严丹;陶兴宝;张超;刘玉杰;解达帅;胡美变;江云;吴纯洁
目的:采用SWOT分析法探讨中药配方颗粒的发展趋势.方法:总结了中药配方颗粒的发展现状,系统阐述了中药配方颗粒的优势(S)、劣势(W)、机会(O)与威胁(T),运用SWOT分析法对中药配方颗粒的发展前景进行分析.结果与结论:针对中药配方颗粒国内外研究现状及发展中存在的疗效认识不足、价格高、生产工艺单一、缺乏统一标准、研究基础薄弱等问题,结合SWOT分析,提出了加强基础研究、完善工艺与品种品规、统一标准、加强质量控制与监管、扩大患者市场、推广临床应用等中药配方颗粒发展策略.
作者:严丹;陶兴宝;张超;刘玉杰;解达帅;胡美变;江云;吴纯洁 刊期: 2017年第01期
目的:制备黄花倒水莲口腔速崩片并考察其体外溶出行为.方法:采用粉末直接压片制备速崩片.以崩解时限为评价指标,通过单因素及正交试验对处方中填充剂甘露醇与崩解剂微晶纤维素用量比、药材浸膏加入量、润滑剂硬脂酸镁加入量等影响因素进行考察.通过体外溶出度试验(以水为溶出介质,桨法)对优化后处方所制速崩片的溶出效果(以远志皂苷元为对照品)进行评价.结果:优处方为药材浸膏加入量15%、甘露醇与微晶纤维素用量比1.5:1、硬脂酸镁加入量1.0%;所制片剂崩解时限为(31±4)s、硬度为(3.4±0.2)kg、脆碎度为(0.23±0.07)%(RSD均小于0.11%,n=3);5 min内总皂苷累积溶出度达到90%以上,溶出参数T50=0.84 min、Td=1.77 min.结论:制备的黄花倒水莲口腔速崩片在水溶液中可快速崩解和溶出.
作者:吴卫;刘业滢;黄莹;刘莉平;廖丽圆;段小群 刊期: 2017年第01期
目的:为静脉药物集中调配中心(PIVAS)设施设备的管理提供参考.方法:从制度的建立、档案的管理、重要设备的维护3个方面介绍我院PIVAS设施设备的管理经验,并通过对核心净化设备进行性能检测以评价管理效果.结果与结论:我院PIVAS通过制定并完善7项管理制度、9项操作规程和5项应急预案,健全了27份档案资料,提高了档案管理的意识,规范了重点设备的维护方法.实施管理后的2014年和2015年,净化设备的各检测项目合格率均为100%.建议进一步提高设施管理水平,积极筹备智能化监测系统,注重完善信息系统和培养专业化管理人员.
作者:浦周芳;张学伟;王学昌 刊期: 2017年第01期
目的:为阿胶的质量评价提供参考.方法:采用全自动氨基酸分析仪分别测定18家企业共18批次阿胶中17种氨基酸的含量,再对含量数据进行主成分分析和聚类分析,以了解各种氨基酸之间的联系,并将相似的阿胶产品进行集合与分类.结果:除1批次阿胶外,其余17批次均含有17种目标氨基酸,包括苏氨酸(Thr)、缬氨酸(Val)、甲硫氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)和赖氨酸(Lys)7种人体必需氨基酸,尤其以甘氨酸(Gly)和脯氨酸(Pro)的含量较高;氨基酸总含量介于66.1%~82.0%之间,相差较大.主成分分析提取得到4个主成分,累积贡献率达到89.578%,并认为Pro、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、Leu、Ile、Thr是市售阿胶的特征氨基酸.聚类分析得到表征3张市售阿胶树系图,欧式距离系数均在0~25之间变动.结论:市售阿胶中氨基酸总含量相差较大,且不同企业阿胶中各种氨基酸的含量也有一定差异.阿胶中蛋白质成分主要为胶原蛋白,可以利用测定氨基酸含量来监控阿胶质量.
