周燕；张纲；卓贤露；裘松波；谭颖徽
目的 检测粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)及其受体(G-CSFR)在儿童肾母细胞瘤中的表达.方法 收集我院2009年1月至2011年6月确诊的肾母细胞瘤患者手术标本27例.应用免疫组织化学方法检测肿瘤标本的G-CSF、G-CSFR的表达和分布情况.结果 肾母细胞瘤标本中粒细胞集落刺激因子和其受体的表达率分别是62.96％、66.67％.其中,G-CSF和G-CSFR在同一样本中均附性表达者16例(59.26％),均阴性表达者8例(29.63％).G-CSF阳性和G-CSFR阴性表达1例(3.70％),G-CSF阴性和G-CSFR阳性表达2例(7.41％).G-CSF和GCSFR的表达与性别、年龄、临床分期和病理分型均无相关性(P＞0.05).结论 G-CSF,G-CSFR在儿童肾母细胞瘤中高表达,无论性别、年龄、临床分期以及病理类型,均应检测肿瘤G-CSF、G-CSFR表达,对于G-CSFR阳性表达的患者,建议使用G-CSF时,应慎重考虑其对肿瘤的影响.
作者：张永波；何大维；何文飞；卞则栋；吴鑫；易钦君；魏光辉 刊期： 2012年第05期
目的 研究氧化亚氮/氧气吸入镇静技术(nitrous oxide/oxygen inhalation sedation,IHS)在牙周炎龈下刮治术中的无痛效果,为其临床广泛应用提供依据.方法 将80例中、重度牙周炎患者随机分为A、B、C、D4组,每组20例(A:电子镇痛仪组；B:IHS组；C:IHS+电子镇痛仪组；D:常规组),记录4组患者术前及术中的心率(HR)、血压(BP)和血氧饱和度( SpO2),并观察其镇静程度(Ramsay评分)和疼痛程度(VAS评分).结果 A、B、C三组HR、BP、VAS指数与D组比较有统计学差异(P＜0.05),B、C两组与A组比较同样有统计学差异(P＜0.05),而B、C两组则无统计学差异(P＞0.05).结论 IHS技术在龈下刮治术中镇静、镇痛效果良好,明显优于电子镇痛仪,可以大程度达到“无痛”效果,值得临床推广.
作者：叶国；杨霞；李丛华；付钢 刊期： 2012年第05期
目的 探讨Geminin基因过表达对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化的影响.方法 构建真核表达载体pEGFP-N1 -Geminin,脂质体2000介导转染不同表型(去分化型和分化型)的大鼠VSMCs株,设置阳性组、阴性组和空白组(n=3),检测转染效果、VSMCs主要表型标志物(α-actin、OPN)和肌动蛋白相关蛋白1(actin related protein,ARPl)的变化情况.结果 Geminin基因成功过表达VSMCs株.与2个对照组(阴性组和空白组)比较,分化型VSMCs中表型标志物(α-actin和OPN)及ARP1含量变化不大；去分化型VSMCs中,OPN在阳性组中表达下调,与2个对照组(阴性组和空白组)比较差异具有统计学意义(P＜0.05),α-actin和ARP1在阳性组中表达上调,与2个对照组(阴性组和空白组)比较差异具有统计学意义(P＜0.05),免疫共沉淀实验结果提示经protein G plus-Agarose沉淀ARP1相互作用蛋白复合物后,用Geminin抗体进行Western blot检测,可以检测到Geminin的表达.结论 Geminin基因过表达有助于VSMCs由去分化型向分化型转化；免疫共沉淀结果提示Geminin和ARP1之间存在相互作用,ARP1可能参与了上述VSMCs表型转化过程.
