吴克刚;陈怡;何消阳
目的 研究异烟肼对大鼠淋巴细胞因子表达和巨噬细胞功能的影响.方法 健康雄性SD大鼠,随机分为喂药1个月组、喂药3个月组、停药1个月(喂药3个月后)组,每组再随机等分为异烟肼组和对照组.异烟肼组给以120 mg/kg异烟肼,隔日1次ig给药,对照组给予生理盐水.于相应时间点,ELISA法检测血清白细胞介素-12 (IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)水平;琼脂平板法检测大鼠血清溶菌酶含量;硝酸铅(Comori)法检测腹腔液酸性磷酸酶水平.结果 在各时间点,异烟肼组IL-12、IFN-γ、溶菌酶水平与对照组比较,差异均不显著;喂药1个月,与对照组比较,异烟肼组酸性磷酸酶水平显著升高(P<0.05);喂药3个月、停药1个月,两组酸性磷酸酶水平差异不显著.结论 120 mg/kg异烟肼对大鼠免疫功能无明显影响,长期应用不会导致免疫功能的损伤.
作者:曹汴川;黄喆;黎秋菊;黄秀芳;朱义红;肖科;黄富礼;钟利 刊期: 2017年第08期
目的 采用主动全身过敏试验(ASA)和被动皮肤过敏试验(PCA)以及血清样本效价测定,综合评价黄芪甲苷注射液对动物的致敏作用,为临床拟用的安全性提供参考.方法 ASA:选用豚鼠作为实验动物,0.4、1.6 mg/kg黄芪甲苷注射液间日致敏5次,末次致敏后11d,3倍剂量进行激发,观察30 min内动物过敏症状;PCA:选用大鼠作为实验动物,0.5、2.0 mg/kg黄芪甲苷注射液间日致敏5次,制备抗血清;将致敏血清稀释后sc给予另一批大鼠进行被动致敏,约48 h后激发,30 min后麻醉处死,观察皮肤过敏反应;间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测制备的抗血清中的抗体效价.结果 ASA:黄芪甲苷注射液在0.4、1.6 mg/kg剂量下各只豚鼠均未出现任何过敏反应,即过敏反应阴性;PCA:黄芪甲苷注射液0.5、2.0 mg/kg剂量下大鼠被动过敏反应均为阴性,血清样本中不存在针对黄芪甲苷的特异性抗体.结论 黄芪甲苷注射液体内ASA和PCA试验均无过敏反应,动物血清中不存在针对黄芪甲苷药物的特异性抗体,提示临床使用出现过敏反应的可能性较小.
作者:荆宝琴;张金晓;康玮;王磊;熊思敏;申秀萍 刊期: 2017年第08期
目的 探讨胃康宁颗粒与胃复春片治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变的临床效果.方法 将安阳市第三人民医院自2012年1月-2016年12月收治的CAG癌前病变患者85例作为研究对象,随机分为对照组41例和研究组44例,对照组给予胃复春片治疗,研究组给予胃康宁颗粒治疗,比较两组治疗前后的病理积分及临床疗效.结果 两组治疗后炎症、萎缩、肠化生积分均明显较治疗前减小,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组炎症、肠化生积分明显小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).研究组临床总有效率为90.91%,明显高于对照组的75.61%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 胃康宁颗粒治疗CAG癌前病变效果显著,尤其对炎症、肠化生等组织学变化有明显的改善作用,临床应用价值高.
作者:侯建明;杨改姣;宋永玲 刊期: 2017年第08期
高血压是一种临床常见的慢性心血管疾病,严重威胁患者身体健康.对于高血压的临床药物选择,众多医生见仁见智.为了解临床医生在高血压防治药物选择上的具体情况,特做此调研,旨在规范临床用药,提高用药合理性,造福患者.
作者:吴绍亮;李宝赛 刊期: 2017年第08期
欧洲药品局(EMA)于2017年3月公布了“证明用于局部并在胃肠道局部起作用的产品治疗等效性的等效性研究指导原则(草案)”,提出了对这类等效性研究的一般要求,详细地介绍了对作用于口腔和(或)咽喉、胃、肠道以及直肠等胃肠道不同部位的药物等效性研究的要求,重点介绍了临床试验替代方法-体外等效性试验和药动学生物等效性研究.介绍该指导原则主要内容,期望对我国这类仿制药和改剂型药疗效一致性评价思路和方法有启发.
