石东文;代飞;池君;陈希炜;贺伟峰;胡晓红;罗高兴;吴军
目的 构建含有端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的逆转录病毒,感染人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs),观察外源性hTERT基因在hMSCs中的表达及其对hMSCs端粒酶活性和细胞增殖能力的影响.方法 构建pLXSN-hTERT质粒,BamHⅠ酶切和测序鉴定,转染PT67包装细胞,G418抗性筛选获得产病毒阳性细胞克隆.用产病毒细胞珠和hMSCs共培养的方法转染hMSCs,G418抗性筛选.以未转染hMSCs作为对照,用TRAPEZE方法检测hTERT基因转染hMSCs的端粒酶活性,用流式细胞仪检测细胞周期,并观察转染hMSCs的生长情况.结果 成功构建了hTERT基因重组pLXSN-hTERT质粒,建立了产病毒 pLXSN-hTER-PT67细胞株.获得了hTERT-hMSCs细胞群,与未转染的hMSCs相比,hTERT -hMSCs细胞群端粒酶活性明显增强,hTERT蛋白阳性表达细胞百分率提高,细胞的生命周期显著延长,细胞传代至46代,形态无明显改变,生长良好.结论 逆转录病毒载体介导的hTERT基因转染可增强hMSCs的端粒酶活性,提高hMSCs的增殖能力.
作者:石东文;代飞;池君;陈希炜;贺伟峰;胡晓红;罗高兴;吴军 刊期: 2007年第16期
目的 探讨心脏双支传导阻滞患者围术期安置临时起搏器的指征及临床意义.方法 对40例术前合并心脏双支传导阻滞及1例特殊病例的围术期处理作回顾性分析.根据病史、临床表现、体能评估和测评房室传导功能将40例患者分为2组:术前预置起搏器组(P组,n=25)和未置起搏器组(N组,n=15),分析两组麻醉手术期间是否发生房室传导阻滞,起搏器的工作状况和心动过缓时阿托品的治疗效果.结果 40例双支阻滞患者麻醉手术经过顺利,术中发生低血压和心动过缓时均对药物治疗有效,无1例发展为完全性房室传导阻滞.1例术前近期出现完全性左束支阻滞的患者暂缓麻醉和手术,终因抢救无效短期内死亡,提示有心肌严重损害.结论 术前无症状不伴有房室传导阻滞的慢性双支阻滞患者不必常规安装临时起搏器,食道心房起搏对评价房室传导功能有量化效果且简单易行.
作者:莫怀忠;安裕文;姚茵;陈惠 刊期: 2007年第16期
目的 采用光学相干断层扫描术(optical coherence tomography,OCT)观察正常人环绕视乳头圆周3.0 mm直径和3.46 mm直径视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)厚度,评价两者之间的差异及其临床意义.方法 在本科行OCT检查的正常人98人112眼,采用Zeiss OCT 3000对同一检查者分别进行以视乳头为中心3.0 mm直径和3.46 mm直径的圆周环行扫描,结果用RNFL THICKNESS AVERAGE程序分析RNFL厚度.结果 正常人不同年龄组之间的RNFL厚度无显著性差异(P》0.05);2种扫描直径所测量的各象限RNFL厚度之间差异显著(P<0.01);上、下象限之间厚度没有显著性差异(P》0.05),但与鼻、颞侧象限厚度之间具有显著性差异(P<0.01).结论 OCT定量检测正常人RNFL厚度重复性较好,采用不同的扫描直径可提供不同的RNFL厚度值,为临床诊断提供依据.
作者:张敏芳;刘波;孟晓红 刊期: 2007年第16期
目的 观察无创通气(non-invasive positive pressure ventilation,NIPPV)在治疗AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者中的临床疗效.方法 治疗组53例AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者在常规治疗的基础上进行NIPPV治疗,对照组53例仅给予常规抗炎、解痉、吸氧等治疗,观察血气指标、心率、血压、呼吸频率及住院时间的变化.结果 治疗组和对照组在治疗后动脉血气pH值、PaCO2、PaO2、心率和呼吸频率与治疗前比较均有明显改善.治疗组在降低PaCO2、呼吸频率和提高PaO2方面比对照组效果更明显.结论 NIPPV治疗AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭能更有效地降低PaCO2、呼吸频率,提高PaO2,减少有创机械通气的几率,缩短住院时间.
