学术投稿

腺病毒介导NT-3基因在雪旺细胞的表达

朱锦宇;朱庆生;黄耀添

关键词:神经营养素3, 雪旺细胞, 逆转录酶-多聚酶链反应, 基因转移
摘要:目的观察腺病毒介导的NT-3基因在培养雪旺细胞(Schwann cells, SCs)的表达.方法在293细胞中培养扩增NT-3重组腺病毒(adenovirus vector for NT-3,Ad-NT-3),用组织培养半数感染量法测定其滴度.然后用Ad-NT-3感染原代培养的SCs,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测NT-3基因的表达.结果 Ad-NT-3扩增后获得了较高滴度的病毒.SCs经NT-3重组腺病毒感染24 h后有NT-3 mRNA的转录.结论腺病毒介导的NT-3基因可转入培养的SCs并高效表达.
中华神经外科疾病研究杂志相关文献
  • 放射神经外科学进展

    射外科概念,在1951年由Leksell教授首先提出.放射外科是一种采用立体定向导向,使用单次高剂量聚焦电离辐射损毁颅内靶点的方法.当今放射外科恰当的定义是:在准确限定的靶点容积内单次剂量治疗所产生的特殊放射生物学效应,从而起到与手术目的相似治疗技术.放射外科自20世纪50年代开始临床应用以来,已经历了50年的发展,现已被广泛地应用于治疗多种神经外科疾病,成为神经外科的一个重要组成部分,即放射神经外科.而近10年来放射神经外科的迅速发展,归因于医学影像学和计算机科学等高科技的融入.

    作者:郑立高 刊期: 2004年第01期

  • 腺病毒介导NT-3基因在雪旺细胞的表达

    目的观察腺病毒介导的NT-3基因在培养雪旺细胞(Schwann cells, SCs)的表达.方法在293细胞中培养扩增NT-3重组腺病毒(adenovirus vector for NT-3,Ad-NT-3),用组织培养半数感染量法测定其滴度.然后用Ad-NT-3感染原代培养的SCs,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测NT-3基因的表达.结果 Ad-NT-3扩增后获得了较高滴度的病毒.SCs经NT-3重组腺病毒感染24 h后有NT-3 mRNA的转录.结论腺病毒介导的NT-3基因可转入培养的SCs并高效表达.

    作者:朱锦宇;朱庆生;黄耀添 刊期: 2004年第01期

  • 侵袭型垂体腺瘤的分期手术治疗

    目的探讨采用分期手术治疗侵袭型垂体腺瘤的临床意义,总结出针对不同生长方式肿瘤的较好的分期手术方法.方法根据25例侵袭型垂体腺瘤的临床病史特点和CT、MRI等影像学表现,详细制定手术治疗方案,并按照肿瘤的不同生长形态选择合适的分期手术入路,术中采用神经内镜和神经导航辅助技术.结果本组病例根据生长方式不同可分成4种类型,分别采用相应不同的分期手术方案,全切除15例,次全切除7例,大部切除3例.死亡1例.结论手术前应根据病史和影像学资料,肿瘤的生长形态,累及的解剖腔隙,选择合理的分期手术方法,避免对鞍区重要解剖结构的损伤,才能取得较好的临床治疗效果.神经内镜和神经导航技术有助于提高手术切除率.

    作者:李士其;王镛斐;赵曜;寿雪飞;贾丕枫;周良辅 刊期: 2004年第01期

  • 颅中窝肿瘤的四种手术入路选择

    我院近10年收治颅中窝肿瘤28例.分别采用颞下入路、改良翼点入路、额颞联合耳前颞下入路、眶颧额颞下入路切除肿瘤.现结合28例临床资料讨论颅中窝肿瘤手术入路优缺点.

