学术投稿

实时荧光定量PCR在EB病毒DNA检测中的应用

黎庆梅;陈辉;庄碧英

关键词:疱疹病毒4型, 人, 聚合酶链反应, 单个核细胞
摘要:目的 探讨实时荧光定量PCR技术在检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中EB病毒(EBV)DNA定量的临床应用,比较实时荧光定量PCR在检测血浆和PBMC中EBV DNA含量的差别,并研究EBV阳性患者的病种分布特点.方法 应用罗氏LightCycler 荧光定量PCR仪检测375例患者PBMC中EBV DNA含量,所有阳性患者均用血浆进行复查,比较其差别,并回顾性分析患者临床特点.结果 检测PBMC中EB阳性标本35例,阳性率为9.3%.阳性患者中鼻炎13例,鼻咽癌4例,鼻息肉4例,肺炎7例,急性淋巴细胞性白血病1例,传染性单核细胞增多症6例.取阳性标本检测其血浆游离EB DNA,33例阳性,其拷贝数低于相应标本中PBMC中的拷贝数.结论 实时荧光定量PCR技术检测PBMC和血浆中EB DNA准确,快速,在确诊EBV感染相关性疾病中具有重要的作用,且检测PBMC中EB DNA可能更优于检测血浆中EB DNA.
国际检验医学杂志相关文献
  • CyFlow Space流式细胞仪CD34+细胞绝对计数分析

    目的 比较在Partec CyFlow Space流式细胞仪上采用不同设门方法计数CD34+造血干细胞结果的差异.方法 采集经骨髓动员的患者外周静脉血标本30例,在分别采用同型对照设门法和国际血液治疗与移植工程协会(ISHAGE)推荐设门法设置流式细胞仪后进行标本测定.结果 两种设门法标本计数结果具有相关性(r=0.990),但ISHAGE设门法的计数结果低于同型对照设门法(P<0.05).回收试验显示,ISHAGE设门法计数不同细胞浓度标本的预期值与回收值的相关系数为0.998 9;对3种细胞浓度重复检测的变异系数为2.2%~3.8%.结论 两种设门法计数CD34+细胞的相关性较好,但ISHAGE设门法更能反映造血干细胞的特点,具有良好的准确度和精密度,且无需同型对照抗体,节约试剂,更适合临床常规使用.

    作者:杨玉琮;程小丽;陈葳;尤元义;李旭 刊期: 2011年第13期

  • 乙型肝炎病毒表面抗原与表面抗体同时阳性的血清学模式初步研究

    目的 分析乙型肝炎病毒感染者乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎表面抗体同时阳性的血清学模式与HBV DNA 的关系,并探究其原因及临床意义.方法 用酶联免疫分析法筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,用化学发光微粒子免疫分析法确认,用实时荧光定量聚合酶链反应检测其HBV DNA含量.结果 在选取的HBsAg和抗-HBs双阳性的56人中,共出现4 种HBV血清学模式:(1)HBsAg、抗-HBs、抗-Hbe、抗-HBc 阳性模式占42.8%,HBV DNA阳性率41.6%;(2)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc阳性模式占30.4%,HBV DNA阳性率70.5%;(3)HBsAg、抗-HBs、HBcAb阳性模式占25%,HBV DNA 阳性率21.4%.(4)HBsAg、抗-HBs、HBeAg 、抗-Hbe、抗-HBc阳性模式占1.8%,HBV DNA阳性率100%.56 例样本中,有27例血清HBV DNA 检测阳性,阳性率为48.2%.结论 HBsAg和抗-HBs 双阳性伴HBeAg阳性者,血清中有较高水平的HBV DNA.HBsAg 和抗-HBs 双阳性并不代表疾病好转.