作者:王红军;李红兵;王平飞;张雪漫 刊期: 2007年第16期
我们对1997年3月至2004年5月收治的胸腰椎骨折退变后凸畸形21例患者进行回顾性分析,总结其发生原因及后路经椎弓根行椎体间隙截骨矫形术的治疗,现报告如下.
作者:张铭华;李波;郑华;何盛江;周南奎 刊期: 2007年第16期
目的 研究吲哚-3-甲醇(I3C)对球囊损伤术后大鼠颈动脉血管平滑肌细胞(VSMC)Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达的影响,探讨I3C诱导VSMC凋亡的机制.方法 建立35只SD大白鼠颈动脉损伤动物模型,分为对照组(n=5):不给药;实验组(n=30):给予I3C(I3C给药量为12.5、25 mg/d和50 mg/d,给药时间为4 d和7 d,共6个亚组,n=5).术后14 d取材.免疫组化检测Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白的表达.结果 术后14 d,各组Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达减少.与对照组比较,Bcl-1和Bcl-X/L蛋白表达的25 mg 7 d组,50 mg 4 d组和50 mg 7 d组差异有显著性(P<0.05);NF-κB蛋白表达12.5 mg 4 d组和对照组无显著性差异(P》0.05),其余均有统计学意义(P<0.05).给药时间和剂量增加时,Bcl-1、NF-κB和Bcl-X/L蛋白表达与对照组差异非常显著(P<0.01).结论 I3C诱导血管损伤后VSMC凋亡的机制主要是通过PI3K-PKB/Akt细胞信号传导途径,下调关键性核因子NF-κB和凋亡抑制蛋白Bcl-X/L表达.
作者:李莉;高大中;江永红;黄晶;刘地川;李进嵩 刊期: 2007年第16期
Pilon骨折是波及踝关节负重面的胫骨远端骨折,85%有腓骨骨折和下胫腓联合分离[1].本科采用Orthofix外支架联合使用微创小切口,透视下撬拨复位及腓骨、胫骨关节面的有效内固定治疗36例Pilon骨折合并腓骨远端骨折患者,取得良好效果,优良率达88.9%.现将结果报告如下.
作者:王国寿;龙兴敬;杨世林 刊期: 2007年第16期
目的 通过观察去势后大鼠的血脂和胆固醇及子宫质量/体质量值的改变,探讨腹腔注入不同剂量的改构异黄酮类化合物(F11)对大鼠的影响.方法 3月龄的SD大鼠,分为假手术组、阴性造模组(造模组)、雌二醇组(E2组)、不同浓度的F11组(低、中、高剂量F11组);除假手术组外,其余各组均切除双侧卵巢.各组大鼠每日腹腔注射1次,连续用药10周后股动脉放血处死,取血清测定血总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白;称体质量及子宫质量,计算其比值.结果 F11各处理组与造模组比较,大鼠血甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白均有显著变化(P<0.05),而体质量较造模组大鼠下降,子宫质量增加.结论 改构后的异黄酮类化合物(F11)具有雌激素活性,可以影响血脂及胆固醇,控制体质量,轻微改善阴道及子宫萎缩.
作者:陈秀明;艾国平;粟永萍;张丽龙;常青 刊期: 2007年第16期
目的 为临床上纵隔疾病的影像学诊断及外科手术方案选择提供解剖学资料.方法 采用中国首例女性数字化可视人体数据集中有关上纵隔部位的连续图像,上下追踪,逐层观察其二维形态结构在连续图像上的变化,找出其重要结构在不同层面上的位置关系,并选用关键断层与相应的CT或MRI图作比较并在断层平面上进行必要的数据测量.结果 各断层图像上能清晰显示主动脉弓及分支、肺动脉干及分支、上腔静脉及属支、气管和支气管、食管、胸导管、淋巴结等结构及其相互毗邻关系.结论 数字化可视人体数据集可以较好地提供完整而精确的上纵隔结构解剖学断面数据,该区域的薄层断面解剖学研究可为上纵隔疾病的影像学诊断和外科手术治疗方案的选择提供形态学依据.