作者:萧惠来 刊期: 2017年第08期
目的 探讨六味地黄丸联合二甲双胍治疗2型糖尿病肾阴亏虚的疗效.方法 选取120例2型糖尿病肾阴亏虚患者,随机分为两组,对照组(60例)口服二甲双胍片0.5g/次,3次/d,观察组在对照组治疗基础上,口服六味地黄丸大蜜丸1丸/次,2次/d.疗程均为4周.观察并记录两组临床疗效,治疗前后空腹血糖、餐后2h血糖水平、治疗前后总症状积分以及治疗期间不良反应情况,以此评价六味地黄丸联合二甲双胍治疗2型糖尿病肾阴亏虚的疗效.结果 观察组治疗有效率为88.3%,明显高于对照组的65.0%,差异有统计学意义(P<0.05).治疗前两组患者空腹血糖和餐后2h血糖水平相比,无统计学差异;治疗后两组空腹血糖和餐后2h血糖水平均下降,组内差异有统计学意义(P<0.05);且观察组空腹血糖、餐后2h血糖均低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组症状积分相比无统计学差异;治疗后两组总症状积分明显下降,组内差异有统计学意义(P<0.05);且观察组总症状积分低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗期间,对照组1例低血糖反应,观察组1例低血糖反应,1例轻度恶心,两组不良反应相比,无统计学差异.结论 六味地黄丸联合二甲双胍对2型糖尿病具有较好的治疗效果,能明显改善糖尿病的临床症状,降糖作用明显,药品安全性高,值得临床推广使用.
作者:冯蕾;李兴波 刊期: 2017年第08期
目的 建立用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定右旋糖酐铁中铅、镉、砷、汞、钴、钒、硒、钼8种重金属元素含量的分析方法.方法 通过检测波长考察,仪器参数优化,验证基体效应干扰,考察内标物校正干扰,测定8种重金属元素的含量.结果 内标法校正基体效应干扰,待测元素回收率由83%~90%提高为94%~100%,方法准确度良好,加标回收率在94.3%~101.5%,方法精密度良好(RSD<3.5%,n=6).各待测元素线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.22~8.54 ng/mL,定量限为0.68~25.73 ng/mL.结论 方法准确度高、灵敏度高、迅速可靠,可用于右旋糖酐铁中8种重金属元素含量的测定.
作者:马超;孟策;张彩霞;陈欣怡;王博;任晓文 刊期: 2017年第08期
目的 利用斑马鱼模型评价安宫牛黄丸防治脑血管疾病的药效.方法 辛伐他汀诱导斑马鱼脑出血模型,评价安宫牛黄丸脑出血保护作用;花生四烯酸诱导血栓模型,评价其血栓预防作用;辛伐他汀诱导微血管缺失模型,评价其促血管再生作用;用三氯化铝诱导阿尔茨海默病(AD)模型,评价安宫牛黄丸对AD斑马鱼运动障碍恢复作用和反应能力的改善作用.结果 与模型组比较,27.8、83.3和250 μg/mL安宫牛黄丸脑出血保护率分别为11%、41%和48%,83.3和250.0 μg/mL组脑出血发生率显著降低(P<0.001);与模型组比较,质量浓度为333和1 000 μg/mL的安宫牛黄丸斑马鱼心脏红细胞染色强度显著增加(P<0.001),111、333和1 000 μg/mL组的血栓预防率分别为5%、33%和64%;质量浓度为11.1、33.3和100.0 μg/mL的安宫牛黄丸斑马鱼肠下血管面积与模型组比较均显著上升(P<0.001),其促血管再生率分别为21%、25%和26%;质量浓度为111、333和1 000 μg/mL的安宫牛黄丸组斑马鱼运动速度与模型组比较均显著提高(P<0.05、0.01),其运动障碍恢复率分别为48%、88%、78%;安宫牛黄丸111、333和1 000 μg/mL反应能力改善率分别为15%、82%、75%,其中333和1 000 μg/mL组与模型组比较差异显著(P<0.05、0.01).结论 安宫牛黄丸能预防脑出血、预防血栓形成、重建血管微循环,对AD的运动功能障碍和反应能力具有改善作用.