    作者:王珍光;邓芝云;郭建巍;马骢;荣扬;刘敏 刊期: 2011年第13期

  • 某医院鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药性监测

    目的 了解2008~2010年本院鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 采用VITEK-60全自动细菌分析系统(法国梅里埃公司生产)及其配套试剂对阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验.结果 2008~2010年分离的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对多种抗菌药物的耐药性严重,对阿米卡星、氨苄西林、头孢唑啉、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢呋辛、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率达60%以上,铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、美罗培南的耐药率则比鲍曼不动杆菌要严重,在56%~64%之间,而后者在42%~56%之间.铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶的耐药率呈逐年递增趋势.结论 临床分离的多数鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌为多重耐药菌,碳青霉烯类抗菌药物与氨基糖苷类抗菌药物或与新一代氟喹诺酮类抗菌药物合用可作为用药参考,有利于降低耐药率.

    作者:黄源春;蔡应木;王佩芬;张娟;姚芬;谢燕璇 刊期: 2011年第13期

  • 尿毒症合并尿路细菌感染及药敏试验结果分析

    目的 了解尿毒症合并尿路细菌感染的病原菌的现状及体外耐药性,为临床提供诊断和治疗依据.方法 回顾分析尿毒症住院患者582例,其中39例合并尿路感染的临床资料.结果 尿毒症患者中段尿细菌培养阳性率为6.7%,以肠杆菌科19株(48.7%)和肠球菌属16株(41.0%)为主;肠杆菌科对β-内酰胺类抗菌药物耐药率较高(68%~100%),对哌拉西林/他佐巴坦、亚安培南耐药率低(5%);肠球菌属对万古霉素均敏感,对其他抗菌药物的耐药率较高(63%~100%).结论 尿毒症患者尿路细菌感染率高,且耐药严重;尿毒症患者注意预防尿路感染,合理使用抗菌药物.

    作者:刘晓强;黄松音;钟日辉 刊期: 2011年第13期

  • 108例新型甲型H1N1流感患者初诊实验室检测结果分析

    目的 探讨新型甲型H1N1 流感患者初诊实验室检测结果的特征.方法 收集该院2009年12月至2010年3月108例新型甲型H1N1 流感患者(核酸阳性)和34例季节性流感患者(核酸阴性)初诊实验室检测结果,并利用SPSS13.0软件对其进行统计分析.结果 108例新型甲型H1N1流感患者中,86.1%的患者外周血白细胞总数正常,11.1%的患者偏低,只有2.78%的患者偏高;36.1%的患者淋巴细胞计数低于正常值下限;7.4%的患者单核细胞、28.7%患者嗜碱性粒细胞计数值高于正常值上限.肝功酶类指标的检测结果分别为丙氨酸氨基转移酶(ALT)23.1%的患者、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)20.3%的患者、γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)22.2%的患者高于正常值上限.结论 分析新型甲型H1N1流感患者初诊时实验室检测结果的特征,有助于提高临床医生对本病流行特点以及首诊发热患者的监测和实验室检测结果特征的认识.

    作者:黄美群;郑卫东;方伟;罗燕飞;罗盈 刊期: 2011年第13期

  • 某型全自动尿液分析仪在门诊患者尿路感染快速诊断中的应用

    目的 探讨Sysmex UF-1000i全自动尿液分析仪(简称UF-1000i分析仪)细菌计数的准确度及在门诊患者尿路感染诊断中的价值.方法 测定仪器的重复性、线性、携带污染率;取疑为尿路感染门诊患者新鲜尿液标本105份,用UF-1000i分析仪测定,结合干化学结果,与尿细菌培养结果分析比较.结果 仪器的重复性、线性、携带污染率均在要求的范围内,UF-1000i分析仪细菌计数与尿细菌培养结果,差异有统计学意义(P<0.05).结合尿液白细胞计数,与培养结果符合率达到94.4%.结论应用UF-1000i分析仪进行尿液细菌计数结合白细胞计数结果,可用于尿路感染快速诊断,但不能完全取代尿细菌培养法.