作者:金联洲;张绍祥;李恺;谭立文;张剑剀 刊期: 2007年第16期
目的 探讨数字化可视人体图像的目标提取.方法 利用归一化阈值分割排除大部分背景,再结合边缘跟踪对目标边界附近保留的边缘特征进行识别、连接、去噪,构建一种准确、有效的目标提取算法.结果 基于边缘和阈值混合的分割技术有效地去除了数字化人体图像的背景.结论 通过与其他几种分割算法的比较,本计算法实际使用效果较好.
作者:宁旭;张绍祥;谭立文;邱全光 刊期: 2007年第16期
布比卡因的中枢神经及心脏毒性作用一直以来都是硬膜外麻醉过程中所关心的问题,随着左旋布比卡因和罗哌卡因的推出,这一顾虑可望大大减低.
作者:赵彩明;陈希霞;肖实;涂盎然 刊期: 2007年第16期
目的 建立人黑色素瘤抗原MAGE1/HSP70/MAGE3融合蛋白基因重组工程菌E.coli.BL21/pET-MHM的高密度发酵工艺.方法 以摇瓶发酵结果为基础,扩大至NBS Bioflo Ⅳ 20 L发酵罐发酵,利用溶氧反馈-补料分批培养技术,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如发酵培养基、活化时间、诱导浓度及时间、pH值及分批补加营养物质等进行优化.结果 保持培养过程中40%的溶解氧,采用半合成培养基、活化至对数生长期时0.2 mmol/L IPTG诱导5 h以及以甘油为碳源连续流加补料的条件发酵,连续3批重复发酵,终菌密度D(600)均达45~50时,菌体量可提高至70 g/L以上,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的38%以上.结论 确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺.
作者:胡沛臻;温江田;路凡;王孝功;李侠;司少艳;葛伟;黄杨;张秀敏;隋延仿 刊期: 2007年第16期
目的 应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14结合位点的多肽序列.方法 以CD14为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附(ELISA)法鉴定筛选后的噬菌体克隆与CD14的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合CD14的效力.结果 挑取的20个噬菌体克隆中,16个结合实验鉴定阳性,取6个亲和力高的克隆测序,得到3条不同编码的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAFHRAHHLTSP),3条多肽与LBP一级结构同源性低,为模拟肽.6个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率.结论 用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与CD14结合位点的模拟肽.
作者:冯起甲;徐智;吴国明;徐顺贵;李树钧;陈维中;郭芮伶 刊期: 2007年第16期
目的 从新生鼠皮层中分离、培养并鉴定原浆型星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte,PAS)和纤维型星形胶质细胞(fibrous astrocyte,FAS).方法 新生大鼠皮层分离的混合星形胶质细胞,经差速振荡法得到纯化的PAS和FAS;用免疫组化法分别对两种细胞进行鉴定.结果 观察到两种细胞均特异性的标记为阳性.PAS外观扁平似圆盘状,细胞体较大,突起宽而扁,分支少,均匀排列生长;FAS细胞体较小,呈圆形、卵圆形或多角形,突起较多,细长并有分支,呈交错生长.结论 采用差速振荡法体外纯化培养两种AS,方法可行、有效,同时纯度达95%以上.
作者:李民;曾琳;刘媛;龙在云;李书林;伍亚民 刊期: 2007年第16期
目的 探讨血管内栓塞治疗颅内动脉瘤并发症的防治,以提高血管内栓塞治疗颅内动脉瘤的安全性.方法 回顾性分析微弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤66例(70个),4例发生动脉瘤破裂出血,2例发生血栓,1例发生微弹簧圈误栓,5例发生血管痉挛,分别进行对症处理.结果 因并发症而死亡2例(3.03%),因脑血管痉挛而出现的一过性神经功能障碍2例(3.03%),经积极处理后,预后良好.结论 栓塞技术的提高,栓塞材料的改进,术中发生情况的正确处理,有助于降低并发症的发生率.
