学术投稿

前列腺增生合并输尿管结石的同期腔镜治疗分析

王洛夫;葛成国;孙中义;李家宽;万江华;兰卫华;张尧;靳风烁

关键词:前列腺增生, 输尿管结石, 经尿道前列腺电切术, 输尿管镜碎石术
摘要:目的:探讨腔镜下同期处理前列腺增生和输尿管结石的可行性、疗效及并发症.方法:同顾性分析我院2000年1月至2008年12月收治的前列腺增生并发输尿管结石病例,对腔镜下同期处理前列腺增生和输尿管结石的病例进行疗效评价.结果:患者58例,平均年龄62.3岁.前列腺增生程度:Ⅰ度12例.Ⅱ度35例,Ⅲ度11例,其中输尿管下段结石29例,中段结石10例,上段结石19例.所有病例均同期行输尿管镜下输尿管结石双频激光(U100)碎石取石术和经尿道前列腺电切术,成功行碎石取石48例,有3例输尿管镜无法上行至上段改为单纯留置双J管,置镜失败2例,失败原因为输尿管口显示不清,3例输尿管上段结石置镜过程中结石移位至肾盂,未能碎石.另有2例患者术后证实有结石残留.所有患者经尿道前列腺增生电切术均顺利,无严重并发症.术后4~6d拔除尿管,无尿失禁及尿潴留,1个月拔除双J管.结论:前列腺增生合并输尿管结石,可同期行输尿管镜下碎石和经尿道前列腺电切手术,治疗效果确切,无严重并发症.
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 地震伤员PTSD及其影响因素的研究

    目的:调查汶川地震灾后伤员的创伤后应激障碍(Posttraumatic stress disorder,PTSD)相关症状的发生及其影响因素.方法:采用美国<精神障碍诊断与统计手册>第四版(DSM-Ⅳ)中关于PTSD的诊断标准,在地震后40 d对伤员PTSD症状进行评定.结果:地震后40 d PTSD症状的检出率为51.4%,其主要影响因素为性别(OR=2.364)、地震中被掩埋(OR=2.171)、目睹有人在地震中受伤(OR=0.338).结论:此次地震后PTSD症状的检出率相当高,应采取针对性的干预措施.

    作者:刘婉婷;况利;陈建梅;黎雪梅;艾明;李大奇;高新学;赵正中;楼丹丹 刊期: 2009年第12期

  • mdrlC3435T基因多态性与卵巢癌遗传易感性关系研究

    目的:探讨mdr1基因多态性与卵巢癌遗传易感性的关系.方法:采用病例对照,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析135例经病理确诊的卵巢癌病人(病例组)和146例同一地区的健康汉族女性(对照组)的mdr1C3435T基因型进行对照研究.结果:卵巢癌病例组C/C型(30.37%)明显低于对照组(47.95%),而病例组T/C型(44.44%)和T/T型(25.19%)均明显高于对照组T/C(38.35%)和T/T(13.7%),病例组和对照组各基因表型之间差异有显著统计学意义(X~2=10.930,P=0.004).卵巢癌mdr1C3435T基因纯合缺失率(25.19%)高于对照组(13.7%),差异有统计学意义(X~2=5.961,P-0.015),与对照组相比,T/T型患卵巢癌的危险度提高了2.121倍.mdr1C3435T的基因纯合缺失型和非纯合缺失型在病例组与对照组间年龄比较差异均有明显统计学意义(P<0.05),其中在50岁以上年龄段,病例组与对照组mdr1C3435T的基因纯合缺失率差异有统计学意义(X~2=4.984,P=0.026),病例组(20.41%)高于对照组(5.1%),T/T型患卵巢癌的危险度增加2.533倍.结论:mdr1C3435T基因突变可增加卵巢癌发病风险,mdr1C3435T基因多态性与卵巢癌遗传易感性密切相关.50岁以上女性,T/T型增加卵巢癌的发病风险.

