王成辉;陈远贵;杨清平;刘佳;孙国伟;卜坤
2010年血站核酸检测(NAT)试点实验室在部分血站开始试运行.在NAT实验室构建过程中,人员培训是检测过程顺利进行,获得高质量、高效率检测工作的重要保证[4,5].也是实验室构建质量体系过程中重要质量活动[6].对此本实验室根据血站实验室的法规要求[1,2],NAT检测技术对操作人员在理论和技能方面的需求,结合血站血液筛查工作的特点,设计了多内容、多模式、多角度的理论培训和实际操作紧密结合的滚动式培训框架.从人员角度保证了核酸检测实验室工作的顺利进行.
作者:郑静;姚凤兰;冷婵;王中梅;汪德海;杨海平;查祎;葛红卫 刊期: 2012年第06期
随着无偿献血工作的发展,无偿献血志愿工作者服务队在各地悄然兴起,对无偿献血事业的发展起着一定的推动作用.我市于2007年6月成立无偿献血志愿工作者服务队,现有在册志愿者330余人.在这几年运行的过程中,我们不断地探索如何提升无偿献血志愿工作者的服务水平、服务激情以及队伍本身的发展,从而在无偿献血宣传中起到切实的作用,现将一些体会报道如下.
作者:赖建秀;何燕琴;张学昇;史影 刊期: 2012年第06期
目的 验证不同真空采血管、保存温度、时间等对核酸检测(NAT)结果的影响,为NAT检测的采血管选取、过程控制、检测策略等提供数据支持.方法 进行3个试验:1)标本保存温度、离心前保存时间及采血管对NAT联检试验结果的影响:将含HIV-1( 150 IU/ml)或HCV(60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存温度分为30℃组、4℃组,之后依据标本离心前的保存时间不同分为4h,6h,8h,10 h,12 h,24h组,再依据采血管生产厂家不同分为A、B、C组,对所有标本进行NAT联检试验,利用卡方统计分析各因素对NAT联检试验结果的影响;2)标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响:将含HIV-1( 150 IU/ml)或HCV( 60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存时间不同分为0d、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d组,再依据采血管不同分为采血管A、B、C组,对所有标本进行NAT鉴别试验,利用卡方统计分析标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响;3)保存时间对HCV阳性标本NAT定量结果的影响:选取9份浓度范围在1.04×102 IU/ml ~ 4.86×103 IU/ml之间的弱阳性标本,依据标本在4℃保存时间的长短不同,分为0d、ld、2d、3d、4d、5d、6d、7d组,进行定量HCVRNA检测,分析4℃保存条件下保存时间对血浆中HCV RNA浓度的影响.结果 试验1:对于全血标本,4℃或30℃的保存温度,4~24 h的离心前保存时间以及采用不同的采血管对弱阳性标本NAT检出率的影响差异均无统计学意义(P>0.05).试验2:在4℃保存条件下,采用A采血管保存含HIV-1( 150 IU/ml)的弱阳性标本0~7d,保存后d3,d4、d5、d6、d7弱阳性标本的NAT检出率与0d相比,差异具有统计学意义(P<0.01);采用B采血管保存含HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本0~7d,保存后d3和d7此标本的NAT检出率与保存前相比差异有统计学意义(P<0.01);其余各组标本的NAT检出率与保存前相比差异没有统计学意义;试验3:9份HCV弱阳性标本的浓度7d内没有出现明显变化.变化范围均在0.56log之内,且有相同的变化趋势,即在4℃保存2d后,其浓度开始下降.结论 采用Procleix Ultrio Assay和Procleix Ultrio Discriminatory Assay分析系统,在不超过30℃的采血环境中,NAT标本采集后可以在24h内离心处理;为提高鉴别阳性率,建议4℃保存的献血者标本在NAT联检阳性后2d内完成NAT鉴别检测.
作者:姚凤兰;陈瑜;汪德海;冷婵;查祎;张莉;王中梅;杨海平;郑静;葛红卫 刊期: 2012年第06期
目的 综合评价大学生和农民工无偿献血知识和动机.方法 通过调查石家庄市大学生和农民工无偿献血知识和动机认知现状,对大学生和农民工无偿献血知识和动机作出综合评价.结果 献血反应发生率很小、精神因素是献血反应发生的主要因素、献血是为了尝试体验一下献血过程、献血是迫于无奈或压力等回答正确率不高;免费用血、累计无偿献血达到一定数量者给予奖励、无偿献血不会影响健康和感染疾病以及奉献爱心,帮助需要用血的患者、献血可以体现社会价值、今后享受用血优惠、献血可以减肥等价值取向上,2类人群认知差异有统计学意义(P<0.05).结论 大学生的整体认知水平高于农民工,但2类人群的认知状况有待于进一步提高.
