不同分离方法分离脐血造血细胞效率的比较

朱美玲；伍新尧；陈汝光；刘永梅；彭丽珍；奚永志

关键词：脐血/胎血, 造血细胞/CD34+, CD34+/分离

摘要：目的探索一种高效快捷可适用于大型脐血库分离脐血造血细胞的理想方法.方法以改良的羟乙基淀粉(HES)分离法为主体,Ficoll密度梯度离心法、明胶法和自然离心沉降法进行对比,系统比较4种分离方法分离脐血总有核细胞(TNC)、单个核细胞(MNC)和CD34+造血细胞分离的得率效果.结果 4种分离方法在分离脐血TNC、MNC及CD34+造血细胞得率方面存在着显著性差异,其中以HES法和明胶法效果较好,两方法间无显著性差异,分别能使TNC、MNC及CD34+造血细胞的得率平均可达90.0%、89.0%、90.0%和82.7%、83.3%、84.5%.相比之下,HES无论在操作时间、操作过程、造血细胞的终体积和细菌污染率等方面都更具有明显优势.结论 HES法是一种高效、实用的脐血造血细胞分离方法,可适用于大型脐血库.

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60Co辐射血红细胞CR1分子基因组密度多态性分布与分子数目的研究

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作者：李志强；徐文皓；乐嘉宜；徐钧；罗丽芳刊期： 2002年第03期
内蒙巴盟地区无偿献血者血清学标志分析

<献血法>颁布实施以来,巴盟地区无偿献血取得了较快发展,献血人数逐年增多,无偿献血率连续三年保持在94.5%以上.为了确保血液质量,保证临床用血安全,本站严格按照<血站管理办法>和<血站基本标准>的要求开展各项工作,对采集的血液进行初、复检.笔者对1997年9月～2000年9月11876名无偿献血者ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒五项指标的检测结果进行了统计分析,报告如下.

作者：贾勇；甄蔚刊期： 2002年第03期
献血者抗-HIV1阳性3例

随着献血法的实施,有组织的大规模无偿献血在本市开展.1997年以来,市中心血站检出抗-HIV可疑2例,抗-HIV1阳性3例.现将结果报告如下.

作者：杨文萍；郑朝辉；王雪飞刊期： 2002年第03期
不同分离方法分离脐血造血细胞效率的比较

目的探索一种高效快捷可适用于大型脐血库分离脐血造血细胞的理想方法.方法以改良的羟乙基淀粉(HES)分离法为主体,Ficoll密度梯度离心法、明胶法和自然离心沉降法进行对比,系统比较4种分离方法分离脐血总有核细胞(TNC)、单个核细胞(MNC)和CD34+造血细胞分离的得率效果.结果 4种分离方法在分离脐血TNC、MNC及CD34+造血细胞得率方面存在着显著性差异,其中以HES法和明胶法效果较好,两方法间无显著性差异,分别能使TNC、MNC及CD34+造血细胞的得率平均可达90.0%、89.0%、90.0%和82.7%、83.3%、84.5%.相比之下,HES无论在操作时间、操作过程、造血细胞的终体积和细菌污染率等方面都更具有明显优势.结论 HES法是一种高效、实用的脐血造血细胞分离方法,可适用于大型脐血库.

作者：朱美玲；伍新尧；陈汝光；刘永梅；彭丽珍；奚永志刊期： 2002年第03期
不同离心方式血液离心效果的调查

目前国内大多数血液中心仍然采用传统速度、时间、温度的离心方式,按照各种制品的佳离心条件对血液进行离心.由于血液离心时除本身因素外受离心机运行状态、条件等因素影响较大,直接后果表现在血制品质量上.为使现有设备功能达到满意的离心效果.笔者对Sorvall-RC-3BP离心机使用1～2年内及5年后在不同运行方式下的血液离心效果进行了调查比较,现将结果报告如下.

作者：李健民；沈莉；张爱红；张义兵；沈荣；王丽红刊期： 2002年第03期
松紧套压迫穿刺部位止血

血细胞分离机采集成分时,献血者需采用双上肢静脉穿刺,机采完毕拔出穿刺针后献血者用屈肘来压迫针眼止血.有时手臂弯曲力度不够或压迫针眼时间较短,往往在针眼处渗血造成血肿.

作者：刘金星刊期： 2002年第03期
ELISA双抗原夹心法与TRUST法检测梅毒抗体的比较及血清学分析

梅毒是由梅毒螺旋体(breponema pallidum,TP)感染引起的性传播性疾病,也是血液传播性疾病之一.提高梅毒抗体的检出率对于扼制梅毒经输血传播极为重要,本站使用ELISA双抗原夹心法试剂作为血液梅毒抗体的普检试剂,检出率大为提高,现以TPHA确诊试剂为参考,将ELISA双抗原夹心法试剂与对比TRUST法试剂检测若干梅毒及非梅毒血清标本的结果报告如下.