    作者:宋军;黄德俊;夏玉成;孙涛;李宗正;宋家仁 刊期: 2004年第01期

  • 脑胶质瘤中细胞凋亡及相关基因Fas、Survivin表达研究

    目的探讨脑胶质瘤中细胞凋亡及Fas、Survivin在凋亡中的意义.方法应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated-deoxy uridine-5'- triphosphate-X nick end labeling, TUNEL)检测细胞凋亡,免疫组化链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物 (strept avidin-biotin peroxidase complex, SABC)法检测Fas、Survivin和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA).结果凋亡指数(apoptosis index, AI)随胶质瘤的恶性程度增高而增高(P<0.001).AI/PI则随着胶质瘤级别增高而减小(P<0.001).Fas阳性组的AI较Fas阴性组显著增高(P<0.01).Survivin阳性组的AI较Survivin阴性组显著减低(P<0.05).低AI(<0.94)组与高AI(>0.94)组的术后1年生存率的差异有显著意义(P<0.05).死亡组与存活组的AI差异无显著意义(P=0.34),而两组的AI/PI有显著差异(P<0.001).多因素Logistic回归模型分析显示,病理、Fas、Survivin、AI、AI/PI和手术与预后相关(P<0.01).结论 AI可作提示预后的指标,对脑胶质瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义.肿瘤级别较低、Fas 阳性、Survivin阴性、AI<0.94%、AI/PI较大、手术全切的患者预后较好.

    作者:焦保华;姚志刚;耿少梅;白保忠 刊期: 2004年第01期

  • 颅内胶质瘤模型建立及肿瘤生长特征观察

    目的建立Wistar、SD大鼠及BALB/c小鼠脑胶质瘤动物模型,比较其颅内肿瘤生长特点.方法借助动物立体定向仪,将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个,悬浮于无血清DMEM培养液60 μl中)分别接种于Wistar、SD大鼠左侧尾状核区, BALB/c小鼠左顶枕区(接种细胞数为1×103).接种后观察不同种实验鼠的生存状态及肿瘤的生长特性,分别于接种后5、15 d进行MRl检查.在实验3 d、6 d、9 d、12 d、15 d时解剖标本,做组织病理学和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化检查.结果两种大鼠脑胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤.而且具有颅内生长稳定,成瘤率高,未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性好.而BALB/c小鼠成瘤率76.67%.结论接种的Wistar、SD两种大鼠脑胶质瘤动物模型,其肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似.均可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型.而BALB/c小鼠则需进一步探索.

    作者:姬西团;章翔;费舟;王西玲;梁景文;曹锐峰;赵明;林绿标;程光 刊期: 2004年第01期

  • 雌激素诱发泌乳素垂体腺瘤的基础研究进展

    垂体腺瘤是颅内常见的良性肿瘤,人群发病率为1/10 ~7/10万[1].泌乳素垂体腺瘤(prolactinomas)是常见的分泌性垂体腺瘤(40%~60%).由于血清泌乳素(prolactin,PRL)持续增高,临床上表现以性腺功能减低和泌乳为主的综合征.本病好发于育龄期,女性多于男性;儿童和老年人少见.

    作者:罗斌;于春江 刊期: 2004年第01期

  • 侧脑室室管膜下室管膜瘤的诊断与治疗

    目的研究侧脑室室管膜下室管膜瘤临床与影像学特点及其手术治疗效果,探讨其诊断及处理方法.方法回顾性分析了本科1998年5月至2003年5月间,12例经手术病理证实的侧脑室室管膜下室管膜瘤病例.结果侧脑室室管膜下室管膜瘤多见于中年,影像学表现为:CT平扫呈等或低密度,增强扫描强化不明显;MRI T1WI呈等或略低信号,T2WI呈高信号;MRI增强后见肿瘤无明显强化.手术全切11例,次全切除1例.随访9例,均无复发.结论侧脑室室管膜下室管膜瘤好发于中年.临床上遇到较长的病史,CT平扫呈等或低密度,MRI T1WI像呈等或略低信号,T2WI像呈高信号;CT、MRI增强后见无明显强化,位于侧脑室内肿瘤,应该考虑侧脑室室管膜下室管膜瘤的诊断.手术全切肿瘤,预后好,术后无需放疗.

    作者:李泽福;徐启武;车晓明;杨伯捷 刊期: 2004年第01期

  • 经双眶额入路切除大型嗅沟脑膜瘤

    为提高嗅沟脑膜瘤的全切率及治疗效果,作者自1996年以来采用双侧眶额入路显微手术切除大型嗅沟脑膜瘤20例,均取得满意疗效,现总结报道如下.

