学术投稿

人miR-106b的克隆及其慢病毒表达载体构建

郑林;王爽;丁彦青

关键词:hsa-miR-106b, 肿瘤, 慢病毒
摘要:目的 克隆微小RNA hsa-miR-106b并构建其慢病毒表达栽体.方法 将PCR扩增得到的miR-106b前体序列和pLVTHM载体经双酶切后连接,产生pLVTHM-miR-106b慢病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆.用pLVTHM-miR-106b、psPAX2和pMD2.G质粒共转染包装细胞293FY,包装产生慢病毒.结果 经双酶切鉴定和测序证实,成功构了miR-106b的慢病毒表达载体pLVTHM-miR-106b.倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293FT呈绿色荧光.结论 成功构建了has-miR-106b的慢病毒表达栽体,为深入研究miR-106b的生物学功能奠定基础.
中国热带医学杂志相关文献
  • 海南黎族人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶C1311T多态性分析

    目的 通过对海南黎族人群葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(C6PD)基因C1311T多态性分析,进一步理解海南黎族人群G1376T和G1388A突变遗传背景.方法 运用硝基四氮唑蓝定量法对海南黎族男性全血标本进行筛查,随机选取无关海南黎族萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症和正常标本各50份,PCR扩增G6PD外显子11至13序列并测序.结果 筛查出海南黎族男性G6PD缺乏86例.在50例G6PD缺乏症的标本中,检出27例G1376T突变、12例G1388A突变和3例G6PD cDNA C1311T突变.在50例海南黎族正常标本中,检出12例C6PD cDNA C1311 T突变.全部C6PDcDNA C 1311T突变标本均合并IVS-11T93C突变,但未观察到G6PD C13011T合并其他突变.结论 C1311T同义突变在海南黎族人群中是普遍存在,C1311T突变与IVS-11T93C突变可能是在较早的一次突变中同时产生的,但与G1376T突变或G1388A突变可能存在不同起源.

    作者:王颖;杜杰;蔡望伟 刊期: 2011年第06期

  • 广西平果县农村生活饮用水水质检测分析

    目的 了解平果县农村生活饮用水水质卫生现状,为农村改水工程规划和管理提供科学依据.方法 对2008~2009年平果县农村生活饮用水水质卫生监测结果资料进行统计分析.结果 2008、2009年平果县农村生活饮用水水质合格率分别为18.09%和14.89%,2年平均合格率为16.49%,集中式供水合格率也仅为19.38%,分散式供水没有1份水样合格.不合格指标中,微生物超标率高,达到83.51%,其中,总大肠茼群和耐热大肠菌群超标严重,超标率分别为76.59%和73.40%,提示平果县农村生活饮用水水质合格率极低,水质受到人畜粪便和生活污水污染严重.结论 影响平果县农村生活饮用水水质合格率低的主要原因是微生物污染严重,应加强对饮用水水源卫生防护和水质消毒处理.

    作者:蒙启飞 刊期: 2011年第06期

  • 口服异维A酸治疗多发性掌跖疣疗效观察

    目的 观察口服异维A酸治疗多发性掌跖疣的疗效.方法 选取门诊多发性掌跖疣患者80例,分为治疗组和对照组,各40例,实验组口服异维A酸胶九,对照组采用液氮冷冻治疗.结果 对照组治愈率为60%,复发率40%.治疗组治愈率为97%,复发率7.5%.治疗组临床效果明显优于对照组(X12=9.60,X22=6.6462,P<0.05).结论 口服异维A酸可提高治愈率,缩短治疗时间,明显降低复发率.

