学术投稿

SiRNA四种制备技术的介绍

阚学峰;高英堂;杜智

关键词:RNA干扰, 双链RNA, 基因抑制
摘要:RNA干扰是一种转录后基因沉默现象,大量研究证明siRNA可有效触发RNA干扰,现主要介绍siRNA的四种合成技术.
国际检验医学杂志相关文献
  • SiRNA四种制备技术的介绍

    RNA干扰是一种转录后基因沉默现象,大量研究证明siRNA可有效触发RNA干扰,现主要介绍siRNA的四种合成技术.

    作者:阚学峰;高英堂;杜智 刊期: 2004年第04期

  • 血清前S1蛋白在乙型肝炎病毒感染中的临床意义

    目的分析前S1蛋白与其他HBV检测指标的关系,并探讨其相应的临床意义.方法采用ELISA方法对住院患者进行血清前S1蛋白检测,比较不同HBV指标组合模式中的前S1蛋白变化.结果 HBV高复制组(HBeAg、HBV DNA、HBcAb IgM阳性各组)中血清前S1蛋白阳性高,低复制组相对低.HBsAg、HBsAb阳性(18)及HBsAg、HBsAb、HBeAb阳性(7)和仅HBsAg阳性(21)患者中,其前S1蛋白均阴性.前S1蛋白阳性亦见于HBsAb阳性的大三阳(3/12)、HBsAb阳性的小三阳(5/20)、HBsAg、HBsAb、HBcAb阳性(1/3)和仅HBsAb阳性(1/439)及仅HBcAb阳性(1/3)患者中.结论血清前S1蛋白不仅是一反映HBV复制状态和传染性的指标,而且还可能反映HBV颗粒状态和隐匿性HBV感染.

    作者:金磊;董惠芳;郭永贞;徐学刚;杨协珍;金树根 刊期: 2004年第04期

  • 实时定量PCR分析ST13基因在肿瘤细胞株中的表达

    目的利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR)相对定量ST13基因在不同肿瘤细胞株的表达情况.方法提取肿瘤细胞株SW620、A549、Bxpc-3、SMMC-7721、RKO和Bcap-37细胞总RNA,经寡聚脱氧胸腺嘧啶逆转录,实时定量PCR扩增,针对内参照GAPDH基因相对定量ST13基因的表达,比较ST13基因在不同组织癌细胞株中的表达.结果 ST13基因在6种肿瘤细胞株中表达高,相当于GAPDH基因表达的1%~20%,细胞株之间ST13基因表达量分高、中、低三类(P<0.05),呈现Bcap-37、RKO>SMMC-7721和Bxpc-3>A549、SW620.结论本方法简便、快速、高效地反映了ST13基因在细胞株中的表达情况,是基因研究中一个实用的技术手段.

    作者:陈功星;张佳炜;董庆华;丁佳逸;郑树 刊期: 2004年第04期

  • 内蒙古少数民族地区人群血清apoAI及apoB水平探讨

    目的研究内蒙古少数民族地区正常人群血清载脂蛋白AI(apolipoprotein AI,apoAI)及载脂蛋白B(apolipoprotein B,apoB)水平,探讨适合内蒙古少数民族地区理想的参考值.方法收集内蒙古各族健康人群血清,按一般生活水平严格筛选1 009例,其中男547例,女462例,年龄1~83岁.用免疫透射比浊法(ITA)测定其apoAI、apoB及AI/B水平并进行统计分析.结果将上述正常人群体检结果与国内外某些资料进行对比分析,得出内蒙古少数民族地区正常人群血清ApoAI、apoB水平较欧美人偏低,与国内宁波地区接近,且低于北京地区.结论说明血清apoAI、apoB及AI/B受种族、环境、生活方式等影响.

