学术投稿

结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定

尤敏;邓小波;崔尚金

关键词:结核分支杆菌, MPT83基因, 原核表达, SDS-PAGE, Wostern, blotting
摘要:[目的]从分支杆菌培养物中提取DNA,扩增结核分支杆菌MPT83蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达、克隆和鉴定. [方法]从分支杆菌培养物中提取总DNA,扩增MPT83因并克隆入T载体,将目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21宿主菌,IPTG诱导表达构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHⅠ+HindⅢ双酶切进行鉴定. [结果]经SDS-PAGE分析,在约42 ku处出现新的蛋白条带,5 h后表达量即达到高峰;Western blotting分析表明,融合蛋白能够被分支杆菌阳性血清所识别;纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳,出现清晰的单一条带.表明MPT83基因原核表达载体构建成功. [结论]结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定,为结核病的诊断以及亚单位疫苗、核酸疫苗的制备和应用奠定基础.
现代预防医学杂志相关文献
  • 临床标本细菌分布与耐药性监测

    [目的]探讨临床分离菌分布及其对抗菌药物的耐药状况. [方法]收集2006年1月~2006年12月临床感染标本分离的病原菌并分析其种类.药敏试验采用kirby-Bauer纸片扩散法. [结果]1 182株病原菌中,革兰阳性球菌604株(51.1%),革兰阴性杆菌578株(48.9%).病原菌以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌多见.万古霉素、阿米卡星、新霉素对革兰阳性球菌抗菌作用较强;多粘菌素B、头孢他啶、阿米卡星对革兰阴性杆菌作用较强;其他抗菌药物对临床病原菌呈现不同程度的耐药. [结论]病原菌种类在发生变迁,耐药性严重,临床应重视病原学检查,开展细菌耐药性监测,合理使用抗菌药物.

    作者:许世琴;邢志广;邵咏 刊期: 2008年第18期

  • 心理健康教育在高校学生工作中的有效渗透

    心理健康教育是高校素质教育的重要内容,是大学生成长成才的客观需要,加强高校心理健康教育具有重要现实意义.高校通过健全大学生心理健康教育档案资料库,加强心理健康教育课程改革和建设.建立心理健康教育咨询体系,加强师资队伍建设,引导大学生进行自我教育,营造积极健康的校园文化氛围,建立学校、家庭和社会心理健康教育服务育人体系,重视心理健康教育与思想政治教育的紧密结合.是新形势下心理健康教育在高校中的有效渗透点.

    作者:慕乾伟;姜海燕 刊期: 2008年第18期

  • 18例溶组织内阿米巴致肝脓肿误诊分析

    [目的]探讨临床对于阿米巴肝脓肿诊断错误的常见原因. [方法]对误诊18例阿米巴性肝脓肿进行回顾分析. [结果]阿米巴性肝脓肿临床表现复杂多样,易被误诊为细菌性肝脓肿等肝胆系统疾病;18例患者肝穿刺脓液直接涂片均查到溶组织内阿米巴滋养体而得以确诊. [结论]临床医师应加强对阿米巴肝脓肿临床表现及临床诊断的认识;尤其是临床检验师应熟悉溶组织内阿米巴形态结构,掌握阿米巴病的寄生虫学检查方法,避免阿米巴肝脓肿病的误诊.肝穿刺脓液直接涂片检查,其方法简单,快速,阳性率高.故对疑诊病人病原学诊断尤为重要,这是及时诊断溶组织内阿米巴肝脓肿的关键.

    作者:王爱华;包东武 刊期: 2008年第18期

  • 杭州市272名暗娼STD/AIDS检测及安全套使用情况调查

    [目的]了解杭州市暗娼性传播疾病/艾滋病(STD/AIDS)感染及安全套使用情况,为针对暗娼开展高危行为干预和遏制杭州市STD/AIDS流行提供依据. [方法]对2006年1~12月杭州市某妇教所在发廊、按摩院、酒吧、旅馆等营业性娱乐场所抓获从事卖淫活动的272名暗娼进行STD/AIDS检测、社会人口学特征、安全套使用情况调查.[结果]91.18%暗娼年龄在20~39岁之间;已婚48.53%,未婚40.44%;文化程度以初中及以下为主,占91.54%;外省户籍占83.46%;职业以待业为主90.81%.11.39%从没有未过安全套.STD检出率为94.05%,未检出HIV抗体阳性;检出病种以非淋菌性尿道炎(NGU)居首位,检出率91.08%;患两种及两种以上STD占49.44%. [结论]暗娼STD检出率高,安全套使用率低,应在暗娼人群中更深入地开展STD/AIDS健康教育、高危行为干预和推广100%使用安全套.