    作者:马丽芳;周琦;徐建业;李少林 刊期: 2009年第12期

  • 苯巴比妥钠对新生儿非病理性呕吐的临床疗效

    目的:探讨苯巴比妥钠对新生儿非病理性呕吐的临床疗效.方法:将出现非病理性呕吐的足月新生儿随机被分为用药组(245例),观察组(200例).用药组新生儿出现非病理性呕吐后立即被给予苯巴比妥钠(2~3 mg/kg)臀部肌肉注射1次,30min后给予口服牛奶以确定药物疗效,若≥20 ml则视为药物治疗有效.而观察组新生儿不给予任何药物干预.结果:用药组新生儿肌注苯巴比妥钠30 min后,给予口服的奶量显著多于观察组单纯停止喂养30 min后的喂奶量(P<0.05).结论:苯巴比妥钠具有初步鉴别病理性和非病理性呕吐的作用,并对新生儿非病理性呕吐具有良好疗效,值得临床推广.

    作者:胡燕;张建华 刊期: 2009年第12期

  • 均匀设计法优选布洛芬缓释原位凝胶剂处方及释药性质的研究

    目的:用均匀设计法筛选布洛芬缓释原位凝胶剂处方,考察不同处方的凝胶溶蚀和药物释放行为.方法:冷法制备原位凝胶,单因素考察布洛芬-羟丙基-β-环糊精包和物和辅料对胶凝温度(T_(sol-gel))的影响,均匀设计法优化P407和P188浓度,无膜溶出法考察凝胶溶蚀行为,高效液相色谱法对溶蚀液进行定量分析.结果:海藻酸钠随浓度的增大可使T_(sol-gel)降低,优化后P407/P188=19%,5%,凝胶溶蚀和药物累积释放与时间均呈零级动力学.结论:均匀设计法适合用于筛选P407和P188浓度,制得的原位凝胶具有缓释效果.

    作者:王丽娟;朱照静;吴青;马俐丽 刊期: 2009年第12期

  • 过氧化氢酶与甲基强的松龙对实验性脱髓鞘性视神经炎的抑制作用

    目的:研究活性氧簇清除剂过氧化氢酶(Catalase,CAT)及甲基强的松龙(Methylprednisolone sodium succinate,MP)琥珀酸钠对实验性脱髓鞘性视神经炎的作用及其机制.方法:将致敏大鼠分别以Catalase、生理盐水(Physiolosic saline,PS)及MP琥珀酸钠腹腔注射后分别于抗原致敏后第7 d及14 d,通过H_2O_2测定、病理图像分析、细胞组织超微结构分析等方法研究CAT及MP对实验性变应性视神经脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠视神经炎症损伤的作用.结果:EAE大鼠视神经H_2O_2含量较正常大鼠高,CAT和MP能减少EAE大鼠视神经H_2O_2含量,减轻炎症反应,抑制视神经的脱髓鞘,但MP对H_2O_2清除作用及髓鞘损害的保护作用较CAT弱.结论:H_2O_2可能和脱髓鞘性视神经炎的发病有一定关系.

    作者:简嘉;李平华 刊期: 2009年第12期

  • 全反式维甲酸诱导HL60细胞分化前后蛋白表达差异分析

    目的:建立全反式维甲酸(All trans-retinoic acid,ATRA)诱导HL60细胞向粒系分化的模型,研究采用改良双向电泳条件对分化前后的细胞全蛋白进行分离分析,寻找差异表达蛋白.方法:采用全反式维甲酸对HL60细胞进行诱导分化.通过MTT、流式细胞技术分析细胞增殖情况和CD11b细胞表面分化抗原的表达,选择适的药物浓度和诱导时间;再通过细胞化学染色对分化结果进行验证,构建分化模型.采用改良双向电泳分离技术对细胞全蛋白进行分离,运用PDQuest软件分析HL60细胞分化前后蛋白表达差异,并用基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF)对差异蛋白点进行分析.结果:ATRA明显抑制HL60细胞增殖,并随药物浓度的增加,抑制效果也越显著;2 μmol/L的ATRA连续作用HL60细胞5 d即有90%以上的细胞有粒系分化标志抗原CD11b的表达.细胞化学染色结果亦表明诱导后的HL60细胞向粒系分化.将分化前后的HL60细胞全蛋白经过改良双向电泳技术分离,PDQuest软件比对,MAIDI-TOF分析,发现有25个蛋白点仅在未分化凝胶谱中找到,有15个蛋白点仅在分化细胞蛋白表达谱中找到.其中有的是癌基因表达蛋白,有的是抑癌基因表达蛋白,还有的则参与凋亡过程等.结论:在选定的药物浓度和作用时间下,ATRA可以诱导HL60细胞向粒系分化.改良双向电泳技术对药物作用前后细胞蛋白的分离,可发现不同于传统双向电泳分离所得的蛋白结果.