    作者:李丹;张霞;曾碧冰;李俊杰;陈明春 刊期: 2011年第06期

  • 磷脂酶A2活性与肺间质纤维化形成相关性研究

    目的 研究磷脂酶A2(PLA2)活性及其相关炎症介质在肺间质纤维化形成中的作用.方法 64只3月龄健康SD大鼠,随机分为正常对照组(A组),肺纤维化模型组(B组),每组于给药后第3、7、14、28d各随机处死8只,光镜下观察肺组织形态学变化、测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HyP)含量、PLA2活性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中前列腺素E2(PGE2)、白三烯C4(LTC4)和转化生长因子-β1(TGF-β1)含量变化.结果 第3、7、14、28d,模型组肺组织匀浆中PLA2活性和BALF中的PGL2、LTC4及TGF-β1含量均较正常对照组显著增高(P<0.01),肺组织HyP含量于第7d开始较正常对照组增高(P<0.05),第28d达高峰.相关性分析显示,PLA2与LTC4、PGE2,TGF-β1及HyP之间均存在正相关性;LTC4、PGE2及TGF-β1三者之间也有一定的相关性.结论 PLA2可能通过LTC4、PGE2、TGF-β1在体內综合作用结果参与了肺间质纤维化的发生发展过程.

    作者:张艳;陈莉延;梁标 刊期: 2011年第06期

  • 昆明地区HIV和HCV共感染者丙型肝炎病毒基因型特征

    目的 分析昆明地区人类免疫缺陷病(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)共感染者丙型肝炎病毒基因型分布.方法 对204例经逆转录聚合酶链反应检测HCV病毒载量,核酸为阳性的样品,利用反向点杂交技术进行HCV基因分型检测,其中60例经免疫印迹试验(WB)确认的HIV感染者,对共感染和非共感染组的丙型肝炎病毒基因型分布进行分析.结果 204例HCV患者中3b型85例(HCV感染率高,为41.6%);1b型HCV感染在HIV/HCV共感染组中的感染率(30.0%)明显高于单纯HCV感染组感染率(20.0%)(P<0.05).而3b型HCV感染在HIV/HCV共感染组申的感染率(35.0%)明显低于单纯HCV感染组感染率(44.2%)(P<0.05).1b型,3a型和3b型HCV合并HIV感染的发生率较高;2a型和6a型HCV合并HIV感染的发生率较低.不同丙肝基因型HIV/HCV共感染者间感染途径以静脉药隐为主,其次是性接触.结论 昆明地区共感染组申的HCV流行的基因亚型有1b,3a,3b,6a共4种,1b为流行的主要基因亚型.3a,3b和6a型均占相当比例,初步说明昆明地区HCV流行的基因亚型呈现多样性.

    作者:普冬;汪亚玲;赵勤;刘红伟;吴芳华 刊期: 2011年第06期

  • 2001~2009年淮安市肺结核病发现与治疗转归

    目的 分析淮安市肺结核患者发现与治疗转归情况,为下一步开展防治工作提供依据.方法 对2001~2009年淮安市结核病控制项目季度、年报表进行分析.结果 截止2009年底,全市共发现活动性肺结核患者30 175例,新发涂阳患者11 859例,占39.30%;2005年之前,活动性肺结核和新发涂阳肺结核登记率呈增高趋势,2006年之后逐渐下降;新发涂阳肺结核平均治愈率迭92.29%.结论 实施DOTS以来,淮安市肺结核病人发现和治疗管理水平不断提高,结核病控制效果显著.

    作者:丁守华;谢靖;金韬;万青灵;张远涛 刊期: 2011年第06期

  • 152例临床念珠菌感染药敏分析

    目的 了解医院念珠菌感染药敏情况,为临床合理用药提供实验依据.方法 从临床标本中分离培养念珠菌,进行鉴定和药敏试验.结果 1 538份临床标本中分离出念珠菌152株(9.88%);其中,白色念珠菌111株(73.03%),克柔氏念珠菌31例(20.39%),其他10(6.58%).白色念珠菌时常用抗真菌药物敏感性均较高(伊曲康唑除外),而克柔氏念珠菌则对常用抗真菌药物均有较高的敏感率.结论 白色念珠菌和克柔氏念珠菌对临床一线抗真菌药氟康哇存在耐药株,应重视对高危人群进行微生物学检测和药敏试验.