作者：李林峪；张园园；舒茂琴 刊期： 2012年第05期
目的 研制一种小型湿热环境动物试验箱.方法 采用有机玻璃制作湿热环境试验箱箱体,敷设加温、加湿装置和电子温度调节仪.利用电子温度、湿度计测定试验箱内环境温度变化规律.将SD大鼠12只置于试验箱内,分别测量受试前及受热30、60、90 min和120 min后的体质量及肛温变化,用于检测模拟效果.结果 当箱内空气温度为(37.9±0.2)℃、相对湿度为(60.4±0.9)％时,受试动物活动增多,30 min肛温平均升高2.7℃,60 min后体质量减轻3.16％ (P＜0.01),120 min后体质量减轻5.52％ (P ＜0.01).结论 该试验箱内温、湿度在一定范围内可控,试验结果精确、稳定、可靠,可作为湿热环境相关科学研究的实验模型.
作者：赵远鹏；蔡颖；董兆君 刊期： 2012年第05期
目的 检测外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-ralated peptide,CGRP)对体外培养兔成骨细胞转化生长因子-β1(transformation growth factor-β1,TGF-β1)表达的调控作用,探讨其对成骨细胞增殖的影响.方法 将出生5d以内新西兰大白兔头骨成骨细胞进行原代培养,用不同浓度的CGRP分别在不同时间段处理后,用MTT法检测细胞生长活力增殖情况；用Western blot检测成骨细胞TGF-β1的蛋白表达.结果 成功分离并培养兔颅骨原代成骨细胞,进行碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞.结果显示同一浓度的CGRP随着时间的增加MTT值呈增加趋势；而就同一时间点做比较,随着CGRP浓度的不断增加,MTT值也呈上升趋势,并且在48h和72h,这种趋势愈加明显(P＜0.05).另外随CGRP浓度的增加TGF-β1条带灰度显著升高,显示TGF-β1蛋白的表达逐渐增强(P＜0.05),CGRP可能促进兔成骨细胞TGF-β1的表达.结论 CGRP可能通过调节成骨细胞TGF-β1蛋白的表达促进成骨细胞的增殖分化从而影响骨代谢.
作者：周燕；张纲；卓贤露；裘松波；谭颖徽 刊期： 2012年第05期
目的 通过观察金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在氧糖剥夺、复氧培养后损伤星形胶质细胞中基质的表达变化并抑制其活性,探讨其在氧糖剥夺、复氧后细胞损伤中的意义.方法 将星形胶质细胞分为正常组、模型组和GM6001组.模型组细胞在无糖DMEM培养基,1％ O2的培养条件下行3、5、7h时长的氧糖剥夺后复氧至24h.GM6001组细胞在5h氧糖剥夺、复氧的过程中加入外源性基质金属蛋白酶抑制剂(GM6001,10 μmol/ml),复氧至24h.用RT-PCR测定不同时长氧糖剥夺后星形胶质细胞MMP-9 mRNA表达变化,ELISA法测定细胞培养上清液中MMP-9蛋白的浓度变化；用光学显微镜观察各组的细胞形态变化,LDH漏出率、CCK-8法检测细胞的损伤情况及存活率.结果 ①RT-PCR及ELISA法检测示:与正常组相比,氧糖剥夺、复氧后,模型组细胞MMP-9 mRNA表达量和细胞培养上清液中MMP-9蛋白的浓度均有所增加(P＜0.05),随着氧糖剥夺时间的延长,均呈现不断上升趋势；②与正常组相比,氧糖剥夺、复氧后,模型组细胞明显损伤,随着氧糖剥夺时间的延长,细胞损伤加重,光镜下细胞出现明显肿胀,并有部分细胞呈凝固性坏死,LDH漏出率不断增高(P＜0.01)、存活率则逐渐下降(P＜0.05,P＜0.01),且培养上清MMP-9蛋白浓度与细胞LDH漏出率的增高程度呈正相关(r=0.693,P＜0.05)；与模型组相比,5h氧糖剥夺、复氧后,GM6001组细胞形态学损伤表现明显减轻,LDH漏出率水平也有明显下降(P＜0.01),细胞存活率则显著上升(P＜0.05).结论 MMP-9过表达可能是氧糖剥夺、复氧后引起细胞损伤的重要因素之一.