作者:宋任浩;赵莉华;何路军 刊期: 2012年第06期
目的 对1个Del表型家系作基因鉴定.方法 运用血型血清学方法对先证者及其家系的3名成员作RhD及相关血型抗原鉴定;提取先证者及其父母和妹妹的静脉血DNA.运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖探针扩增技术(MLPA)对先证者及其他成员血型基因作定性及定量分型;用PCR产物直接测序方法对发现的变异作确认.结果 血型血清学检测:先证者为Del表型,其他3名家系成员为正常的RhD阳性个体.MLPA基因分型:先证者有2条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因,而3名家系成员有1条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因及1条正常的RHD等位基因.结论 高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够对Del表型作明确的基因鉴定,有助于节约宝贵的RhD阴性血液.
作者:姬艳丽;赵阳;王贞;张润青;骆宏;莫春妍;魏玲;罗广平 刊期: 2012年第06期
自1943年美国的Beeson[1]首次报道输血后肝炎病例起,针对于输血传播疾病的风险研究就从未停止过.众所周知,HBV是目前世界范围内为普遍的慢性感染的病原体.全世界近三分之一的人口曾经暴露于HBV,大约有3.5 ~4亿人发生过感染[2].研究表明输血相关HBV风险的大小与所在地区HBV的流行率的高低[3]以及当地采取的血液HBV筛检策略[4]密切相关.尽管各地区HBV流行率不同,血液检测策略也不尽相同,但各国的血液HBV残留风险评估研究得出了相同的结论:与产生严重社会影响的输血传播HIV相比,发生输血相关HBV的风险要高出数倍至数十倍[5].
作者:邓雪莲;张丽 刊期: 2012年第06期
1 病例简介患者,女,89岁,汉族,无输血史,孕2产2,无新生儿溶血史.2009年因“糖尿病合并左下肢溃疡”在当地社区卫生服务中心治疗,连续服用SMZ 2年余.近期因头晕、恶心、四肢乏力3d来我院就诊,临床诊断为重度贫血(原因待查).入院时外周血常规检查结果:RBC 1.23×1012/L,WBC 7.1×109/L,Plt 145×109/L,Hb 45g/L,Hct 0.117.入院后给予对症治疗(包括输注悬浮红细胞),备血时,血型血清学检测红细胞血型:A型、RhD阳性,抗体筛查阳性;血液交叉配血试验:盐水介质法主侧、次侧均无凝集溶血,凝聚胺介质法主侧、次侧均凝集,进一步检测确认患者血清及放散液中检出类抗-DC类同种特异性自身抗体.
作者:鲍聿炜;黄崴;吴春芳;胡雷光;向东 刊期: 2012年第06期
目的 探讨过期血液中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用.方法 选取全血和浓缩血小板样品为研究对象,分别采用冻融法和CaCl2法处理保存d1、5、10的血小板,应用ELISA试剂盒测定样品中PDGF-AB、TGF-β1的含量,应用CCK-8试剂盒测定样品的促细胞增殖作用;在全血保存d1、10、21、35、40时取样,离心收集血浆,测定其血小板生长因子含量和促细胞增殖作用.结果 CaCl2法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为86.56±19.66、76.15±18.55、70.65±24.13 ng/ml,TGF-β1的含量分别为86.40±19.92、79.80±16.54、92.45±17.59 ng/ml;冻融法处理的d1、5、10血小板样品中PDGF-AB含量分别为48.24±3.73、60.91±18.39、69.35±22.29 ng/ml,TGF-β1的含量分别为107.57 +46.48 149.33±24.78 154.26±38.99 ng/ml,同一处理方法d1、5、10血小板样品中生长因子含量无明显差别(P>0.05);同一处理方法不同时间点血小板样品对细胞增殖作用无明显差别(P>0.05);冻融法处理后样品在浓度20%时促细胞增殖率明显下降;不同时间点全血血浆促细胞增殖作用趋势线相近,在样品浓度达到20%时促细胞增殖率均明显下降.结论 过期血小板中血小板生长因子含量及促细胞增殖作用与新鲜血小板无显著差异,过期全血血浆中的血小板生长因子与新鲜全血相比也得到了相似的初步结果.
作者:于晶晶;王红;刘曦;袁理;刘嘉馨 刊期: 2012年第06期
自开展血液核酸检测工作以来,检测过程中遇到血液标本凝块造成标本混样失败,从而进行重复操作,核酸检测中血液标本凝块不仅严重影响到混样的效率,并且反复离心也对标本造成一定的影响,不仅增加了核酸检测的检测成本,浪费耗材和试剂.也增加了工作人员的工作量,为此我们对标本的前处理进行分析,现报道如下.