    作者:孙文阁;朱振远;费志宏;何述祥;牛丽丽;伍镜池 刊期: 2004年第04期

  • 心血管疾病的蛋白质组学研究进展

    蛋白质组学是作为继基因组学后提出的新学科,其以组织或细胞的全部蛋白质为研究对象,以蛋白质表达的整体水平为研究特点,为生命科学的研究提供了新视角.心血管疾病的研究是蛋白质组学研究的重要领域,并且取得了不少阶段性成果.现对蛋白质组学在心血管疾病领域,包括比较蛋白质组、功能蛋白质组的研究进展作一综述.

    作者:沈静;钱令嘉 刊期: 2004年第04期

  • 叶酸受体介导的药物靶向投递系统研究进展

    目的肿瘤细胞膜上表达一些正常细胞不表达或低表达的受体,它可成为肿瘤治疗的靶点.一些肿瘤组织高水平表达叶酸受体,利用多聚阳离子为载体,结合药物/DNA形成叶酸交联复合物,通过叶酸受体介导的基因转移方式,将药物/DNA靶向投递到肿瘤组织或细胞,具有转移效率高和靶向性投递的特点.现就叶酸受体、叶酸受体介导的内化机理、基因药物、蛋白毒素、放射性药物靶向投递等方面作一综述.

    作者:蒋建伟;张洹 刊期: 2004年第04期

  • 会讯(全国检验医学与临床学术会议)

    作者: 刊期: 2004年第04期

  • 荧光实时逆转录PCR定量研究进展

    荧光实时逆转录PCR广泛应用于稳态mRNA水平的定量,并且它已经成为基础研究、分子医学和生物技术的一种必不可少的实验工具.用此技术定量具有范围宽、敏感性高、精确度高,无PCR后处理步骤,避免了交叉污染,且产出率高,可以进行多重检测等特点.然而要成功地应用该技术并不是一件容易的事.现对方法学建立、扩增效率以及标准化等方面作一综述.

    作者:陈英剑;胡成进 刊期: 2004年第04期

  • 热烈祝贺《检验医学与临床》杂志公开发行

    作者: 刊期: 2004年第04期

  • 血液代用品及其临床应用

    临床常规输血技术是安全的,但是由于血液贮存期短、供-受血者之间需要配型、血液传播血源性疾病等原因,限制了配体输血技术在紧急状况,如灾难、战争的广泛应用,由此促进了血液代用品的研究开发.

    作者:夏德宜;周剑涛 刊期: 2004年第04期

  • 慢性骨髓炎患者脓性分泌物中检出蜡样芽胞杆菌

    蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)常存在于空气、土壤、尘埃、水及植物中,有时正常人的粪便中亦有,一般不致病.自Frankland首次发现该菌以来,蜡样杆菌在很长一段时间内被视作与食物中毒有关.近年来才有报道本菌引起胃肠外感染.在慢性骨髓炎患者中检出此菌比较少见,且感染时间较长,有10年之久.现将从这一男性患者骨髓炎分泌物中检出的蜡样芽胞杆菌报道如下.

    作者:蒋建华;周祚盛 刊期: 2004年第04期

  • 《国外医学临床生物化学与检验学分册》征订通知

    作者: 刊期: 2004年第04期

  • 细菌CpG DNA的免疫激活作用研究进展

    细菌基因组DNA中以较高的频率出现非甲基化的胞嘧啶-鸟嘌呤二核苷酸(CpG DNA),免疫活性细胞的Toll样受体-9(TLR9)可以识别CpG DNA并激活NF-κB途径,活化免疫活性细胞,引起以Th1型为主的免疫应答,在诱导天然免疫、疫苗佐剂、抗肿瘤、促进造血、防治过敏性疾病等方面得到广泛应用.

    作者:谢成彬;王跃 刊期: 2004年第04期

  • 基质金属蛋白酶与肝癌侵袭和转移的研究进展

    近年来研究发现细胞外基质(ECM)在肿瘤的侵袭和转移过程中起着重要作用,金属蛋白酶(MMPs)通过对ECM的降解而促进肿瘤的转移.现就金属蛋白酶的结构、功能及其与肝癌侵袭、转移的研究进展作一综述.

