学术投稿

小鼠髓源性树突状细胞的体外扩增及生物学特性的鉴定

余昆;苟欣;周青松;杨华安;仲伟营;夏阳

关键词:树突细胞, 抗原P150, 95, 免疫耐受, 小鼠
摘要:目的 以小鼠骨髓细胞为前体,建立一种高效、简便的体外扩增、分离培养树突状细胞(DC)的方法 .方法 实验分为GM/4组和GM/4-α组,以重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组鼠白介素-4(rmIL-4)对小鼠骨髓细胞联合诱导培养,GM/4-α组在第5天添加rmTNF-α继续培养48 h,GM/4组不加并于第5天时终止培养;分别收集第5天、第7天的悬浮及疏松贴壁细胞,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞表面分子,同种异体混合淋巴细胞反应(MLR),检测2组细胞刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 所收集的2组细胞均具有典型DC形态,细胞表面高表达小鼠髓源性DC相对特异性标志CD11c,表达率达75%以上;GM/4组DC细胞表面CD40、CD86、MHC-Ⅱ的表达率分别为30.5%、34.2%、45.1%,GM/4-α组则分别为78.7%、88.3%、96.7%;MLR中GM/4组DC刺激同种异体T细胞活化增殖的能力不如OM/4-α组强.结论 此种方法 能于体外定向诱导和扩增出大量髓源性DC,这为后续研究DC在器官移植后诱导机体免疫耐受的机制奠定了基础.
国际检验医学杂志相关文献
  • CYP3A5和多重耐药基因1多态性对肾移植患者他克莫司药代动力学参数的影响

    目的 探讨细胞色素P450,家族3,亚家族A,多肽5(CYP3A5)基因和多重耐药基因1(MDR1)C3435T多态性对肾移植患者他克莫司药代动力学参数的影响,在基因水平为临床合理用药提供参考.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和限制酶切片长多态性(RFLP)方法 对63例肾移植术后患者进行CYP3A5和MDR1基因分型.移植手术1个月后进行血药浓度测定和药代动力学参数计算.结果 携带CYP3A5*1基因型肾移植患者的剂量校正曲线下面积(AUC0-t)明显低于CYP3A5*3*3型患者,在随后对上述2 组不同CYP3A5基因分型的患者进行MDR1的C3435T基因多态性分型研究表明,MDR1 C3435T基因多态性对他可莫司的药代动力学参数无明显影响.结论 CYP3A5基因多态性与他可莫司药代动力学参数相关,携带CYP3A5*1基因型肾移植患者比CYP3A5*3*3型患者需要较高的剂量才能达到目的 浓度;而在影响他可莫司药代动力学参数的因素中MDR1 C3435T基因多态性不是重要因素.药代动力学参数的测定有利于器官移植患者剂量选择及个体化用药治疗.

    作者:罗儒超;聂新民;李伟芳;桂嵘;黄竹英;朱利军 刊期: 2010年第06期

  • 茂名市无偿献血人群血液检测情况分析

    目的 了解茂名市无偿献血人群血液检测情况,为献血者的招募及血液初筛检测方案的制定提供科学依据.方法 对无偿献血者进行HBsAg初筛;初筛合格者血液样本采用双人、双试剂进行ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和梅毒抗体的初检与复检.结果 HBsAg初筛检测不合格率由高到低依次为计划献血人群、志愿献血人群、互助(应急)献血人群.血液初复检不合格率由高到低依次为ALT、抗-HCV、HBsAg、梅毒抗体、抗-HIV;女性献血者ALT不合格率显著低于男性(P<0.01);学生与军人ALT不合格率显著低于其他职业人群(P<0.01).结论 坚持HBsAg初筛并选择性进行ALT初筛,能显著降低血液的报废率.