作者:钱榕;熊丽红;刘强 刊期: 2012年第06期
目的 探索通过免疫亲和层析从Cohn法组份Ⅳ分离纯化人α1-抗胰蛋白酶浓缩物的方法.方法 24℃下,将Cohn氏法组份Ⅳ用Tris缓冲液抽提0.5h后,离心4 750 g×15 min,上清液加入亲水型气相二氧化硅脱脂后,离心6 000 g×15 min,再用1.2 μm的滤膜过滤;通过GE公司新型的Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和凝胶层析柱,对α1-抗胰蛋白酶进行纯化.用考马斯亮蓝法通过紫外分光光度计测定总蛋白含量;用SDS-PAGE鉴定α1-抗胰蛋白酶的纯度,并用Western Blot和串联质谱分析鉴定纯化的蛋白;通过发色底物法测定α1-抗胰蛋白酶活性.结果 纯化的α1-抗胰蛋白酶在非还原性SDS-PAGE图谱上呈现1条54 kD左右的蛋白带和1条约140 kD的多聚体蛋白带,经过还原性SDS-PAGE多聚体条带解聚,Western Blot也可以反应相关变化;在经过前处理和亲和层析后,α1-抗胰蛋白酶活性回收率为(60.35±1.39)%,α1-抗胰蛋白酶总活性回收率为(41.88±6.98)%,纯化倍数为(71.68±1.32)倍,比活性大约(1.00~1.05)PU/mg.结论 GE公司Alpha-1 Antitrypsin Select免疫亲和层析亲和层析可以从Cohn氏法组份Ⅳ中特异性捕获α1-抗胰蛋白酶浓缩物.
作者:张学俊;叶生亮;曹海军;王宗奎;杜晞;谢亦武;李长清 刊期: 2012年第06期
目的 了解亲友互助献血小板者与自愿无偿献血小板者的初筛不合格差异原因.方法 将2种献血者采前征询、填表、查询、体检、初筛检验结果进行统计分析.结果 亲友互助献血小板组初筛不合格率(76.19%)明显高于自愿无偿献机采血小板组(6.5%).结论 自愿无偿献机采血小板者应为献血的主要群体,而亲友互助献血小板者可作为血源不足时的一种补充.
作者:吴次宁;汪彦;田浩;万浬科;罗勋;冯伟 刊期: 2012年第06期
目的 探讨足三里穴位按摩在处理献血不良反应中的治疗方法和效果.方法 将500名发生献血不良反应的献血者随机分为2组,观察组除按常规献血不良反应处理外并进行足三里穴位按摩,对照组仅进行常规献血不良反应处理,必要时给予药物对症治疗.结果 观察组与对照组轻度、中度献血不良反应的献血者在各时间段好转的献血者数差异具统计学意义;重度者差异无统计学意义.结论 在处理献血不良反应中,辅以足三里穴位按摩可明显缩短不适症状持续时间,减少药物的使用:方法简单易行,容易被献血者接受.
作者:张学昇;赖群英;袁光华;罗曼华;肖国龙 刊期: 2012年第06期
目的 比较IgG抗体效价测定与单核细胞单层试验对预判新生儿溶血病的效果,找到适合新生儿溶血病预判的方法组合.方法 分别在孕妇妊娠的不同时间采集血标本,做产前血清学试验和单核细胞单层试验,并按妊娠次数不同进行分类.新生儿出生时收集脐血,进行新生儿溶血病检查.结果 ABO血型不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率依次为76.2%、61.5%、70.9%和90.1%、64.6%、81.0%.Rh(D)不合夫妇,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率,均依次为100%、94.1%、95.7%.11名早产新生儿,IgG抗体效价和单核细胞单层试验的灵敏度、特异性、准确率均为100%.结论 预判ABO新生儿溶血病单核细胞单层试验总体优于IgG抗体效价测定,可根据患者的实际情况,在进行IgG抗体效价测定的同时,有选择地开展单核细胞单层试验.
作者:杜振军 刊期: 2012年第06期
目的 了解血浆报废原因,减小血浆浪费.方法 2008~2010年锡林郭勒盟中心血站采集、制备的病毒灭活滤白血浆13 549份进行报废原因统计分析.结果 血浆总报废率为20.44%,报废率占前3位的依次为:脂浆> ALT>过期.结论 脂浆报废率高与锡林浩特地区居民饮食习惯及采血前未对血浆进行肉眼筛查有关;ALT报废与非病理性因素相关;过期报废与本地区基层医疗条件偏低、没有合理使用血浆有关.