    作者:唐薇;王伟佳;邱宗荫 刊期: 2009年第12期

  • 表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠

    目的:观察表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠的效果.方法:小鼠分为3组.对照组(10只)用空质粒pcDNA3.1(+)活化的脾细胞免疫后,以空质粒治疗;模型组和治疗组(各19只)均以人TSH受体(Human thyrotmpin receptor,hTSHR)活化的脾细胞进行免疫,前者不予治疗,后者甲状腺注射表达hFasL的质粒pcDNA3.1(+)/hFasL.结果:模型组47.4%的甲状腺细胞出现增生、肥大,以及甲状腺滤泡腔胶质减少,与对照组相比,TT4、TRAb升高、TSH降低(P<0.05).治疗组仅15.8%有类似甲状腺功能亢进改变,电镜下见细胞核异染色质边集,TT4、TSH、TRAb回复至对照组水平.结论:表达人Fas配体的质粒治疗Graves病模型小鼠取得一定效果.

    作者:随华;刘纯;张徽;李秀娟;何云;张琳;詹升华 刊期: 2009年第12期

  • 肾恶性血管平滑肌脂肪瘤1例报告及文献复习

    目的:探讨肾恶性血管平滑肌脂肪瘤(Malignant renal angiomyolipoma,MRAML)的临床病理特点,以提高对该病的认识.方法:分析本院病理科室收集的肾恶性血管平滑肌脂肪瘤标本,进行HE染色,光镜观察,免疫组化(S-P法)染色,结合临床诊治资料并复习文献.结果:肿瘤组织学形态示上皮样细胞、平滑肌样细胞以不同比例出现,可见厚壁血管,核分裂象明显,并可见病理性核分裂象及灶性坏死区域.免疫组化:上皮样及平滑肌样细胞都特征性表达黑色素特异性标识(4MB-45)、上皮膜抗原(Epithelial membrane antigen,EMA)、平滑肌标识(Aetin)等.结论:B超、CT、MRI是诊断肾恶性血管平滑肌脂肪瘤的重要检查方法,家族史和详细的体格检查能够给我们提供重要的诊断线索,组织病理学特点结合免疫组化标记有助于该瘤的确诊.

    作者:杨春蓉;张徽;黄伟 刊期: 2009年第12期

  • 正交实验优选γ-亚麻酸脂质体制备工艺

    目的:月见草油富含多种人体必需不饱和脂肪酸,其主要有效成分为γ-亚麻酸,但性质不稳定易氧化,故将其制成脂质体可增加其稳定性并提高其疗效.方法:本实验采用正交试验筛选γ-亚麻酸脂质体的制备工艺.经过实验得出佳的制备工艺条件为磷脂与月见草油的比例为0.2:0.1,溶于20ml氯仿和40ml磷酸缓冲溶液,超声处理10min.结果:制得的γ-亚麻酸脂质体的包封率较高达99%以上,且渗透率较低.结论:本方法简便易行,实验结果可为新药开发和工业化生产应用提供条件.