作者:葛重宇;庞慧;李楠;郑洁;何昌隆;杨欢;沈玉萍 刊期: 2017年第01期
目的:研究阿立哌唑对Aβ淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的神经PC12细胞损伤的影响及其机制.方法:将PC12细胞随机分为正常对照组、模型组(20μmol/L Aβ25-35)和阿立哌唑低、中、高浓度组(5、10、20μmol/L阿立哌唑+20μmol/L Aβ25-35),加入含相应药物的培养基培养48 h,每组6个复孔.MTT法检测细胞活力(光密度值),Hoechst染色法检测细胞凋亡情况,分光光度法检测细胞中天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9活性,Western blot法检测细胞中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白表达及蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平.结果:与正常对照组比较,模型组细胞光密度值降低,凋亡率增加,Caspase-3、Caspase-9活性和Bax蛋白表达均增强,Bcl-2、PI3K蛋白表达和Akt磷酸化水平均降低(P<0.01).与模型组比较,阿立哌唑低、中、高浓度组细胞光密度值增加,凋亡率减少,Caspase-3、Caspase-9活性减弱,Bcl-2、PI3K蛋白表达和Akt磷酸化水平均增加;阿立哌唑中、高浓度组细胞Bax蛋白表达减弱(P<0.05或P<0.01).结论:阿立哌唑可明显抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,其作用可能与激活PI3K/Akt信号通路有关.
作者:杨淑珍;赵晶媛 刊期: 2017年第01期
目的:考察苗药大乌泡叶提取物的体外抑菌作用.方法:将大乌泡叶煎煮水提物和80%醇提物均制备成质量浓度为200 mg/mL的药液,并以氨苄青霉素和氟康唑为阳性对照(50 mg/mL),采用管碟法测定其对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾志贺菌、普通变形杆菌、白色念珠菌、新型隐球菌的抑菌作用.依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取80%醇提物,得到相应部位萃取物(50 mg/mL)后,采用管碟法考察其对上述7种菌株的抑菌作用;筛选出具有抑菌作用的部位及对药物敏感的试验菌株,并分别采用微量肉汤稀释法和琼脂培养基平板法测定其低抑菌浓度(MIC)和低杀菌浓度(MBC).结果:大乌泡叶的水提物几乎无抑菌活性,80%醇提物对各菌株则表现出不同程度的抑制作用,对5种细菌的抑菌作用优于对2种真菌;大乌泡叶80%醇提物的乙酸乙酯及正丁醇萃取部位表现出良好的抑菌作用,石油醚和水层部位几乎没有抑菌作用,各萃取部位对真菌均未见抑制作用;大乌泡叶80%醇提物对5种细菌的MIC、MBC分别在6.25~12.5、12.5~25 mg/mL之间,其乙酸乙酯部位的MIC、MBC分别为3.13、6.25 mg/mL,其正丁醇部位的MIC、MBC分别在3.13~6.25、6.25~12.5 mg/mL之间.结论:苗药大乌泡叶的80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取部位对细菌具有明显的体外抑菌作用.
作者:刘瑶;蔡进;陈瑞;刘珈伲;刘丽娜;黄静 刊期: 2017年第01期
目的:建立同时测定大鼠血浆中槲皮素-3-O-槐糖苷、罗布麻甲素、金丝桃苷、芸香苷4种黄酮类成分含量的方法.方法:取8只SD大鼠,ig大花罗布麻叶提取物混悬液,0.1 g/kg(以提取物计).给药后1 h于眼眶采血1 mL,离心后采用微乳液相色谱法(MELC)测定4种黄酮类成分含量.色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为微乳体系[月桂醇聚氧乙烯醚-正丁醇-乙酸乙酯-三乙胺-水(体积比为2.5:3.0:1.7:0.3:92.5,pH=5.0)],流速为0.8 mL/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm,进样量为10μL,内标为岩白菜素.同时与使用常规有机溶剂为流动相的高效液相色谱法(HPLC,流动相为0.2%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,其余条件同MELC法)进行相关比较.结果:大鼠血浆中槲皮素-3-O-槐糖苷、罗布麻甲素、金丝桃苷、芸香苷检测质量浓度线性范围为10~1000 ng/mL(r≥0.9980),定量下限(信噪比为10)均为10 ng/mL,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过7.5%(n=5),平均加样回收率在97.4%~98.5%之间(RSD均不大于5.3%,n=5),提取回收率均在88.7%~100.3%之间(RSD均不大于6.14%,n=5).MELC与HPLC的方法学考察结果均符合药典规定,血药浓度测定结果相近,但与HPLC法比较,MELC法可缩短检测时间(10 min vs.40 min),减少有机溶剂使用量(0.38 mL vs.28 mL).结论:本研究建立的MELC法快速简便、绿色环保,可用于大鼠血浆中大花罗布麻叶4种黄酮类成分的同时测定.