    作者:宋姝娟;陈树昶;丁建明;程洁;罗艳;许坷;苑航;陈卫永;戴耀忠;陈康凯 刊期: 2008年第18期

  • 卡氏肺孢子虫MSG抗原片段细胞表位的预测

    [目的]预测卡氏肺孢子虫主要表面抗原(MSG)片段的B细胞和T细胞抗原表位. [方法]运用Sig-nalp3.0、EMBOSS等网络服务器推测卡氏肺孢子虫MSG抗原片段的B细胞和T细胞抗原表位,分析预测结果. [结果]MSG抗原片段存在3个潜在的B细胞抗原表位及6个潜在的T细胞抗原表位.B细胞抗原表位在氨基酸序列的位置为69-79、96-101、133-140aa 3个区域内或其附近;T细胞抗原表位在氨基酸残基的位置为7-22、28-43、20-35、40-55、53-68、86-101aa. [结论]MSG抗原表位的预测为有目的的克隆基因片段,研究高效的表位疫苗奠定基础.

    作者:董永生;段义农;王建新;陈金铃;秦永伟 刊期: 2008年第18期

  • 影响女性青春期启动因素的研究进展

    青春期启动是决定女性一生身心发育的关键过程.从人类几千年的历史来看,月经初潮的年龄是稳定的.而近20~30年女性月经初潮的年龄在逐步提前.青春期提前不仅使人类机体在组织、结构上发生深刻变化,而且缩短了儿童期,影响青少年心理卫生健康[1],与青春期负性情绪和恋爱低龄化、性生活低龄化、生殖疾病低龄化密切相关,也是导致学生妊娠事件发生率上升的间接因素.大限度的应对性发育提前的趋势,消除那些引起性发育提前的因素是迫切需要解决的问题.因此.本文综述了女性青春期启动的影响因素,为防治性发育提前制定科学的干预措施提供参考.

    作者:李国屏;刘浩 刊期: 2008年第18期

  • 某大学学生毒品知信行调查及其尝试情况研究

    [目的]了解在校大学生对毒品知信行及毒品尝试情况的现状,为探讨在高校大学生中开展毒品预防教育提供基础资料. [方法]自拟调查问卷,按照分层随机整群抽样的方法,对2004、2006级710名学生进行了调查,获得问卷699份,有效率98.45%. [结果]大学生毒品尝试率高达2.57%,男生和女生的毒品尝试率分别为3.28%和2.12%,无性别差异;对毒品知识的掌握程度一般,态度以同情和鄙视为主,并有59.1%的学生对吸毒者采取劝阻但并不报警的方法. [结论]大学生对毒品知识的认识不够全面,一次尝试毒品的情况严重,高校迫切需要开展系统的毒品知识教育.

    作者:贾改珍;董兆举;孙维克;刘芳 刊期: 2008年第18期

  • 应用随机时间序列分析法对军队乙型肝炎疫情的预测研究

    [目的]探讨应用ARMA模型拟合时间序列的方法,并将其应用于军队乙型肝炎的预测,为传染病预警系统提供决策依据. [方法]利用SPSS软件对全军1996~2005年乙型肝炎的月发病数据进行建立模型.并用所建模型对2006乙肝逐月发病人数进行预测,将预测值与实际值进行比较. [结果]ARIMA(0,1,1)×(0,1,1)12模型较好地拟合了既往时间段上的发病序列,其对2006年各月发病人数的预测值符合实际发病人数的变动趋势. [结论]在乙型肝炎的近期预测中引入时间序列的ARMA模型方法,为传染病预测具有指导意义.

    作者:徐元勇;温亮;李申龙;孙海龙;王波;闫永平;徐德忠 刊期: 2008年第18期

  • 广西2006年食物中毒流行特点分析及预防对策

    [目的]分析广西2006年食物中毒流行规律和特点,为防控提供依据. [方法]根据中毒发生情况、时间分布、地区及城乡分布、食品种类、致病因素等流行特点对2006年广西各地的食物中毒进行统计分析. [结果]2006年广西共发生重大食物中毒76起,中毒人数1 250人,死亡15人.中毒高发时段为第2季度的6月.桂西地区发生率较其他地区高.农村为食物中毒监控的薄弱地带.动植物类食品引起中毒占主要. [结论]针对广西食物中毒发生、发展的规律和特点,提出加强对高发季节、高发区域、高发单位和重点食品的监控以及卫生宣传教育等有效预防措施.

