HBV DNA转染原代鸭肝细胞初步观察

三氧化二砷治疗中晚期原发性肝癌的临床研究

我们在1998年7月～2000年12月静脉应用三氧化二砷(As2O3)注射液单药治疗原发性肝癌,取得一定疗效,现报告如下.

作者：钱军；秦叔逵；何泽明；王琳；陈映霞；邵志坚；刘秀峰 刊期： 2002年第01期

肝癌高表达新基因的克隆和编码蛋白质二级结构分析

目的研究和克隆新的肝癌相关基因,探索肝癌发生的分子机制. 方法采用mRNA差异显示技术和筛选胎盘cDNA文库,获得新基因全长cDNA;制备新基因的GST融合蛋白和多克隆抗体,进行western杂交和免疫组织化学染色;利用计算机软件分析新基因的二级结构和功能预测. 结果克隆了一个新的肝癌相关基因全长cDNA,western杂交证实该基因全长能在293细胞中表达,免疫组织化学染色证实该基因编码蛋白定位于细胞浆,二级结构分析发现含2个SH3结合结构域和数个不同的蛋白激酶磷酸化位点. 结论获得一个新的肝癌相关基因全长cDNA.

作者：王征旭；胡桂芳；王红阳；吴孟超 刊期： 2002年第01期

肝移植术后乙型肝炎复发的预防和治疗

原位肝移植是治疗急慢性肝衰竭的有效手段.在我国,接受肝移植的大多数患者患有HBV相关性疾病(如急性重型肝炎、乙型肝炎肝硬化终末期).如果不采取有效的预防措施,这些患者在接受肝移植后80%以上均会发生HBV的再感染,并且在平均2年左右即可形成肝硬化.尤其是一旦发生由于病毒在肝细胞内大量复制所致的纤维淤胆性肝炎(fibrosing cholestatic hepatitis),可于数月内死于肝衰竭.这些患者肝移植术后的1年和5年存活率分别为72%和51%,均低于因其它疾病(如胆汁郁积性疾病)而接受肝移植者(分别为84%和74%).因此,积极而有效地预防肝移植术后乙型肝炎的复发是提高患者长期存活率的关键.

作者：贾继东；王宝恩 刊期： 2002年第01期

FSCLZLY-A腹水超滤治疗仪研制与临床应用

我所在总结治疗近千例次顽固性腹水的基础上,研制用于腹水超滤浓缩回输腹腔的专用仪器, FSCLZLY-A腹水超滤治疗仪(简称治疗仪)已获得国家专利.

作者：刘超英；胡大荣；彭晓君；田慧英；龚丽娟；陈天宝 刊期： 2002年第01期

40例临床肝移植血管和胆管重建经验

目的总结第三军医大学西南医院肝移植时血管及胆管重建的经验. 方法回顾性分析40例肝移植时血管重建、胆道重建的方法及效果. 结果本研究肝移植病例围手术期死亡6例,手术病死率为15.0%.并发症为:肺部感染18例;多器官功能衰竭5例;腹腔内出血4例;ARDS 8例;肝动脉血栓形成1例;胆漏1例;脑出血1例.存活长的1例为31个月,有15例生存期超过1年. 结论良好的血管和胆管重建技术是确保肝移植手术成功的关键.

作者：董家鸿；王曙光；别平；王槐志；杨占宇；何宇；李智华；蔡景修 刊期： 2002年第01期

缺血再灌注期间供肝糖原水平对供肝细胞内游离钙的影响

目的研究供肝糖原含量对缺血再灌注期间肝组织ATP及胞浆游离Ca2+的影响. 方法供体组兔(21只)均分为3组:A组(禁食24h)、B组(正常喂食)和C组(正常喂食+葡萄糖补充),运用自创的兔肝保存-再灌注模型来观察冷保存、复温和再灌注期间供肝组织中糖原含量、ATP、肝细胞膜Ca2+ATP酶活性及胞浆内游离Ca2+浓度的变化. 结果经上述处理,于冷保存前各组供肝糖原含量两两间差异有显著性(质量分数分别为15.38±2.61,51.80±6.63和63.23±2.75);且于缺血再灌注期间供肝糖原含量越高则ATP水平越高,肝细胞膜Ca2+ATP酶活性也越高,胞浆内游离Ca2+浓度则越低. 结论术前提高供肝糖原含量能为肝细胞在缺血再灌注期间提供相对充足的ATP,使肝细胞膜Ca2+ATP酶活性能保持在较高的水平,能维持细胞内外Ca2+浓度差,防止胞浆游离Ca2+超载,对减轻供肝缺血再灌注损伤可起到一定作用.[

作者：王雨；田伏洲；汤礼军；黄大熔；李小军；尹致良 刊期： 2002年第01期

血清肝纤维化标志物与门静脉压力对早期肝硬化诊断的作用

血清肝纤维化标志物[透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(hPCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)]对肝纤维化判断较好;核医学测定心/肝(H/L)比值换算门静脉压较方便;我们试图探讨两者的关系,报告如下.

