学术投稿

大鼠血小板衍生生长因子C重组腺病毒载体的构建及在内皮祖细胞中的表达

李锋;罗文军;唐博;陈以宽;孙建明;付健

关键词:血小板衍生生长因子C, pAD/CMV/V5-DEST腺病毒载体, 内皮祖细胞, 转染
摘要:目的 构建含大鼠血小板衍生生长因子C(PDGF-C)基因的pAD-EGFP-PDGF-C的重组腺病毒表达载体,体外转染骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)并观察目的基因蛋白及mRNA表达情况.方法 通过逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)法从pIRES2-EGFP-PDGF-C真核表达载体中获得PDGF-C目的片段,经BP重组与LR重组插入到pAD/CMV/V5-DEST,构建pAD-PDGF-C-IRES2-EGFP腺病毒载体.酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293A包装、纯化,测定病毒滴度后转染大鼠骨髓源性EPCs,应用Real-time qPCR、蛋白免疫印迹法(Western blotting)等方法检测PDGF-C蛋白及mRNA的表达.结果 核酸内切酶消化及PCR分析证实PDGF-C基因成功插入pAD/CMV/V5-DEST腺病毒载体,转染后荧光显微镜下观察可见绿色荧光蛋白表达,转染48 h后实时定量酵素聚合反应技术(Real-time qPCR)测定EPCs中PDGF-C含量明显提高(P<0.05),Wester blotting检测证实在46×103存在特异性条带.结论 成功构建了大鼠PDGF-C基因的腺病毒表达载体pAD-EGFP-PDGF-C,体外转染大鼠骨髓源性EPCs能高效表达目的基因产物,为后续研究PDGF-C基因功能以及进一步开展基因治疗奠定了基础.
重庆医学杂志相关文献
  • 大鼠血小板衍生生长因子C重组腺病毒载体的构建及在内皮祖细胞中的表达

    目的 构建含大鼠血小板衍生生长因子C(PDGF-C)基因的pAD-EGFP-PDGF-C的重组腺病毒表达载体,体外转染骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)并观察目的基因蛋白及mRNA表达情况.方法 通过逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)法从pIRES2-EGFP-PDGF-C真核表达载体中获得PDGF-C目的片段,经BP重组与LR重组插入到pAD/CMV/V5-DEST,构建pAD-PDGF-C-IRES2-EGFP腺病毒载体.酶切及DNA测序鉴定后转染HEK293A包装、纯化,测定病毒滴度后转染大鼠骨髓源性EPCs,应用Real-time qPCR、蛋白免疫印迹法(Western blotting)等方法检测PDGF-C蛋白及mRNA的表达.结果 核酸内切酶消化及PCR分析证实PDGF-C基因成功插入pAD/CMV/V5-DEST腺病毒载体,转染后荧光显微镜下观察可见绿色荧光蛋白表达,转染48 h后实时定量酵素聚合反应技术(Real-time qPCR)测定EPCs中PDGF-C含量明显提高(P<0.05),Wester blotting检测证实在46×103存在特异性条带.结论 成功构建了大鼠PDGF-C基因的腺病毒表达载体pAD-EGFP-PDGF-C,体外转染大鼠骨髓源性EPCs能高效表达目的基因产物,为后续研究PDGF-C基因功能以及进一步开展基因治疗奠定了基础.

    作者:李锋;罗文军;唐博;陈以宽;孙建明;付健 刊期: 2013年第16期

  • 临床综合干预对乳腺癌患者生活质量的影响

    目的 探讨医疗、药学、护理、营养临床综合干预对乳腺癌患者生活质量的影响.方法 将80例乳腺癌患者随机分为干预组和对照组.两组均接受临床对症治疗,而干预组合并实施临床综合干预.于入组时和干预3、6、12个月末对两组患者进行SAS和SDS评定量表、WHO生存质量评定量表简表(WHO QOL-BREF)、治疗依从性、复发率和再住院率的评定.结果 入组时干预组与对照组患者的SAS和SDS总分、WHO QOL-BREF评分及治疗依从性比较差异均无统计学意义(P>0.05).干预12个月末时,干预组患者在WHO QOL-BREF的生理领域、心理领域、社会领域和环境领域的评分明显高于对照组(P<0.01),治疗依从性明显高于对照组(P<0.01),复发率、再住院率、SAS和SDS总分均低于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 医疗、药学、护理、营养临床综合干预可提高乳腺癌患者维持治疗的依从性,促进患者焦虑、抑郁症状的好转,使患者的病情更稳定且显著改善生活质量,可作为促进患者康复的常用措施.