作者：唐兆华；廖正步；谢延风；石全红；何朝晖；詹彦 刊期： 2012年第05期
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性关节滑膜炎、关节损伤及骨破坏变为特征的系统性自身免疫性疾病[1].IL-1(interleukin 1)在RA的发病机制中是滑膜炎症反应的关键性细胞因子[2].近年来,应用重组人型的IL-1受体拮抗剂应用于本病的治疗,取得显著效果[2],但由于生物制剂价格昂贵,在临床上限制了其应用.双醋瑞因是一种治疗骨关节炎的药物,其作用机理为抑制白介素-1 β的生成,同时还能抑制软骨细胞IL-1受体的表达[3].来氟米特是一种改善类风湿关节炎病情药物,单药应用即可减缓RA影像学进展[4].因此,本研究应用来氟米特+双醋瑞因治疗RA患者,观察双醋瑞因对类风湿关节炎的治疗效果.
作者：闫永龙；班爱军；郑桂敏；宁晓然 刊期： 2012年第05期
目的 观察婴幼儿体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)心脏直视手术中异氟烷预处理对脑的保护作用.方法 42例年龄≤3岁的先天性心脏病患儿分为异氟烷预处理组和对照组两组(n=21),行快速麻醉诱导插管后,异氟烷预处理组持续吸入1 ～1.5 MAC异氟烷,对照组不行异氟烷预处理.两组在术前(T1)、CPB开始5 min(T2)、阻断主动脉(T3)、CPB后30 min(T4)、CPB结束时(T5)、CPB结束后6 h(T6)、24 h(T7)分别采取血样,ELISA法检测血清中S100β蛋白和神经特异性烯醇化酶(NSE)表达变化情况.结果 两组术前S100β和NSE无统计学差异(P＞0.05)；异氟烷预处理组S100β蛋白和NSE从CPB开始到结束后24h内各时间点与术前相比无显著差异(P＞0.05)；对照组术前S100蛋白及NSE水平与T4、T5及T6时间点相比有明显差异(P＜0.05),与T7时间点相比统计学意义不显著(P＞0.05).S100β蛋白在T5时间点达到大值,NSE在T6时间点达到大值.对照组在术后T4～T6时间点与异氟烷预处理组相比显著上升(P＜0.05).对照组(r =0.684)和异氟烷预处理组(r=0.648) S100β蛋白和NSE浓度的变化均呈明显的正相关性(P＜0.05).结论 异氟烷预处理后能够显著降低婴幼儿CPB心脏直视手术中S100β和NSE的含量.
作者：彭明清；李远；龚放；吴春；杨杰先 刊期： 2012年第05期
卵黄囊瘤来源于胚外结构卵黄囊,又名内胚窦瘤,约占卵巢恶性肿瘤的3％～5％,恶性程度高,直接蔓延及腹腔种植是其主要的转移途径,晚期可发生血行播散,以肝、肺为常见[1-2].本研究拟通过我院近期收治的1例卵巢卵黄囊瘤发生弥漫性肝转移的危重患者的诊治经过,探讨对此类患者的诊断与治疗.
作者：李颖姗；令狐华；梅耀宇 刊期： 2012年第05期
目的 探讨食管癌术后发生心律失常的相关因素及临床护理对策.方法 回顾我科2010年6月至2011年6月行食管癌手术331例患者[男性239例,女性92例；年龄38 ～79(57.9±3.6)岁]临床资料,对术后发生心律失常的临床相关因素进行分类统计.结果 术后并发心律失常69例,发生率20.8％.年龄＞60岁(P＜0.01)、术前心电图异常(P＜0.01)、肺功能异常(P＜0.05)、颈部及弓上吻合(P＜0.05)等术后易发生心律失常.而术前合并高血压的患者行食管癌手术后,心律失常的发生率没有显著增加(P＞0.05).结论 食管癌术后发生心律失常是多因素综合所致.护理上应制定相应的护理对策,指导临床护理工作,以提高手术成功率、促进患者康复.
