马华锋；江兵
目的:构建survivin特异性短发夹RNA(shRNA)的表达载体,并以其修饰人膀胱移行细胞癌细胞株T24,评价其在体内的抑制肿瘤生长增殖的作用.探讨其在膀胱移行细胞癌(TCCB)T24细胞中的作用.方法:设计、合成survivin特异性的短链寡核苷酸,克隆到PTZU6+1质粒载体中.构建survivin特异shRNA表达载体.转染T24细胞;通过PTZU6+1质粒载体介导.成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/survivin-siRNA,拟在体内研究survivin-siRNA对膀胱移行细胞癌生长、增殖的影响.建立裸鼠皮下种植瘤模型,观察肿瘤形成时间和观察肿瘤形成时间,以及计算抑瘤率;HE染色行组织学检查;SABC法测定survivin,评估survivin在PTZU6+1介导的survivin-siRNA治疗膀胱移行细胞癌后的表达.结果:未转染组、空载体组共发生肌肉侵润6例,可见肌纤维的溶解、断裂等;皮下注射含survivin-siRNA的转染组细胞所形成的种植瘤的时间显著地延长,与其它两组比较有显著性差异(P<0.01);含survivin-siRNA的转染组所形成的种植性膀胱癌的体积明显受到抑制,与未转染组、空载体组有明显差异(P<0.01);survivin-siRNA转染组的抑瘤率为68.93%,与未转染组、空载体组相比较有显著差异;survivin-siRNA转染组survivin的阳性表达率降低.结论:应用PTZU6+1质粒载体构建survivin的shRNA表达载体,成功建立了表达survivin的膀胱移行细胞癌细胞株T24/Survivin-siRNA,有效抑制了survivin蛋白的表达,在体内实验中表明可以抑制T24细胞移植瘤的生长,诱导T24细胞的坏死、凋亡.
作者：杜虎；吴小候；罗春丽；何云锋；刘川；尹志康；曾柯 刊期： 2009年第01期
目的:研究汉族人内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因G894T多态性与冠心病(Coronary heart disease,CAD)的关系.方法:采用聚合酶链反应限制性片断长度多态性(Polymerase chain reaction-restricted fragments length polymorphism,PCR-RFLP)技术榆测了103例CAD患者、104例对照组eNOS基因G894T多态性的基因型.分析了其对CAD的影响.结果:CAD组和对照组eNOS基因G894T多态性的等位基因频率有显著性差异(P=0.029),但是基因型分布在两组间的差异无统计学意义.Logistic回归分析确定高血压病、糖尿病及吸烟史为CAD发生的独立危险因素.T等位基因不是其发生的独立危险因素.结论:CAD组的eNOS基冈G894T突变频率高于对照组,T等位基因可能与CAD的发生有一定的关联.
作者：彭瑾瑜；彭怀燕；聂新民 刊期： 2009年第01期
目的:探讨肠缺血再灌注(Intestinal ischemia-reperfusion,IIR)肺损伤核转录因子-K B(Nuclear factor-kappaB.NF-K B)的活性和高迁移率族蛋白1(Hish mobility group box 1,HMGB1)基因表达及白藜芦醇苷(Polydatin,PD)的保护作用.方法:54只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成对照组、肠缺血45min继以再灌注组(再灌注0.5h、2h、6h)及肠缺血45min继以再灌注同时给予PD治疗组(再灌注0.5h、2h,6h).采用比色法检测肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)水平、免疫组化法检测细胞间黏附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和NF-K B的表达、RT-PCR 检测肺组织高迁移率族蛋白1(HMGBl)mRNA.结果:IIR后肺组织明显水肿、出血和炎性细胞侵润.与对照组相比,肺组织W/D、MPO水平明显升高,ICAM-1及NF-K B的蛋白表达,HMGBlmRNA(2h,6h)的表达增强(P<0.05);白藜芦醇苷干预后肺损伤程度减轻、各项指标明显改善(P<0.05).结论:PD可以减轻肠缺血再灌注肺损伤,作用机制可能与其抑制NF-KB活化,降低肺组织HMGBlmRNA的表达上调密切相关.