    作者:钟日辉;黄松音;李文静 刊期: 2011年第13期

  • 毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增

    目的 利用毛细管液滴技术,发展一种集成DNA提取与扩增的乙型肝炎病毒分析方法.方法 利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性,向毛细管中先后引入油相和水相溶液,在表面张力作用下形成油包水液滴.顺序向毛细管中引入含有不同试样的液滴,完成进样、DNA结合、洗涤、洗脱,扩增等过程.微液滴不仅有效解决了样品蒸发和扩散问题,同时在操作中起到微阀和微混合器微功能.结果 利用上述毛细管液滴方法分析了乙型肝炎病毒的血清样品,通过优化DNA提取和扩增条件,毛细管液滴方法能在较短时间内高效纯化并扩增DNA.结论 上述方法具有简便快速和低成本的优势,有望发展成一种有潜力的微全核酸分析系统.

    作者:王维;刘大渔;梁广铁;雷秀霞;周小棉 刊期: 2011年第13期

  • 基于微型生化光谱分析仪测定血糖的干试剂研究

    目的 探索一种制备葡萄糖干试剂的方法,建立干试剂湿化学测定方法,为干试剂微型生化光谱分析仪的应用奠定基础.方法 将测定试剂工作液添加到微孔板的小孔内,每孔200 μL,用冷冻干燥的方法将试剂干燥,然后用水稀释测定样品,温浴10 min,用酶标仪进行比色测定.对冻干添加剂的种类及浓度进行了筛选,应用TBHBA替换酚试剂,增强显色灵敏度,将优化的方法与生化分析仪方法进行对比.结果 通过添加10 g/L清蛋白制备了复溶性和反应性都较好的葡萄糖干试剂,以TBHBA替代酚试剂,使灵敏度提高了4.6倍,增加稀释倍数,提高了反应速度,增加了线性范围,降低了检测限,优化的方法测定结果与全自动生化分析仪结果具有较好的一致性.结论 通过对方法的改进和改良,研制出了能有效测定血糖的干试剂,为干试剂微型生化光谱分析仪的应用奠定了基础.

    作者:王华忠;蒲晓允;吴杰红;李强 刊期: 2011年第13期

  • 3例跗线螨侵染男性肾脏引起血尿的临床分析

    螨虫侵入人体后极易引起脏器受损,多数侵入人体内螨虫随痰、粪便排出体外,少数未能排出体外者可导致人体患病.螨虫易侵染的部位常见于皮肤、肺、肠道,泌尿系统偶见.螨虫若侵入肾脏常导致患者出现血尿,易误诊为泌尿系感染[1].

    作者:仝连信;鞠传余;韩鹏飞 刊期: 2011年第13期

  • 冷链运输对体检人群血糖含量检测结果的影响分析

    目的 探讨冷链运输对体检人群血糖含量检测结果的影响.方法 采用全自动生化仪检测A、B两组体检人群血糖含量,A组人群采样后及时分离血清,1 h内完成检测;B组人群采样后4 ℃冷链运输箱保存,经4 h车程运回实验室后分离血清检测血糖含量.结果 两组体检人群的年龄、性别、血糖含量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 冷链运输4 h后检测的血糖值可以为体检所接受.

    作者:李黎 刊期: 2011年第13期

  • 鲍曼不动杆菌临床分离株的病区分布和耐药性分析

    目的 探讨鲍曼不动杆菌临床分离菌株的病区分布及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 分析本院2009年1月至2010年5月各主要临床科室送检标本中分离的鲍曼不动杆菌菌株的病区分布及耐药性.结果 临床分离菌株主要分布在重症监护病房(33.3%),呼吸道标本检出率高(90.0%);临床分离菌株对常用抗菌剂均耐药.结论 鲍曼不动杆菌在重症监护病房的感染情况为严重,分离自重症监护病房送检标本的菌株耐药率高于其他科室.监测鲍曼不动杆菌的耐药性、采取相应防范措施对预防鲍曼不动杆菌的感染具有重要的临床意义.

