李萍；刘显红；赵丽娟
目的 重组表达人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位跨膜区成份。方法 采用DNA重组技术将尿素酶B亚单位3'端732 bp基因片段克隆至pET11C载体上，转化宿主菌BL21（DE3） E.coli，IPTG诱导，SDS-PAGE及Western-blot分析表达情况。结果 成功构建了含UreB 0.7 kb片段的重组质粒pET-UreB0.7，并表达了具有免疫反应性的分子量约28 000 u的重组蛋白，表达率为19.8％。结论 重组的尿素酶B亚单位跨膜区成份为研究其相关生物学特性奠定了重要基础，亦可作为Hp疫苗的成分用于Hp感染的预防和治疗。
作者：毛旭虎；鲁东水；郭红；吴超；王缚鲲；邹全明 刊期： 2001年第02期
目的 阐明甲胎蛋白生物半衰期（AFP T1／2）与原发性肝癌（PHC）治疗后复发与转移的关系。方法 用单克隆双抗体夹心两步法测定AFP含量；按T1／2=0.3 dT／log（AFP1／AFP2）分别计算介入和射频治疗PHC患者AFP T1／2。结果 当AFP T1／2＞1.5 d时预测PHC患者治疗后复发转移的敏感性、特异性及总符合率（准确度）分别为87.5％、89.3％、88.5％。介入组为82.35％、83.3％、82.75％；射频组为93.3％、93.75％、93.5％。60例患者在200 d内未发生复发转移的患者与发生复发转移或死亡患者之间的AFP T1／2差异非常显著（P＜0.001）。结论 AFP T1／2是预测PHC患者发生转移复发的早期预测指标，它不仅为其后续治疗的监测提供了可靠参数，而且也是评价疗效的良好指标。
作者：刘树林；齐为民；李斌；张丽君 刊期： 2001年第02期
目的 了解ConA在体内对小鼠腹腔MΦ吞噬功能、细胞毒作用及产生NO、TNF-α、IL-1的影响。方法 分别测MΦ吞噬鸡红细胞的能力，以S180为靶细胞测MΦ依赖的细胞毒作用。以griess试剂、L929细胞MTT检测法、胸腺细胞增殖法测MΦ产生NO、TNF-α、IL-1的水平。结果 ConA活化的腹腔MΦ吞噬鸡红细胞的能力以及对S180细胞的细胞毒作用显著强于PBS对照组（P＜0.01），并产生较高水平的NO、TNF-α、IL-1。结论 ConA能活化MΦ产生NO等效应分子，发挥对MΦ的免疫调节作用。
作者：高立芬；刘君炎；汤红明；屈雪菊；蒋正明 刊期： 2001年第02期
目的 探讨PVN不同亚核在调控脾脏免疫功能中的作用。方法 4只SD大鼠脾脏内注射假狂犬病毒（PRV）96 h后，采用免疫组化法和体视学方法研究被假狂犬病毒跨突触感染的神经元在PVN不同亚核内的分布特点及其与PVN内AVP神经元位置配布间的相互关系。结果 PRV感染的神经元主要聚集于PVN尾段的尾侧大细胞亚核（PM）和外侧小细胞亚核（LP）（占总面积的73.49％），少量分布于喙段的前小细胞亚核（LP）、中段的背侧小细胞亚核（DP）和室周小细胞亚核内（PP）。其中LP及PM内的部分PRV感染神经元分布在AVP阳性神经元聚集的区域内。结论 PVN对脾脏免疫功能的调控除了传统神经内分泌途径外，还可能存在下列途径：PM内的AVP阳性神经元和LP、DP及AP内的神经元通过向延髓背侧及脊髓中间外侧柱的投射，然后再通过副交感和交感神经的直接神经支配途径调控脾脏的功能。
作者：朱家媛；欧可群；王蕾；陈文玉；马玉琼 刊期： 2001年第02期
目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（ CTLA- 4）基因外显子1的49位点A／G多态性与自身免疫性甲状腺病（AITDs）的相关性。方法 采用多聚酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术分析122例自身免疫甲状腺病患者，其中Graves’病（GD）87例，桥本甲状腺炎（HT）35例，84例健康对照的CTLA-4基因外显子1的49位点基因型。