作者：杨廷芳；王兴勇；胡语航；徐静；熊燚；周海银；何蓉；许峰 刊期： 2009年第01期
目的:观察和对比电刀排龈法与二次排龈法在固定修复中的临床效果.方法:金属烤瓷冠桥修复患者36例68颗牙齿随机分为两组,分别采用二次排龈法和电刀排龈法完成排龈,制取印模,灌制工作模型.对排龈时间及排龈后的预备体肩台、牙龈状况、工作模型进行评价.结果:33颗牙齿采用二次排龈法,25颗达到满意标准,8颗未达到满意标准,满意率75.8%;35颗采用电刀排龈法,28颗达到满意标准,7颗未达到满意标准,满意率80.0%.两种排龈方法的排龈时间有显著统计学差异,排龈效果没有统计学差异.结论:电刀排龈法操作简便,易于暴露清晰的软硬组织界限,能得到满意的排龈效果,且术后恢复快,是一种较好的排龈方法,值得在临床推广和应用.
作者：谭发兵；王璐；付钢；周雯雯 刊期： 2009年第01期
目的:探讨转化生化因子β3(Tansforming grow facotr β3,TGFβ3)、结缔组织生化因子(Connectire tissue growth factor,cT-GF)及其受体TGFβRⅡ、LRP6与非综合征性唇腭裂(Nonsyndromic cleft lip and／or cleft palate,NSCLP)发生的关系.方法:实验组标本40例,为NSCLP患儿裂缘皮肤、粘膜组织.对照组标本18例,为正常儿童的口唇部皮肤、粘膜组织.通过免疫组织化学SP法,检测TGFβ3、CTGF及其受体TGFβRⅡ、LRP6在实验组和对照组中的表达.结果:实验组CTGF的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05);实验组CTGF受体LRP6的表达较正常对照组降低(P<0.01);实验组TGFB 3的表达较正常对照组明显增高(P<0.01);实验组TGFl3 3受体TGFβRⅡ的表达与对照组无显著性差异(P>0.05).结论:CTGF受体LRP6及TGFβ3的表达异常可能与NSCLP的发生有关.
作者：田晓菲；金先庆；罗庆；邱林；傅跃先 刊期： 2009年第01期
目的:探讨结核性脑膜炎患者脑脊液(Cerebrospinal flaid,CSF)常规、生化检测及脑脊液细胞学检查对结脑的诊断以及疗效评估的价值.方法:动态分析80例结脑患者治疗前、后CSF常规、生化、脑脊液细胞学变化特点及检测结果.结果:结脑患者治疗前CSF开放压力高(87.5%).治疗后压力升高率下降明显,差异具极显著性意义(P<0.01);多数结脑患者治疗前CSF常规镜下清晰透明(87.5%),经治疗后差异对比不明显(P>0.05);治疗前,多数结脑患者CSF细胞数总数升高(94.19%);治疗12周下降至25%(P<0.01);结脑患者治疗前CSF.的生化异常率高达90%以上,治疗12周后氯化物和葡萄糖异常率下降(P<0.01),蛋白质与治疗前比较,差异均无显著性意义(P>0.05).典型的结核性脑膜炎早期呈以粒细胞增多为主的混杂细胞反应,治疗中期粒细胞逐渐减少,免疫细胞、激活单核细胞增多,治疗晚期以激活淋巴细胞反应为主,粒细胞逐渐消失,治愈后细胞学恢复正常.结论:CSF常规及生化改变异常率高,对结脑患者早期诊断与疗效评估有重要价值;脑脊液细胞学的动态监测有助于结核性脑膜炎的早期快速诊断及判断预后.
作者：周大明；彭仕芳 刊期： 2009年第01期
目的:观察大鼠未成熟睾丸单侧扭转后对健侧睾丸血流供应的影响,并比较不同处理方法的疗效.方法:建立3周龄大鼠左侧睾丸扭转(Testis torsion,TT)模型,随机分为对照组、扭转组、扭转复位组和切除组.彩色多普勒测量各组术前、术后8 h(即扭转复位或切除术后2 h)、12 h、24 h、72 h及1周时右侧精索内睾丸动脉收缩期大血流速度(Vs),舒张末期血流速度(Vd)和阻力指数(RI).结果:左侧睾丸扭转后,右侧睾丸的血供较对照组明显增加(P<0.01),以术后8 h为高峰;解除扭转6h后,右侧睾丸动脉Vs值较扭转复位2 h时有明显下降(P<0.01),但仍显著高于对照组和扭转组(P<0.01);切除扭转睾丸6h后,右侧睾丸动脉Vs值较扭转切除2 h时显著升高(p<0.01),随后逐渐下降,术后72 h右侧睾丸动脉Vs值显著高于对照组和复位组(P<0.01),而低于扭转组(P<0.01);术后1周,Vs、Vd、RI均为扭转切除组>扭转复位组>扭转组>对照组(p<0.01).结论:大鼠未成熟睾丸单侧扭转后,扭转复位和扭转切除处理均可引起对侧睾丸血供显著持续增加.