作者:朱晓宇;郭胜亚;徐懿乔;杨华;李萍;李春启 刊期: 2017年第08期
目的 研究注射用脑蛋白水解物(Ⅰ)对血管性痴呆大鼠的神经保护作用机制.方法 采用改良两血管阻断法制备血管性痴呆(VaD)大鼠模型,假手术组仅分离颈总动脉不阻断血管.将大鼠随机分为假手术组、模型组、注射用脑蛋白水解物(Ⅰ)低、中、高剂量(5、10、20 mg/kg)组和脑蛋白水解物注射液(Cerebrolysin,阳性药,10 mg/kg)组.尾iv给药,每天1次,连续给药2周;假手术组和模型组给予等体积生理盐水.给药结束后,腹主动脉采血分离血清,分离大鼠皮层制备匀浆,ELISA法检测VaD大鼠血清中神经生长因子(NGF)和胰岛素样生长因子2(IGF-2)水平、皮层中γ-氨基丁酸(GABA)水平,比色法检测皮层中谷氨酸(Glu)水平.结果 与模型组比较,注射用脑蛋白水解物(Ⅰ)显著升高VaD大鼠血清中NGF、IGF-2水平、皮层中GABA水平,显著降低VaD大鼠皮层中Glu水平;其升高IGF-2和GABA水平的作用优于同剂量Cerebrolysin.结论 注射用脑蛋白水解物(Ⅰ)提高VaD大鼠学习记忆能力的作用机制,可能与升高机体NGF、IGF-2水平,调节兴奋性及抑制性氨基酸类神经递质平衡有关.
作者:景小龙;马莉;任雷鸣;侯衍豹;黄妍;孙双勇;刘静;申秀萍 刊期: 2017年第08期
侵袭与转移为恶性肿瘤的重要生物学特征,也是临床肿瘤治疗失败和高死亡率的重要原因,寻找安全有效的抗肿瘤转移药物已成为转化医学的一项迫切任务.中药单体成分姜黄素、贝母乙素、β-榄香烯等以其疗效确切、毒副作用小等优势,成为近年来抗肿瘤转移药物研究和开发的热点.综述了近年来中药单体成分抗肿瘤侵袭转移的研究进展.
作者:李春雨;王琪;申珅;李国霞 刊期: 2017年第08期
目的 探讨瑞芬太尼与芬太尼在小儿先天性心脏病介入手术麻醉中的效果.方法 80例小儿先天性心脏病患儿入院后被分为两组,对照组(40例)给予芬太尼麻醉,观察组(40例)给予瑞芬太尼麻醉,依据麻醉前后不同时间的收缩压(SDP)、舒张压(DBP)、心率(HR),两种麻醉药物的拔管时间、苏醒时间及麻醉用药量及麻醉期间患儿出现的不良反应情况,评价瑞芬太尼与芬太尼在小儿先天性心脏病介入手术麻醉中的效果.结果 与诱导前的基础值相比,麻醉药物诱导后两组SDP、DBP值均降低,组内比较差异有统计学意义(P<0.05);两组HR水平与诱导前的基础值相比,差异无统计学意义.观察组拔管时间、苏醒时间均短于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05);但观察组麻醉药物用量多于对照组,两组比较差异显著(P<0.05).麻醉期间,两组不良反应率相比,差异无统计学意义.结论 瑞芬太尼对小儿先天性心脏介入手术麻醉效果好,对心功能的影响较小,术后能早期拔管,副作用较小,是目前临床上一种理想的麻醉药物.