    作者:施向东;林新勤;陈兴乐;梁惠宁;龙兮 刊期: 2008年第18期

  • mTOR/p70S6K信号通路与NIH3T3成纤维细胞增殖

    [目的]探讨mTOR/p70S6K信号通路激活在成纤维细胞增殖中的作用. [方法]以mTOR基因转染小鼠NIH3T3成纤维细胞,用MTT法检测其是否增殖,用RT-PCR和Western印迹分析测定细胞mTOR、p70S6K mRNA与蛋白的表达. [结果]MTT法检测转染组细胞增殖能力增强;RT-PCR与Western印迹分析转染组中mTOR和p70S6K的mRNA与蛋白表达水平明显增加(P<0.01). [结论]mTOR/p70S6K信号通路激活可能介导成纤维细胞增殖.

    作者:李小明;杨作成;陈淳媛;李卓颖 刊期: 2008年第18期

  • 俱乐部形式的体育教学促进大学生心理健康的实验研究

    [目的]探索体育教学促进大学生心理健康的途径和方法. [方法]采用教学实验法、问卷调查法、测试法和数理统计法. [结果]体育教学对提高大学生心理素质具有不同程度的效果. [结论]体育教学对提高大学生心理素质和促进大学生心理健康具有积极的效应,不同形式的体育教学对大学生心理健康的促进作用是不一样的,俱乐部形式的体育教学对大学生心理健康的促进作用具有非常显著的效果.

    作者:宋子良 刊期: 2008年第18期

  • 江西省某高等师范院校大学生AIDS知识和态度现状调查

    [目的]了解师范类大学生对艾滋病知识、态度现状,为探索有针对性的艾滋病行为干预提供依据. [方法]采用分层整群抽样的方法对江西一所大学师范类专业的570名大学生进行匿名问卷调查. [结果]大学生对于艾滋病的基本知识有一定程度的了解.基本掌握艾滋病的主要传播途径,但对于一些日常生活接触是否会传播艾滋病回答正确率较低,97.4%的学生认为在大学中开展艾滋病健康教育很必要. [结论]对师范类大学生开展艾滋病防治教育工作非常必要,有助于提高他们自身的知识并促进改变行为.

    作者:龚敏;汪德华 刊期: 2008年第18期

  • 现代医院总值班的理论认知与实践探索

    医院总值班制度是现代医院的重要管理制度之一.本文结合我院工作实践.探讨医院总值班内涵、任务、特点、要求及应急处置等诸方面工作.以期为完善我国医院总值班总值班制度,规范化管理流程和提升处置各种复杂情势的能力,提供有益的借鉴.

    作者:谢娟;朱方;孙荣国;薛凡 刊期: 2008年第18期

  • 漯河市郾城县地方性甲状腺肿调查

    [目的]证实地方性甲状腺肿流行程度及因素. [方法]对高发人群7~14岁儿童调查肿大率及患病率,14岁儿童尿碘测定,外环境水碘检测. [结果]7~14岁儿童地方性甲状腺肿大率为28.2%,患病率5.2%.省级复查肿大率为52.3%,患病率为12.2%.儿童尿碘为0.6~100.1 μg/L,水碘含量5.2 μg/L. [结论]两乡为地方性甲状腺肿中度流行区,并及时采取以普服碘油丸为主的综合性防治措施.

    作者:马晓 刊期: 2008年第18期

  • 胰升糖素样肽-1长期作用对2型糖尿病大鼠血糖和胰岛素水平的影响

    [目的]观察胰升糖素样肽-1长期作用对2型糖尿病大鼠血糖和胰岛素水平的影响. [方法]采用高脂高糖饲料喂养结合小剂量链脲佐菌素注射的方法成功建立2型糖尿病动物模型.用高、中、低3个剂量GLP-1对2型糖尿病大鼠进行长期干预(4周),比较干预组与未干预组糖尿病大鼠血糖、血脂和胰岛素水平的变化. [结果]GLP-1高剂量组较糖尿病组大鼠血糖及血脂明显降低(P<0.01),胰岛素水平明显升高(P<0.01). [结论]一定剂量的GLP-1长期作用.可以明显降低2型塘尿病大鼠的血糖,增加胰岛素分泌,并有效地控制体重和降低甘油三酯水平.

