100%和42%;工程藻对低龄幼虫的杀灭效果高于高龄幼虫,即龄期越低对工程藻的敏感性越高,杀蚊毒效与龄期呈负相关. 结论 转苏云金杆菌CrylVD基因蓝藻具有明显杀蚊幼效果,为今后蚊虫防治提供了新的方法.

    作者:朱嵩;闫歌;刘相萍;甄天民;张昕;王怀位;赵玉强;孙传红;程鹏 刊期: 2013年第08期

  • 槟榔和南瓜子治疗布朗族人群绦虫病204例疗效观察

    目的 观察槟榔南瓜子治疗绦虫病的疗效. 方法 将调查的近1周内排绦虫节片的314例患者随机分为2组,治疗组采用槟榔、南瓜子治疗,对照组采用阿苯达唑治疗,治疗结束后进行疗效比较及副反应情况对比分析. 结果 治疗组治疗2天内总有效率为98.04%,对照组为一周内有效率为18.19%;两组比较,有显著性差异(P<0.001);治疗组副反应发生率为2.94%,对照组为10.00%;两组比较,有显著性差异(P<0.05). 结论 槟榔、南瓜子、硫酸镁治疗绦虫病有一定的疗效.

    作者:李鸿斌;朱进;车英;刀天友;唐小英 刊期: 2013年第08期

  • 惠州市2009~2012年甲型H1N1流感流行状况调查

    目的 了解惠州市甲型H1N1流感流行状况,为有效防控甲型H1N1流感提供参考依据. 方法 运用描述流行病学方法分析2009~2012年惠州市甲型H1N1流感流行状况;用血清流行病学方法调查惠州市人群甲型H1N1流感病毒的感染水平. 结果 2009 ~ 2012年惠州市流感监测哨点医院的平均ILI就诊百分比(ILI%)为7.88%,共报告甲型H1N1流感279例.采集鼻咽拭子2 230份,甲型H1N1流感核酸检测阳性219份,阳性率为9.82%,阳性率高的年龄组为15~岁组(24.45%),低的年龄组为0~岁组(3.43%).三次横断面调查共抽取调查对象480人,甲型H1N1流感病毒抗体阳性人数121人,阳性率为25.21%.三次调查抗体阳性率分别为30.0%,36.25%和9.38%,人群甲型H1N1流感抗体阳性率在年龄、性别及职业间差异有统计学意义(P<0.05);接种过甲型H1N1流感疫苗和未接种过甲型H1N1流感疫苗之间的抗体阳性率差异有统计学意义(x2=71.76,P<0.05). 结论 惠州市甲型H1N1流感疫情通过采取综合性措施得到有效防控,今后应定期在人群中开展流感病毒抗体监测,以便了解人群对流感流行株的免疫保护和病毒抗原变化,为防控流感提供重要依据.

    作者:琚雄飞;方巧云;许岸高;梁立环;丘文清 刊期: 2013年第08期

  • 肺炎支原体抗体阳性儿童的锌和维生素D含量分析

    目的 分析肺炎支原体抗体阳性的儿童锌和维生素D含量. 方法 分别用酶联免疫法检测肺炎支原体抗体(MP),原子吸收光谱法检测锌含量,电化学发光免疫分析法检测25-羟基维生素D含量,用u检验统计分析阳性组与对照组的锌、25-羟基维生素D含量,用x2检验统计分析两组的锌和维生素D缺乏率的差异. 结果 对照组锌和25-羟基维生素D含量分别为(75.33±16.03)μmol/L、(27.08±13.76)ng/ml,缺乏率为17.85%、8.57%;阳性组锌和25-羟基维生素D含量分别为(65.06±17.11)μmol/L、(26.64±12.82)ng/ml,缺乏率为35.71%、15.71%,两组的锌含量(u=5.185,P<0.05)和缺乏率都有显著差异(x2=11.38,P<0.05),25-羟基维生素D含量(u=0.276,P>0.05)和缺乏率无差异(x2=-3.35,P>0.05). 结论 肺炎支原体抗体阳性患儿及时补充锌对提高疗效、缩短病程有重要意义.

    作者:付姣;符生苗;马志超 刊期: 2013年第08期

  • 创伤后应激障碍患者细胞因子和皮质醇水平分析

    目的 初步探讨创伤后应激障碍(PTSD)患者血清细胞因子IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α及血浆皮质醇含量及其意义. 方法 收集50例PTSD患者和50例健康对照组,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和放射免疫的方法对PTSD患者血清IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α及血浆皮质醇进行检测,并与对照组进行比较. 结果 PTSD组血清IL-2、IL-6、IL-8、及TNF-α水平显著高于正常对照组(P<0.01);血浆皮质醇含量水平显著高于正常对照组(P<0.01).结论 PTSD患者存在广泛的免疫异常,IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α及血清皮质醇可能在PTSD的发病机理中起着重要作用.

    作者:周淑萍;郭敏;蒋湘玲;郭骏成;许晨耘;陈峰;刘涛;吴多育 刊期: 2013年第08期

  • 日本血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离

    目的 探索稳定、高效的血吸虫感染小鼠肝星状细胞的分离方法. 方法 采用Ⅳ型胶原酶体外灌注、11.5% Optiprep密度梯度离心、CD11b磁珠阴性分选方法相结合分离血吸虫感染小鼠肝星状细胞. 结果 11.5%Optiprep密度梯度离心后细胞得率可达到(7.66±2.43)×106个/鼠,存活率为96%~98%.CD11b磁珠阴性分选后肝星状细胞得率可达到(3.9±1.33)×106个/鼠,CD11b、F4/80双阴性细胞纯度为90.8%~95.8%. 结论 本实验建立的血吸虫感染小鼠肝星状细胞分离方法稳定、高效,能够有效去除kupffer细胞的污染,为进一步研究HSC在血吸虫病肝纤维化中的功能提供基础.