    作者:罗丹 刊期: 2011年第13期

  • 重症监护病房嗜麦芽窄食单胞菌临床感染及耐药性分析

    目的 通过了解嗜麦芽窄食单胞菌在重症监护病房的感染情况和耐药性,为防止其感染和合理指导临床用药提供依据.方法采用法国生物梅里埃ATB半自动细菌分析系统对该院重症监护病房2007年1月至2010年12月分离的嗜麦芽窄食单胞菌进行鉴定和手工药敏分析.结果 86例嗜麦芽窄食单胞菌对氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢唑林等多种抗菌药物耐药,但对复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氧氟沙星耐药性较低.结论 嗜麦芽窄食单胞菌出现多重耐药性,且重症监护病房的感染有上升趋势.临床上应对嗜麦芽窄食单胞菌的耐药高度重视,以减少其感染的机会.

    作者:翁秋青;黄永青;刘桂荣 刊期: 2011年第13期

  • D-二聚体与同型半胱氨酸联合检测在急性脑血管病诊断中的价值

    目的 探讨D-二聚体与同型半胱氨酸(Hcy)联合检测在急性脑血管病(ACVD)诊断中的价值.方法 对116例ACVD患者和50例健康者用全自动血凝分析仪测定D-二聚体,用全自动生化免疫分析仪测定Hcy.结果 急性期ACVD患者D-二聚体和Hcy含量明显升高(P<0.05);脑出血和脑梗死患者比较,D-二聚体和Hcy差异无统计学意义(P>0.05).结论 血浆D-二聚体和Hcy联合检测,可为ACVD的诊断提供快速、准确的诊疗依据.

    作者:赫艳梅;张玉香;张喜梅;陈瑞轩 刊期: 2011年第13期

  • 抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA对大鼠肝纤维化的影响

    目的 观察抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA(CTGF siRNA)对大鼠肝纤维化肝脏功能及肝纤维化指标的影响.方法 雄性SD大鼠30只,随机分成5组,即空白对照组、模型组、治疗组、预防组及晚期治疗组,检测各组肝功能及肝纤维化指标,并对肝脏进行组织学检测.结果 与模型组相比,预防组及治疗组肝组织炎症、坏死及纤维化明显减轻,血清氨基转移酶、总胆红素、肝纤维化指标水平降低,清蛋白升高(P<0.05).晚期治疗组与模型组相比肝组织炎症、坏死及纤维化减轻,血清、总胆红素、肝纤维化指标水平降低,清蛋白升高(P<0.05).结论 经尾静脉注射抗CTGF siRNA可有效防治大鼠肝纤维化,改善大鼠肝脏功能,且对已发生的肝纤维化也具有一定的疗效,提示抗CTGF siRNA将成为抗肝纤维化治疗的新策略.

    作者:毛小荣;陈红;岳伟;薛苗 刊期: 2011年第13期

  • 新型hGLP-1基因对β-TC-6胰岛瘤细胞凋亡的影响

    目的 探讨新型人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)类似物基因(2×Val2-hGLP-1)对四氧嘧啶(AXN)诱导凋亡的β-TC-6胰岛瘤细胞株的影响.方法 脂质体介导重组质粒pIRES2-EGFP/2×Val2-hGLP-1转染β-TC-6胰岛瘤细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP),酶联免疫吸附法(ELISA)检测目的蛋白表达;以AXN诱导细胞凋亡后观察细胞形态,Hoechst染色及四甲基偶氮唑盐光吸收法(WST-1)检测目的基因表达对细胞凋亡的影响.结果 荧光显微镜观察到GFP表达;ELISA显示重组质粒转染组细胞培养液吸光度值为(2.53±0.05),高于其他研究组(P<0.05);细胞形态观察及Hoechst染色显示,AXN可诱导β-TC-6细胞凋亡;WST-1显示转染重组质粒的细胞组存活率为66.23%,高于其他研究组(P<0.05);Hoechst染色显示,经重组质粒转染的细胞凋亡减少.结论 2×Val2-hGLP-1的表达对胰岛β细胞凋亡具有一定抑制作用,为糖尿病基因治疗提供了相关试验研究基础.