    作者:林伟玲;王传升;沈永生 刊期: 2013年第16期

  • 51例髓母细胞瘤临床病理分析

    目的 分析髓母细胞瘤(MB)的临床病理特点,以提高对MB的认识.方法 回顾性研究2005~2010年确诊的MB,分析其症状、病理改变、免疫组织化学和预后.33例通过电话或信件随访.结果 男27例,女24例,年龄1~56岁(平均14.5岁).常见症状为头痛(96%)、呕吐(88%)和行走不稳(62.7%).肿瘤主要位于小脑半球、第四脑室和颅后窝.根据2007年WHO中枢神经系统肿瘤分类标准分为:21例促结缔组织增生/结节型,18例伴有广泛结节型,9例间变型,3例大细胞型.肿瘤组织细胞密集,多有核分裂,胞浆少,有的呈假菊形团排列.免疫组化检测该肿瘤表达CD99(12/14),S-100(6/14),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(9/14)和突触素(Syn)(5/14).获得患者是否继续生存、有无复发、转移或死亡的随访信息.结论 常见的MB为促结缔组织增生/结节型,其次分别为伴有广泛结节型、间变型和大细胞型.大细胞和间变型MB患者预后差,如果患儿年龄小于3岁,手术切除程度不够,或有脑脊液、脊柱、幕上或全身转移,则预后更差.

    作者:唐俐;林晓;李昱 刊期: 2013年第16期

  • 重庆市巴南区居民慢性病知识状况及影响因素研究

    目的 了解重庆市巴南区居民的慢性病知识状况及影响因素,为制定区内慢性病相关政策和干预措施提供科学依据.方法 采用分层随机抽样方法,在区内按照街道地理位置分布分层抽取8条街道,共抽取600名年龄大于或等于18岁常住居民,通过重庆市疾控中心设计的问卷进行居民慢性病知识调查.结果 高血压为终身疾病的知晓率在高血压患者与非患者间以及不同年龄层和文化程度间均有差异.高血压患者一级预防措施及其损害的器官和糖尿病并发症患者在不同年龄层和文化程度间均有差异.多因素分析中,影响居民慢性病相关知识得分的因素为居民年龄(P=0.000)、文化程度(P=0.002)、体育锻炼情况(P=0.000)和饮酒情况(P=0.019).结论 重庆市巴南区居民对慢性病知识知晓率尚可,但31~40岁年龄层人群的慢性病知识水平有待提高.

    作者:陈仿;陈凤;饶刚 刊期: 2013年第16期

  • 重庆市璧山县社区医院眼科现状调查

    目的 通过对重庆市璧山县社区医院眼科医疗服务机构进行调查,为加强防盲治盲工作,提高初级眼保健水平提供依据.方法 选择重庆市璧山县所有社区医院进行调查,获得璧山县社区医院眼科医疗服务资源调查资料.结果 璧山县63万人口共有15个社区医院,602名专业技术人员.3个(20%)社区医院开设有眼耳鼻喉科,共有5名眼耳鼻喉科医师,占全县社区医院专业技术人员的0.83%,能够处理部分眼科急诊、常见病,能做部分门诊小手术,年诊治眼病共约5 000余人次;其余12个(80%)社区医院无眼科及眼科医师,无诊治眼病能力.全县平均每10万人口在社区拥有兼职眼科医师0.79名,无眼科护士.结论 璧山县社区医院眼科资源和服务能力参差不齐,专业技术人员极少,需要争取政府和其他部门对社区眼科卫生事业的支持,努力建立县与社区的二级防盲网络.