    作者:兰春慧;陈东风 刊期: 2004年第04期

  • 胰蛋白酶原激活肽在急性胰腺炎早期诊断中的应用

    急性胰腺炎发病机理的中心环节是胰腺组织受胰蛋白酶的自身消化作用,对其周围组织的消化,从而继发一系列的器官功能障碍.胰蛋白酶原激活肽(TAP)是胰蛋白酶原激活后释放出来的短肽,可以很快进入腹膜、血液及尿液.检测体液TAP浓度,可以特异地反映胰蛋白酶原激活情况以及早期预测急性胰腺炎患者病情严重程度,在临床诊断方面有很好的应用前景.

    作者:王慧;徐霞 刊期: 2004年第04期

  • 比较蛋白质组学在病原菌研究中的应用价值

    应用双向凝胶电泳、蛋白质鉴定的质谱分析法和生物信息学等蛋白质组学技术,全局性监测病原菌的基因表达,可有效鉴定与菌株变异、环境影响和遗传操纵效应相关的重要蛋白质.通过病原菌的比较蛋白质组学研究,有助于阐明与细菌毒力和耐药相关蛋白质,描述疫苗和用于诊断的蛋白质特征,以及确定药物设计的新靶位和评价这些药物对细菌生理学的作用效应.

    作者:赵辉;乐军 刊期: 2004年第04期

  • 丙型肝炎病毒感染的实验室检测及临床应用

    全球丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染率约为3%(1.7亿人).HCV传播的主要方式是接触感染者血液,如静脉内用药或输血;透析、外科手术和结肠镜检查也可引起院内HCV传播;针刺损伤的健康保健工作人员血清HCV抗体阳转率为0%~7%.HCV的围生期和性传播很低,但是,如果HCV感染的母亲或性伙伴也感染了HIV-1,这种传播出现率更高.发达国家从1990年开始对献血员筛查HCV抗体,将输血获得HCV感染的危险性大大降低,估计美国当年就防止了40 000 HCV感染.随着酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA)HCV抗体技术的发展和核酸扩增技术的应用,进一步降低了输血传播HCV的发生率,1999年4月~2000年7月,美国和加拿大应用核酸扩增技术从1 630万例血清学阴性献血员中检出HCV阳性62例.

    作者:杨朝国;陈川 刊期: 2004年第04期

  • 高敏C反应蛋白与心血管疾病的关系

    对C反应蛋白(CRP)这个古老项目的新认识、新理论及用途在概述动脉粥样硬化中的作用,预测非冠心病(CHD)患者未来心血管事件发生率及未来心血管事件的可能性研究,高敏感性C反应蛋白(Hs-CRP)与传统CHD危险因素的关系和检测应用前景几方面进行扼要综述.Hs-CRP与传统检测方法不同的是检测正常范围低水平的CRP微小变化,它不仅可能是一种轻度慢性全身性炎症的标志物,而且直接参与了动脉粥样硬化的过程,可以增强预测预后和治疗的能力,hs-CRP的预测价值显著高于与传统危险因素有关的生化指标或其他新发现的指标.

    作者:康红;冯刚 刊期: 2004年第04期

  • 流式细胞仪检测淋巴细胞亚群糖皮质激素受体的表达:创伤后应激病患者糖皮质激素受体减少

    作者:姜维洁;李培成 刊期: 2004年第04期

  • 结核分枝杆菌ESAT6基因克隆与表达质粒构建

    目的克隆结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白ESAT6基因,并构建重组表达质粒.方法根据Genbank中ESAT6基因序列,针对其编码区合成引物,采用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv 基因组DNA中扩增出ESAT6基因,并连接到T载体,然后定向克隆到原核表达质粒pGEX-4T-2,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.结果经双内切酶消化所切下的片段,大小与预计相符;测序结果证实基因序列正确,符合表达框架.结论成功构建了重组原核表达质粒pGEX-ESAT6.

    作者:李延武;李卓成;陈剑雄 刊期: 2004年第04期

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