    作者:高艳;陈志强;麦永平;范章平;陈桃;吴剑云;刘旭坚 刊期: 2010年第06期

  • HPV L1壳蛋白在宫颈病变中的表达及与HR-HPV DNA的关系

    目的 研究人乳头瘤病毒(HPV)L1壳蛋白在宫颈病变中的表达及与高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA的关系,为宫颈病变的早期诊断提供预测指标,为HPV疫苗的研制提供理论依据.方法 采用免疫细胞化学方法 和第二代杂交捕获法(HC-Ⅱ),分别检测272例女性HPV L1壳蛋白的表达和高危型HPV(HR-HPV)病毒载量,组织活检复查宫颈病变情况.结果 HR-HPV DNA感染者中,随着宫颈病变级别(CIN I及以上)的升高,HPV L1壳蛋白阳性表达率增高(χ2=35.176,P<0.001),HPV L1壳蛋白诊断CIN Ⅱ及以上的灵敏度为89.77%,特异度为45.12%;按年龄分层后,HPV L1壳蛋白表达与宫颈病变的OR均小于1;小于35岁研究对象中,病毒载量与HPV L1壳蛋白阳性表达率之间存在剂量反应关系(χ2=12.915,P<0.001).结论 HPV L1壳蛋白的缺失与宫颈癌及癌前病变的发生、发展密切相关,年轻女性HPV L1壳蛋白的表达与HPVDNA载量存在剂量反应关系.

    作者:姜晓曼;黄民主;张志魁;郑宝文;朱庆义;李洪波 刊期: 2010年第06期

  • 代谢综合征患者血清淀粉样蛋白A水平与胰岛素抵抗的关系

    目的 探讨代谢综合征患者血清淀粉样蛋白A水平与胰岛素抵抗的关系.方法 对40例代谢综合征患者身高、体重、腰围、SBP及DBP进行测量,同时测定血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)等生化指标,并与30例健康体检者进行对比分析.结果 代谢综合征组血清SAA、HOMA-IR水平明显高于健康对照组(P<0.01),除年龄、身高,TC、LDL-C外,其余各指标两组比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).血清SAA与体重、BMI、腰围、收缩压、LDL-C、FINS、HOMA-IR呈正相关,与HDL-C呈负相关.结论 SAA水平的检测可能是早期发现代谢综合征高危人群的手段之一.

    作者:胡必成 刊期: 2010年第06期

  • 肝豆状核变性分子生物学研究进展

    肝豆状核变性(HLD)又称Wilson病(WD),是常染色体隐性遗传的铜代谢障碍病.该病常起病于青少年时期,临床表现复杂多样.WD基因的成熟mRNA编码1个含1 411个氨基酸残基的蛋白质,即一种P型铜转运ATP酶(ATP7B),参与铜的跨膜转运.所有WD患者都有ATP7B基因突变.目前国际上已被检测的有300多种突变.WD 临床表现的复杂性给临床诊断带来较大困难,迫切需要建立准确、快速的分子诊断方法 ,并进行症状前诊断或产前诊断.

    作者:蔡美英 刊期: 2010年第06期

  • 酗酒青壮年血清细胞因子的变化及意义

    目的 研究长期酗酒青壮年血清细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-8以及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化.方法 采集门诊体检的酗洒青壮年血样30例,无酗酒嗜好的健康青壮年血样20例,用ELISA方法 定量检测血清IL-6、IL-8以及TNF-α的水平,观察两组细胞因子的变化.结果 30例酗酒青壮年血清IL-6、IL-8以及TNF-α的水平分别为(-x±s)(0.307±0.144)mg/L、(3.207±1.477)mg/L、(0.321±0.105)mg/L;20例非酗酒青壮年血清IL-6、IL-8以及TNF-α的水平分别为(0.205±0.121)mg/L、(2.323±0.756)mg/L、(0.246±0.099)mg/L.两组血清细胞因子水平差异有统计学意义(P<0.05).结论 长期酗酒青壮年血清细胞因子水平明显高于无酗酒嗜好的健康青壮年血清细胞因子.

    作者:王国戗;牛菊霞;艾敏 刊期: 2010年第06期

  • 铜绿假单胞菌主动外排表型及OprM基因检测

    目的 对淮北地区铜绿假单胞菌主动外排表型及OprM基因存在情况进行分析,探讨铜绿假单胞菌多重耐药的主动外排分子机制.方法 采用外排泵抑制剂碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)对铜绿假单胞菌环丙沙星(CIP)敏感性的逆转试验,筛选铜绿假单胞菌主动外排表型阳性菌;采用PCR法扩增主动外排表型阳性菌的OprM基因.结果 在CCCP作用下,36株铜绿假单胞菌中有24株菌对CIP的敏感性提高4倍以上,主动外排表型阳性率为66.7%(24/36);在OprM基因的PCR扩增试验中,有16株(44.4%,16/36)扩增出848 bp的OprM基因片段.结论 主动外排表型在临床铜绿假单胞菌中广泛存在;OprM基因在铜绿假单胞菌主动外排菌中常见.