    作者:王玲;赵凤琴;滕臣;邵驹;王红;姜燕丽;刘明秀 刊期: 2013年第16期

  • 重庆市20家医院手术边缘时间患者安全管理现状调查

    目的 了解手术边缘时间患者安全管理现状,以提高手术患者安全,促进手术室护理质量的持续改进.方法 采用自制问卷,对重庆市20家医院手术边缘时间患者安全管理现状进行调查.结果 有5家医院由运送工人单独接手术患者,有2家医院没有对运送工人进行专业的运送技能培训,有6家医院没有对接送患者的推车进行定期检查和登记,有2家医院所接手术患者在等侯区没有专人看管,有11家医院在送患者时没有常规配备简易呼吸器等急救设备,有3家医院没有与病房、复苏室交接的记录表,有14家(70%)医院手术室护士与手术间比例不符合要求.在对全麻和硬膜外麻醉患者术后护送人员组成上的比较,综合手术室和专科手术室、二级医院手术室和三级医院手术室之间的差异有统计学意义(P<0.05).在对局部麻醉患者术后护送人员组成上的比较,综合手术室和专科手术室之间的差异有统计学意义(P<0.05);二级医院手术室和三级医院手术室之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 重庆市20家医院手术边缘时间患者安全管理现状不乐观,管理者应针对手术边缘时间患者安全的薄弱环节,建立安全文化,优化接送流程,以确保手术患者边缘时间的安全.

    作者:王依贵;官莉;方利;廖印;舒红;胡娅琴;高明华 刊期: 2013年第16期

  • 某综合医院医疗纠纷之实证研究

    目的 明确医疗纠纷发生特点和规律,为医疗纠纷防范提供依据.方法 选取四川省某三级甲等医院2005~2011年的医疗纠纷数据,进行文献研究和描述性分析.结果 该院近5年医疗纠纷总体数量较前明显增加;外科纠纷发生率高,其次是儿科、妇产科;医疗纠纷的发生原因,主要包括诊断、治疗、手术和告知义务的履行;自行协商是医疗纠纷的主要解决方式.结论 建立健全医疗风险管理体系,强化质量管理,重视业务培训,坚持医德医风建设,尊重患者权利,规范和完善医疗纠纷的解决方式,以预防医疗纠纷,促进医院健康发展.

    作者:罗秀;王轶 刊期: 2013年第16期

  • 应用灰色预测模型GM(1,1)预测医院住院人次

    住院部是医院对外服务的重要窗口,可以直接影响医院的声誉和形象[1].同时,住院量也是评价一所医院医疗工作的重要指标之一,直接或间接地反映出该医院的规模、医疗质量及医疗水平.因此,了解医院住院量的变化情况,对于合理安排医疗资源,提高医疗工作效率意义重大.要想更好地了解医院住院量的变化情况,好是能掌握其变化趋势,这就需要通过运用统计学知识,借助软件对其进行模拟预测.目前,预测的模型及方法有很多种,主要有线性回归模型、神经网络模型、灰色预测模型、马尔科夫链模型以及时间序列模型等[2].

    作者:李小升;刘海霞;马春柳;雷海科 刊期: 2013年第16期

  • 76例妊娠高血压疾病的临床诊治分析

    目的 探索妊娠高血压疾病的临床特征及其治疗方法.方法 回顾性分析该院2011年1月至2012年2月期间收治的76例妊娠高血压患者的临床病例资料.结果 妊娠高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组的不良围产儿率分别为:4.65%、25%、61.5%;不良妊娠结局发生率分别为16.3%、45%、61.5%.3组差异有统计学意义(P<0.05).经阴道分娩组不良结局为15%,经剖宫产组不良结局1.8%,差异有统计学意义(P=0.023).结论 对妊娠高血压疾病的及时控制和治疗,可有效降低不良妊娠结局和不良围产儿结局的发生率,并为剖宫产术适时终止妊娠是保障母婴安全的佳方式提供理论依据.

    作者:陈茜 刊期: 2013年第16期

  • 同伴式健康教育在慢性阻塞性肺疾病护理管理中的应用和效果分析

    随着社会的进步,中国医疗卫生事业的发展,目前,危害人类生命健康安全的疾病谱发生了变化,由传染性疾病转为慢性病,即指起病隐匿,病程迁延不愈,该病的后果是严重损害健康.目前,全世界约有2.7亿慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者,慢性阻塞性肺疾病患者位于心脑血管病和急性呼吸道病之后,与艾滋病并列为全球第4大死因.中国约有2 500万慢性阻塞性肺疾病患者,每年致死人数达100万.调查显示,中国整个人群的发病率为7.5%~10%,40岁以上发病率为25%.

    作者:刘海燕;刘海霞 刊期: 2013年第16期

  • 大黄与栀子的配伍机制及临床意义

    目的 探索大黄与栀子配伍机制及临床意义.方法 通过对历代及现代文献的研究,探索大黄与栀子在清热泻火、清热利湿、凉血止血、清热解毒4个方面配伍使用,观察其临床疗效.结果 大黄与栀子配伍主要运用于火热上炎、湿热黄疸、血热出血、热毒疮疡等证,从而确定了二药配伍的药效及机制.结论 大黄与栀子的不同配伍机制及作用,对临床具有重要的指导意义.