    作者:赛雪;何兴;潘卫庆 刊期: 2013年第08期

  • 深圳市龙岗区2011~2012年流感样病例呼吸道病毒病原学分析

    目的 了解深圳市龙岗区流感样病例病原学现况,为呼吸道传染病的预防控制提供依据. 方法 2011 ~2012年采用实时荧光定量PCR法,检测龙岗区801份流感样病例咽拭子样本的流感病毒、腺病毒、鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒和人偏肺病毒等7种病毒共15个亚型. 结果 流感样病例的病毒总阳性率为52.4%(420/801),其中FLU-A检出率高(27.8%),其后依次为FLU-B(15.7%)、HRV(3.6%)、ADV(2.2%)、RSV-A(1.0%)、PIV-1(0.6%)、RSV-B和CoV-OC43(0.4%)、CoV-229E和hMPV-A(0.2%)、hMPV-B(0.1%),而PIV-2、PIV-3、CoV-NL63和CoV-HKU1四个亚型未检出.7种常见呼吸道病毒检出率高峰分别在2011年2月(69.9%)和2012年1月(85.0%).7种常见呼吸道病毒以春夏季多发,春夏季与秋冬季比较差异有统计学意义(p<0.05).FLU以春夏季多发,春夏季与秋冬季比较差异有统计学意义(P<0.05); HRV以冬季多发,冬季与春夏秋季比较差异有统计学意义(P<0.05);ADV、PIV、RSV、CoV、hMPV全年基本为散发分布.不同年龄组的病毒阳性率差别有统计学意义(P<0.05),其中,其中0~4岁组7种常见呼吸道病毒均有检出,5岁以上组主要以FLU为主. 结论 加强常见呼吸道病毒监测对呼吸道传染病的防控具有重要意义.

    作者:钟庆洪;李静媚;陈应坚;徐亚军 刊期: 2013年第08期

  • 重组金属蛋白酶蛋白的纯化及鉴定

    目的 构建创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)金属蛋白酶(vvp)基因原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性. 方法 采用pET-32a质粒构建vvp基因原核表达载体,在E.coliBL21(DE3)宿主菌中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的重组金属蛋白酶蛋白rvvp表达,采用His-Ni亲和层析法提纯rVvp,SDS-PAGE检测表达和提纯效果.采用兔抗Vv全菌抗体的Western Blot鉴定其特异性和免疫原性. 结果 在1mmol/L IPTG诱导下,rvvp产量较高.提纯的rvvp经SDS-PAGE后仅显示分子量为86KD的单一蛋白条带.重组蛋白rvvp能与兔抗Vv全菌抗体发生特异性结合. 结论 本研究成功地构建了创伤弧菌vvp基因高效原核表达系统,所表达的rvvp具有良好的免疫反应性,可作为Vv免疫检测试剂盒及疫苗的抗原.

    作者:郑晶;谢富生 刊期: 2013年第08期

  • 新农合政策下法定传染病住院经济负担及其影响因素

    目的 通过分析新型农村合作医疗制度(以下称为“新农合”)下法定传染病在玉溪市农村居民造成的直接经济负担以及影响因素,为制定降低经济负担的措施提供科学依据. 方法 采集了2005~2012年新农合9 344例住院病例的住院费用、补偿情况等进行分析,采用多重线性回归进行影响因素分析. 结果 2005~2012年,玉溪市9 344例保销新农合的法定传染病住院直接经济负担为1 139.7元/例,维持在1 000元/例;补偿比为47.8%/例,中位实际补偿比逐年增加,由2005年的19.7%上升到2012年的72.6%.多因素分析显示:年度、年龄两个因素与实际补偿比呈正相关,就诊医疗机构级别、住院天数、住院费用与实际补偿比呈负相关(P均<0.001). 结论 新农合在一定程度上起到了降低农村居民法定传染病经济负担的作用,探索适当提高重大、慢性传染病补偿比可成为减低负担有效途径之一.

    作者:李顺祥;李再友;张洪军;赵金仙;高良敏 刊期: 2013年第08期

  • 创伤后应激障碍致病基因(DRD2)研究进展

    创伤后应激障碍(PTSD)是个体在突然遭遇强烈的精神应激后出现的延迟发生而又较持久的应激障碍.本文就多巴胺D2基因(DRD2),多巴胺D2受体及多巴胺系统与PTSD疾病发生及其相关特性方面进行了阐述.

    作者:康延海;郭敏;邓立群;盛莉;蔡俊宏;陈峰;郭骏成 刊期: 2013年第08期

  • 深圳市疑似肺结核患者转诊追踪情况分析

    目的 评价中国疾病预防控制信息系统对肺结核病人发现工作的作用,为改进医防合作提供依据. 方法 收集2005~2012年深圳市疑似肺结核患者网络登记报告信息及报表信息进行统计分析. 结果 2005~2012年非结防机构网络报告肺结核患者总体到位率逐年提高,由2005年的59.4%提高至2012年90.4%; 2005~2012年登记活动性肺结核中医疗卫生机构转诊病人占86.4%; 2009~2012年网络报告肺结核患到位排除率69.6%. 结论 中国疾病预防控制信息系统有利于推动结核病防治工作;医疗卫生机构是发现肺结核病的主要场所,应加强结核病诊断报告相关知识的培训,提高肺结核患者诊断的准确性.

    作者:吴清芳;谭卫国;吕德良;罗道泉;管红云 刊期: 2013年第08期

中国热带医学杂志

中国热带医学杂志

主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心