    作者:黄常洪;李晓丽;代国知;廖晓梅;袁红霞 刊期: 2011年第13期

  • X蛋白的研究进展

    乙型肝炎病毒(HBV)感染引起的乙型肝炎已成为全球范围的严重公共卫生问题之一,HBV感染人群往往成为肝硬化和肝癌的高发人群.由于X蛋白可通过直接和间接的方式作用于病毒和宿主细胞,与乙型肝炎和肝癌的发生、发展有着密切的关系,从而成为近年来的研究热点.本文就近年来国内外对于X蛋白结构及生物学功能等的相关研究做一综述.

    作者:潘颖 刊期: 2011年第13期

  • 黏质沙雷菌β-内酰胺酶的分类检测

    目的 探讨黏质沙雷菌(SM)产各种β-内酰胺酶(β-lase)的分布情况.方法 采用头孢硝噻吩试验检测32株SM所产β-lase,多底物纸片法(协同法、拮抗法)、AmpC酶检测法分类检测其所产各种β-lase.结果 32株SM菌株中,5株药敏试验全敏感(非产酶菌),27株至少对1种β-内酰胺类抗菌剂耐药,且该27株头孢硝噻吩试验阳性,即产β-lase,总产酶率84.4%(27/32);27株产酶菌中,2株产青霉素酶,22株产广谱酶,3株产ESBLs(2株单产ESBLs,1株复合产ESBLs和AmpC),未检出产头孢菌素酶、产碳青霉烯酶菌株.结论 SM产β-lase比例较高,且多数为产广谱酶菌株.

    作者:傅冬梅 刊期: 2011年第13期

  • 计算机辅助精液分析的质量控制

    精液分析是判断和评估男性生育能力重要和基本的检测方法,在生殖医学、优生优育、计划生育、泌尿男科等临床和科研中具有广泛应用价值[1].随着计算机技术的飞速发展,计算机辅助精液分析技术越来越普及,其相关的质量控制工作也越来越重要.精液分析的检测结果受分析前、分析中和分析后各环节的多种因素影响[2].

    作者:吴希国;刘秀珍;陈大力 刊期: 2011年第13期

  • 某地区乙型肝炎病毒基因型检测及其与患者肝功能的关系分析

    目的 探讨甘肃地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型与患者肝功能的关系.方法 采用荧光PCR法检测532例慢性HBV感染者的HBV基因型并同时测定其肝功能.结果 532例不同临床类型慢性HBV感染者中,B型168例(31.58%),C型320例(60.15%),B/C混合型32例(6.02%),未分型12例(2.25%).甘肃地区慢性HBV感染者中,以C基因型为主,其次为B基因型,部分以B/C混合型存在.感染C基因型者的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素水平均高于B型感染者,但差别无统计学意义,但其清蛋白水平低于B型感染者,差异有统计学意义(P<0.01).结论 甘肃地区病毒性肝炎以C基因型为主,以C基因型为主,其次为B基因型,部分以B/C混合型存在.

    作者:李彩东;吴斌;田鹏飞;段正军 刊期: 2011年第13期

  • 校准品与理论K值在血清酶测定中的应用比较

    目的 探讨校准品校准与理论K值校准血清酶测定结果的差异.方法 采用相同的生化分析仪和试剂,在进行校准品校准和理论K值校准后对相同标本进行检测.结果 校准品校准血清酶测定结果与理论K值校准测定结果比较差异有统计学意义(P<0.05);校准品校准测定结果更接近靶值.结论 在血清酶检测工作中,不能机械套用理论K值,而应用校准品进行校准定标.

    作者:李鹏宇;陈激扬 刊期: 2011年第13期

国际检验医学杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心