作者:庄鲁江;刘金岩;李欢欢;周军 刊期: 2017年第01期
目的:优化余甘子配方颗粒的提取工艺.方法:以没食子酸含量、出膏率的综合评价结果为指标,以加水倍数、提取次数和提取时间为因素,设计正交试验优化余甘子配方颗粒的提取条件并进行验证试验.结果:余甘子配方颗粒优提取工艺为饮片加12倍水,提取2次,每次提取1 h.验证试验中出膏率平均值为30.44%(RSD=2.07%,n=3)、没食子酸含量平均值为8.12%(RSD=0.86%,n=3).结论:优化的提取工艺稳定,可为余甘子配方颗粒的标准化、规范化生产提供依据.
作者:魏彩彩;李雪利;郝磊;冯玉康;张风林;霍保军;李军山;陈钟 刊期: 2017年第01期
目的:提高医院药房制订药品计划采购量的合理性和科学性.方法:分析现有医院信息系统(HIS)中采购药品模块功能的不足,采用增量系数法、ABC分析法、VEN分析法改进计划库存量的计算公式,再通过在系统中设置高储值、低储值以及各级包装量来限制和调整计划库存量;在系统中拟建立一键采购功能,并以5种典型药品进行模拟采购的操作实践.结果:在原有计划库存量的计算公式上新增代表变化趋势的参数、增量系数k1和计划库存系数k2;建立了只需输入某类药的计划周期天数N1和购药安全期N2,即可得出该类药品计划库存量的一键采购模式.经模拟操作实践,与改进前比较,改进后计划采购的药品占用资金及空间减少,采购量可根据药品包装自动取整.结论:对HIS中药品采购模块功能的改进及一键采购模式的拟建立使制订的药品计划采购量更加合理、科学、准确,既能保障药品的及时供应,又避免药品积压,并能有效降低人力、物力和资金成本.
作者:陈淑茜;何训;吕世文 刊期: 2017年第01期
目的:比较生黄柏、酒黄柏和盐黄柏对甲亢型肾阴虚模型大鼠甲状腺和肾上腺皮质功能的影响.方法:将88只大鼠随机分为空白组、模型组、黄酒组、盐水组、阳性组(六味地黄丸,0.2 g/kg,以生药计)以及生黄柏、酒黄柏、盐黄柏的高、低剂量组(剂量均为9.519、1.058 g/kg,以生药计),每组8只.除空白组外,其余各组大鼠均ig左旋甲状腺素钠复制肾阴虚模型;于造模同时各给药组大鼠ig相应药物,其余组大鼠ig等体积相应溶液,每天1次,连续3周.末次给药后测定大鼠体质量、24 h尿量、脏器(胸腺、脾)指数,并测定血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、抗利尿激素(AVP)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平及尿液中17-羟皮质类甾醇(17-OHCS)水平,并计算cAMP/cGMP比值.结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量、24 h尿量、脏器(胸腺、脾)指数均明显降低;血清中FT3、FT4、AVP、cAMP水平、cAMP/cGMP比值及尿液中17-OHCS水平明显升高,血清中cGMP水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01).除酒黄柏低剂量组大鼠体质量和酒黄柏高、低剂量组大鼠血清中cGMP水平外,阳性组及生、酒、盐黄柏的高、低剂量组大鼠上述指标较模型组均明显改善(P<0.05或P<0.01),改善程度大小依次为盐黄柏组>生黄柏组>酒黄柏组;且盐黄柏高剂量组大鼠血清中cAMP水平和cAMP/cGMP比值及盐黄柏高、低剂量组尿液中17-OHCS水平均明显低于同剂量生黄柏组(P<0.05).结论:黄柏对甲亢型肾阴虚模型大鼠甲状腺和肾上腺皮质功能均有一定的改善作用,且盐制品作用增强,而酒制品作用减弱,提示黄柏给盐制后其滋阴效果有所增强.