    作者:周萍;罗华丽;胡红 刊期: 2013年第16期

  • 转基因小鼠模型在特应性皮炎中的应用研究进展

    特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性皮肤炎症性疾病,易反复发作,伴剧烈瘙痒,严重影响了患者的生活质量,近年来发病率呈逐年升高的趋势.该病确切发病机制尚不清楚,可能涉及遗传、免疫、感染等众多因素.转基因小鼠在确定特定基因和蛋白的生理功能及在疾病状态所起的作用方面是非常有价值的工具,近年来AD的转基因小鼠模型有了很大发展,白细胞介素(interleukin,IL)-4转基因小鼠、IL-18转基因小鼠、半胱天冬酶1(caspase-1,CASP1)转基因小鼠、IL-31转基因小鼠、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)转基因小鼠、RelB缺陷小鼠、组织蛋白酶E(cathepsin E,Cat E)缺乏小鼠、缓激肽释放酶(stratum corneum chymotryptic enzyme,SCCE)转基因小鼠、载脂蛋白C1 (apolipoprotein C1,APOC1)转基因小鼠等从不同的角度显示疾病的特征,对研究疾病的发病机制和开发药物提供了广阔的前景,有助于阐明单个细胞因子和蛋白在AD的发生与发病机制、生物治疗等方面的作用.为此,本文就转基因小鼠模型在AD中的应用研究进展进行简述.

    作者:刘娟娟 刊期: 2013年第16期

  • 高职高专药学专业人才培养模式与课程体系探索

    教育部《关于全面提高高等职业教育教学质量的若干意见》(教高[2006]16号)明确提出,要积极推行与生产劳动和社会实践相结合的学习模式,把工学结合作为高等职业教育人才培养模式改革的重要切入点,带动专业调整与建设,引导课程设置、教学内容和教学方法改革.学校应与企业合作开展应用研究和技术开发,使企业在分享学校资源优势的同时,参与学校的改革与发展,使学校在校企合作中创新人才培养模式.现根据教育部指导精神,同时融入重庆及西南地区医药行业特点,结合本校60多年办学特色,提出高职高专药学专业人才培养模式与课程体系探索,供兄弟院校参考和学习.

    作者:杨宗发;杨元娟;刘晓颖;何静;许燕 刊期: 2013年第16期

  • 90例面部基底细胞癌患者的整形外科手术治疗及预后评估

    目的 探讨面部基底细胞癌合适的整形外科手术治疗方法、美容修复方法及预后效果.方法 2000年1月至2012年1月,共收治面部基底细胞癌患者90例,根据临床表现及个体病例差异采用不同的整形外科手术方式修复创面,采取美容缝合技术,术后进行随访观察顸后.结果 各种整形外科手术后的90例面部基底细胞癌患者切口愈合良好,复发率低,术后外形满意,不影响功能,预后良好.结论 面部基底细胞癌选择整形外科手术治疗,适宜的手术方式与病灶部位、大小等结合,可取得理想的治疗及美容效果.

    作者:杨娥;张恒术 刊期: 2013年第16期

  • 医学院校构建农村卫生人才培训体系的探索和实践

    加强农村医疗卫生技术人员在职岗位培训,是结合农村卫生工作实际,推进农村卫生事业发展的重要渠道和基础工作.中共中央、国务院在《关于进一步加强农村卫生工作的决定》中指出:高等医学院校要针对中国农村卫生实际需要,通过改革培养模式,调整专业设置和教学内容,强化面向农村需要的全科医学教育,建立健全继续教育制度,加强农村卫生技术人员业务知识和技能培训;要依托有条件的高等医学院校建设区域性全科医学师资培训基地.

    作者:毛良 刊期: 2013年第16期

  • 尿AD7c-NTP联合血浆Hcy水平在老年性痴呆患者中的检测意义

    目的 研究尿神经丝蛋白(AD7c-NTP)和血浆高半胱氨酸(Hcy)在老年性痴呆(AD)患者中的检测意义.方法 筛选AD患者120例和正常对照组120例,分别采用双抗体夹心法和循环酶法检测患者尿液AD7c-NTP和血浆Hcy的含量.结果 AD组尿AD7c-NTP均值为(4.02士3.19)ng/mL,明显高于正常对照组(2.16±2.33) ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05);AD组血浆Hcy均值为(17.13±12.99),μmol/L,亦高于正常对照组(13.61士7.43)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05).结论 尿AD7c-NTP和血浆Hcy与AD密切相关,可用于AD患者的诊断及筛查.