采用ELISA技术检测AITDs患者甲状腺功能，间接免疫荧光法检测甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺抗过氧化物酶抗体（TPO Ab）。结果 AITDs患者CTLA-4／G49等位基因频率显著高于对照组（P＜0.000 1，其中GD组P＜0.000 1，HT组P＜0.01）；GD、HT组按性别分层分析后发现 CTLA-4／G49等位基因在不同性别的分布均无显著性差异。结论 CTLA-4基因外显子1G49等位基因与AITDs显著相关；GD、HT患者A／G49等位基因的分布与性别无关。
作者：王娈；王斐；马瑞欣；于宏伟 刊期： 2001年第02期
目的 建立表达可溶性HLA-G1蛋白的真核表达载体pcDNA3-sHLA-G1。方法 从绒癌细胞系Jeg-3细胞中提取总RNA，借助RT-PCR技术扩增可溶性HLA-G1的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3，然后经酶切和测序法鉴定。结果 经酶切鉴定及测序分析，证实已成功构建pcDNA3-sHLA-G1。结论 本研究成功构建可溶性HLA-G1的真核表达载体。
作者：房崇芸；吴雄文；龚非力 刊期： 2001年第02期
目的 研究超抗原SEA对外周血T淋巴细胞的活化作用。方法 用SEA刺激人外周血T淋巴细胞，观察细胞的DNA合成、形态、IL-2的产生、细胞表型以及凋亡情况。结果 SEA对T淋巴细胞的促增殖作用在浓度为100 ng/mL强，在第2、3d达高峰；首次或多次刺激不改变T淋巴细胞的CD4+CD8+表型；首次刺激24h内未见明显凋亡；但再次刺激24 h内即有明显凋亡；加入rhIL-2 2 d凋亡现象消失。结论 超抗原SEA对T淋巴细胞的促增殖作用与其浓度、作用时间有关，并且SEA首次或多次刺激对CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞起同等的活化作用。
作者：许桂莲；朱锡华；杨劲 刊期： 2001年第02期
目的 探讨bcl-2、bax在丁型肝炎发病机理中的作用。方法 采用免疫组化双标记染色和连续切片技术，检测77例丁型肝炎病人肝组织HDAg、bcl-2和bax表达，以67例乙型肝炎作对照。结果 HDAg以肝细胞核表达为主，bcl-2以肝细胞浆及核膜表达为主，bax以肝细胞浆表达为主，胞核也可呈阳性表达。bax和HDAg表达及分布有相关性，在各临床类型肝炎中的表达强度有显著性差异（P＜0.01）。结论 HDV感染可诱导肝细胞表达bax，增强bax 促细胞凋亡作用，bcl-2／bax途径介导的细胞凋亡在丁型肝炎发病机理中可能有一定作用。
作者：顾小红；李奇芬；王宇明 刊期： 2001年第02期
目的 建立一种介导体外真核细胞高效率基因转染的新方法。方法 采用一种新的非脂质体基因转染试剂Fugene 6，以人p14ARF蛋白表达载体（pCI-neo-p14ARF）为外源DNA，转染存在p14ARF基因原发缺失的人H460，A549，U251和PC-3共4个癌细胞系，通过G418筛选21 d确定转染效率。结果 经转染的4个细胞系培养孔中均长出了抗G418细胞克隆，而且这些细胞克隆的p14ARF基因PCR产物均为阳性，细胞毒性分析发现高浓度Fugene 6作用下各细胞的增殖活力未受影响。结论 Fugene 6为一简便快速、易操作、重复性好且无细胞毒性的体外真核表达载体基因转染新系统。
作者：胡义德；高楠；曹晓运；周决；曹世龙 刊期： 2001年第02期
目前，大量研究表明：Th1／Th2细胞亚群与自身免疫病、AIDS、肿瘤及妊娠等许多病理和生理过程有关。我们以往的工作曾证明人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）在一定剂量范围内可抑制Th1、Th2细胞分泌各自独特的细胞因子［1］。鉴于妊娠期间，尤其是早期妊娠期间，孕妇体内产生大量的hCG， 同时结合近Lin［2］等报道，孕妇外周血T细胞可表达hCG 受体的研究，本文试图对早孕妇女外周血中的Th1／Th2细胞亚群进行分析，旨在从一个崭新的角度阐明维持早孕有关的部分机理，并为理解某些临床现象提供理论基础。