作者：林涛；李旭良；王荞；魏光辉；何大维；刘俊宏；张德迎 刊期： 2009年第01期
目的:探讨人包皮成纤维细胞的生物学特性,为人胚胎生殖细胞(Human embryonic germ cells,hEG cell)长期体外培养打下基础.方法:探索分离包皮成纤维细胞的方法;采用免疫细胞化学法、MTY法、流式细胞术等对人包皮成纤维细胞进行生长形态观察.纯度鉴定,生长曲线及细胞周期检测,并就不同浓度丝裂霉素作用不同时间对人包皮成纤维细胞生长的影响进行研究.结果:0.25%胰酶,4℃消化过夜(12-16h)较37℃,5%CO2孵育2h更容易分离表皮和真皮;包皮成纤维细胞波形蛋白染色呈强阳性,纯度达95%以上;细胞生长曲线没有明显的滞留期,在1～6 d处于快速增殖期,第7d开始处于平台期;细胞周期大多数处于G0/G1期,细胞周期与细胞生长曲线保持一致.丝裂霉素抑制包皮成纤维细胞增殖的适宜浓度及时间为12.5μg/ml作用2.5h.结论:包皮成纤维细胞的生物学特性表明其可以作为人EG细胞长期体外培养的饲养层.
作者：黎晓莉；张雁；吴宏 刊期： 2009年第01期
目的:构建并鉴定细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)重组pCD-Eg95质粒.方法:从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA,采用RT-PCR方法扩增Eg95编码基因,将该基因定向克隆到真核表达载体pCDNA3.1中构建pCD-Eg95重组质粒;电穿孔转化大肠杆菌BIA21(DE3)株,抽提质粒进行酶切及PCR鉴定.结果:电泳及测序证实471 bpEg95基因克隆成功.经酶切及PCR证实重组质粒pCD-Eg95成功转入BL21(DE3).结论:成功构建了Eg重组pCD-Eg95质粒.
作者：周辉；李文桂 刊期： 2009年第01期
目的:探讨头孢曲松钠羊膜腔内给药对大肠埃希菌所致宫内感染的晚孕SD大鼠胎盘组织炎症反应和滋养细胞凋亡的影响.方法:妊娠15 d的SD孕鼠36只.随机分成4组,分别为羊膜腔内给药(IUA)组、对照(IUC)组和母鼠静脉给药(IVA)组、对照(IVC)组,每组9只.(1)妊娠第15 d,所有孕鼠一侧宫角行1010个几大肠埃希菌菌液0.2 ml接种.(2)妊娠第16 d,IUA组和IUC组,分别于接种侧各羊膜腔内注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水,IVA组和IVC组,母鼠尾静脉分别注射头孢曲松钠和等体积的生理盐水.(3)自妊娠第17 d起,每组每天随机处死3只,其接种侧宫角顶端3个胎囊胎盘行HE染色组织切片,光学显微镜下比较Naeye分期分级,随机抽取其一TUNEI.法FITC标记胎盘凋亡细胞后作半定量分析.结果:羊膜腔内穿刺总体和各天的给药组轻度炎症率高于对照组,母鼠静脉途径总体和第2、3 d.给药组轻度炎症率高于对照组(P<0.05).轻度炎症率在两个给药组和其给药后1 d时,羊膜腔内组较母鼠静脉组为高(P<0.05).给药组滋养细胞凋亡强度明显低于其对照组(P<0.05).IUA组给药后第1、3 d,凋亡强度较IVA组低(P<0.05).结论:单次头孢曲松钠给药治疗晚孕SD大鼠大肠埃希菌宫内感染,羊膜腔内较母鼠静脉途径能更迅速地减轻胎盘的炎症反应和抑制滋养细胞凋亡,以改善妊娠结局.
作者：程浩；刘建；兰易；邹姝丽；甘晓玲 刊期： 2009年第01期
目的:探讨影响人脐静脉内皮细胞转染效率的因素,为优化外源基因在其中的表达提供实验依据.方法:选用适于转染人脐静脉内皮细胞的脂质体lipofectin,采用不同的转染条件:脂质体和DNA的用量;铺板密度;细胞与DNA-脂质体复合物孵育时间转染内皮细胞.荧光显微镜、流式细胞仪测定不同转染参数下的转染效率.结果:(1)24孔板中,铺板密度大于2×104个/孔和孵育时间超过4h,反而使转染效率下降.(2)随质粒质量增加转染效率逐渐上升,达峰后质粒质量的增加并不能显著增高转染效率.(3)特染效率达峰前,随着脂质体用量的增加,转染效率增高;达峰后,脂质体用量的增加,转染效率反降低.当DNA(μg)和脂质体(μl]的用量比为1∶6～1∶8时,获得高的转染效率:18.62%.结论:采用优化后的转染参数在人脐静脉内皮细胞转染中可获得较优的转染效率.
