学术投稿

不同分离方法分离脐血造血细胞效率的比较

朱美玲;伍新尧;陈汝光;刘永梅;彭丽珍;奚永志

关键词:脐血/胎血, 造血细胞/CD34+, CD34+/分离
摘要:目的探索一种高效快捷可适用于大型脐血库分离脐血造血细胞的理想方法.方法以改良的羟乙基淀粉(HES)分离法为主体,Ficoll密度梯度离心法、明胶法和自然离心沉降法进行对比,系统比较4种分离方法分离脐血总有核细胞(TNC)、单个核细胞(MNC)和CD34+造血细胞分离的得率效果.结果 4种分离方法在分离脐血TNC、MNC及CD34+造血细胞得率方面存在着显著性差异,其中以HES法和明胶法效果较好,两方法间无显著性差异,分别能使TNC、MNC及CD34+造血细胞的得率平均可达90.0%、89.0%、90.0%和82.7%、83.3%、84.5%.相比之下,HES无论在操作时间、操作过程、造血细胞的终体积和细菌污染率等方面都更具有明显优势.结论 HES法是一种高效、实用的脐血造血细胞分离方法,可适用于大型脐血库.
中国输血杂志相关文献
  • 松紧套压迫穿刺部位止血

    血细胞分离机采集成分时,献血者需采用双上肢静脉穿刺,机采完毕拔出穿刺针后献血者用屈肘来压迫针眼止血.有时手臂弯曲力度不够或压迫针眼时间较短,往往在针眼处渗血造成血肿.

    作者:刘金星 刊期: 2002年第03期

  • HBsAg全血金标检测试纸条漏检原因分析

    本站于2000年3月~12月,用胶体金试纸条筛查6093名献血者,HBsAg阳性373例,占6.12%.试纸条失效8例,筛查合格者5720名献血后用ELISA法做初、复检出HBsAg阳性86例,占1.50%.OD值0.12~3.20,复检出的阳性对照初筛试纸条重新观察,发现其中有12例因弱阳性而误判为阴性,漏检原因分析如下.

    作者:刘福昌 刊期: 2002年第03期

  • 冰冻红细胞脱甘油用分浆器的改良

    冷冻保存RhD阴性血液和自身输血者的血液,具有重要的临床意义,保存期可长达10年.一旦需要可以立即解冻输注.

    作者:李丹;王海林;刘卫 刊期: 2002年第03期

  • 振动态ELISA可抑制钩状效应

    酶联免疫吸附实验(ELISA)是目前应用较为广泛的一种免疫学方法,献血者体检 HBsAg、抗-HIV、抗-HCV均为ELISA方法检测.钩状效应(hook effect)是ELISA方法中因被测样本中抗原或抗体浓度过高而出现假阴性的带现象(zone phenomenon).笔者选择了15例因表面抗原浓度过高而引起后带(Post Zone)反应的标本,进行了振动态ELISA,现介绍如下.

    作者:郭东杰;刘秀敏;许连秀;刘风茹 刊期: 2002年第03期

  • RHD基因序列分析:保障输血治疗安全和预防Rh同种免疫的新措施

    笔者在一次全德会议上提出,当Rh定型血清学反应出现矛盾或不确定的结果时,必须进一步采用分子生物学方法(Legler et al, 2000).在过去两年里发现了约60个RHD等位基因,可以预料RHD基因存在许多突变,这些突变均有可能导致不正确的基因分型结果,从而导致不合适的临床指导.

    作者: 刊期: 2002年第03期

  • IgM抗-N引起血型定型困难1例

    无偿献血者,女,23岁,无输血史.在对其血型定型时,发现正反定型不符,逐作如下血清学检查.1 血型血清学检查1.1 血型鉴定正定其红细胞与抗-A和抗-A、B标准血清凝集(均为4+)与抗-B不凝集、红细胞血型为A型;反定其血清可凝集A、B、O型标准红细胞(分别为2+、4+、2+),自身不凝集;判断该血清中可能有ABO以外的抗体.

    作者:王民权;陈月;邱淑业 刊期: 2002年第03期

  • 不同离心方式血液离心效果的调查

    目前国内大多数血液中心仍然采用传统速度、时间、温度的离心方式,按照各种制品的佳离心条件对血液进行离心.由于血液离心时除本身因素外受离心机运行状态、条件等因素影响较大,直接后果表现在血制品质量上.为使现有设备功能达到满意的离心效果.笔者对Sorvall-RC-3BP离心机使用1~2年内及5年后在不同运行方式下的血液离心效果进行了调查比较,现将结果报告如下.

    作者:李健民;沈莉;张爱红;张义兵;沈荣;王丽红 刊期: 2002年第03期

  • ELISA双抗原夹心法与TRUST法检测梅毒抗体的比较及血清学分析

    梅毒是由梅毒螺旋体(breponema pallidum,TP)感染引起的性传播性疾病,也是血液传播性疾病之一.提高梅毒抗体的检出率对于扼制梅毒经输血传播极为重要,本站使用ELISA双抗原夹心法试剂作为血液梅毒抗体的普检试剂,检出率大为提高,现以TPHA确诊试剂为参考,将ELISA双抗原夹心法试剂与对比TRUST法试剂检测若干梅毒及非梅毒血清标本的结果报告如下.