作者:张凡;徐珊;刘蓬蓬;贾天柱 刊期: 2017年第01期
目的:制备布洛芬纳米微粉并对其进行表征,考察其体外透皮作用.方法:采用乳化法,以氯仿-乙醇(7:3,V/V)为有机相、超纯水为水相、聚山梨酯80为表面活性剂制备布洛芬纳米微粉.利用激光粒度分析方法、扫描电镜、傅里叶变换红外光谱、X射线衍射、差示扫描对制备的布洛芬纳米微粉进行表征.比较布洛芬纳米微粉与原料药的饱和溶解度、体外溶出度和体外透皮率.结果:确定的处方及制备工艺为聚山梨酯805 mg/mL、水相-有机相体积比40:1、布洛芬质量浓度250 mg/mL、匀浆速度5000 r/min、匀浆时间2 min.所制布洛芬纳米微粉为多孔疏松珊瑚状,其化学结构未改变,由原来的晶体态变为无定形态,粒径为179.6 nm,载药量为8.99%;其饱和溶解度、溶出度和透皮率分别是原料药的148、1.23、4.08倍.结论:所制布洛芬纳米微粉具有良好的水溶性和体外透皮性.
作者:邓怡平;赵修华;祖元刚;王璐 刊期: 2017年第01期
目的:通过建立电子化的会诊系统加强对抗菌药物临床应用的监管.方法:基于医院信息系统(HIS)和抗菌药物管理系统建立了特殊使用级抗菌药物会诊系统,并评价其自2014年1月起应用后效果.结果:通过设计特殊使用级抗菌药物的会诊申请单、组建会诊专家及确定其工作内容、增设相关的统计功能等,实现了针对特殊使用级抗菌药物医嘱的实时会诊及对相关会诊结果的查询与统计.该系统自2014年应用后至2015年底其完成会诊8275次,使用特殊使用级抗菌药物的患者病原微生物的标本送检率也从系统应用前(2013年)的78.68%上升到83.90%(2015年).结论:特殊使用级抗菌药物会诊系统的建立及应用可提高会诊工作效率和质量,由此促进抗菌药物的临床合理应用.
作者:葛卫青;侯幸赟;丁明明;冯瑾;陈万生;陶霞 刊期: 2017年第01期
目的:评价湖北省药品抽验质量情况,为监管部门与药品生产企业提供参考.方法:收集汇总湖北省食品药品监督检验研究院2013-2015年省计划抽验药品检验结果,以现行标准对总体质量状况及不合格样品情况进行统计分析.结果与结论:2013-2015年共完成省计划抽验药品检验7721批,发现不合格样品333批,占4.3%.不合格产品主要出自经营企业(不合格率为2.8%~9.0%)和医疗机构(不合格率为5.2%~11.7%);从品种看,中药材不合格率高(12.1%~37.4%)、不合格项目(含量测定、补充检验项目、性状、二氧化硫残留量及灰分等项目)种类多,药物制剂的质量则相对稳定,不合格项目分布与品种和剂型有关.宏观层面存在现有标准水平参差不齐、抽验资源分配欠合理、行业整体水平较低等问题.建议监管部门整顿药品标准,合理规划抽验工作,加强生产企业源头治理.
作者:蔡丹宁;江燕 刊期: 2017年第01期
目的:确保医院冷链药品储存设备可靠,保证在院冷藏药品的质量.方法:介绍我院药品冷链监控平台的建立、应用效果和相关的改进及完善措施.结果:通过配备相关的设备、架构平台网络、确定监测点、设置系统中的预警条件等,建立了我院药品的冷链监控平台,实现了对医院不同区域、不同冷链设备温湿度的全天候实时监控,可实时了解设备的运行状况、提供完整的在院药品冷藏温度记录,借助预警短信及时处理设备故障问题;通过预警短信原因分析及时更换了不合格设备,并进一步完善了冷链监控平台的使用制度与流程.在平台应用的2年内,53台普通冰箱更换为药品专用冰箱;月度预警短信数和冷藏设备预警率分别由2014年9月短信预警功能开启初期的6869条、100%下降至2016年2月的1083条、40%.结论:医院药品冷链监控平台的建立,保障了冷藏药品储存环境的可靠性,从而确保了在院冷藏药品的质量.