作者：段炼；周波；李启富 刊期： 2009年第01期
1991年Reich等[1]首次报道了腹腔镜肝切除术,之后.随着腹腔镜外科的不断发展,腹腔镜在肝脏外科的应用日益广泛,但由于肝血管瘤的特殊解剖,腹腔镜肝血管瘤切除术至今报道较少.我科2002年8月到2007年6月完成了9例腹腔镜肝血管瘤切除术,取得了较满意的疗效,现总结如下.
作者：邓和军；李庆东；冉崇新 刊期： 2009年第01期
目的:构建编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体.为进一步研究其蛋白功能提供工具.方法:穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α线性化后与骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重组,筛选并提取重组正确的腺病毒质粒,PacI线性化,脂质体转染293细胞包装出成熟的具有感染活力的腺病毒颗粒,TCID50法测定病毒滴度,Western bloting检测PGC1α蛋白在293细胞的表达.结果:测序及酶切鉴定表明目的基因正确插人穿梭质粒,读码框未发生移位.重组腺病毒扩增后滴度约3×1010TCID50/ml,能在293细胞中表达PGC1α蛋白.结论:利用细菌内同源重组的方法成功构建了编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体,并观察到其蛋白表达.
作者：马仕坤；钟立；程庆丰；李卫平；青华；李启富 刊期： 2009年第01期
目的:了解乙肝免疫球蛋白(Hepatitis B immune globulin,HBIG)联合乙肝疫苗阻断乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)母婴传播的效果,探索佳免疫方案.方法:选择HBsAg检测阳性孕妇共99例为研究对象,按检测时期分为试验组和对照组,同时依据乙肝疫苗接种方式不同将试验组分为A组(皮内注射)和B组(肌肉注射).试验组孕妇于怀孕第28W、32W、36w分别肌注HBIG200IU;新生儿出生后分别于4 h、15 d、30 d肌注HBIG200IU,出生当日、1个月和第6个月各接种5μg基因乙肝疫苗.对照组常规接种乙肝疫苗.随访儿童至5岁,监测血液中HBsAg和抗-HBs情况.结果:试验组和对照组的乙肝病毒母婴垂直传播阻断率分别为98.36%和83.33%(P<0.05),试验A组和试验B组阻断率差异无统计学意义(P>0.05). HBsAg和HBeAg双阳性孕妇组和HBsAg单阳性孕妇组HBV母婴垂直传播阻断率分别为77.78%和97.26%(P<0.05),试验组和对照组的抗-HBs阳性率在一年时无统计学差异,但在5年时有统计学差异.结论:HBIG联合乙肝疫苗注射可明显提高HBV母婴垂直传播阻断率.对HBsAg单阳性孕妇的阻断率高于HBsAg和HBeAg双阳性孕妇.
作者：李雪梅；周晓军；王琳 刊期： 2009年第01期
目的:探讨纳米磁性颗粒(Magnetic nano-particles,MNP)对高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)损伤效率的影响.方法:将直径为80～90nm的磁性颗粒0.05 g和直径为200～300am的磁性颗粒0.05 g和0.10 g分别均匀分布在270 ml蛋白凝胶体模中.用同一高强度聚焦超声剂量辐照,结束后测量损伤线大剖面的长和宽.结果:含有0.05 g直径为80～90 nm的磁性颗粒的蛋白凝胶体模与对照组相比未见增效,而200～300 nm的磁性颗粒与对照组相比损伤面积增大3倍多(P<0.01).结论:直径为200～300 nm的磁性颗粒能够改变蛋白凝胶体模的声学环境,从而提高高强度聚焦超声对其损伤的效率.
作者：李全义；李发琪；秦艳 刊期： 2009年第01期
神经鞘膜瘤(Neurilemmoma)是起源于神经鞘膜施万细胞的良性肿瘤[1],可单发或多发于身体任何部位,发生于颈部者,其诊断与治疗易与颈部转移性肿瘤混淆,误诊率较高,临床上有研究意义,我科收治的1例颈深部神经鞘膜瘤报告如下.