    作者:张鹏;姚慧琳 刊期: 2010年第06期

  • Fox转录因子家族在正常和胆道结扎小鼠肝脏中的动态表达

    目的 研究Forkhead盒(Fox)转录因子在正常和肝胆管结扎致纤维化的Balb/c小鼠肝脏中的动态表达.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常Balb/c小鼠肝脏中包括Foxo1、Foxo3、Foxm1、Foxl1等18个Fox转录因子的表达,并用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肝胆管结扎后Balb/c小鼠肝脏中9个炎症和增殖相关性Fox转录因子的mRNA动态变化.结果 18个Fox转录因子基因在正常Balb/c小鼠肝脏中均有表达,且以Foxo1和Foxo3表达高;肝胆管结扎后Foxo1表达显著下调,而Foxol1和Foxm1表达显著增高.结论 肝胆管结扎致纤维化的Balb/e小鼠肝脏中,炎症和增殖相关性Fox转录因子的动态改变提示Fox转录因子可能参与肝纤维化的发生.

    作者:杨双双;黄世峰;张莉萍 刊期: 2010年第06期

  • 耦联因子6对糖尿病血管病变的研究进展

    耦联因子6(CF6)是线粒体ATP合成酶的1个亚基,存在于血管内皮细胞膜上.通过不同的途径引起前列环素合成受抑、NO释放减少、动脉粥样硬化因子增加,造成血管内皮功能异常,在血管相关性疾病(如高血压、冠心病)中扮演关键角色.近年来发现,糖尿病患者体内CF6明显升高,导致糖尿病血管病变.现简要综述CF6的结构功能、信号转导系统对精尿病及血管病变的作用.

    作者:王艳 刊期: 2010年第06期

  • 1 352例石化职工血清α1-抗胰蛋白酶浓度观察

    目的 观察石油化工企业大气污染对企业职工α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)浓度的影响.方法 将石化体检者按工作年限分组,Ⅰ组(<10年)291例,年龄22~35岁,Ⅱ组(10~20年)634例,年龄33~45岁.Ⅲ组(>20年)427例,年龄44~55岁.正常对照组根据石化体检者的分组情况按年龄<35岁、35~45岁、>40岁分组,所有血清样本在全自动生化分析仪七检测α1-AT含量,观察不同组间结果 的差异.结果 Ⅰ组中石化体检者α1-AT结果 为2.58±0.38 g/L,P>0.05,与对照组差异无统计学意义,Ⅱ组和Ⅲ组α1-AT结果 分别为2.02±0.43 g/L和1.72±0.41 g/L,P<0.05,与对照组差异有统计学意义.同时,石化体检者不同工作年限Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间血清α1-AT结果 差异有统计学意义,P<0.05.而正常对照不同年龄组α1-AT结果 间差异无统计学意义,P>0.05.结论 石油化工厂在进行石油冶炼过程中排放的二氧化氮、烯烃、链烷、醇、羰基等有害物质,对人体的α1-AT含量产生了一定的影响,石油化工企业在积极治理厂区大气环境污染的同时,对职工定期监测α1-AT含量,及时采取一定的治疗手段,对降低肺部疾病的发病率有着重要意义.

    作者:向长港;祝莉 刊期: 2010年第06期

  • Cks1与肿瘤的研究现状

    Cks1是Cks蛋白家族的成员之一.它是高度保守的小分子蛋白,可参与正常的细胞周期调控.在多种人类肿瘤中,Cks1的表达水平增高,且与肿瘤恶性程度和预后密切相关.现就Cks1与人类肿瘤的研究现状作一综述.

    作者:詹家贵 刊期: 2010年第06期

  • 164株念珠菌培养与药敏分析

    目的 了解女性外阴阴道的感染情况.研究临床分离的真菌种类及其对药物的敏感性.方法 对1 184例标本进行回顾性分析,其中164例阳性标本的菌株用API真菌鉴定板条(API 20C AUX)鉴定,用Rosco纸片法对制霉菌素、益康唑、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、两性霉素、克霉唑、氟康唑、氟胞嘧啶进行药物敏感性试验.结果 164例共有8个种,以白色念珠菌为主,占67.1%.各种念珠菌对9种抗真菌药物均有不同程度的耐药.结论 白色念珠菌仍然是妇产科真菌感染主要菌种.氟胞嘧啶与两性霉素是治疗妇产科深部真菌病的首选药物.各种念珠菌对临床上常用抗真菌药物的敏感性具有明显不同,对于合理使用抗生素,减少真菌感染,特别是耐药菌株感染的发生有着重要的意义.