作者：夏梅；何萍；陈巧；王华；熊雪梅 刊期： 2012年第05期
目的 制备能同时携带2种抗肿瘤药物的脂质微泡,对其载药量以及体外控制释放能力进行研究.方法 以机械振荡法制备脂质微泡,嵌入法对紫杉醇进行装载以及生物素-亲和素体系连接阿霉素脂质体.粒径分析仪以及荧光显微镜对其表征分析,紫外分光光度法以及酶标仪分别测定紫杉醇和阿霉素载药量；在超声辐照条件下,促使微泡对紫杉醇以及阿霉素的释放,并测定各自药物释放量确定超声辐照微泡的药物释放效率.结果 粒径分析仪测得载药微泡其粒径约为(1.45±0.27) μm,荧光显微镜下能够观察到微泡周围显红色荧光；以3 mg固定磷脂用量,紫杉醇大包封率为(54.64±2.98)％,每108个微泡载阿霉素量为(4.52±0.53)μg；当超声波机械指数为1.0时(MI=1.0),90％的微泡破碎以及紫杉醇和阿霉素释放率分别为15％和80％.结论 载药微泡在超声辐照作用下具有良好的药物释放能力,能够在超声图像辅助给药体系为肿瘤治疗提供一种有效的双药载体.
作者：李露；陈娟娟；刘先俊 刊期： 2012年第05期
目的 探讨地塞米松诱导的危重病性肌病的细胞死亡方式.方法 将SD大鼠分为健康对照组和实验组；实验组义分为7、9、11d3个时相点(n=10).实验组采用5 mg/kg地塞米松连续腹腔注射,每天1次,健康对照组腹腔注射等量的生理盐水.采用肌功能缺损评分判定肌功能缺损情况.利用免疫组化和Western blot检测比目鱼肌active caspase-3、PARP、pULK的表达情况.结果 ①健康对照组无肌肉功能缺损症状；而实验组7d时大鼠70％出现肌肉功能缺损症状,9、11d时全部出现明显的肌肉功能缺损症状,以11d时相点缺损程度为严重.②各组active caspase-3、PARP均为阴性表达；健康对照组可见少量pULK阳性表达细胞,实验组pULK表达显著增强,以11d时相点表达增强为明显.结论 地塞米松诱导的危重病性肌病中无active caspase-3、PARP表达,以pULK表达为主,提示该病可能以自噬性死亡为主要死亡方式.
作者：袁静；梁佳；赵颂；包翠芬 刊期： 2012年第05期
目的 探讨Ⅰ型去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi)MS-275对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成脂分化的影响.方法 利用噻唑蓝(MTT)和碘化乙啶(PI)染色结合流式细胞术(FCM)分别检测不同浓度MS-275对C3H/10T1/2细胞活性和细胞周期的影响；油红0染色分析MS-275对C3H/10T1/2细胞成脂分化能力的影响；同时应用实时定量PCR( real-time PCR)检测MS-275对成脂分化标志物:脂结合蛋白(aP2)、围脂素(perilipin)、脂联素(Adipoq),以及成脂分化关键转录因子:过氧化物酶体增殖物激活受体-γ2(PPAR-γ2)mRNA转录水平的影响.结果 随着MS-275浓度升高,其对C3H/10T1/2细胞的抑制率也随着增高,IC50约为8μmol/L(P ＜0.05)；流式结果表明,MS-275将C3H/10T1/2细胞周期阻滞在G0/G1期；0.5 μmol/L的MS-275明显减少C3H/10T1/2细胞的脂滴积累；同时成脂分化标志物aP2、perilipin、Adipoq及成脂关键转录因子PPAR-γ2的转录水平也显著降低(P＜0.05).结论 MS-275减弱了间充质干细胞成脂分化的能力,表明抑制Ⅰ型HDACs的活性可部分抑制MSCs向成脂分化.