作者：王越；屈野；陈莉；潘菊芬 刊期： 2001年第02期
目的 探索胰岛素促进心肌细胞葡萄糖摄取增加的机制。方法 采用Northern法分析心肌GLUT4 mRNA和免疫法分析心肌GLUT4多肽。结果 胰岛素刺激心肌GLUT4 mRNA和GLUT4多肽表达增加1～1.2倍。同时伴随心肌葡萄糖摄取增多。结论 胰岛素能刺激GLUT4 mRNA和GLUT4多肽表达，使GLUT4数增加，进而促进心肌葡萄糖摄取增多，胰岛素刺激心肌细胞GLUT4表达，可能是心肌增加葡萄糖摄取的重要分子学机制之一。
作者：殷仁富；陈金明；吴宗贵；仇韶华；王咏梅；武瑞美；孔宪涛 刊期： 2001年第02期
目的 在大肠杆菌中表达人白细胞分化抗原CD7胞外区蛋白。方法 采用PCR技术调整CD7基因的阅读框架，使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致，缺失了CD7 cDNA基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子,构建CD7胞外区cDNA和生物素化蛋白基因融合的原核表达质粒PinPointxa3-CD7。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α表达, SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果。结果 融合蛋白的分子量约为30 000 u，Western blotting结果表明:表达的蛋白质可被抗CD7的单克隆抗体识别。结论 为研制抗CD7基因工程抗体奠定了基础。
作者：周艳春；朱锡华；黄云辉 刊期： 2001年第02期
目的 构建人CD154基因真核细胞表达载体。方法 采用RT-PCR方法，从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中扩增得到820 bp的人CD154 cDNA片段，再用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中，限制性内切酶酶切分析重组质粒和DNA序列分析。结果 人CD154 cDNA已经正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论 本研究为探讨CD154分子与淋巴细胞活化的关系及其信号传导机制，为进一步用于抗移植排斥反应的研究，或对由于CD154遗传缺陷所致的免疫缺陷病的基因治疗奠定了基础。
作者：张春艳；宁波；李树浓；张志方；冯炼强 刊期： 2001年第02期
G－细菌的脂多糖（LPS）是重要的病原体相关模式分子。PAMPs均可被动物作为外来分子进行识别。LPS能激发机体细胞因子IL-1、TNF-α等活性分子的合成，对感染具有十分重要的作用。LPS是通过什么受体怎样将信号传入免疫细胞并启动免疫反应的，人们一直都不十分清楚。近年来，一种名为Toll蛋白的发现，使人们对机体识别LPS机制的认识向前跨进了一大步。本文试对该模式识别受体的研究进展做一综述。
作者：顾长国；李磊 刊期： 2001年第02期
针对海洛因依赖者普遍存在易受细菌、病毒感染，多不易治愈的临床表现。本文通过对45例海洛因成瘾者和40例正常人血清中白细胞介素-1（IL-1），白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子（TNF）含量测定，以探讨海洛因依赖者免疫功能损害与细胞因子含量变化的相互关系。现将结果报告如下：1 对象与方法1．1 研究对象 解放军第473医院戒毒中心收治的海洛因依赖者45例，其中男性35例，女性10例，年龄16～57岁，平均24．8岁；吸毒时间4个月～4 年，平均2．2年；海洛因日均用量0．5～3 g。符合DSM-Ⅲ-R关于阿片类药物依赖诊断标准，尿液吗啡定性实验阳性，既往无心肝肾和自身免疫疾病史。对照组为常规体检健康人40例，男性30例，女性10例，年龄18～40岁，平均为27．5岁。