作者：雷永良；纪勇平；张晓红；吴丽雅刊期： 2002年第03期
特异光敏效应对血细胞悬液中DHBV的灭活作用

目的观察设计的靶向光敏剂所产生的特异光化学效应对血细胞悬液中病毒的灭活作用,以探索新型的血液病毒灭活技术.方法以光化学效应为基本原理,利用反义核酸技术设计合成与DHBV-DNA特异结合的TFO-P,将其作为特异的靶向光敏剂,在UVA的协同下将其作用于血细胞悬液中的DHBV.通过电泳转移印迹试验、原代鸭肝细胞感染试验,观察TFO-P与DHBV-DNA的结合效应和在UVA协同下灭活DHBV的效果.结果所设计的TFO-P能与不同株DHBV-DNA样本产生不同程度的特异结合,在剂量为0.1 nmol/ml 的TFO-P和照射强度为1800μW/cm2的UVA作用下,血细胞悬液中DHBV的活性下降1.9～5.4Log.结论 TFO-P所产生的光化学效应能显著灭活血细胞悬液中的DHBV.

作者：熊鸿燕；陈惠孙；胡小兵；王思雄刊期： 2002年第03期
毒品问题与献血者的筛选

血液及其制品的安全依赖的首要因素是招募来自低危人群的无偿献血者,血液安全从对献血者的正确筛查开始.世界卫生组织(WHO)敦促各国政府和卫生部门必须建立起体系(systems)筛选拟献血者,正确地选出可以献血、应推迟献血和不能献血的各类人员,从而保证采到安全的血液[1].能否正确地对拟献血者筛选取决于相关方法的科学性及可行性.笔者现综述有关选择献血者时对吸毒人员的筛除问题.除台湾、港澳地区,1990～1998年我国登记的吸毒人数增加了8.5倍[2].

作者：何毅；陈颜；吕鹤年；安娜刊期： 2002年第03期
兄妹3人均为RhD阴性血型报告

1 病例简介牟某,女,30岁,潍坊市人,血型为A,RhD阴性.G5P2,第1胎5个月流产,第2胎已6岁,由于出生后发生严重黄疸,至今智力低下.第3、4胎均在6个月左右发生死胎,第5胎1999年5月出生,生后1天出现黄疸,并逐渐加重,随即送血样检验,经系统鉴定患儿为抗-D引起的Rh溶血病,分多次输注Rh阴性血液300ml,照射蓝光加常规治疗,患儿基本康复,经一年随访一切正常.其家系血型调查报告如下.

作者：杨春晴；王志刚；周少为；王倩；王玉荣；赵玲刊期： 2002年第03期
医院红细胞制品使用情况调查

为进一步推广成分血的使用,笔者对金华市区5家医院1998～2000年的红细胞制品使用情况作一统计,现报告如下.1 材料与方法1.1 材料来自于血站管理信息系统,从1998～2000年发往市区各家医院血库的全血,红细胞制品(主要是红细胞悬液和洗涤红细胞)和血浆,质量均符合卫生部标准.

作者：李笑春刊期： 2002年第03期
新生儿溶血病患儿换血后抗-D持续存在引致晚期贫血1例

1 病例简介产妇,29岁,汉族,无输血史,孕3产2.第1胎人工流产,第2胎产后因新生儿黄疸死亡,2年后再孕(第3胎).孕20周来本站作血型血清学检查:血型为A,Rh0(D)阴性(Ccdee),IgG抗-D效价为16.此后持续在本站追踪检测效价,孕34周时,IgG抗-D效价为128,去天津某医院行剖腹产.从产妇在该医院的病例资料得知,新生儿产后6h内出现黄疸,当天取新生儿血样检测血型为A,Rh0(D)阳性,系抗-D引致的新生儿溶血病;立即进行换血治疗[Rh0(D)、A型血400ml],并辅以光疗(换血后Hb 130g/L),10d后出院回本市.患儿出生后37d,因贫血(Hb 70g/L)住进本市某医院.本站对患儿血样本进行检查,血型为A,Rh0(D)阴性,DAT阴性,IgG抗-D效价为16.间隔1周,2次输注Rh0(D)阴性血,纠正贫血,症状得以控制.生后4个月随访,婴儿体格发育均正常.

作者：孙国栋刊期： 2002年第03期
冰冻红细胞脱甘油用分浆器的改良

冷冻保存RhD阴性血液和自身输血者的血液,具有重要的临床意义,保存期可长达10年.一旦需要可以立即解冻输注.