    作者:雷永良;纪勇平;张晓红;吴丽雅 刊期: 2002年第03期

  • 白细胞过滤对血小板保存期间炎性细胞因子水平的影响及临床效果的评估

    目的考察浓缩血小板悬液(platelet concentrate suspend, PCs)在保存期内IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的浓度变化和过滤对其的影响,了解在保存前滤除PCs中的白细胞是否能有效地减少这些细胞因子的积累和降低受血者非溶血性发热性输血反应(febrile nonhemolytic transfusion reactions, FNHTR)发生率.方法将1单位PCs分成两等份,分别给予血小板专用白细胞滤器过滤处理和不滤除白细胞处理,保存5d.在0、3、5d测定IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量及白细胞计数,采用配对t检验进行统计分析;临床观察未滤组和过滤组PCs输后FNHTR发生率.结果 PCs中的白细胞计数与保存5d时IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平之间呈正相关.未滤组PCs中有较多白细胞混入[(351±81)×106/袋],在保存期间IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平明显升高;过滤组的PCs残余白细胞<1×106/袋在保存期间诸细胞因子均保持在0d水平;临床观察显示,末滤PCs与过滤PCs输注后FNHTR发生率分别为20.83%和5.83%,P<0.01.结论保存前用血小板专用去白细胞滤器去除PCs中残留的白细胞能有效地防止细胞因子的积累,同时保留95%以上的血小板.输注滤除白细胞的PCs能有效地减少FNHTR发生.

    作者:成晓玲;赵树铭;胡建;曾杰;任德惠;王泽荣;林武存 刊期: 2002年第03期

  • 毒品问题与献血者的筛选

    血液及其制品的安全依赖的首要因素是招募来自低危人群的无偿献血者,血液安全从对献血者的正确筛查开始.世界卫生组织(WHO)敦促各国政府和卫生部门必须建立起体系(systems)筛选拟献血者,正确地选出可以献血、应推迟献血和不能献血的各类人员,从而保证采到安全的血液[1].能否正确地对拟献血者筛选取决于相关方法的科学性及可行性.笔者现综述有关选择献血者时对吸毒人员的筛除问题.除台湾、港澳地区,1990~1998年我国登记的吸毒人数增加了8.5倍[2].

    作者:何毅;陈颜;吕鹤年;安娜 刊期: 2002年第03期

  • 8种艾滋病病毒抗体诊断试剂的质量评估

    HIV抗体检测对艾滋病/HIV感染的诊断目前仍是非常重要的手段.过去的经验证明,由于试剂的质量(包括敏感性与特异性等)问题,可以造成对艾滋病/HIV感染的漏诊或错判.虽然我国卫生部对市售HIV诊断试剂有严格要求,并必须批批检定合格[1,2],但由于多种原因,各厂家的试剂质量仍可能出现较大差异.因此,卫生部艾滋病预防与控制中心艾滋病参比室近几年来一直要求对市售HIV抗体诊断试剂每年进行考核评估.1999年我室受卫生部艾滋病参比室委托,对8个指定的生产厂家艾滋病诊断试剂质量进行考核评估,现将结果报告于下.

    作者:季阳;贾桂芳;周琼秀;何智 刊期: 2002年第03期

  • 抗-E和唯酶抗体抗-c引起新生儿溶血病1例

    1 病历简介产妇31岁、汉族,无输血史.1998年12月25日生产1男婴,患儿属第2胎第2产,出生32h后出现黄疸,送本中心检测,经血型血清学检验,发现患儿及该产妇血清中存在抗-E和唯酶抗体抗-c ,且患儿直接抗人球蛋白试验 2+,认为这两种抗体引起患儿Rh系统的新生儿溶血病(HDN)诊断成立.患儿换无c、E抗原的血液后,黄疸逐渐消退,痊愈出院.

    作者:苗天红;范道旺;孙云;刘素芳 刊期: 2002年第03期

  • 恶性肿瘤患者的合理输血

    恶性肿瘤患者输血有其特殊性.随着大剂量化疗、放疗和干细胞移植技术在肿瘤患者中的推广应用,肿瘤患者的成分输血越来越受到重视,同时细胞因子支持疗法以及输血与肿瘤相关问题也越来越受到人们的关注.

    作者:于新发;田兆嵩 刊期: 2002年第03期

  • 医院红细胞制品使用情况调查

    为进一步推广成分血的使用,笔者对金华市区5家医院1998~2000年的红细胞制品使用情况作一统计,现报告如下.1 材料与方法1.1 材料来自于血站管理信息系统,从1998~2000年发往市区各家医院血库的全血,红细胞制品(主要是红细胞悬液和洗涤红细胞)和血浆,质量均符合卫生部标准.