    作者:赵跃刚;沈晓君;齐晋楠;孙全乐;贡济宇 刊期: 2009年第12期

  • 硫酸长春新碱PLGA微囊的制备及体外释放性质研究

    目的:制备硫酸长春新碱乳酸-乙醇酸共聚物[Poly(lactide-co-glycolide),PLGA]微囊并考察其体外释放.方法:采用W/O/W复乳-溶剂挥干法制备硫酸长春新碱PLGA微囊,考察了内、外水相pH值,PLGA,Span 80,NaCl浓度和CH_2Cl_2挥干方法对微囊包封率的影响,并对其形态、粒径分布和体外释放性质进行了研究.结果:制得的硫酸长春新碱PLGA微囊为球形,表面光滑,平均粒径约为643.1 nm,平均包封率为39.5%.结论:采用复乳-溶剂挥干法成功制备硫酸长春新碱PLGA微囊,体外释放表明具有其缓释作用.

    作者:凌旭;张良珂;李攀;王海鸥;冉海涛 刊期: 2009年第12期

  • Bcl-2、Bad表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的关系

    目的:研究bcl-2、bad表达与乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的关系.方法:选取术中冰冻病理诊断为乳腺癌(术前未行放疗、化疗)的手术切除标本20例,体外分离细胞作培养,应用四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-y1)-2,5--diphenylt etrazolium bromide,MTT)法分析表柔比星(Epirubicin adriamyein,EADM)、5一氟脲嘧啶(Fluorouracil,5一Fu)、盖诺(Navelbine,NVB)、顺铂(Diaminedichloroplatinum,DDP)4种化疗药物对乳腺癌肿瘤细胞的相对抑制率,通过免疫组织化学染色法分析乳腺癌组织bcl-2、bad的表达.结果:0.1倍血浆峰值浓度(Plasma peak concentration,PPC)浓度时乳腺癌细胞对4种化疗药物的敏感率分别为EADM 30%、5-Fu 20%、NVB45%、DDP25%;bcl-2(-)的乳腺癌细胞对4种化疗药物敏感性均高于bcl-2(+)的乳腺癌细胞(P<0.05),bel-2阳性表达程度与乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性存在负相关关系(19<0.05).bad(+)的乳腺癌细胞对EADM敏感性高于bad(-)的乳腺癌细胞(P<0.05),bad阳性表达程度与乳腺癌细胞对EADM、NVB的敏感性存在正相关关系(P<0.05).结论:联合检测bcl-2、bad的表达可对乳腺癌化疗药物的选择起到指导作用,调节bcl-2、bad表达水平能成为治疗乳腺癌的新途径.

    作者:罗杰;于冰;孙治君 刊期: 2009年第12期

  • 16层螺旋CT冠状动脉成像的临床价值

    目的:探讨16层螺旋CT冠状动脉成像的临床应用价值.方法:采用GE LightSpeed 16层螺旋CT,对36例可疑冠心病患者行CT冠状动脉成像检查,按照心率不同分为Agt(≤65次/min)14例、B组(66-70次/min)12例和C组(71~75次/min)10例3组,前一组采用单扇区重建,后两组采用双扇区重建,重建时相预设为75%R-R间期,扫描完成后分别重建45%、55%、65%和 85%R-R间期图像.重建数据传至AW4.1工作站后处理成像.后处理方法采用大强度投影(Maximum intensity pmjection,MIP)、容积再现(Volume rendering,VR)、多平面重组(Multi-planar reformation,MPR)等模式,分别获取冠状动脉的各种重组图像并分析冠状动脉主要分支的显示率.统计学处理采用卡方检验.结果:A组冠状动脉的主要分支包括右冠状动脉、左冠状动脉主干、前降支和左旋支的显示率均为100%;B组其显示率分别为91.67%、100%、100%和91.67%;C组其显示率分别为80%、100%、90%和70%.3组间差异无统计学意义(P>0.05).左冠状动脉主干和前降支在75%R-R间期显示佳,左旋支在55%显示佳,右冠状动脉在65%R-R间期显示佳.各重建相位间显示差异无统计学意义(P>0.05).结论:作为无创性的检查手段,16层螺旋CT能充分显示冠脉主干及其主要分支的正常解剖以及病变特征.随着CT技术的发展和临床应用的增多,多层螺旋CT冠脉成像必将发挥重要作用.

