耿淼;蒋宁;周文霞;张永祥
目的 研究木瓜超氧化物歧化酶粗提物颗粒的加工工艺,并评价其生物学效应.方法 1%纤维素酶酶解木瓜匀浆,β-环糊精和γ-环糊精包埋,制得超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)粗提物,50只小鼠分为5组:空白对照组、模型对照组、3个试验组(样品剂量分别为1000、2000、3000 U/kg).对照组予同质量基础饲料,除空白对照组外,各组给予5 Gy60Coγ射线全身照射1次,3 d后处死,测定血清和各组织MDA含量及SOD活性.结果 酶解后单位体积的上清液中SOD的活力比酶解前降低了7.8%,但是由于出汁率大大提高,使得单位质量木瓜所得上清液中SOD总活力提高近10.65%.采用3%的γ-环糊精包埋木瓜SOD,并运用喷雾造粒技术制备PC-SOD,其SOD活性保留率为67.8%.动物实验显示:各剂量组中小鼠血清和组织中的MDA含量均低于模型对照组,各剂量组中小鼠血清和组织中的SOD活性均高于模型对照组.结论 木瓜的本方法SOD粗提物颗粒(PC-SOD)的加工工艺效果好.产品PC-SOD对降低小鼠血清和组织中的MDA有显著作用,且对提高小鼠血清和组织中的SOD活性也有明显的效果.
作者:赵靖;糜漫天;唐勇;张婷;王建 刊期: 2008年第06期
目的 观察CX3CR1在不同类型冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者外周血单核细胞中的表达.方法 选择经冠状动脉造影后确诊为冠心病的患者,其中54例稳定型心绞痛病例及61例急性冠脉综合征的病例作为研究对象;以冠状动脉造影正常的20例患者作为正常对照组,24例冠状动脉造影正常但有胸前区疼痛的病例作为阳性对照.利用流式细胞仪直接免疫荧光法检测不同类型患者外周血单核细胞上CX3CR1的表达;同时采用Gensini评分系统对冠心病患者冠状动脉病变程度进行定量评分,并分析CX3CR1与Gensini积分间的关系.结果 冠心病患者CX3CR1表达水平高于正常对照组[正常对照组为(0.46±0.27)%、稳定性心绞痛组为(12.59±6.05)、急性冠脉综合征组为(38.77±13.22),P<0.01],急性冠脉综合征患者CX3CR1表达明显高于稳定型心绞痛患者,差异有统计学意义(P<0.01);且冠心病患者CX3CR1表达水平与Gemini积分呈显著正相关(r=0.913,P<0.01).结论 冠心病患者CX3CR1表达水平明显升高,并且其增加程度与冠脉的狭窄程度有相关性.
作者:彭丹丹;李志梁 刊期: 2008年第06期
目的 为研究子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)的治疗提供理想的动物模型.方法 选取雌性巴马香猪6头,从子宫后壁选取内膜组织,种植于腹腔和皮下,观察异位组织变化情况.结果 皮下和腹腔种植的部分内膜组织形成异位病灶,呈包块或小囊泡状.病理证实为子宫内膜,表明动物建模成功.结论 成功建立子宫内膜异位症的动物模型.
作者:马玉霞;王琳;孔燕;梁志清 刊期: 2008年第06期
目的 构建表达Otos基因的复制缺陷型重组腺病毒.方法 应用RT-PCR技术从大鼠耳蜗螺旋韧带成纤维细胞总RNA中克隆出Otos基因,将Otos基因定向克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,经与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183内同源重组后,转染293细胞进行包装,反复感染293细胞,并进行扩增,对其进行安全性、病毒滴度以及活性等指标的检测.结果 克隆出大鼠Otos基因,经测序证实结果正确,得到高滴度的重组腺病毒,提取病毒DNA证实含目的 基因.结论 成功构建了表达Otos的复制缺陷型重组腺病毒.