作者：王嘉军；张伟；杨爱霞；刘东亮；魏敬军 刊期： 2001年第02期
幽门螺杆菌（helicobacter pylori，Hp）是慢性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌，并且与胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发生发展密切相关［1］。采用疫苗预防、治疗Hp感染，已成为近年来的研究热点［1］。本研究采用Hp全菌超声上清和佐剂大肠杆菌不耐热肠毒素口服免疫BALB／c小鼠，从分子水平分析肠粘膜免疫主要诱导部位派伊尔小结（PP）的Th1、Th2细胞在粘膜免疫应答中的调节作用，为Hp口服疫苗研制提供免疫学依据。
作者：于长青；邹全明；王缚鲲；张卫军 刊期： 2001年第02期
目的 观测Hp全菌抗原和粘膜佐剂LT口服免疫Balb／c小鼠后的胃肠粘膜免疫反应。方法 采用ELISPOT法检测了胃粘膜、肠粘膜相关淋巴组织PP结抗原特异性形成细胞（AFC）。结果 抗原免疫组、抗原＋佐剂组胃肠粘膜抗原特异性sIgA-AFC、IgG-AFC数量明显增加，尤以sIgA-AFC为甚，并且抗原＋佐剂组明显高于单纯抗原组和对照组。结论 口服菌苗可有效诱导胃肠道粘膜免疫应答，局部sIgA可能在抗Hp感染中具有重要作用。
作者：鲁东水；于长青；邹全明 刊期： 2001年第02期
目的 从核基质蛋白中探寻人食管癌肿瘤标志物。方法 用高盐抽提法制备核基质，免疫动物获取抗血清，Western Blot检测特异性。结果 食管癌细胞中出现一条阳性条带，其代表的蛋白约为126 000 u，除食管癌原发的贲门癌外，这一阳性条带均未在正常食管和所检测的其它几种肿瘤细胞中出现。结论 食管癌细胞核基质中存在1个或1组表观分子量为126 000 u的相关多肽，可能与食管癌的发生发展有关，并且有一定的诊断价值。
作者：李冠武；温博贵；陈爱云 刊期： 2001年第02期
目的 探讨尿白介素-8（IL-8）检测在狼疮性肾炎（LN）病情判断中的价值。方法 应用ELISA双抗体夹心法检测38例LN患者尿IL-8水平。结果 ①LN患者肾功正常组和肾功不全代偿期组尿IL-8水平显著高于健康人（P＜0.001），且肾功不全代偿期组尿IL-8水平显著高于肾功能正常组（P＜0.01），高尿IL-8水平患者伴较高的血沉值和较低的补体C3值。②出现白细胞尿的LN患者尿IL-8水平显著高于其它患者（P＜0.05）。③环磷酰胺静脉冲击加强的松治疗4周后，LN患者尿IL-8水平显著降低（P＜0.01）。结论 尿IL-8水平的变化可能有助于判断狼疮活动和肾损害程度。LN患者非感染性白细胞尿的出现可能与尿IL-8水平增高有关。环磷酰胺和强的松可能通过抑制免疫细胞和肾固有细胞产生IL-8而取得疗效。
作者：范兴忠；李新东；潘宝安；李世荣；徐新伟 刊期： 2001年第02期
目的 研究MAGE-1基因在人食管癌中的表达，分析MAGE-1抗原能否作为食管癌的治疗性候选疫苗。方法 采用RT-PCR方法检测了MAGE-1基因在30例食管癌组织和相应癌旁正常组织中的表达；并从食管癌组织中扩增了MAGE-1 cDNA全长序列，经酶切后与pET-30a（+）质粒载体连接，经初步酶切鉴定后，进行DNA序列分析，获得克隆基因的核苷酸序列。结果 MAGE-1基因在食管癌组织中的表达率为43%（13/30），在30例相应癌旁正常组织中未见表达；成功地克隆了MAGE-1 cDNA全长序列。结论 由于MAGE-1基因在食管癌中高频率表达以及MAGE-1抗原具有HLA-I类分子限制性CTL识别表位，因此，MAGE-1抗原可以作为食管癌免疫治疗的候选疫苗。
作者：彭良平；王贵齐；冉宇靓；刘海燕；孙立新；遇珑；杨治华 刊期： 2001年第02期
免疫学杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学,中国免疫学会