作者：何津祥；刘纯；陈明；杨鹏；宋霞；王宏 刊期： 2002年第01期

长效干扰素:聚乙二醇干扰素研究进展

一、聚乙二醇及聚乙二醇-蛋白结合物的特性聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一个以-CH2CH20-为基础结构的大分子的线性多聚体,常用来进行蛋白质的修饰[1].PEG与蛋白的共价结合称为聚乙二醇化,通过控制PEG与蛋白质的比率在某种程度上可控制聚乙二醇化的程度.通过聚乙二醇化(pegylation),可改变蛋白质生物物理特性,包括大小、疏水性及电荷等[2].Carpenter等[3]研究了给狗静脉注射PEG(相对分子质量4.0×103)后的生物相容性(毒性及生物蓄积性).

作者：马慧；王豪 刊期： 2002年第01期

奥曲肽对门静脉高压性胃病胃粘膜大出血的疗效

我们于1997年1月～2001年1月用奥曲肽(octreotide)治疗门静脉高压性胃病(portal hypertensive gastropathy,PHG)胃粘膜大出血22例,现报道如下.

作者：乐桥良；张捷；许其增；高河元 刊期： 2002年第01期

HCV 5′NCR转基因小鼠模型的初步建立

目的为进行反义核酸抗HCV药物的体内活性评价. 方法以含CMV启动子的HCV 5′NCR与荧光素酶基因的融合基因为转基因片段,经显微注射导入ICR小鼠受精卵原核,由移植鼠获68只仔鼠,取鼠尾组织经PCR方法鉴定转基因整合鼠,取整合鼠的子代阳性鼠的肝肾组织采用RT-PCR方法进行mRNA表达鉴定,同时取其心、肝及肾组织进行荧光素酶活性检测. 结果共有13只G0代阳性整合鼠,整合率为19.2%;有3只整合鼠后代的肝肾组织中有mRNA表达;有1个转基因小鼠系心、肝、肾组织中显示荧光素酶活性.该系小鼠在外形、生长速度及繁育方面与正常小鼠无异. 结论 HCV 5′NCR转基因小鼠模型的初步建立提示CMV启动子启动转录的HCV 5′NCR-荧光素酶融合基因构件在转基因小鼠体内能够表达,这为HCV 5′NCR转基因小鼠模型的进一步研究奠定了基础.

作者：王小红；郭鹏；管伟；成勇；王升启 刊期： 2002年第01期

HBV DNA转染原代鸭肝细胞初步观察

目的通过观测人HBV DNA在非哺乳动物-鸭肝细胞中的复制和表达水平,探讨人HBV感染与复制的跨种属特异性,为建立人HBV DNA转染跨种属肝细胞模型奠定基础. 方法获取线性HBV DNA并电转染原代鸭肝细胞,电转后48h采用IMX系统检测鸭肝细胞中HBsAg和HBeAg表达水平,用Southern blotting和dot blotting检测HBV DNA复制情况.以单纯电击肝细胞为对照. 结果转染组原代鸭肝细胞裂解液中HBsAg为9.10(P/N值≥2.1为阳性),HBeAg为阴性;上清液中二者均为阴性.转染组原代鸭肝细胞裂解液dot blotting呈强阳性;转染组肝细胞总DNA Southern blotting显示约4.0kb以下分子涂抹带,为游离复制型HBV DNA,包括rcDNA、cccDNA与ssDNA等复制中间体;未见整合型HBV DNA-高分子区(4.0～24.0kb)涂抹带.对照组上述指标均为阴性. 结论人HBV DNA能在原代鸭肝细胞中复制和表达,可能为肝细胞内环境依赖性,无严格种属特异性限制.

作者：姚云清；黄爱龙；唐霓；王波；张定凤 刊期： 2002年第01期

慢性乙型肝炎自然史的研究

目的对乙型肝炎的自然史进行研究,为其预后判断、药物疗效的分析及药品经济学评估提供佐证. 方法采用回顾性方法随访6～18年前经肝穿病理组织学诊断的183例慢性乙型肝炎的远期转归、影响因素及其抗病毒治疗的远期作用. 结果 183例慢性乙型肝炎患者累计死亡20例(10.93%),发生肝硬化22例(12.02%),肝癌12例(6.56%).累计5、10、15年生存率分别为97.27%、91.62%和84.47%.因乙型肝炎及其并发症死亡者占死亡原因的85.00%.累计肝癌5年、10年、15年发生率分别是0、3.19%和11.56%.对照组247例死亡6例(2.43%),无1例发展为肝硬化和肝癌.慢性乙型肝炎患者的死亡率是普通人群的4.50倍.二者相比,肝硬化、肝癌和死亡的发生率差异均有显著性(P＜0.005).采用Cox回归分析,高龄、病理损害重、HBeAg阳性是肝硬化的危险因素;高龄、病理损害重、男性是死亡的危险因素;未筛选出肝癌的危险因素. 结论慢性乙型肝炎的远期预后不良.