作者：李智耀；王奎栋；吴伟；龚雨琴；季煜华 刊期： 2012年第05期
目的 检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中CD161+T细胞的频数变化,探讨其在类风湿关节炎(RA)发生、发展中的作用.方法 收集唐山市工人医院风湿病科2009年6月至2010年6月21例类风湿关节炎患者,其中男性7例,女性14例,平均年龄55岁.采用PBMCs体外活化技术,应用流式细胞术检测RA患者外周血PBMCs中CD4+ CD161+T细胞的频数情况.结果 与年龄、性别匹配的健康人群相,RA患者PBMCs中CD161+ CD4+T和CD161+ Thl细胞的百分比显著降低[(27.53±7.34)％ vs(22.75±5.11)％,(P＜0.05)；(11.35±4.36)％ vs(8.21±3.93)％,(P＜0.05)],导致RA患者CD161+与CD161- Thl细胞的比率下降,二者差异有显著性[(0.76±0.29)％ vs(0.60±0.30)％,(P＜0.05)].结论 RA患者滑膜炎性反应导致外周血CD161+ CI4+T细胞及其Thl亚群与相应阴性T细胞群体的平衡紊乱,CD161+CD4+T细胞及其Th1亚群在RA的病理过程密切相关.
作者：周云涛；刘静；王志国；郝丽宁；刘畅；周玉秀；佟胜全；田卫 刊期： 2012年第05期
目的 建立一个适用于中国慢性肾脏病人群的肾小球滤过率估算模型,基于人体体征及血清肌酐来估算肾小球滤过率.方法 采用人工神经网络方法中的广义回归神经网络(generalized regression neural network,GRNN)方法,基于562例训练样本集建立模型,在独立的269例验证样本集中验证模型性能,与传统的统计学回归方法得到的GFR估算经验方程比较.结果 与经验方程相比,神经网络模型具有更高的准确性(P＜0.05).结论 人工神经网络作为常用的机器学习方法之一,应用于生物医学信息处理时,比传统统计学方法具有更大的优势,利用该方法建立的肾小球滤过率估算模型具有更好的估算精度.
作者：李宁山；刘迅；吴效明；黄岳山；娄探奇 刊期： 2012年第05期
目的 建立HPLC测定重酒石酸去甲肾上腺素注射液中重酒石酸去甲肾上腺素含量的方法,考察重酒石酸去甲肾上腺素注射液经不同强度γ射线辐照后主药的含量变化.方法 将同批号重酒石酸去甲肾上腺素注射液置60Co-γ射线放射原中,分别一次性接受1、2、4、8、16、25 kGy辐照剂量照射,以0.14％庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH =3.0)-甲醇=65:35为流动相,流速1 ml/min,检测波长286 nm,进样量20μl,测定重酒石酸去甲肾上腺素注射剂含量.结果 HPLC测定方法的线性范围5 ～25 μg/ml(r =0.999 9)；低、中、高浓度(8,10,12 mg/ml)的平均回收率分别为99.685％、96.366％、97.557％；日间(n=3)及日内精密度(n=3)均小于2％,重酒石酸去甲肾上腺素辐照后外观及澄明度没有明显变化,含量随辐照强度增加其含量显著下降(P＜0.05),且吸收8kGy辐照剂量以上含量下降超出质量合格范围.结论 所建方法可用于重酒石酸去甲肾上腺素注射液的含量测定,辐照对重酒石酸去甲肾上腺素注射液的稳定性有显著影响.