作者:沈烽;张健;吴颖坤;马医宗;刘荣 刊期: 2017年第01期
目的:优化米拉贝隆缓释片处方.方法:采用聚氧乙烯(PEO)和羟丙甲基纤维素(HPMC K4M)为缓释骨架材料,以粉末直压法制备米拉贝隆缓释片.以1、3、5、7 h的累积释放度为指标,采用星点设计-响应面法优化处方中PEO、HPMC K4M和包衣液(OPADRY?)的用量,并进行验证.比较所制缓释片与原研片(MyrbetriqTM)在不同pH介质(水、pH 1.0的人工胃液、pH 4.5醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液)中不同转速(100、50 r/min)下的累积释放度,计算相似因子f2,拟合缓释片的释药模型.结果:优化处方中每片米拉贝隆缓释片含米拉贝隆25 mg、PEO 108.02 mg、HPMC K4M 21.69 mg、OPADRY?2.27%;其1、3、5、7 h的累积释放度与预测值的相对误差分别为4.78%、3.48%、0.69%、-1.41%.所制缓释片与原研片在不同pH介质中和不同转速下释放曲线的f2均大于65;缓释片释药符合零级释药特征.结论:优化处方制备的米拉贝隆缓释片与原研片的释放行为相似.
作者:徐斌;浦雨伟;周卫;丁逸梅;卢定强 刊期: 2017年第01期
目的:研究1949年后我国麻醉药品与精神药品(以下简称麻精药品)管制历程及现状,为我国麻精药品管制工作的完善提供依据.方法:检索收集国内外数据库、新闻报道、相关网站中与我国麻精药品相关的文献、报道与政策等,对1949年后我国麻精药品管制历程及现状进行整理分析.结果与结论:我国麻醉药品和精神药品的管制起步于1950年原卫生部下发的《管理麻醉药品暂行条例》,在先后颁布了《麻醉药品管理条例》《药品管理法》等后,经历了从无法可依到有法可循、从行政管制为主导到法制化管制变化的过程.麻醉药品和精神药品逐渐实现统一、系统的管制,法规层级由部门行政规章提高到国家行政法规.目前,我国以2005年颁布的《麻醉药品和精神药品管理条例》为管制依据,2013年版麻醉药品和精神药品目录为管制对象,由卫生部门、农业部门、交通部门等部门配合国家食品药品监督管理总局开展管制工作.
作者:满春霞;邹武捷;杨淑苹;管晓东;史录文 刊期: 2017年第01期
目的:考察蒙药芯芭提取物的抗炎、镇痛作用.方法:将96只KM小鼠或SD大鼠随机分为模型组(水),阳性对照组(阿司匹林,0.5 g/kg),芯芭醇提物(70%乙醇提取)低、中、高剂量组(0.325、0.650、1.300 g/kg,以生药计)和芯芭醇提后残渣水提物低、中、高剂量组(0.325、0.650、1.300 g/kg,以生药计),每组12只;ig给药,每天1次,连续7 d.分别采用二甲苯致小鼠耳肿胀法测定小鼠耳肿胀度和蛋清致大鼠足肿胀法测定大鼠致炎1、2、4、6 h后的足跖肿胀度,以考察芯芭提取物的抗炎作用.取96只KM小鼠同法分组、给药,采用乙酸扭体法测定小鼠20 min内扭体次数;另取64只KM小鼠,同法分组,每组8只,除阳性对照组小鼠ig盐酸曲马多(0.5 g/kg)外,其余各组小鼠同法给药,采用热板法测定小鼠给药前及给药30、45、60、90 min后的痛阈值,以考察芯芭提取物的镇痛作用.结果:与模型组比较,芯芭提取物可降低小鼠耳肿胀度和蛋清致炎6h后大鼠足跖肿胀度,除芯芭醇提后残渣水提物高剂量组大鼠足跖肿胀度降低不显著外,其余各组差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);芯芭提取物可显著减少小鼠20 min内扭体次数,延长给药30、60、90 min后的小鼠痛阈值(P<0.05).结论:芯芭醇提物及其醇提残渣水提物均具有一定的抗炎、镇痛作用.