    作者:蔡超群;周毅 刊期: 2013年第16期

  • 西替利嗪治疗慢性荨麻疹的临床疗效观察

    目的 探讨盐酸左西替利嗪治疗慢性荨麻疹的临床疗效.方法 将该院2010年1月至2012年6月收治的92例慢性荨麻疹患者随机分为两组,治疗组给予盐酸左西替利嗪,对照组患者给予盐酸西替利嗪,比较两组患者的治疗效果和不良反应.结果 治疗组患者的总有效率为82.6%,对照组患者的总有效率为80.4%,两组患有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组患者的不良反应发生率明显低于对照组患者(P<0.05).结论 采用盐酸左西替利嗪能够有效治疗慢性荨麻疹,疗效较好.

    作者:孙静;崔蓉;李乐平 刊期: 2013年第16期

  • 高频超声引导水灌肠法在小儿肠套叠复位中的应用价值

    目的 探讨高频超声引导水灌肠在小儿肠套叠复位治疗中的运用价值.方法 将131例肠套叠患儿随机分为高频超声引导生理盐水灌肠复位组(高频超声组)42例,X线透视钡剂灌肠复位组(X线钡剂组)46例,X线透视空气灌肠复位组(X线空气组)43例.比较3种灌肠复位方法诊断符合率、复位成功率、平均耗时、开腹手术率等.结果 诊断符合率高频超声组与X线钡剂组及X线空气组接近,差异无统计学意义(P>0.05);复位成功率超声组高于X线钡剂组及X线空气组(P<0.05);平均耗时高频超声组短于X线钡剂组及X线空气组(P<0.05).结论 高频超声引导下用生理盐水灌肠法复位小儿肠套叠复位成功率高,耗时少,中转开腹手术率低,操作简单.

    作者:卓涛;胡小韦;岑君;黄万昌 刊期: 2013年第16期

  • 培美曲塞与吉西他滨联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

    目的 探讨培美曲塞(PEM)联合顺铂(DDP)与吉西他滨(GEM)联合顺铂(DDP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的有效性和安全性.方法 将60例晚期NSCLC(Ⅲ~Ⅳ期)患者随机分为两组,治疗组30例采用PEM联合DDP治疗,对照组采用GEM联合DDP治疗,治疗2个周期后评价疗效,治疗期间观察不良反应.结果 治疗组总有效率43.3%,中位无进展时间5.5个月,对照组分别为40%和4.8个月,两组比较差异均无统计学意义.治疗组中位生存时间11.9个月,对照组为9.6个月,且治疗组Ⅲ~Ⅳ级药物相关性血液学毒性显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义.结论 PEM或GEM联合DDP一线治疗晚期NSCLC疗效确切,但其与GEM比较,PEM中位生存时间长、血液学毒性反应低,更适合于化疗耐受性较差的晚期NSCLC患者.

    作者:邹茵;陆方阳;周志华 刊期: 2013年第16期

  • 普罗布考联合阿托伐他汀对急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块的影响

    目的 观察普罗布考联合阿托伐他汀对急性脑梗死患者血脂及颈动脉粥样硬化斑块的影响.方法 将60例急性脑梗死患者,分为阿托伐他汀单独治疗(对照组)和阿托伐他汀联合普罗布考治疗(观察组),对照组使用阿托伐他汀20 mg,每天1次;治疗组在此基础上使用普罗布考0.25 g,每天2次,共治疗6个月.分别于治疗前及治疗后6个月测定患者血脂和颈动脉内膜中膜厚度(IMT).结果 两组患者在治疗后6个月较治疗前总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显降低(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)增高(P<0.05),颈动脉IMT明显降低(P<0.01).治疗后6个月观察组较对照组TC、LDL-C、TG及颈动脉IMT明显降低(P<0.05),HDL-C增高但差异无统计学意义(P>0.05).结论 普罗布考联合阿托伐他汀治疗急性脑梗死具有协同降脂和降低颈动脉IMT作用,能有效稳定颈动脉粥样硬化斑块.

    作者:马璟曦;蔡敏 刊期: 2013年第16期

重庆医学杂志

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主管:重庆市卫生和计划生育委员会

主办:重庆市卫生信息中心,重庆市医学会