    作者:胡记妹;禢永洲 刊期: 2010年第06期

  • 尘螨粗提浸液致敏小鼠的方法学研究

    目的 建立尘螨过敏性哮喘小鼠模型,比较不同致敏方式在相同尘螨粗提浸液(CDM)激发下的结果 ,评价CDM哮喘模型.方法 C57BL/6小鼠随机分成5组,各组分别采用不同的致敏程序致敏,试验第15~18天采用相同剂量与方式的CDM浸液激发.对照组致敏与激发均以磷酸盐缓冲液替代过敏原.从症状、肺泡灌洗液(BALF)的白细胞介素(IL-4)与干扰素-γ(IFN-γ)水平及细胞计数与肺组织病理方面进行评估.结果 各模型组从症状,组织病理,BALF细胞计数、分类(细胞总数增加,其中嗜酸性粒细胞所占比例增大,与对照组比较,P<0.05)及细胞因子检测(IL-4与对照组比较,P<0.05)等均表现出了过敏性哮喘的特点.但是模型组间细胞因子差异无统计学意义.结论 各模型组均能够建立小鼠过敏性哮喘模型,证明了CDM的免疫耐受与常规过敏原不同,同时验证了抗原间可能存在协同作用.

    作者:孔存权;彭霞;白萍;李莉 刊期: 2010年第06期

  • 德宏地区地中海贫血社区群体筛查和基因诊断

    目的 了解德宏地区地中海贫血(简称地贫)检出率和基因缺失突变类型.方法 先以红细胞指数、微量血红蛋白电泳、HbA2定量等进行初筛,然后以PCR和反向点杂交技术鉴定β-地贫基因突变类型;以跨跃断裂位点PCR(GAP-PCR)技术和凝胶电泳鉴定α-地贫基因缺失类型,后再对所有β-地贫阳性样本进行α-地贫基因检测.在选定的先证者所能寻找到的家族成员中采集血样,直接检测基因类型并展开家系调查.结果 3 018例受检者中检出α-、β-地贫阳性848例,总检出率为28.10%,其中α-地贫554例(18.36%)、β-地贫385例(包括HbE 375例)检出率为12.76%;β-地贫复合α-地贫检出率为22.60%;在4例家系调查先证者的56例家族成员中检出阳性44例(78.5%).结论 跨跃断裂位点PCR和反向点杂交技术能快速检测3种常见缺失型α-地贫和β-地贫基因突变,具有简便、快捷和准确的特点;德宏地区是我国地贫特别高发地区,需加强婚前检查及产前诊断.

    作者:杨艳秋;葛世军;番云华;刘厚昌;杨必清;王冠;禹祖祥;陈祖聪;尹兆清;罗祥美 刊期: 2010年第06期

  • 湿涂片法和革兰染色法在妊娠期无症状细菌性阴道病诊断中的比较研究

    目的 比较湿涂片法和革兰染色法在妊娠期无症状细菌性阴道病诊断中的应用价值.方法 普查本院2006年9月至2009年1月期间妇产科门诊参加孕前检查无症状妊娠期患者.将临床常用诊断法(阴道分泌物pH值、吹气试验和线索细胞等3项标准中有2项为阳性)与革兰染色诊断法(Nugent标准下细菌性阴道病为7~10分)相比较.结果 受试者的群体特征包括:入选孕妇平均为(27.3±6.6)周龄,其中26例为未产妇,受试时的平均孕龄为(15.6±7.6)周.其中27%(18/67)用革兰染色法确诊为细菌件阴道病(bacterial vaginosis,BV).使用革兰染色法作为诊断细菌性阴道病的标准,常规诊断法(即湿涂片法)灵敏度为56%(95%可信区间为32%~78%),特异性为96%(95%可信区间为90%~100%),阳性预测值为83%,阴性预测值为85%.结论 在无症状妊娠期患者中,可用革兰染色法对细菌性阴道病进行可靠诊断.

    作者:金爱群;湛东进 刊期: 2010年第06期

  • 建立BCR-ABL逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病模型的实验条件优化

    目的 探讨构建BCR-ABL逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病模型佳实验条件,以简化实验过程、节约成本并提高建模成功率.方法 不同剂量5-氟脲嘧啶(5-FU)注射受体鼠后观察骨髓中原始细胞占有核细胞百分比;纤维连接蛋白(FN)铺板后观察逆转录病毒感染效率的变化;分别用不同数量的骨髓细胞(0.2~0.6)×106个进行移植后通过形态学观察和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)鉴定移植小鼠成模状况.结果 研究剂量范围内5-FU量不影响骨髓原始细胞相对数量;纤维连接蛋白铺板后可使活细胞数量增加30%~50%,感染效率提高10%~20%;移植0.5×106个成功感染了BCR-ABL逆转录病毒的供体鼠骨髓细胞入受体小鼠即可成功建模.结论 优化后的实验条件简化了程序,节约了成本,大大提高了建模成功率,为相关研究提供了良好的实验参考.