作者:张广礼 刊期: 2012年第06期
1 病例资料献血者,男,汉族,25岁,无特殊疾病.2008年10月来本站第1次无偿献血,其血型正反定型相符,鉴定为B型;2010年12月第2次无偿献血,其血型正反定型相符,鉴定为B型,2次采集血液均发往临床,未见退血记录.2011年10月第3次无偿献血,街头采血车初筛纸板法正定型为B型,在对血液进行试管法复检时发现正定型为AB型,反定型为B型,正反定型不符,怀疑为表达弱A抗原的AB型.进一步的鉴定证明该献血者ABO血型为Ael02B.
作者:王成辉;陈远贵;杨清平;刘佳;孙国伟;卜坤 刊期: 2012年第06期
目的 了解民营医院临床输血和临床输血质量管理的情况,为规范医院临床输血管理提供决策依据.方法 实地考察民营医院,全面了解与浙江省血液中心签订采供血协议的所有民营医院(15家)的基本情况、管理情况,并查阅临床输血病历了解临床输血规范化管理情况.结果 15家民营医院2011年1~11月总用血量2494.4 U,占同期所有用血医院的0.69%,15家医院均未建立临床输血质量体系.22例输血病例调研发现采用酶联免疫法检测HBsAg/抗-HCV仅2例,抗-HIV为11例,所有病例均未采用酶联免疫法检测梅毒螺旋体,符合输血指证的病例13例,占59.1%.结论 民营医院在临床输血管理中仍存在很多问题,必须制定临床输血准入、考核和退出机制,规范输血前传染性指标检测工作,全面提升临床输血的安全性.
作者:冯晴;孟忠华;虞容;吕杭军 刊期: 2012年第06期
无偿献血者丁某,女,51岁,在本站采血点经健康征询、体检合格后于2012年1月1日献全血400ml,初筛检测血型为AB型,检验科进行血标本检测时发现正定型为AB型,反定型为A型,正反定型不一致,随将标本送至我室,经检测该献血者为A型,红细胞上有获得性B抗原,现将实验情况报道如下.
作者:张军;李鹏;侯振娇 刊期: 2012年第06期
2010年,我国血站开始实施血液的核酸检测(NAT),标志着我国的输血服务又进入了1个跨越式发展期,对于进一步预防输血相关传染病和提升输血安全性都具有深远的历史意义.从质量管理的角度,NAT的实施属于血站行业血液检测过程的重大变更,需要通过一系列的确认活动对其加以有效的控制.确认活动是认识过程的手段,更是控制过程的前提[1].
作者:葛红卫;王鸿捷 刊期: 2012年第06期
近年来,对血液检测实验室实施质量监控已经成为实验室的一项重要质量活动.实验室质量监控的要求也更多体现在行业法规中.《血站实验室质量管理规范》[1]规定,血站实验室“必须建立和持续改进实验室质量体系,并负责组织实施和严格监控”.美国临床实验室标准委员会CLSI-GP35的发布,更明确了实验室可采用质量监控指标,对检测过程和检测要素进行量化管理和监控,并将其作为改进和完善实验室质量管理体系的重要依据之一.目前,血站行业正在逐步实施血液核酸检测(NAT),建立核酸检测实验室(NAT实验室).相对于已经建立成熟质量监控指标体系的血清学检测过程,如何应用质量监控指标监控NAT检测过程,尚无报道.我们依据本中心NAT实验室基本状况,从过程分析入手,建立了总体类、过程类、资源类监控指标.用这些指标监控NAT过程和NAT实验室质量体系运行状况,以达到控制检测过程、持续改进质量体系的目的.
作者:汪德海;王瑞;葛红卫 刊期: 2012年第06期
当前我国平均人口献血率仅为0.84%,远远低于世界高收入国家的4.54%和中等收入国家的1.01%,而人口献血率未达到1%的,即说明献血量低于通常被视为必要的水平[1].我市为典型移民新兴工业城市,主要以钢铁企业带动城市发展,全市总人口近30万,全市人口献血率为1.7%,高于全国平均水平,在临床用血量以15%的比率逐年增涨的情况下,未出现明显的结构性、季节性缺血现象.在无偿献血人群分布上,相对于其它城市无偿献血人群主要以高校学生、部队官兵及流动人群为主不同,我市献血人群分布主要以企业职工为主,约占总献血人数的60%以上,不受如寒暑假、小长假、以及部队战备任务、务工人员流动性大等因素影响,并且在血液紧张,偏型及应急突发事件中发挥着积极作用.现将日常工作中针对以企业职工为主要献血人群的分布特点所采取的宣传和招募策略做以下粗浅的探讨.
作者:王英 刊期: 2012年第06期