作者：巫贵成；周卫平；赵有蓉；郭树华；王志毅；邹淑碧；张全海；任红；黄爱龙；张定凤 刊期： 2002年第01期

干扰素α和甘草酸对肝纤维化鼠星状细胞胶原代谢的影响

草酸均可降低肝纤维化鼠星状细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达，减少Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝脏的沉积[1，2]。

作者：张其胜；王吉耀；胡美玉 刊期： 2002年第01期

小鼠高低转移性肝癌3号染色体微卫星不稳定性的研究

为探讨微卫星不稳定性(micro-satellite instability,MSI)与肝癌发生及转移的关系,我们应用微卫星多态性标记对小鼠高、低转移性肝癌细胞系MSI进行了研究.

作者：秦芳；张树辉；张霞 刊期： 2002年第01期

慢性乙型肝炎的病理与临床

目的提高慢性乙型肝炎临床诊断的正确性. 方法对202例慢性乙型肝炎患者的临床表现、血液生物化学指标[血清总胆红素(TBil)、白蛋白(ALB)、凝血酶原活动度(PTA)、ALT、白蛋白/球蛋白比值(A/G)、r-球蛋白(GGT)]与病理分级分度进行对比分析. 结果临床表现如乏力、纳差、厌油、腹胀、鼻/牙龈出血及肝掌、蜘蛛痣、脾静脉增宽、胆囊炎与肝组织炎症活动密切相关;TBil、ALT、GGT上升及Alb、A/G比值、PTA下降均与肝组织炎症程度加重有关.6项指标中,轻度慢性肝炎临床与病理诊断符合率较高,为63.8%～79.0%,其次为重度慢性肝炎,为40.0%～62.5%,符合率低的是中度慢性肝炎,为10.0%～28.2%. 结论临床诊断时要高度重视临床症状、体征的变化,可适当放宽临床分度中有关中度异常值范围.

作者：马洪波；郎振为；金荣华；黄春；金瑞 刊期： 2002年第01期

熊去氧胆酸对节制饮食防治大鼠肥胖高脂血症性脂肪性肝炎的影响

目的探讨熊去氧胆酸对节制饮食防治肥胖、高脂血症性脂肪性肝炎的影响. 方法 35只SD大鼠持续10周高脂饮食后,分为3组.模型组(n＝10)继续给予高脂饮食;低热卡饮食组(n＝10)恢复普通饮食,但仅给正常需要量的1/3,2周后处死;熊去氧胆酸组(n＝15)在LCD的同时经口给予熊去氧胆酸(250mg/kg/d).另设9只普通饮食饲养大鼠作正常对照. 结果与正常组相比,模型组大鼠体重、肝重明显增加、血脂和转氨酶升高,肝组织学检查示脂肪性肝炎;与模型组相比,低热卡饮食组大鼠体重、肝重及肝组织脂肪变显著减轻,但血脂紊乱和肝组织炎症坏死改善并不明显;而熊去氧胆酸组血脂异常和AST以及肝组织炎症坏死程度均较低热卡饮食组减轻. 结论熊去氧胆酸有助于促进节食减肥大鼠血脂和脂肪性肝炎的康复.

作者：范建高；钟岚；王国良；田丽艳；武文森；李明升 刊期： 2002年第01期

腱蛋白在四氯化碳大鼠肝纤维化形成过程中的动态表达

目的探讨腱蛋白(Tenascin,Tn)在肝纤维化形成中的作用. 方法以CCl4诱发大鼠肝损伤期(4周)、肝纤维化早期(8周)和肝纤维化晚期(12周)模型;采用免疫组织化学及核酸原位分子杂交技术对大鼠肝组织中Tn mRNA及其蛋白质表达进行观察,并进行计算机图像分析. 结果正常肝组织有少量Tn分布;肝损伤期及肝纤维化早期,Tn的mRNA及蛋白质表达均显著增高.肝纤维化晚期,Tn的mRNA及蛋白质表达相对减少.核酸原位杂交提示肝间质细胞是Tn的主要合成细胞. 结论 Tn是肝内重要的细胞外基质成分,参与了肝纤维化的早期形成.

作者：姚定康；李石；孔宪涛；叶挺军 刊期： 2002年第01期

2002年中青年肝病科研论文奖及课题基金开始申报

作者： 刊期： 2002年第01期

β2糖蛋白Ⅰ与重组乙型肝炎表面抗原的结合特性

目的研究HBsAg与β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)的结合特性,探讨β2GPⅠ参与HBV感染的机制. 方法采用酶联免疫吸附实验,研究标记的人β2GPⅠ与重组HBsAg的结合特性. 结果标记的人β2GPⅠ与HBsAg有高度亲和力,并可以被过量的未标记人β2GPⅠ所抑制. 结论β2GPⅠ与HBsAg的结合特性可能是β2GPⅠ介导乙肝病毒感染肝细胞的结构基础.

作者：高普均；郭延军；曲立科；时彤；张洪雁；董春娥；杨翰仪 刊期： 2002年第01期

经颈静脉肝内门体静脉分流术治疗肝肺综合征

我们采用经颈静脉肝内门体静脉分流术(TIPSS)治疗了3例肝肺综合症(HPS)患者,现报道如下.

作者：赵正华；颜廷敏；陶可胜；张玉臣；高德勇；肖德明；封杨 刊期： 2002年第01期