    作者:罗银灯;赵建农;郭大静;吴伟;敬永勇;倪卫国;沈霞;邝晓 刊期: 2009年第12期

  • miRNA-451表达质粒的构建及其对iNOS基因表达的抑制

    目的:探讨miRNA-451对肾小球系膜细胞中诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)基因表达的影响.方法:依据miRBase数据库中mmu-miR-451序列,设计两条寡核苷酸片段,退火处理后克隆至pGenesil-1质粒,构建pGenesil-1-miRNA-451质粒及阴性对照质粒pGenesil-1-control.将pGenesil-l-miRNA-451及pGenesil-1-control质粒分别转染小鼠肾小球系膜细胞,经G418筛选,建立稳定表达pGenesil-1-miRNA-451及pGenesil-1-control的细胞株.采用MTT比色法检测活细胞数并绘制生长曲线;RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学检测iNOS基因表达的差异.结果:经测序证实重组质粒构建成功,与未处理的小鼠肾小球系膜细胞和稳定表达pGenesil-1-control的细胞相比,在稳定表达pGenesil-1-miRNA-451的小鼠肾小球系膜细胞中,细胞增殖受到抑制,iNOS基因的蛋白表达明显受到抑制,而iNOS基因的mRNA水平无明显变化.结论:miRNA-451在翻译水平抑制了iNOS基因的表达,并对小鼠肾小球系膜细胞生长具有显著的抑制作用.

    作者:李春蕾;何晓燕;彭琼乐;张政;武卫华;彭惠民 刊期: 2009年第12期

  • 胆总管结扎对小鼠肝脏炎症和细胞凋亡的影响

    目的:探讨胆总管结扎引起的胆汁淤积对小鼠肝脏细胞凋亡和炎性细胞浸润的影响.方法:采用胆总管结扎手术制备胆汁淤积小鼠模型;利用全自动生化分析仪检测小鼠血清肝脏生化指标水平;用末端核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷原位缺口末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dutp nick end labeling,TUNEL)检测小鼠肝脏细胞凋亡;用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测肝脏炎症相关基因表达情况.结果:通过胆总管结扎手术成功制备了梗阻性胆汁淤积小鼠模型;小鼠血清生化指标结果表明小鼠肝脏功能受损,胆总管结扎手术成功;胆总管结扎引起胆汁淤积后,肝脏细胞凋亡和坏死明显增加,炎症细胞浸润增强.结论:胆汁淤积导致肝脏细胞凋亡、坏死和炎症活动增强是胆总管结扎致肝纤维化过程中的重要表现.

    作者:董玉芳;文阳安;周倩云;罗丹;张莉萍 刊期: 2009年第12期

  • 喉癌中HPV不同亚型的检测及测序

    目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用.方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA.同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型.123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高.结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染.

    作者:彭方毅;姜海蓉;刘芳;杜志银;林治华;彭方亮;赵卫兵 刊期: 2009年第12期

  • 丹参酮ⅡA磺酸镁对大鼠急性心肌梗死的保护作用及机制

    目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸镁(Magnesium tanshinone Ⅱ A sulfonate,MTS)对急性心肌梗死的保护作用及其作用机制.方法:用冠状动脉结扎法制备大鼠急性心肌梗死模型,并将成功模型大鼠随机分为5%葡萄糖溶液对照组、丹参酮ⅡA磺酸钠组、丹参酮ⅡA磺酸镁低、中、高剂量组.结扎后5min通过尾静脉分别给予相应剂量的药物并于4h后测定大鼠心肌梗死范围以及血清和心肌组织中酶的活性.结果:与对照组比较,丹参酮ⅡA磺酸镁能剂量依赖性降低模型血清肌酸激酶(Creatine phos phokinase,CK)和乳酸脱氢酶(Lactic acid dehydrogenase,LDH)活性;减少心肌梗死范围;提高心肌组织超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性,同时降低丙二醛(Malondiadehyde,MDA)含量.结论:丹参酮ⅡA磺酸镁对急性心肌梗死有保护作用,其保护机制与抗氧自由基作用有关.