    作者:唐忠;朱炎昌;李志勇 刊期: 2004年第01期

  • 颅内实质性血管母细胞瘤的诊断与治疗

    近年来,我科共收治5例实质性血管母细胞瘤,经手术病理证实,取得满意的疗效,现报道如下.

    作者:李栋平;封雨;刘艳生;秦培韬;邓洵鼎;王典春 刊期: 2004年第01期

  • 腺病毒介导的TIMP-2基因对恶性胶质瘤血管生成能力的影响

    目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)参于恶性脑胶质瘤发生发展,及对脑胶质细胞瘤血管生成的抑制作用.方法选用含TIMP-2基因的重组腺病毒载体,体外转染人胶质瘤细胞系U87,用逆转录酶-多聚酶链反应法(RT-PCR)检测其mRNA的表达,并用酶联免疫分析法(ELISA)检测其蛋白表达.用四唑蓝比色法(MTT)法检测含TIMP-2上清对人脐静脉内皮细胞生长(ECV-304)的影响,并检测它对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成的作用.结果 RT-PCR 、Western结果表明转染AdTIMP-2病毒后的U87细胞TIMP-2表达上调.MTT 示蛋白含量为100 ng/ml 的TIMP-2对人脐静脉内皮细胞生长表现出明显的抑制作用.CAM 结果显示AdTIMP-2组可见血管稀疏区,并出现血管结构紊乱.血管指数:U87组为(91.1± 8.2)%、AdX-gal组为(62.4±3.3)%,AdTIMP-2组为(45.7±6.1)%.VIII因子相关抗原的表达病理指数U87组为17.27±7.48, AdX-gal组为16.98±7.54,AdTIMP-2组为 6.78±3.37. 结论 TIMP-2基因是为胶质瘤的抗血管生成治疗的临床应用提供了实验依据.

    作者:周晓平;卢旺盛;王建军;岳志健;洪波;闻军慧 刊期: 2004年第01期

  • 人骨髓基质细胞分化为神经细胞潜力的研究

    目的研究骨髓基质细胞在含血清培养基中向神经细胞分化的潜能.方法从健康人肋骨分离原代骨髓基质细胞,接种于含10%胎牛血清(FBS)的DMEM中,分为A组(3~4 d换液一次)、B组(不换液),在相差显微镜下观察生长情况.在培养的1,5,10 d用免疫荧光法检测两组骨髓基质细胞的各种表面标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白(MAP-2)、S-100表达情况.并在培养的第1,4,7,10,13 d用酶联免疫吸附法(ELISA)检测 B组培养细胞上清中的脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)的分泌水平.结果 A组细胞分裂繁殖速度明显高于B组,在培养的第11~12 d,B组中部分细胞表现为胞体锥形并有长突起的神经元样形态,且形成网状.A组中随着培养时间的延长仅仅有nestin表达增加 ,B组中Nestin, GFAP, MAP-2的表达随时间的不同有差异,S-100在体积较小的细胞表达较强.B组细胞培养的第10d,检测到BDNF的表达,培养第7,10,13 d检测到NGF分泌.结论人骨髓基质细胞在含血清培养基中能够表达神经前体细胞和神经细胞的相关表面标志物,并且能够分泌一定水平的神经营养因子,表现出可分化成神经细胞的潜能.血清和骨髓基质细胞自身分泌物质的蓄积可能在其中起到了重要的作用.

    作者:娄晓辉;张亚卓;历俊华;杨瑞疆;余一俊 刊期: 2004年第01期

  • 小骨窗额下入路切除垂体腺瘤26例报告

    一年来作者对26例大型及巨大型垂体瘤患者行小骨窗额下入路切除术,取得满意疗效,现报告如下:

    作者:刘鑫;章翔;费舟;贺晓生;李茂林;王彦刚;李侠 刊期: 2004年第01期

  • 慢性硬膜下血肿钻孔引流术后并发气颅的防治

    慢性硬膜下血肿钻孔引流术后易并发气颅,作者从1995年6月至2001年6月行慢性硬膜下血肿钻孔引流术86例,术后并发气颅21例,发生率为24.4%,经综合治疗取得良好效果,现报告如下:

    作者:于烽;王伟明;赵保 刊期: 2004年第01期

  • 大型听神经瘤显微外科治疗

    目的探讨大型听神经瘤的诊断、经枕下-乙状窦后入路显微手术切除及预后价值.方法采用CT 或 MRI扫描检查和显微外科技术,作者对316例大型听神经瘤行系列手术切除.术中及术后评估面神经的功能.结果本组肿瘤255例(86.4%)达到全切除,43例(13.6%) 获次全切除.术后5例(1.6%)死亡,面神经的解剖学保留率为78.8%(249例).根据House-Brachman面神经分级标准,对258例进行1年的随访评估,面神经功能获得满意恢复者(I~IV级)为225例(87.2%).结论采用显微技术切除大型听神经瘤,对面神经可获得解剖学与功能的保护,并发症与死亡率很低, 临床疗效满意.

    作者:章翔;费舟;傅洛安;张剑宁;刘卫平;贺晓生;王占祥;蒋晓帆;李兵;王彦刚;陈义军;甄海宁;刘恩渝 刊期: 2004年第01期

  • 自体血回输在颅脑手术中的应用

    因解剖因素而决定,颅脑血液供应极为丰富,术中出血量大,一般都在600 ml左右,多者可达1 000 ml以上.尽管目前的输血技术和检测水平都在不断提高,但大量输入异体血仍会引起许多不良反应和并发症,同时亦使本就非常紧张的血源更加馈乏.我科于1999年12月至2002年10月对68例颅脑手术患者施行了自体血回输,方法简单,效果可靠,且无不良反应,现分析总结如下.

    作者:周东升;李新选;白西民;张志俊;姚胜;党俊涛;赵金安;李贵来 刊期: 2004年第01期

  • 脑干肿瘤围手术期处理

    1999年1月至2001年5月,我院共收治7例脑干肿瘤,并进行了手术治疗,预后良好.根据实践,本文分析、总结其围手术期临床特点.

    作者:周志中;赵刚;于嘉;张筠 刊期: 2004年第01期

  • 眶内侧型肿瘤影像学特征及手术径路选择

    眶内肿瘤表现为眼球突出、视力下降甚至消失、眼球活动障碍等症状,手术易引起一些长期或短期并发症.影像学检查(CT、MRI)能准确显示肿瘤的部位、大小、形态、信号特征以及与眶内结构的关系,为手术入路选择及肿瘤性质的估计提供有力的参考.本文结合我院1997年至2002年经颅底-眶顶手术治疗、术后病理检查证实的8例眶内内侧型原发肿瘤的临床资料,总结分析了眶内内侧型肿瘤的影像学特点及手术径路的选择方式.

    作者:潘剑威;詹仁雅;刘凡隆;周永庆;马跃辉;童鹰;黄红光 刊期: 2004年第01期

  • 第四脑室肿瘤手术治疗

    颅后窝的解剖比较复杂,肿瘤的临床表现出现较晚,因此第四脑室肿瘤就诊时常常较大,如何全切或次全切除肿瘤而不发生或少发生并发症一直是神经外科的难题.我院从2000年1月至2002年 12月共治疗第四脑室肿瘤 26例,本文对此进行回顾性分析.

    作者:廖晓灵;黄光富;冯海龙;谭海斌;赵冬冬 刊期: 2004年第01期

  • 脑脓肿23例报告

    随着高效抗生素的广泛应用,临床表现不典型的脑脓肿在脑脓肿中所占比率有逐渐增加之趋势,少数患者的临床表现与脑肿瘤极为相似,直至在术中见到脓液才得以确诊[1],此为瘤型脑脓肿.我科于1990年1月至2002年2月共收治脑脓肿165例,其中23例临床表现与肿瘤相似,甚至连CT和MRI检查均难以鉴别,术前多数误诊为胶质瘤.现报告如下.

    作者:刘窗溪;刘健;杨华;韩国强 刊期: 2004年第01期

中华神经外科疾病研究杂志

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