作者：胡大强；卢华；管海燕；李卓恒；藕顺龙；卢来春 刊期： 2012年第05期
目的 探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染对人少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)增殖与凋亡的影响.方法 用BDV感染OL细胞,免疫荧光检测OL细胞中博尔纳病病毒P40蛋白的表达,CCK8测定法观察细胞的生长增殖情况,用流式细胞技术检测细胞的凋亡情况和周期变化,Western blot检测凋亡指标Bax、Bcl-2的相对表达量.结果 与阴性对照组细胞比较,感染组在博尔纳病病毒感染少突胶质细胞第3天时,免疫荧光能够检测到P40蛋白的表达.随着感染时间的增加,BDV感染的OL细胞增殖能力下降(P＜0.05),且通过流式细胞仪检测到病毒感染3d后,细胞出现凋亡增多.流式细胞仪检测结果显示,与对照组比较,感染细胞周期G2期延迟(P＜0.05),细胞增殖指数降低(P＜0.05).Western blot检测结果显示,与对照组比较,感染细胞促凋亡蛋白Bax表达量增加(P＜0.05),抑凋亡蛋白Bcl-2表达量下降(P＜0.05).结论 BDV感染可以抑制OL细胞增殖,并能通过上调Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白表达量,诱导细胞凋亡的发生.
作者：邓婧；李丹；张亮；黄荣忠；李文娟；马丽华；房亮；谢鹏 刊期： 2012年第05期
目的 探讨经后路全脊椎整块切除术(total en-bloc spondylectomy,TES)治疗脊椎肿瘤的方法与临床价值.方法 我科2009年1月至2010年2月应用全脊椎整块切除术治疗脊柱肿瘤患者6例,其中男4性例,女性2例,年龄43～64岁,脊椎原发性恶性肿瘤2例,转移性脊柱肿瘤4例.病变发生在T112例,T121例,L4 2例,L5 1例.6例患者均采用单纯后侧入路,同时采用前方钛网植骨重建+椎弓根钉系统后方固定.结果 6例患者术中、术后无严重手术并发症,术后近期临床症状改善明显.随访12 ～24个月,均未出现局部复发,2例原发病例未出现远处转移.结论 经后路脊柱肿瘤全脊椎整块切除术是治疗胸腰椎肿瘤的一种可行的手术方法,技术优势明显,能提高病灶切除率、降低局部复发率,近期随访疗效满意.
作者：初同伟；张莹；刘玉刚；潘勇；周跃 刊期： 2012年第05期
卵巢成熟型囊性畸胎瘤是卵巢生殖细胞肿瘤中常见的良性肿瘤,好发于育龄期妇女与儿童,临床治疗通常以手术切除肿瘤为主,然而,这可能会引起盆腔粘连,从而影响生育[1],因此,保守随访显得尤为重要.超声检查作为一种价廉物美的检查手段,诊断该病的准确率80％～90％.我们总结了资料保存完备的30例卵巢成熟型囊性畸胎瘤,以探求卵巢成熟型囊性畸胎瘤的生长变化规律,以旨提高超声诊断卵巢畸胎瘤的准确性,现报告如下.
作者：何志容；殷军；续云芳；周丽 刊期： 2012年第05期
目的 初步研究早产子宫平滑肌组织中调控PGHS-2表达的分子机制.方法 采用胶原酶原代培养早产子宫平滑肌细胞,Western blot检测该细胞中调控PGHS-2表达的信号分子NF-κB p65蛋白的表达和迁移情况；检测子宫平滑肌组织中MAPK信号分子的表达情况.结果 采用胶原酶消化法,成功培养原代子宫平滑肌细胞并免疫组化鉴定；与对照组比较,PGE2显著抑制子宫平滑肌细胞中NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.05),呈时间依赖性；LPS和IL-1β刺激细胞后,NF-KB p65蛋白由细胞质向细胞核迁移,参与PGHS-2转录活化；加入PGE2后,该迁移效应被显著抑制；在早产子宫平滑肌组织中,MAPK信号分子JNK1/2/3与p38激酶的磷酸化水平较足月产显著增加(P＜0.05).结论 早产子宫平滑肌组织中,PGE2显著抑制NF-κB P65蛋白的表达和活化；PGHS-2的表达调控可能与MAPK信号通路直接相关.
作者：陈诚；张利宏；王琳；常青 刊期： 2012年第05期
第三军医大学学报杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学