作者:郭佳佳;刘海;朱燕红;任佳秀;梁永红 刊期: 2017年第01期
目的:制备沙棘总黄酮(TFH)-聚乙烯吡咯烷酮K30(PVP K30)固体分散体,并对其进行表征及体外溶出研究.方法:采用溶剂法制备不同药载比(1:1、1:2、1:3、1:4、1:5)的TFH-PVP K30固体分散体,以溶出参数Td为指标设计单因素试验筛选药载比,以体外溶出度为指标设计正交试验优选制备工艺中的超声时间、水浴温度和干燥时间,并进行验证.采用扫描电镜法(SEM)、差示扫描量热法(DSC)和傅里叶红外光谱法(FT-IR)对固体分散体进行表征.结果:药载比为1:3时TFH-PVP K30固体分散体的Td小;优工艺为超声时间10 min、水浴温度60℃、干燥时间12 h.以此工艺制备的TFH-PVP K30固体分散体90 min的累积溶出度平均值为90.22%(RSD=1.74%,n=3).SEM、DSC与FT-IR结果表明,TFH以无定形分散在PVP K30载体中,二者之间形成氢键.结论:成功制得TFH-PVP K30固体分散体,其体外溶出度明显提高.
作者:田茜;何晨;贺敬霞;尹蓉莉;杨军宣;张礼 刊期: 2017年第01期
目的:研究安子合剂对抗磷脂抗体(APA)阳性流产小鼠Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗APA阳性流产作用机制.方法:将BALB/c小鼠(♀)随机分为空白对照组、模型组、阿司匹林组(阳性对照,0.0195 g/kg)和安子合剂低、中、高剂量组(37.7、75.4、150.8 g/kg,以生药计),每组10只.除空白对照组外,其余各组小鼠均以人β2-糖蛋白Ⅰ为诱导剂建立APA阳性流产模型.从妊娠第1天起,各给药组小鼠ig相应药物,空白对照组和模型组小鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续9 d.分别采用实时荧光定量聚合酶链反应法和免疫组化法测定胎盘组织TLR4、髓样分化蛋白2(MD2)、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白表达水平均显著升高(P<0.01).与模型组比较,阿司匹林组和安子合剂低、中剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2、MyD88 mRNA及其蛋白表达水平,安子合剂高剂量组小鼠胎盘组织TLR4蛋白表达水平,以及各给药组小鼠胎盘组织NF-κB蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);安子合剂低剂量组小鼠胎盘组织TLR4、MD2 mRNA表达水平和MD2、MyD88蛋白表达水平较阿司匹林组更低(P<0.05或P<0.01).结论:安子合剂可抑制APA阳性流产小鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路转导,这可能是其抗APA阳性流产的作用机制之一.
作者:柳静;陆启滨 刊期: 2017年第01期
目的:建立人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素(RAPA)含量的测定方法,研究RAPA靶向制剂(RAPA-NP-Apt)对泡沫细胞的靶向作用.方法:以氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞建立泡沫细胞模型,取200 ng/mL的RAPA和200、400、800 ng/mL的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共同孵育60 min.采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内RAPA含量,色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水(90:10,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为40℃,检测波长为278 nm,进样量为20μL.结果:RAPA检测质量浓度线性范围为50~6400 ng/mL(r=0.99996),平均回收率为98.72%(RSD=0.62%,n=3),日内、日间RSD均不大于6.15%(n=6),稳定性试验的RSD<2%(n=6),重复性试验的RSD=1.64%(n=6).RAPA和低、中、高质量浓度的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共孵育后RAPA的含量分别为12、43、98、140 ng/106个细胞.结论:本方法操作简单,稳定性和重复性好,可用于泡沫细胞内RAPA的含量测定.RAPA-NP-Apt可提高RAPA对泡沫细胞的靶向作用.
作者:胡华钟;王仲萍;陈亦清;朱秋连;林彩燕;严鹏科 刊期: 2017年第01期