    作者:李笑春 刊期: 2002年第03期

  • 内蒙巴盟地区无偿献血者血清学标志分析

    <献血法>颁布实施以来,巴盟地区无偿献血取得了较快发展,献血人数逐年增多,无偿献血率连续三年保持在94.5%以上.为了确保血液质量,保证临床用血安全,本站严格按照<血站管理办法>和<血站基本标准>的要求开展各项工作,对采集的血液进行初、复检.笔者对1997年9月~2000年9月11876名无偿献血者ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒五项指标的检测结果进行了统计分析,报告如下.

    作者:贾勇;甄蔚 刊期: 2002年第03期

  • γ射线辐照对血液质量的影响

    目的探讨用灭活淋巴细胞剂量的γ射线辐照对血液质量造成的影响.方法用淋巴细胞转化试验找出能灭活淋巴细胞的小剂量,以此剂量辐照,对辐照前后的标本作红细胞渗透脆性试验;用血细胞计数仪对辐照前后血标本作RBC、Hct、MCV、Plt、MPV检测;用生化分析仪检测辐照前后血清中K+、Na+、Cl-、Ca2+浓度的变化;用瑞氏染色法观察辐照前后RBC及Plt的形态变化;用CD41a、CD62p标记辐照前后血小板标本后,用流式细胞仪检测其阳性率.结果辐照前后标本RBC、Hct、MCV、Plt、MPV无变化;RBC、Plt形态无改变;K+、Na+、Cl-、Ca2+浓度无变化;CD41a、CD62p阳性率无变化.结论血液成分经35Gy γ射线辐照后,淋巴细胞被灭活,而RBC、Plt的数目、形态及其功能都不受影响.

    作者:梁华钦;邓晶;田兆嵩;汪传喜;江朝富 刊期: 2002年第03期

  • 流式细胞仪检测HLA-B27抗原初探

    目的建立一种快速、准确的HLA-B27检测技术.方法利用流式细胞仪(FCM)检测HLA-B27抗原,并将结果与基因定型法比较,74例临床样本分别用FCM法、PCR-ASP基因定型法检测HLA-B27抗原和基因.结果 FCM法有22例HLA-B27阳性,52例阴性,与PCR-ASP法结果比较,阳性符合率88%,阴性符合率100%,总观察一致率95.9%,二种检测方法无显著性差异(P>0.05).结论可以认为,FCM法检测HLA-B27具有快速灵敏、多参数检测等优点,针对不同的样本来源和临床要求,与PCR-ASP法配合使用,能在临床强直性脊椎炎等疾病诊断中发挥重要作用.

    作者:许先国;洪小珍;何吉;金蕾;傅启华;严力行 刊期: 2002年第03期

  • 无偿献血者巨细胞病毒感染标志物的检测

    巨细胞病毒(CMV)在人群中感染率极高,西欧、美国献血者为40%~79%,而在发展中国家则高达81%~100%,而且受地理条件、经济条件、卫生状况及年龄等因素的影响[1].深圳是一座年轻的移民城市,外来人口众多,来自全国各地,笔者对2379名无偿献血者进行了CMV-IgM、IgG抗体检测,发现CMV的感染率极高,现报道如下.

    作者:张健;李雪丽 刊期: 2002年第03期

  • 无偿献血者初筛血型定型错误及原因分析

    本中心自1998年10月以来,全部实施无偿献血,献血人数达20多万人,初筛血型误定606人次,现将ABO血型定型错误分布及原因进行统计分析如下.

    作者:张伯伟;郭如华 刊期: 2002年第03期

  • 免疫性输血反应的调查及预防研究

    目的对各类输血反应进行调查研究,同时建立输血前免疫血液学检查新技术,以预防和治疗免疫性输血反应.方法对上海地区13家医院的30776名输血病人进行调查,并应用改良Polybrene、简易致敏红细胞血小板血清学试验 (SEPSA)等新技术,进行同种特异性抗体的筛选、鉴定及交叉配型试验.结果发生各类输血反应508例(1.65%),其中检出引起免疫性输血反应的同种抗体64例(12.6%), 抗体特异性分别为血小板抗体(包括HLA)51例,红细胞不规则抗体13例;各项新技术的应用对预防免疫性输血反应的发生具有显著相关性 (χ2>3.84,P<0.05).结论使用研究建立的输血前免疫血液学新技术能有效地诊断、预防和治疗免疫性输血反应的发生,提高了输血的安全性和有效性.

    作者:刘达庄;朱俊;朱自严;沈伟;王健莲;向东;张雄民;陈和平;陆震宇;郭忠慧;李志强;金麒英;方勇;姚顶根;胡宁克;邹纬;鲍聿炜;马淑芬;刘宇宁;李海伦;孙伟文;马惠荣 刊期: 2002年第03期

中国输血杂志

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主办:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所