作者:卓贤露;姜振东;魏运军;鲁立;张学渊;袁伟 刊期: 2008年第06期
目的 研究Cyr61与β-catenin在肝细胞肝癌和肝癌细胞株中的表达及其相关性,探讨二者在肝癌发生中的作用.方法 采用免疫组化法检测32例肝细胞肝癌患者肝癌组织中Cyr61与β-catenin蛋白的表达水平;免疫组化法和RT-PCR检测正常肝细胞株L02和肝癌细胞株HepG2、QGY-7701、H22中Cyr61与β-catenin蛋白与mRNA的表达水平;并比较二者的相关性.结果 65.63%(21/32)肝癌标本Cyr61蛋白阳性表达,71.88%(23/32)肝癌标本β-catenin蛋白阳性表达,二者合并阳性表达有56.25%(18/32),合并阴性表达有18.75%(6/32),Cyt61表达与β-catenin表达呈正相关(r=0.425,P<0.05);正常肝细胞株L02及肝癌细胞株HepG2、QGY-7701、H22中Cyr61与β-catenin mRNA与蛋白均有表达,二者表达一致性达100%.结论 Cyr61与β-catenin在肝癌和肝癌细胞株中高度一致阳性表达,提示Cyr61的表达可能与Bβ-eatenin的表达有关,二者可能在肝癌的发生中起到重要作用.
作者:孙世俊;司维柯;丁伟;潘静;李招权;赵宸 刊期: 2008年第06期
目的 观察小脑齿状-中位核在豚鼠经典眨眼条件反射建立过程中的作用.方法 采用500 ms正弦波纯音和100 ms束状氧气流的配对刺激,训练豚鼠建立经典眨眼条件反射.在条件反射训练的第4~6天,向豚鼠双侧小脑齿状-中位核微注射蝇蕈醇.整个实验过程中,使用高分辨率的张力换能器检测豚鼠的眨眼反应.结果 ①蝇蕈醇注射组豚鼠训练第4~6天的条件反应率均显著低于第3训练日水平(P1=0.005,P2=0.004,P3=0.010);②蝇蕈醇注射组豚鼠训练第7、8天条件反应率仅分别相当于对照组豚鼠第4、5训练日水平(P1=O.061,P2=0.669);③在此过程中,蝇蕈醇注射组豚鼠非条件眨眼反应的幅度和峰潜伏期均无显著变化(P1=0.926,P2=0.939).结论 小脑齿状一中位核是运动性学习神经回路的重要组成部分,控制着眨眼条件反应的获得和表达.
作者:林曦;胡波;杨丽;隋建峰 刊期: 2008年第06期
目的 观察不同剪切力对体外培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞的影响.方法 用自制的流体力学装置在不同时相点、以不同剪切力对豚鼠脑、耳蜗微血管内皮细胞进行力学作用,获得形态学图像并进行形状参数Pyx的测定分析.结果 通过胶原酶消化法可获得单层培养的豚鼠耳蜗、脑微血管内皮细胞.对于耳蜗微血管内皮细胞,剪切力为0.883 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.184 dyn/cm2时,作用8 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化,随时间延长,变化趋势更明显.而脑微血管内皮细胞在剪切力0.267 dyn/cm2时作用24 h未发生细胞形态改变;当剪切力增加到1.069 dyn/cm2时,作用4 h后细胞形态即开始出现顺流体方向的顺应性变化.结论 耳蜗、脑微血管内皮细胞在受到剪切力作用后其形态学不同于静态培养的内皮细胞.
作者:袁伟;张学渊;魏运军;李琪;钟诚;姜振东 刊期: 2008年第06期
目的 获得大量高质量小鼠破骨细胞,为体外研究破骨细胞骨吸收功能提供丰富的细胞来源.方法 采用巨噬细胞集落刺激因子(maerophage colony stimulating factor,M-CSF)和破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclearfactor-κB ligand,RANKL)诱导小鼠骨髓单核细胞分化为破骨细胞,并通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phos-phatase,TRAP)染色和骨吸收实验来鉴定破骨细胞及其噬骨能力.结果 诱导3 d后可见TRAP(+)多核细胞出现,诱导5 d后骨片上可见蓝紫色的吸收陷窝.随着培养时间的延长,TRAP(+)多核细胞数目和吸收陷窝呈现时间依赖性增长趋势(P<0.05).结论 M-CSF和RANKL诱导小鼠骨髓单核细胞可产生大量的具有活跃噬骨能力的破骨细胞.