    作者:奚琳琳;张群智;李芳芹 刊期: 2011年第06期

  • 打破乙肝病毒感染免疫耐受的外部诱因研究

    目的 探讨打破乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染免疫耐受的外部诱因.方法 收集HBV携带者进行HBV血清学标志物(HBV M)定量、HBV DNA定量、肝功能等检测,筛分免疫耐受HBV感染者(对照组)和免疫再活动HBV感染者(病例组),详细询问两组间可能存在不同的外部诱固.结果 对照组HBV DNA定量为(7.58±2.46)×107copies/ml,HBeAg定量为(188.11+54.52)PEI U/ml,ALT为(28.64±15.11)U/L;病例组HBV DNA定量为(3.67±1.79)×104copies/ml,HBeAg定量为(69.18±32.72)PEI U/ml,ALT为(102.43±37.65)U/L.发现饮酒、劳累、熬夜、损肝药物等是打破免疫耐受的外部诱因(P<0.01).结论 处于免疫耐受期的HBV携带者如避免饮酒、劳累、熬夜、损肝药物等因素的干扰,或可较长时间的停留在免疫耐受期.

    作者:曾庆磊;李春霞;王霞;徐光华 刊期: 2011年第06期

  • 中药药浴结合健康教育对寻常型银屑病疗效的影响

    目的 观察分析中药药浴结合健康教育综合治疗寻常型银屑病的远期疗效.方法 将2008年7月~2009年9月120例寻常型银屑病患者随机分为2组,其中治疗组80例患者在西药常规治疗妁基础上,通过辨证分型选择不同的中药药浴方(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ号方)辅以药浴疗法,结合医护人员及按<健康教育手册>对患者进行健康教育和心理疗法.与40例患者单独西药治疗作对照,观察综合治疗的远期疗效.结果 治疗组有效率为81.25%,对照组有效率为60.00%,治疗组明显优于对照组(P<0.05);随访6月,治疗组患者复发率明显低于对照组(P<0.05).结论 在西药治疗的基础上加中药药浴结合健康教育,可明显改善寻常型银屑病患者的症状,减轻患者心理及精神压力,且停药后复发率低,远期疗效好.

    作者:张小军;陈丽梅;李文斌;王建东;朱伟文 刊期: 2011年第06期

  • HBV感染者中HBV前S1蛋白检测分析

    目的 检测HBV前S1蛋白(PreS1-Ag)的水平,分析与HBV DNA复制的关系.方法 用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测HBV感染者血清中PreS1-Ag和HBV血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb),同时用Real Time PCR检测血清中HBV DNA含量.结果 407例HBV感染者HBeAg(+)的大三阳模式135例血清中,HBV-DNA、PreS1-Ag阳性率分别为87.4%和81.5%,两者差异无统计学意义;在117例HBeAg(-)的小三阳模式血清中,HBV-DNA、PreS1-Ag阳性检出率分别为74.4%和69.2%,两者差异无统计学意义.在266例HBV-DNA阳性患者血清中,PreS1-Ag阳性和HBeAg阳性检出率分别为74.4%、60.2%,两者差异具有统计学意义,P<0.01.结论 PreS1-Ag与HBV-DNA检测结果一致性较好,较HBeAg能更灵敏地反映体內HBV的复制状况,可与HBV-DNA互相补充,在临床诊断和治疗HBV感染中有重要意义.

    作者:严雪萍;万彦彬;李惠;吴海娟 刊期: 2011年第06期

  • 1997~2009年新疆阿克苏市艾滋病疫情分析

    目的 掌握阿克苏市艾滋病感染趋势和流行特点,为制定防治对策提供科学依据.方法 用描述流行病学方法探讨阿克苏市1997~2009年HIV/AIDS流行特征.结果 1997~2009年阿克苏市累计报告HIV/AIDS 921例,其中AIDS患者84例,死亡47例;疫情持续增长,局部地区疫情严重,向城乡结合部及农村地区及普通人群申扩散;以维吾尔族感染为主,占感染者总数的95%;男性感染者比例相对有所下降,女性感染者比例上升,向小年龄段转移,传播途径以共用注射器传播为主占62%,近年来性接触传播上升速度明显.结论 阿克苏市艾滋病疫情形势严峻,应加强领导,完善监测系统,开展持续、广泛的干预措施,切断传播途径,有效控制疫情扩散.