    作者:张玉方;赵春景 刊期: 2009年第12期

  • 熊果酸诱导前列腺癌细胞株PC-3凋亡的实验研究

    目的:探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人前列腺癌细胞株PC-3细胞周期、凋亡的影响及其作用机制.方法:人前列腺癌细胞株PC-3以不同浓度的UA作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(4 methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT),免疫组织化学SP法,流式细胞术(Flow cytometry,FCM),Western blot等实验方法检测PC-3细胞的增殖抑制情况,细胞周期和凋亡率的变化,以及细胞内bcl-2、bax 2个重要的细胞凋亡相关基因和细胞凋亡相关特殊蛋白cox-2、caspase 3表达的变化.结果:UA对PC-3细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强.24、48 h和72 h 3个时间段UA分别作用于PC-3细胞后的IC_(50)分别为50.87、37.91 μmol/L和27.86μmol/L;熊果酸作用后PC-3细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G_1期,进入S期的细胞减少.UA能够诱导PC-3细胞凋亡,经过24、48 h和72h 3个时间段UA浓度50μmol/L作用后,细胞凋亡率为6.21%、7.81%和13.31%;细胞内bcl-2和cox-2的表达随着药物浓度增加逐渐减少;bax和caspase 3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加.结论:UA能够抑制PC-3细胞的增殖,并使细胞大量累积于G_1期,进入s期的细胞减少.可能通过使bcl-2和cox-2的表达减少、bax和caspase 3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡.

    作者:夏阳;苟欣 刊期: 2009年第12期

  • 丹参素对肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

    目的:观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB(Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1,2(Phosphoryhted extracellular signal-regulated kinase 1/2,P-ERK1/2)表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制.方法:四甲基偶氮唑盐法检测大鼠HSC增殖活性;免疫细胞化学染色法测定大鼠HSC Ⅰ型胶原合成的表达;Western blot测定大鼠肝星状细胞P-ERK1/2的表达.结果:丹参素有抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原表达,p-ERK1/2表达的作用.结论:丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关.

    作者:李智;戴立里 刊期: 2009年第12期

  • 宫颈妊娠的诊断与治疗-附23例分析

    目的:探讨早期诊断及有效、微创治疗宫颈妊娠的方法.方法:回顾性分析23例官颈妊娠的临床及影像学表现,总结诊断及治疗要点.结果:19例患者通过保守性的治疗方法治愈,3例通过全子宫切除治愈.结论:宫颈妊娠的发生与刮宫及剖宫产有关;超声检查可为临床诊断和处理提供可靠的信息;保守性治疗包括药物治疗、保守性手术治疗、介入治疗均是有效的治疗方法,可以大限度减少创伤、保留月经及生育功能.

    作者:肖琳;唐良萏;卞度宏 刊期: 2009年第12期

  • 抗菌肽PR-39真核表达载体的构建及表达检测

    目的:构建富含脯氨酸精氨酸的39位氨基酸抗菌肽(Proline-arginine rich 39-amino acid peptide,PR-39)的真核表达载体,并检测它在293 T细胞中的表达情况.方法:以含有PR-39核心编码区(Core ceding regions,CDS)序列的质粒pBluescript ⅡSK-PR-39为模板,PCR扩增PR-39 CDS序列并测序.扩增片段插入真核表达质粒pGC-FU中,构建包含PR-39基因的重组表达质粒pGC-FU-PR-39.阳性克隆用限制性内切酶酶切及测序鉴定后用脂质体2000转染293 T细胞,荧光显像观察其转染效率,Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:成功扩增出PR-39基因,通过酶切测序鉴定证明成功构建了包含PR-39的真核表达载体pGC-FU-PR-39,转化293 T细胞24 h后观察到荧光,Western blot检测到目的蛋白.结论:本实验成功构建PR-39真核表达载体,并能在293 T细胞中表达PR-39-GFP融合蛋白,这为进一步研究PR-39的作用奠定了基础.

    作者:朱勇军;翁玄;张健;文阳安 刊期: 2009年第12期

重庆医科大学学报杂志

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