    作者:张文萍;韩红星;杨燕;陈荣贵;单万水 刊期: 2010年第06期

  • 探讨血VEGF、PAPP-A、D-D和尿NAG/Cr对妊娠高血压综合征的临床意义

    目的 探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者血管内皮生长因子(VEGF)、血清妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)、D-二聚体(D-D)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甙酶/肌酐(NAG/Cr)比值的变化及意义.方法 通过检测92例PIH患者和35例健康妊娠孕妇PAPP-A、VEGF、D-D和NAG/Cr的水平,分析其与PIH的关系.结果 妊娠高血压综合征患者VEGF水平显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且随着病情的加重而显著降低,而PAPP-A、D-D、NAG/Cr水平显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);且随着病情加重PAPP-A、D-D、NAG/Cr水平显著增高.结论 VEGF、PAPP-A、D-D、NAG/Cr与PIH的发生、发展密切相关,动态监测其水平变化对于PIH患者的病情判断、临床治疗均有重要意义.

    作者:潘秋荣 刊期: 2010年第06期

  • DNA损伤与细胞衰老关系的研究进展

    细胞衰老是生物衰老的基本单位,是人类老年病发病的共同基础.它受到多种因素的影响,有自身遗传因素的影响,也有环境因素的影响.近年对衰老机制的研究已进入基因时代,细胞内DNA损伤积累是衰老过程中先提出的机制,DNA损伤与细胞衰老是现代生物学研究的热点.DNA不断地被外源性和内源性因子损伤,如果损伤持续,它能引起DNA复制或翻译错误,从而导致点突变或染色体重排及经由各种信号途径引起应激反应,引起细胞衰老.本文将就DNA损伤与细胞衰老的关系的研究进展作一综述.

    作者:李文瑞;刘新光 刊期: 2010年第06期

  • 可溶性转铁蛋白受体结合红细胞参数对儿童不同基因型β-地中海贫血的诊断价值

    目的 探讨可溶性血清转铁蛋白受体(sTfR)和红细胞参数检测在不同基因型β-地中海贫血(β-地贫)儿童中的诊断价值.方法 对选取的20例β-地贫杂合子(β+-地贫)、44例β-地贫双霞杂合子(β0-地贫)、3例α-合并β-地贫、38例缺铁性贫血(IDA)患儿以及54例健康儿童血清sTfR以及红细胞参数(RBC、Hb、MCV、Hct、MCFI、MCHC、RDW)进行检测和统计学分析,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析评价sTfR在儿童β-地贫和IDA的诊断价值,并结合红细胞参数探讨其对不同基因型β-地贫患儿的诊断价值.结果 1)各病例组间及其与健康对照组sTfR的差异具有统计学意义(P<0.05).2)β+-地贫组RBC数明显高于其他各组(P<0.01),血红蛋白(Hb)和红细胞压积(Hct)与健康对照组相近(P>0.05,下同)但明显高于β0-地贫与IDA 组(P<0.01),而平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)与β0-地贫组、IDA组相近但明显低于健康对照组(P<0.01),红细胞分布宽度(RDW)与IDA组相近,明显高于健康对照组而低于β0-地贫组(P<0.01).结论 血清sTfR可以作为评价β-地贫基因变异程度的有用指标,sTfR结合血常规红细胞参数可以对儿童β0-地贫和β+-地贫作出初步诊断.

    作者:伍绍国;黄钰君;区小冰;张力;华亮;佟莉贞 刊期: 2010年第06期

  • 血氨检测的临床适应证及其价值探讨

    目的 探讨血氨检测的一些临床适应病症并对其临床价值作一分析.方法 采用干化学法检测血氨浓度.结果 各型病毒性肝炎、肝门胆管癌、肝癌和健康对照组相比,血氨的检测结果 明显偏高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血氨检测可作为一些肝病、癌变、消化道出血等患者的主要检测指标,有助于病情的监测.

    作者:盛大平;徐元宏;李涛;王中新;沈继录;凌华志 刊期: 2010年第06期

国际检验医学杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心