作者:陈立朝;许民辉;杨东虹;邹咏文 刊期: 2007年第16期
尸体解剖(简称尸检)是对死亡人体进行系统性全身性病理检查和诊断的技术,目的在于查明死因,验证生前诊断,治疗是否得当,以便总结经验,提高医疗质量和诊治水平.
作者:余舰;刘勇;杨永福 刊期: 2007年第16期
目的 初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响.方法 构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化.结果 成功得到小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体(pPUR/U6-siJAB1),将其转染RAW264.7细胞后使JAB1的蛋白表达水平显著下降,经LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度较正常细胞明显降低.结论 小鼠JAB1基因的低表达使RAW264.7细胞在经LPS诱导后的炎性因子产生降低,推测其在炎症反应中对致炎因素的影响更大.
作者:任泂;粟永萍;李洪涛;李军;王军平;邹仲敏 刊期: 2007年第16期
目的 研究不同剂量环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对裸鼠 A549 肺腺癌移植瘤耐药情况的影响,同时观察其抑瘤效果和毒副作用.方法 建立荷 A549 肺癌的 BALB/c裸小鼠模型,分别给予不同剂量 CTX 腹腔注射干预,观察肿瘤体积、小鼠体质量和毒副作用.免疫组化检测移植瘤组织中GST-π和LRP的表达情况.结果 小剂量、高频率 CTX治疗组用药初期肿瘤生长较快,后逐渐延缓,且在较长一段时间内肿瘤生长缓慢;大剂量 CTX治疗组用药初期肿瘤生长较慢,后生长加快.从化疗副作用来看:小剂量、高频率 CTX治疗组裸鼠无明显体质量减轻及行动迟缓、反应迟钝、精神食欲差等毒副反应,大剂量 CTX治疗组则毒副反应较明显.免疫组化结果示:小剂量、高频率CTX治疗组与对照组相比 GST-π和 LRP 表达程度稍强(P》0.05);大剂量组与对照组相比 GST-π和 LRP表达程度均明显增强(P<0.01);大剂量组与小剂量、高频率组相比 GST-π和 LRP 表达增强(P<0.05).结论 CTX 小剂量、高频率的给药模式不易产生获得性耐药,与传统的大剂量给药模式相比,小剂量、高频率的给药模式能够更显著、持久地抑制肿瘤增长,且毒副反应小,裸鼠耐受性好.
作者:李娜;梅同华 刊期: 2007年第16期
椎动脉型颈椎病(vertebral artery type of cervical spondylosis,CSA)是各种机械性与动力性因素致使椎动脉受刺激或压迫,以致血管狭窄、折曲而造成以椎基底动脉供血不足为主要症状的综合征[1].
作者:刘文波;谢增华;吴珊;刘豫蓉 刊期: 2007年第16期
目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)对白血病源树突状细胞(dendritic cell,DC)抗原提呈能力的影响及其分子机制.方法 K562细胞经5 μmol/L VEGF反义寡核苷酸(AS-ODN)处理24 h,ELISA和免疫组化检测VEGF蛋白水平.以正常K562细胞诱生的白血病DC作为对照组,利用流式细胞术和混合淋巴细胞反应,观察AS-ODN处理的白血病DC的免疫表型及其刺激T细胞增殖的能力.采用荧光素酶检测系统和RT-PCR分析培养12 h时白血病DC内NF-κB转录活性和Flt-1 mRNA水平.结果 AS-ODN处理使K562细胞VEGF蛋白分泌量较K562细胞组显著下降(P<0.05).与K562-DC比较,AS-ODN处理的免疫表型(CD40、CD86、CD83、HLA-DR)表达明显上调.在不同DC/T值(1:10~1:40)时,MLR实验中AS-K562-DC组刺激指数(SI)明显高于对照组(P<0.05).此外,培养12 h时AS-K562-DC NF-κB转录活性较K562-DC明显增高(P<0.05),而Flt-1 mRNA水平未见明显改变.结论 反义寡核苷酸可抑制白血病细胞VEGF表达,下调VEGF能够增强白血病DC免疫表型的表达,提高DC抗原提呈能力.
作者:张伶;李维;涂植光;黄宗干 刊期: 2007年第16期