    作者:吐尔洪;牛德强;古丽扎尔;范玉萍 刊期: 2011年第06期

  • 圆形分布法分析江苏省间日疟发病季节变化

    目的 分析江苏省1997~2009年度疟疾发病的季节性,研究江苏省疟疾流行特征,为积极防治疟疾流行提供参考依据.方法 收集江苏省疾病监测信息报告网络直报管理系统中间日疟疫情资料,按月统计间日疟发病数,用圆形分布法分析江苏省间日疟的发病高峰日和高峰期.结果 江苏省间日疟发病具有明显的季节性(P<0.01),各年份发病高峰日不全相同(P<0.01),平均发病高峰日为8月5日,发病高峰日早出现在1997年的7月14日,晚出现在2006年的9月1日,二者之间相差了49d.结论 江苏省间日疟存在明显的季节高峰,其发病高峰日多集中在8月份;间日疟流行高峰期延长与全球气候变暖之间是否存在关联还有待商榷.

    作者:王伟明;周华云;曹俊 刊期: 2011年第06期

  • 上消化道恶性肿瘤患者血清CEA、CA199和SCC联合检测的研究

    目的 探讨血清肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、唾液酸化岩藻戊糖(CA199)和鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)联合检测对上消化道恶性肿瘤的临床诊断价值.方法 采用酶联免疫法(ELISA)测定90例上消化道恶性肿瘤患者、90例正常健康者的三种肿瘤标志物(CEA、CA199、SCC)水平.结果 肿瘤组三种血清标志物的水平高于对照组(P<0.05);CEA和CA199在腺癌中具有较高的阳性率,SCC在鳞癌中具有较高的阳性率(P<0.05);在不同TNM临床分期患者中,CEA和CA199的阳性率为Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅰ~Ⅱ期(p(0.05);SCC的阳性率Ⅰ~Ⅱ期低于Ⅲ期、Ⅳ期(P<0.05),但Ⅲ期和Ⅳ期比较差别无统计学意义(P>0.05).结论 血清肿瘤标志物CEA、CA199和SCC在上消化道恶性肿瘤的诊断、病理类型的鉴别、临床分期的诊断上都有重要的临床价值.

    作者:马江涛;刘春;吴文苑 刊期: 2011年第06期

  • 热毒宁治疗手足口病93例临床效果观察

    手足口病(Hand-foot-and-mouth disease)主要是由肠道病毒引起的传染病,多发生于5岁以下儿童,可引起手、足、口腔等部位的疱疹,个别患儿可导致心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症.有些重症患儿病情发展快,引起死亡.本文选择我院手足口病患儿,应用热毒宁注射液治疗,观察其临床效果.

    作者:蔡於勤 刊期: 2011年第06期

  • 鼻咽癌组织中巨噬细胞帽蛋白的表达

    目的 探讨巨噬细胞帽蛋白(CapG)在鼻咽癌(NPC)组织申的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学检测NPC组织和正常鼻咽粘膜(NNM)组织中CapG的表达;采用统计学方法分析CapG表达水平与NPC病人临床病理因子的关系.结果 CapG在NPC间质中的表达较NNM间质明显上调(P<0.01);CapG的表达与NPC的分化程度和临床分期相关(P<0.01);在不同性别、年龄组患者NPC组织中CapG表达无明显差异(P>0.05).结论 CapG在NPC间质中高表达,CapG在肿瘤中的高表达倾向于更晚的临床分期、更差的分化程度(P<0.01),提示NPC间质高表达的CapG在NPC发生发展过程中可能起着一定作用.

    作者:李美香;谢远杰;石金凤;黄欣琼;赵国军;张晓红;龙治峰 刊期: 2011年第06期

  • 斑贴试验检测职业性接触陸皮炎变应原

    目的 探讨东莞地区职业性接触性皮炎主要致病因素,了解其常见的接触性变应原.方法 采用斑贴试验试剂盒对每例患者进行斑贴试验.结果 300例患者中有167例至少对一种物质过敏,总阳性率为55.67%,阳性率较高的几种变应原依次为:硫酸镍104例(34.67%),甲醛42例(14.00%),重铬酸钾30例(10.00%).结论 东莞地区职业性接触性皮炎主要变应原为三种化学物质,调查结果有助于临床指导该疾病的预防和治疗.