作者：李丹；王海林；刘卫刊期： 2002年第03期
B区缺失型人FⅧ在酵母中的表达尝试

目的尝试B区缺失型FⅧ在毕赤酵母(P.pastoris)中的表达,探索rFⅧ在酵母中的表达情况和可能性.方法将B区缺失型FⅧcDNA与质粒载体pPICZaA酶切、连接,构建了酵母表达载体pPICZα-FⅧ,电击转染GS115酵母细胞,甲醇诱导表达,一步法对表达产物进行活性检测并进行Dot-Blot及Western-Blot分析.结果随着发酵时间的延长,表达产物的凝血时间越来越长,而蛋白表达量越来越高.结论 rFⅧ在酵母中的表达产物不稳定,表达水平较低,表达方法须改进.

作者：赵艳华；马平；卜凤荣刊期： 2002年第03期
脐血输注对妇科恶性肿瘤患者外周血中IL-2、IL-6和sIL-2R的诱导表达和T细胞亚群改变

目的探讨妇科恶性肿瘤患者免疫功能的变化机制及脐血输注对其的影响.方法将化疗后妇科恶性肿瘤患者30例分为脐血治疗组15例、非脐血治疗组15例,并设正常人对照组30例,采用MTT法、ELISA法和流式细胞仪检测的方法观察脐血输注后患者免疫功能变化.结果①患者外周血CD4+细胞含量低于正常人、CD8+细胞含量高于正常人(t均为2.56,P＜0.05),CD4+/CD8+比例倒置;脐血治疗组30名脐血输注后患者CD3+细胞含量明显升高(t=3.01,P＜0.01)、CD4+ 细胞含量明显升高(t=2.74,P＜0.05),CD4/CD8比例恢复正常.②30名患者外周血IL-2活性较正常人降低,可溶性IL-2R(sIL-2R)含量明显增加(t分别为4.33、5.89,P<0.01);脐血输注后患者IL-2活性增加, sIL-2R含量降低,与对照组相比,差异有显著性(t分别为2.32、2.42,P<0.05).而IL-6活性有一定程度下降,但无统计学意义(t=0.27,P＞0.05).结论妇科恶性肿瘤患者的免疫功能低于正常人,脐血输注后可以通过免疫活性细胞与淋巴因子水平的变化调节患者免疫功能.

作者：潘小玲；彭芝兰；何跃东；刘兴会刊期： 2002年第03期
人珠蛋白代血浆实验研究

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作者：陈正秋；范启修；王守铭；商介寿；郭志鸿；邢凤楼；陈全生刊期： 2002年第03期
血友病甲患者抗-HCV和抗-HIV阳性率调查分析

血友病甲是常见的遗传性出血性疾病之一,患者终生需要输血或输注凝血因子Ⅷ(FⅧ)以预防和治疗出血.国外报道丙型肝炎病毒(HCV)是血液传播肝炎的主要原因[1],血友病患者常伴有HCV和艾滋病病毒(HIV)合并感染[2].目前国内这方面的报道甚少,为了解血友病甲患者输血后HCV和HIV感染情况,为预防输血后肝炎和艾滋病的发生提供数据,笔者对1996年以来确诊的血友病甲患者进行了抗-HCV 、ALT和抗-HIV检测,并与1995年的检测结果进行比较[3],现报告如下.

作者：丁培芳；张志传；张心声；颜新；申法奎刊期： 2002年第03期
流式细胞仪检测HLA-B27抗原初探

目的建立一种快速、准确的HLA-B27检测技术.方法利用流式细胞仪(FCM)检测HLA-B27抗原,并将结果与基因定型法比较,74例临床样本分别用FCM法、PCR-ASP基因定型法检测HLA-B27抗原和基因.结果 FCM法有22例HLA-B27阳性,52例阴性,与PCR-ASP法结果比较,阳性符合率88%,阴性符合率100%,总观察一致率95.9%,二种检测方法无显著性差异(P＞0.05).结论可以认为,FCM法检测HLA-B27具有快速灵敏、多参数检测等优点,针对不同的样本来源和临床要求,与PCR-ASP法配合使用,能在临床强直性脊椎炎等疾病诊断中发挥重要作用.

作者：许先国；洪小珍；何吉；金蕾；傅启华；严力行刊期： 2002年第03期
无偿献血者巨细胞病毒感染标志物的检测

巨细胞病毒(CMV)在人群中感染率极高,西欧、美国献血者为40%～79%,而在发展中国家则高达81%～100%,而且受地理条件、经济条件、卫生状况及年龄等因素的影响[1].深圳是一座年轻的移民城市,外来人口众多,来自全国各地,笔者对2379名无偿献血者进行了CMV-IgM、IgG抗体检测,发现CMV的感染率极高,现报道如下.

作者：张健；李雪丽刊期： 2002年第03期
效期内光照处理对血液胆碱脂酶活性的影响

有机磷中毒患者,胆碱酯酶(CHE)活性下降[1],临床上常输注全血提高CHE活性[2]并除去有毒物质.笔者对经光照处理的血液与未处理血液各期CHE活性做了比较,报告如下.

作者：刘芹；王利民；李翠萍刊期： 2002年第03期