    作者:张娟;田林红;王苑铭 刊期: 2008年第18期

  • 支气管肺泡灌洗液中肿瘤相关物质群、CYFRA21-1的临床研究

    [目的]探讨血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤相关物质群(TSGF)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)对肺癌早期诊断的价值. [方法]检测50例肺癌和50例肺良性疾病患者支气管肺泡灌洗液、血清中肿瘤相关物质群、CYFRA21-1的含量. [结果]肺癌患者血清和支气管肺泡灌洗液中TSGF、CYFRA21-1的含量均显著高于肺良性疾病患者.肺癌患者支气管肺泡灌洗液中TSGF、CYFRA21-1的含量显著高于血清中的含量. [结论]支气管肺泡灌洗液中TSGF、CYFRA21-1的测定对早期肺癌的诊断有一定价值,其临床价值优于血清.

    作者:吴金如;刘颖 刊期: 2008年第18期

  • 郴州市1990~2005年甲乙类传染病流行趋势分析

    [目的]了解郴州市近16年甲乙类传染病的流行情况,分析发病特点及流行趋势,为传染病预防和控制策略的制定提供科学的依据. [方法]收集1990~2005年郴州市甲乙类传染病疫情资料,采用描述流行病学方法进行分析. [结果]1990~2005年郴州市报告甲乙类传染病21种122 420例,年平均发病率为172.12/10万;历年发病率波动在125.00/10万~328.70/10万之间,发病率总体呈下降趋势.年平均发病率居前6位的依次是痢疾、肺结核、病毒性肝炎、伤寒、麻疹和淋病.肠道传染病由1990年的213.61/10万下降到2005年的42.03/10万,呈明显下降趋势;呼吸道传染病和血源及性传播疾病呈上升趋势. [结论]近16年来,郴州市甲乙类传染病发病率总体呈下降趋势,疾病谱以肠道传染病为主转为以呼吸道传染病为主.该市今后传染病防制的重点是加强以肺结核为主的呼吸道传染病的防治,同时要加大对血源及性传播疾病和狂犬病的监测和防控力度.

    作者:段良松;姚令辉;苏小可;陈伟华 刊期: 2008年第18期

  • 肺癌患者血清肿瘤相关抗原Scc-Ag检测及临床意义

    [目的]评价血清肿瘤相关抗原Scc-Ag的水平测定对肺癌的临床诊断价值. [方法]采用化学发光微粒子免疫分析技术检测101例肺癌、65例肺良性疾病、38例正常对照者血清Scc-Ag的水平. [结果]肺鳞癌患者血清Scc-Ag水平明显高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05),肺良性疾病组与对照组差异无统计学意义(P>0.05),肺鳞癌临床分期越晚,其Scc-Ag水平与阳性率越高. [结论]血清Scc-Ag的检测可提高对肺鳞癌的的诊断,对肺鳞癌病情判断及预后有较大帮助,但对肺鳞癌早期诊断意义不大.

    作者:张燕辉;戴金华;马建波;张更荣;赵锐;应丽娜 刊期: 2008年第18期

  • 综合干预疗法对儿童肥胖症患者的行为影响

    [目的]观察综合干预疗法对儿童肥胖症的疗效.[方法]回顾分析我院儿科2006-06~2007-06对收治的50例儿童肥胖症进行综合干预治疗1年的效果,同时设立对照组,正常组. [结果]干预组和正常组均肥胖的发生率明显降低,与对照组比较差异有统计学意义. [结论]综合干预疗法对儿童肥胖症治疗效果明显,可推广应用.

    作者:王爱国;牛小燕;叶明阳;李仁清;涂明辉 刊期: 2008年第18期

  • 常山县中小学教师伤害认知情况调查

    [目的]了解常山县中小学教师对意外伤害的认知程度. [方法]采用整群抽样对中小学教师进行问卷调查. [结果]老师对伤害的知晓率为:小学93.93%,初中97.60%,高中94.77%.班主任为96.43%,非班主任94.81%,差异无统计学意义(χ2=0.313,P>0.05).老师认为伤害前3位为跌伤、车祸、溺水,此与中小学生实际伤害发生情况相符.老师认为意外伤害对学生有影响的占绝大部分,但对伤害导致残废的认识的仅占52.97%.老师认为安全教育是非常必要和必要的,认为是否应开展预防伤害教育非常必要和必要的均占绝大多数.老师对学生每年应付多少保险金在每年20~50元之间,平均为32.87元.这与本县的经济情况、文化结构、消费水平、观念习惯基本一致. [结论]开展中小学生伤害预防和控制,应充分发挥教师的作用.

    作者:王谦信;韩成星 刊期: 2008年第18期

现代预防医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 四川大学华西公共卫生学院