作者:鲁秀敏;苏楠;李福兵;赵玲;陈林 刊期: 2008年第06期
作者: 刊期: 2008年第06期
目的 研究当归芍药散(powder of Chinese Angelica and Peony,DSS)对快速老化模型小鼠(senescence-accel-crated mouse,SAM)海马蛋白表达的影响.方法 选择12月龄SAM的快速老化亚系SAMP8和抗快速老化亚系SAMR1作为研究对象,分为SAMR1组、SAMP8组和SAMP8+DSS组(3.2 g/kg),每组10只,连续给药30 d.应用双向凝胶电泳结合质谱鉴定,观察DSS对SAMP8海马蛋白表达的影响.结果 与SAMR1组比较,SAMP8组海马中有9个蛋白表达下调,13个蛋白表达上调;SAMP8+DSS组与SAMP8组比较,海马中有14个蛋白表达下调,21个蛋白表达上调.经肽质量指纹谱分析及蛋白数据库检索,表达有明显变化的蛋白根据功能可分为5类:线粒体相关蛋白、能量代谢相关蛋白、突触形成相关蛋白、细胞骨架蛋白、其他蛋白.结论 SAMP8和SAMRI海马蛋白表达存在明显差异,DSS可影响快速老化模型小鼠海马蛋白的表达,其作用是多途径多靶点的.
作者:耿淼;蒋宁;周文霞;张永祥 刊期: 2008年第06期
目的 探讨脂联素基因Gly15Gly多态性与糖尿病早期大血管病变发生的关系.方法 运用多聚酶链式反应.限制性片段长度基因多态性(PCR-RFLP法)分析方法,对56例伴大血管病变和120例无大血管病变的2型糖尿病患者脂联素基因GIy15Gly多态性位点进行基因分型.结果 大血管病变组GG基因型频率(25.0%)显著高于无血管病变组(6.2%),G等位基因频率显著升高(P<0.05);GG基因型血浆脂联素水平显著低于TT和TG基因型.结论 脂联素基因GIy15G1y多态性与糖尿病大血管并发症的发生有关,脂联素基因+45位点GG基因型是2型糖尿病大血管并发症的易感基因型.
作者:艾智华;房殿春;张忠辉 刊期: 2008年第06期
近年来研究表明支气管哮喘急性发作期存在血小板的活化[1].本研究测定哮喘急性发作期的儿童血小板膜糖蛋白CD62p,CD63阳性表达率和血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)和大血小板比率(P-LCR)4项指标,旨在探讨CD62p、CD63及血小板与儿童哮喘的发病关系,为哮喘的治疗提供一定的理论依据.
作者:孙萍;陈婷婷;吴星恒;杨明;黄正刚 刊期: 2008年第06期
目的 观察小鼠胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植Aβ损伤大鼠海马后新生神经元的分化情况.方法 将表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞采用无血清方法定向诱导为神经前体细胞,移植至Aβ1-40损伤的大鼠海马齿回,免疫荧光染色观察分化神经元的递质表型、受体表达以及与受者神经元的突触性接触.结果 小鼠胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植后能长时间存活并分化为谷氨酸能、γ-氨基丁酸能神经元,表达NMDA受体和GABAA受体;发出类似神经元的长突起伸入到受者脑组织中去,并且在其胞膜和突起周围可观察到大量受者神经元来源的突触素阳性颗粒.结论 神经前体细胞移植Aβ损伤大鼠海马后能分化为不同类型的神经元,与受者神经元之间可能存在突触结构.
作者:李志方;唐军;李露斯;杨丽;徐海伟 刊期: 2008年第06期
多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是中枢神经系统各部位白质反复髓鞘脱失,临床表现为复发与缓解交替的以慢性病程为特征的自身免疫性疾病.此病好发于青壮年人群,且缺乏有效的治疗方法,预后不佳.为探讨尿酸(UA)及一氧化碳(NO)在MS发病机制中的作用及其临床意义,本研究对于2002年5月2005年5月间在我院神经内科住院的40例MS患者的血清UA及NO水平进行了检测,并与正常组作对照.现报告如下.