作者:范智芳;王川;许晓璐;吉丁奎 刊期: 2017年第08期
目的 研究盐酸氨溴索联合止咳平喘糖浆治疗小儿咳嗽的临床效果.方法 选择2012年1月-2015年12月在成都市龙泉驿区妇幼保健院进行诊治的咳嗽患儿200例,随机分为两组.观察组采用盐酸氨溴索联合止咳平喘糖浆治疗,对照组采用盐酸氨溴索治疗.两组均治疗2周.观察患儿治疗完成后的临床症状和临床表现,记录咳嗽好转时间及咳嗽消失时间,并进行治疗效果的判定,检测两组患儿的肺功能指标:呼气流量峰值、用力肺活量、一秒钟用力呼气量、50%肺活量大呼气流速与25%肺活量大呼气流速,并在治疗结束后,对所有患儿通过电话或门诊随访6个月,观察两组的复发率,并记录转变为哮喘的患儿例数.结果 观察组的咳嗽好转时间及咳嗽消失时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组的总有效率为93.00%,明显高于对照组的74.00%,差异有统计学意义(P<0.05).经过治疗后,两组的呼气流量峰值、用力肺活量、一秒钟用力呼气量、50%肺活量大呼气流速与25%肺活量大呼气流速均明显升高,统计治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且观察组的升高幅度明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).经过6个月的随访发现,对照组有22例患儿复发,复发率为22.00%;观察组有6例复发,复发率为6.00%,观察组患儿的复发率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组有14例患儿转变为哮喘,转变率为14.00%;观察组有2例患儿转变为哮喘,转变率为2.00%,观察组患儿的转变率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 盐酸氨溴索联合止咳平喘糖浆对小儿咳嗽具有较好的疗效,可以有效改善患儿的肺功能,降低复发率和哮喘转变率,具有较高的临床应用价值.
作者:杜春华;黎家金;廖全辉 刊期: 2017年第08期
目的 对比不同剂量阿托伐他汀对高脂血症合并2型糖尿病患者的调脂效果.方法 选择2014年1月-2016年12月在青海省心脑血管病专科医院诊治的高脂血症合并2型糖尿病患者140例作为研究对象,根据随机原则分为观察组与对照组各70例,对照组给予小剂量阿托伐他汀治疗,观察组给予大剂量阿托伐他汀治疗,都治疗观察4周.比较两组糖脂代谢指标,血脂指标及并发症情况.结果 观察组与对照组治疗后的血糖与糖化血红蛋白明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后的血糖与糖化血红蛋白值对比无明显差异.观察组与对照组治疗后的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)低于治疗前,高密度脂蛋白(HDL-C)高于治疗前,对比差异明显(P<0.05);同时治疗后观察组的TG、TC、LDL-C明显低于对照组,HDL-C明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后观察组与对照组的总有效率分别为95.7%和97.1%,两组对比差异无统计学意义;治疗后随访调查6个月,观察组的心律失常、心衰、心源性休克等并发症发生率为8.6%,对照组为27.1%,观察组明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 阿托伐他汀治疗高脂血症合并2型糖尿病患者具有很好的效果,特别是大剂量阿托伐他汀的应用具有更好的调脂效果,从而减少随访心血管并发症的发生,有很好的应用价值.
作者:张旭辉 刊期: 2017年第08期
目的 探讨柴枳夏及汤对实验性胆汁反流性胃炎(BRG)大鼠胃黏膜的保护作用及机制.方法 将Wistar大鼠按照体质量及性别以随机数字表法分为5组:对照组、模型组、铝碳酸镁片(阳性药)组和柴枳夏及汤低、高剂量(生药量12.77、25.54 g/kg)组,除对照组外,ig自制反流液制备大鼠BRG模型.观察对照组及模型组大鼠进食、大小便、毛色、体质量等;肉眼及HE染色后于光镜下观察胃窦黏膜病理组织学变化;ELISA法检测血清GAS及胃窦黏膜PGE2水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠出现排稀糊便、便中含红黄色黏液、反应迟钝、体质量显著下降(P<0.05)等特点;肉眼可见胃窦部点片状糜烂,有黄绿色胆汁及较多黄色黏液;胃窦黏膜出现大量炎性细胞浸润和肠上皮化生,炎症及肠上皮化生积分显著提高(P<0.01);GAS及PGE2水平明显下降(P<0.01);与模型组比较,柴枳夏及汤高剂量明显改善胃黏膜病理组织损伤形态;减轻炎性细胞浸润和肠上皮化生,显著降低积分(P<0.05、0.01);显著提高GAS及PGE2水平(P<0.0l).结论 柴枳夏及汤具有明显的保护胃黏膜的作用,其机制可能与调节血清GAS、胃窦黏膜PGE2水平有关.