作者：向银洲；魏莲枝；余林 刊期： 2009年第01期
目的:了解国人正常月骨形态,为新型生物材料腕月骨假体的设计和置人提供理论数据.方法:健康成年男60例,女61例在CT下进行双侧腕关节扫描,获取腕关节DICOM格式文件,利用MIMICS软件重建腕月骨.并根据腕月骨假体的设计要求进行测量.结果:月骨长度(15.40±1.25)mm、月骨高度(6.00±1.16)mm、月骨宽度(12.64±1.43)mm、头月关节面纵向大角度132.28.±6.76.、桡月面近端夹角79.18.±5.87..结论:腕月骨的相关参数是设计新型生物材料假体和置入的关键指标.可以根据这些数据进行适合国人假体的设计,并探讨假体的个性化设计.
作者：钦斌；黄永火；黄伟；吕发金；甘强；王仁崇 刊期： 2009年第01期
目的:观察依达拉奉对血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清VEGF、IL-1β和TNF-α表达的影响,探讨依达拉奉对血管性认知功能损害脑保护作用机制.方法:永久性结扎大鼠双侧颈总动脉法建立血管性认知功能损害血管性认知功能损害动物模型,Wistar大鼠随机分为假手术组(S组)、血管性认知功能损害模型组(M组)、依达拉奉治疗组(MT组).酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织IL-1β、TNF-α.表达水平和血清水平,蛋白质免疫印迹法和酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织VEGF,水迷宫实验和跳台实验检测行为学改变.结果模型组大鼠有明显的学习、记忆、行为障碍,经过依达拉奉治疗后血管性认知功能损伤大鼠的学习、记忆、行为功能明显改善.MT组IL-1β、TNF-α表达较M组降低(P＜0.01),MT组VEGF表达较M组增高(P＜0.01);MT组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较S组增高(P＜0.01);M组VEGF、IL-1β、TNF-α表达较N、S组显著增高(P＜0.01).结论依达拉奉能降低血管性认知功能损害大鼠脑组织和血清IL-1β、TNF-α水平、增强VEGF表达,依达拉奉可以通过抑制血管性认知功能损害炎症反应和增强血管修复发挥脑保护作用.
作者：蔡志友；晏勇；张骏；吴芳；张建刚；王咏龙 刊期： 2009年第01期
目的:探讨心房颤动(简称房颤)波的主导心房周长(Dominant atrial cycle length,DACL)在房颤药物复律过程中的变化和可能的机制.方法:对30例持续性房颤服用胺碘酮的患者,于服药前、后的1～14 d进行房颤波的采样分析,并计算DACL、P2/p1(第二频峰的功率与第一频峰功率的比值)比值.结果:服药14d后有21例转复成窦性心律(A组),9例未能转复(B组).所有患者服药后的DACL和P2/p1较服药前明显延长和变小(246±27)ms vs(150±31)ms,(215±22)ms vs(143±28)ms,(0.32±0.24)vs(0.43±0.21),(0.49±0.28)vs(0.53±0.23),P<0.05～P<0.001),复律组复律前的DACL较未复律组的DACL延长更为明显(246±27)ms vs(215±22)ms p<0.001).结论:DACL是判断房颤复律成功与否的有用指标.
作者：王渝佩；张红 刊期： 2009年第01期
目的:观察短暂延迟性酸处理对老龄大鼠心肌缺血再灌注后血流动力学的影响.方法:60只SD老龄大鼠(≥18个月),随机分为6组(n=10):(1)空白对照(C组)组;(2)缺血再灌注(I/R)组;(3)缺血后处理(IPO)组;(4)酸处理(H+)组;(5)缺血后处理+碱处理(IPO+OH-)组;(6)碱处理(OH-)对照组.采用Langendorff离体心脏灌流方法,以心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压大上升速率(+dp/dtmax和左室内压大下降速率(-dp/dtmax)5项血流动力学参数为指标,观察短暂延迟性酸处理对老龄大鼠心肌缺血再灌注后收缩和舒张能力的影响.结果:与C组比较,再灌注期间I/R组、IPO组、H+组、IPO+OH-组和OH-组的LVEDP升高,HR、LVSP、±dp/dtmax降低(P＜0.05);与I/R组比较,IPO组和H+组LVEDP降低,HR、LVSP、±dp/dtmax升高(P＜0.05).结论:短暂延迟性酸处理能模拟缺血后处理对离体心脏血流动力学的保护作用,且这种保护作用对老龄大鼠同样有效.
作者：乔欣；刘新伟 刊期： 2009年第01期
重庆医科大学学报杂志
主管:重庆市教育委员会
主办：重庆医科大学