作者:孙萍;李德炯;龚玲;付蓉 刊期: 2008年第06期
目的 用生物反应器制备乙脑纯化灭活疫苗.方法 用搅拌式生物反应器培养Vero细胞,接种并培养乙型脑炎病毒,将收获的病毒液进行灭活和纯化.结果 细胞密度都增至2.4×106ml-1以上,病毒滴度都>7.25 lgLD50/ml.结论 用生物反应器制备乙脑灭活纯化疫苗的工艺合理,可以生产出高滴度的乙型脑炎病毒液.
作者:衡燮;温嘉纳;李佳;李桂兰;奚光跃;周健;姬光;任邦彦;谭振国;孙明波 刊期: 2008年第06期
石菖蒲挥发油中含有β-细辛醚、α-细辛醚等多种有效成分.本室自发现石菖蒲挥发油对吗啡依赖大鼠戒断症状有明显的抑制作用后[1],又观察了石菖蒲挥发油对吗啡戒断大鼠肠系膜微循环障碍的影响,并与654-2(山莨菪碱)的作用相比较,为临床脱毒治疗药物筛选提供依据.
作者:刘秀平;董超;廉海晨;王亚龙;李娜 刊期: 2008年第06期
颅内黑色素瘤是一种罕见的恶性肿瘤,其临床表现不具特征性,诊断和治疗困难,预后不佳,现将2005-2007年收治的4例颅内原发性恶性黑色素瘤报告如下.
作者:李毅;肖顺武;张学军;谢明祥;任光阳;王培 刊期: 2008年第06期
目的 采用RNAi抑制食管癌EC9706细胞株MTA1基因的表达,观察对食管癌细胞侵袭和迁移的影响.方法 用脂质体包裹转染沉默MTA1表达的siRNA表达载体人食管癌细胞EC9706.定量RT-PCR和免疫印迹分别检测MTAl mRNA和蛋白表达情况;划痕损伤实验和细胞体外侵袭实验分别测定迁移和侵袭的影响.结果 定量RT-PCR检测显示,MTA1基因的表达水平明显降低;转染沉默MTA1的siRNA表达载体组的食管癌细胞划痕未愈合,穿透Matrigel的细胞数量明显减少,与未转染组、转染空载体组和转染无关序列siRNA载体组比较差异有显著性(P<0.05).结论 RNA干扰介导的MTA1基因表达沉寂可有效降低食管癌细胞侵袭和迁移;MTA1基因可能成为肿瘤治疗上有前途的分子靶点.
作者:杨松华;赵国强;郑红;赵继敏;董子明 刊期: 2008年第06期
目的 探讨用化学药物及放射性处理,建立小鼠卵巢早衰动物模型的方法.方法 将80只昆明小鼠分为化学药物处理组、放射组、对照组、去势组.化学药物组使用环磷酰胺和白消安干预,放射组采用60Coγ射线放射.通过观察阴道脱落细胞监测小鼠动情周期变化、雌激素水平、卵巢及子宫内膜组织学改变等指标,判断建模效果.结果 化学药物组、放射组与对照组相比动情期构成比降低、动情间期构成比增加(P<0.01);雌激素水平明显降低(P<0.01),接近去势组水平(P>0.05);两个处理组小鼠均可见卵巢萎缩、生长卵泡数明显减少、间质纤维化;卵巢未闭锁原始卵泡数显著减少(P<0.01),且随建模后时间的延长而呈进一步下降趋势,但化学药物组与放射组各相同时间段之间无明显差异.结论 以化学药物及放射方法能够成功建立小鼠卵巢早衰模型.
作者:李彩霞;王凤英;李玉艳;俞炽阳 刊期: 2008年第06期
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是严重危害公众健康的多发病、慢性病.2005年我国COPD流行病学调查显示:全国每年因COPD死亡100万人,COPD致残500万~1000万人,我科对住院治疗的COPD患者52例采取护理干预措施,取得满意效果,现介绍如下.
作者:吴海燕;张钦芳;张安琴 刊期: 2008年第06期