作者:刘尧蓓;邹义龙;梁靓靓 刊期: 2017年第08期
目的 建立同时测定芍药苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、甘草酸含量的超高效液相色谱(UPLC)法,研究柴胡疏肝散水提物的肠吸收特性.方法 采用大鼠在体单向肠灌流和外翻肠囊实验模型,应用UPLC法测定柴胡疏肝散水提物中指标性成分(芍药苷、阿魏酸、芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和甘草酸)在不同时间点、不同部位肠道吸收量,计算吸收动力学参数,考察其肠吸收特征.结果 在体单向肠灌流模型结果表明,芍药苷、芸香柚皮苷、新橙皮苷、柚皮苷和甘草酸均为中等程度吸收的化学成分,而阿魏酸为完全吸收;外翻肠囊模型结果表明,芍药苷在空肠部位,阿魏酸、柚皮苷和新橙皮苷在十二指肠部位,芸香柚皮苷在十二指肠和空肠部位的吸收佳,而甘草酸在各肠段的吸收无显著性差异.结论 肠道对柴胡疏肝散中6种指标性成分均有吸收,阿魏酸较其他5种指标性成分更易透过肠壁进入血液循环;不同肠段对6种指标性成分的吸收具有选择性.
作者:刘洋;赵洋;于猛;贾红梅;马丽焱;邹忠梅 刊期: 2017年第08期
目的 探讨不同剂量左甲状腺素治疗老年亚临床甲状腺功能减退症的临床疗效及对血压的影响.方法 以2013年3月-2016年5月于旬阳县医院就诊的老年亚临床甲状腺功能减退症患者98例作为研究对象,平均分为A、B两组各49例,两组患者均使用左甲状腺素进行治疗.A组患者初始剂量为12.5 μg/d,B组患者初始剂量为25 μg/d,每两周增加剂量25μg/d,维持剂量50~150 μg/d治疗12周.比较两组患者临床疗效、甲状腺功能、血脂水平以及不良反应.结果 A组患者治愈率与总有效率分别为59.18%与87.76%,B组患者治愈率与总有效率分别为61.22%与91.84%,两组患者临床疗效差异不显著.治疗后两组患者甲状腺功能及血脂水平均优于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05).治疗4周后,B组患者甲状腺功能及血脂水平优于A组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗12周后,两组患者甲状腺功能及血脂水平差异不显著.A组总不良反应发生率为4.08%,明显低于B组的16.33%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 不同剂量左甲状腺素治疗老年亚临床甲状腺功能减退症疗效相当,大剂量组短期内改善甲状腺功能及血脂效果更好,但低剂量左甲状腺素不良反应较少,临床应根据患者情况采用合适剂量治疗.
作者:符宝林;符星 刊期: 2017年第08期
全新药物从临床前向临床推进的过程中,首次临床试验起始剂量的拟定是一个关键风险控制节点.生物制品与小分子药物存在不同的药理作用特点和毒性风险,在首次临床试验起始剂量的拟定上具有与小分子药物不同的考虑侧重点.重点阐述支持首次临床试验起始剂量拟定所需要的临床前研究信息;根据国内外的指导原则,介绍了基于毒性终点、药理终点、以及PK/PD模型进行起始剂量拟定的方法;通过回顾性分析,发现尽管毒性反应剂量法依然是传统保守的方法,但是对于具有免疫激发作用的生物制品更倾向于采用低预期生物效应剂量法.研究者应基于药物的特点,采用多种方法拟定首次临床试验起始剂量,选取合适安全的剂量,并加强与监管机构沟通与交流.