    作者:曾碧冰;陈明春;李俊杰;周敏慧;李丹;林绍华;张静 刊期: 2011年第06期

  • 广西乙脑高发区媒介蚊虫乙脑病毒感染状况调查

    目的 对广西流行性乙型脑炎(乙脑)高发区的蚊虫进行乙脑病毒分离鉴定.方法 2006~2007年在广西乙脑高发区采集蚊虫标本,用C6/36和BHK21细胞分离乙脑病毒,用Clustal X(1.8)、Mega 4.1等软件进行分离株E基因序列比对和系统进化分析.结果 2006~2007年共采集蚊虫12 102只,从北流市和桂平市的三带喙库蚊中分离到4株基因Ⅰ型乙脑病毒,4株病毒之间E基因片段核苷酸和氨基酸的大同源性为98.3%和99.8%.结论 从广西蚊虫中分离到4株基因Ⅰ型乙脑病毒.

    作者:谭毅;闭福银;谢艺红;杨进业 刊期: 2011年第06期

  • 尿微量白蛋白检测对狼疮肾炎的早期诊断价值

    目的 通过检测正常人群和狼疮肾炎患者的尿微量白蛋白(m-Alb),探讨其对早期狼疮肾炎的诊断价值.方法 采用免疫透射比浊法检测45例狼疮肾炎患者的尿微量白蛋白,并与20例健康人员作对照.结果 20例正常对照组申尿微量白蛋白阳性0例,45例狼疮肾炎组阳性19例,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),且狼疮肾炎患者随着病程的延长,尿微量白蛋白阳性率不断升高.结论 尿微量白蛋白是诊断狼疮肾炎早期损伤的可靠生化指标,对临床的早诊断、早治疗有着重要的参考价值.

    作者:宁学玲;宁学洪;李国富 刊期: 2011年第06期

  • 人类脐带血MSC和骨髓MSC分泌细胞因子的对比研究

    目的 比较人类脐带血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞支持造血干细胞分泌生长因子的能力.方法 应用ELISA方法,测定两种细胞分泌的干细胞生长因子(Stem cell factor,SCF),血小板生成素(Thrombopoietin,TPO)和白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)的浓度,并且进行对比.结果 人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可分泌TPO、SCF和IL-6等支持造血生长因子.但是相同生长条件下,两种细胞分泌的因子浓度不同.人脐血基质细胞分泌SCF的量(575.7±40.2pg/ml)高于骨髓基质细胞(482.2±17.7pg/ml),而人脐血基质细胞分泌IL-6(469.7±27.2pg/ml)的量(低于同期培养的骨髓基质细胞(935.19+_35.4pg/ml),人脐血基质细胞TPO分泌的量(195.5±7.3pg/ml)与骨髓基质细胞(172.2±9.3pg/ml)相近.结论 人脐血基质细胞与骨髓基质细胞都具有分泌支持造血生长因子的能力,但是分泌量之间有差异.

    作者:王小博;毛平;许艳丽;王彩霞;邓婷芬;杜庆华 刊期: 2011年第06期

  • 结核分枝杆菌自身淬灭探针荧光定量PCR检测方法的建立

    目的 利用自身淬灭探针技术建立敏感、特异、快速、价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法.方法 构建重组质粒PET-32a(+)-16s rRNA作为标准品,自行设计自身淬灭探针,建立、优化定量PCR体系,并进行方法学评价及临床应用.结果 所建立方法的线性检测范围为102~109copies/μL.灵敏度为lcopy/μL,特异性为100%.高拷贝样品的天间CV为2.65%、批內CV为1.86%,低拷贝样品的天间CV为2.12%、批內CV为0.78%.该方法比培养方法更快速、灵敏.结论 以自身淬灭探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,对结核病的早期快速诊断有较高价值.

    作者:张伟铮;黄彬;林冬玲;鄂顺梅;薛新娜;曾建明;陈茶 刊期: 2011年第06期

中国热带医学杂志

中国热带医学杂志

主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心