作者:闫莉萍;孙涛;王海学;王庆利 刊期: 2017年第08期
目的 探讨西黄丸联合紫杉醇和铂类新辅助化疗对晚期宫颈癌患者术后疗效的影响.方法 选取2014年1月-2017年1月安阳市第三人民医院收治的晚期宫颈癌患者80例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各40例,均择期行根治性子宫切除术,术后对照组予以紫杉醇+顺铂新辅助化疗方案,3周为1个疗程,治疗2个疗程;观察组在对照组基础上予以西黄丸2次/d,治疗6周.比较两组化疗有效率、生存率及复发率,测定两组化疗前后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)及免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平,应用卡氏评分表(KPS)、数字评分法(NRS)评价生活质量及癌痛度,记录不良反应.结果 观察组化疗有效率(87.50%)与对照组(77.50%)比较略高,但差异无统计学意义;观察组化疗后3、6个月生存率、复发率与对照组对比均无统计学差异;化疗后观察组CD3+ (72.39±1.47)%、CD4+ (37.62±1.17)%、IgA (11.11±1.34) g/L、IgG(1.23±0.45) g/L、IgM (2.60±0.46) g/L较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);观察组CD8+ (20.32±1.39)%低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后观察组KPS评分(78.49±1.45)分较对照组显著增加,而其NRS评分(1.20±0.11)较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).观察组不良反应发生率(7.50%)明显低于对照组(25.oo%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 西黄丸西黄丸联合紫杉醇和铂类新辅助化疗对晚期宫颈癌患者术后疗效较好,可改善其免疫功能、生活质量、疼痛度,减少不良反应,近期不会明显改善生存率及复发率,远期疗效需进一步研究.
作者:桑秀丽;刘国燕 刊期: 2017年第08期
目的 分析芪苈强心胶囊联合左西孟旦治疗充血性心力衰竭的疗效及对血清脑钠素N端前体肽(NT-proBNP)、同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响.方法 以2014年1月-2016年6月焦作市第五人民医院收治的92例充血性心力衰竭患者为研究对象,根据随机数字表法分为观察组和对照组,每组46例.对照组患者在常规治疗基础上加用左西孟旦,观察组在对照组治疗方案的基础上加用芪苈强心胶囊.比较两组的临床疗效、安全性,及治疗前后患者心功能和血清NT-proBNP、Hcy水平的变化.结果 观察组的总有效率高于对照组,但两组间差异无统计学意义.治疗结束后,两组的左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)均较治疗前显著升高,左室舒张末期内径(LVEDD)较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组的LVEF、SV显著高于对照组,LVEDD显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组的血清NT-proBNP、Hcy水平均较治疗前显著降低,组内差异有统计学意义(P<0.05);且观察组的血清NT-proBNP、Hcy水平显著低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义.结论 芪苈强心胶囊联合左西孟旦治疗充血性心力衰竭疗效显著,可有效改善患者的临床症状、心功能及血清NT-proBNP、Hcy水平,且安全可靠.
作者:杨静;李钰兰;贾百全 刊期: 2017年第08期
目的 采用普通48孔平底培养板结合悬滴培养法建立人结肠癌HT29细胞的三维培养模型,并通过比较选择适合三维培养的细胞活力检测方法.方法 以237.5、316.4、421.8、562.5、750.0、1 000.0/μL、每孔10μL的接种量接种HT29细胞于48孔平底培养板底面形成液滴,倒置培养2d形成细胞球,补充培养液后常规培养3d,通过倒置显微镜测量细胞球体积;采用酸性磷酸酶法(APH)、MTT法及CCK-8法(直接测定及消化后测定)测定细胞活力,比较不同检测方法的优劣.结果 HT29细胞以237.5~1 000.0/μL、每孔10μL悬滴培养能形成较为规则的细胞球,237.5~750.0/μL细胞球体移积与接种量呈良好的线性关系;APH法A值随细胞接种量增加而增大;MTT及CCK-8未经消化直接测定组A值随细胞接种量增大增加缓慢,消化后测定的A值-细胞接种量曲线与APH法相似,但细胞球消化操作复杂,且对细胞活力造成损伤.结论 采用48孔培养板悬滴法建立三维细胞培养模型,并结合APH法进行细胞活力检测,经济、准确、便于操作.
作者:林鹤;王婉秋;焦佳媛;杨昊珅;任利翔;邢立国 刊期: 2017年第08期